測微尺計數(shù)板

1、關鍵字:測微尺 血球計數(shù)板 使用方法 構造 原理 標定這兩樣東西是顯微鏡上的外掛物件,可用來測量細胞,細菌等一些微小物體的長度,還有就是測量數(shù)量,如單位體積細胞的數(shù)量. 測微尺的構造和使用方法測微尺分目鏡測微尺和物鏡測微尺.目鏡測微尺用來測量視野中的物體長度;物鏡測微尺是標準長度,用來標定目鏡測微尺. (1)目鏡測微尺的構造 目鏡測微尺是一塊圓形玻片,其中央刻有精確的刻度,通常是將5mm劃分為50格,實際每格等于100m.刻度的大小隨著使用的目鏡和物鏡的放大倍數(shù)而改變,用前必須用物鏡測微尺來標定.(2)物鏡測微尺的構造 物鏡測微尺為一塊特制的載玻片,其中央有一小圓圈.圓圈內刻有分度,

2、將長1mm的直線等分為100小格,每小格等于10m.目鏡測微尺的標定(1)取下目鏡,旋下目鏡上的透鏡,將目鏡測微尺放人目鏡的中隔板上,使有刻度的一面朝下,再旋上透鏡,并裝入鏡筒內.(2)將物鏡測微尺置于顯微鏡的載物臺上,使有刻度的一面朝上,同觀察標本一樣,使具有刻度的小圓圈位于視野中央.(3)先用低倍鏡觀察,對準焦距,待看清物鏡測微尺的刻度后,轉動目鏡,使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行,并使兩尺的左邊第一條線相重合,再向右尋找兩尺的另外一條重合線.如圖 (4)記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數(shù)和物鏡測微尺的格數(shù). 計算方式(1)目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物

3、鏡測微尺格數(shù)×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數(shù)(2)以同樣方法,分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度.(3)如此測定后的目鏡測微尺的尺度,僅適用于測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數(shù).若更換物鏡,目鏡的放大倍數(shù)時,必須再進行校正標定.            血球計數(shù)板的構造和使用 血球計數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四條下凹的槽,構成三個平臺.中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面,刻有一個方格網(wǎng).方

4、格網(wǎng)上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室,供微生物計數(shù)用.這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3. 計數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格內分為16中格,每一中格又分為25小格;另一種是大方格內分為25中格,每一中格又分為16小格.但是不管計數(shù)室是哪一種構造;它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成,見圖.      血球計數(shù)板的使用以計數(shù)酵母菌為例(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵

5、母菌懸液的計數(shù),以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可. (3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內.(5)計數(shù)時,如果使用16格×25格規(guī)格的計數(shù)室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為25格×16格的計數(shù)板,除了取其4個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數(shù). (6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數(shù)下方和左方線上的酵母細胞).(7)對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù).3.計算公式(1)16格×25格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細胞數(shù)/ml=100小格內酵母細胞個數(shù)/100