實訓(xùn)項目十五內(nèi)標對比法測定對乙酰氨基酚的含量

1、實訓(xùn)項目十五 內(nèi)標對比法測定對乙酰氨基酚的含量一、實驗?zāi)康恼莆諆?nèi)標對比法的測定步驟和結(jié)果計算方法。掌握樣品、流動相的處理方法，掌握液相色譜儀維護基本知識。二、實驗原理內(nèi)標對比法是內(nèi)標法的一種， 是高效液相色譜法中最常用的定量分析方法之 一。 分別配制含有等量內(nèi)標物的對照品溶液和試樣溶液，經(jīng) 分析后，測得上述 兩溶液中待 測組分 （）和內(nèi)標物 （ ）的峰面積，按下式計算試樣溶液中待測組分的濃 度試樣對照 X對乙酰氨基酚（撲熱息痛， ）為苯胺類解熱鎮(zhèn)痛藥，是治療發(fā)熱、鎮(zhèn)痛的首 選藥 物之一。對乙酰氨基酚稀堿溶液在波長 附近有最大吸收，可以用于定量測 定。在其生 產(chǎn)過程中， 有可能引入對氨基酚等中間

2、體， 這些雜質(zhì)在上述波長處也 有紫外吸收， 若 采用紫外分光光度法測定含量， 方法影響因素較多。 為避免雜質(zhì) 干擾，本實驗采用 內(nèi) 標對比法測定對乙酰氨基酚含量。三、主要儀器和試劑. 儀器高效液相色譜儀；色譜柱 （X, m ； 電子天平；容量瓶；移液管。試劑對乙酰氨基酚對照品：非那西丁對照品；對乙酰氨基酚原料藥；甲醇 （色譜 純）；重蒸餾水；針頭濾器（仏有機系 ）。四、操作步驟色譜條件色譜柱：色譜柱 （ X, m ；流動相：甲醇水（：）；流速：；檢測波長：；柱溫：室溫；進樣量： m。內(nèi)標溶液的配制精密稱取非那西丁對照品約 , 用適量甲醇溶解后加入 容量瓶中, 并稀釋至 刻度, 搖 勻即得內(nèi)標溶

3、液。? 對照品溶液的配制精密稱取對乙酰氨基酚對照品約，用適量甲醇溶解后加入 容量瓶中，再精 密加入 內(nèi)標溶液，用甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取 ，置 容量瓶中，加流 動相稀釋至刻 度，搖勻即得。?試樣溶液的配制精密稱取對乙酰氨基酚樣品約，用適量甲醇溶解后加入 容量瓶中，再精密 加入內(nèi) 標溶液，用甲醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取 ，置容量瓶中，用流動 相稀釋至刻度， 搖勻即得。?進樣分析對乙酰氨基酚對照品溶液經(jīng) 卩濾膜濾過。用微量注射器吸取濾液，過進樣 W記 錄色譜圖，重復(fù)次。以同樣方法分析試樣溶液。五、數(shù)據(jù)記錄與處理按下表記錄峰面積，按下式計算對乙酰氨基酚的百分含量。(% ) X式中對照是對照溶液中組分的量序號對照品溶液試樣溶液平均值六、注意事項?流動相應(yīng)選用色譜純試劑、高純水或雙蒸水，酸堿液及緩沖液經(jīng)過濾后使用，過濾時注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍；水相流動相需經(jīng)常更換(一般不超過天)，防止滋生細菌變質(zhì)。.實驗中可通過選擇適當長度的色譜柱，調(diào)整流動相中甲醇和水的比例或流速，使對乙酰氨基酚與內(nèi)標物的分離度達到定量分析的要求。.內(nèi)標對比法是內(nèi)標校正曲