糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-1、表皮生長(zhǎng)因子含量測(cè)定

1、    糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-1、 表皮生長(zhǎng)因子含量測(cè)定        【關(guān)鍵詞】糖尿病視網(wǎng)膜病胰島素樣生長(zhǎng)因子I表皮生長(zhǎng)因子-尿抑胃素放射免疫測(cè)定中國(guó)書資料分類法分類號(hào)R7713R446 近年來(lái)發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)因子參與視網(wǎng)膜疾病的發(fā)生及發(fā)展，其中胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）、表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor，EGF）可能是與增殖性視網(wǎng)膜疾病密切有關(guān)的重要因子1，

2、2。我們用放射免疫法測(cè)定糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy，DR）患者血清IGF-1及EGF含量，并與正常人進(jìn)行對(duì)比，以探討兩種生長(zhǎng)因子在糖尿病視網(wǎng)膜病變病理過(guò)程中的作用。1對(duì)象和方法11對(duì)象正常對(duì)照組：本院正常體檢者20例，男9例、女11例，年齡4060歲，排除高血壓、糖尿病等全身性疾病，通過(guò)詢問(wèn)病史及眼部檢查排除眼部疾患。DR組：內(nèi)科確診的糖尿病患者，按照我國(guó)眼底病學(xué)組1984年制定的“糖尿病視網(wǎng)膜病變分期標(biāo)準(zhǔn)”，診斷為單純性糖尿病視網(wǎng)膜病變（background diabetic retinopathy，BDR）者20例，男12例，女8例，年齡5372歲，病程61

3、5年；增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變（proliferative diabetic retinopathy，PDR）者20例，男11例，女9例，年齡5576歲，病程721年，其中并發(fā)新生血管性青光眼者2例，玻璃體積血者5例。除并發(fā)新生血管性青光眼及玻璃體積血的7例患者，其余DR組患者均根據(jù)散瞳眼底檢查及眼底熒光血管造影檢查確診和分型。12方法標(biāo)本及藥盒：采集晨起空腹血2ml，離心后保存于20冰箱中待測(cè)。IGF-1放射免疫藥盒由美國(guó)INCSTAR公司提供；EGF放射免疫藥盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供。血清中IGF-1的提取及檢測(cè)：將250l質(zhì)控及待測(cè)標(biāo)本與1ml鹽酸混合，用10ml注射器分別抽取異丙醇

4、、甲醇和乙酸對(duì)Octadecasilyl-silica 柱進(jìn)行預(yù)處理，將前述樣本過(guò)柱，用乙酸沖洗2次，用色譜純的甲醇洗脫，收集洗脫液，置37水浴中，用壓縮氮?dú)獯蹈桑尤?00l零標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)融，取50l作放射免疫檢測(cè)。將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控及待測(cè)標(biāo)本各50l及200l抗血清加入試管中，28孵育2小時(shí)，各加200l125I標(biāo)記的IGF-1，28孵育20小時(shí)，各加混勻后的IGF-1沉淀復(fù)合物500l，28孵育2小時(shí)，2025下以3000rmin離心20分鐘，去上清，將沉淀物用GC-911型自動(dòng)計(jì)數(shù)器測(cè)定并顯示標(biāo)準(zhǔn)曲線，給出樣本中的IGF-1含量。EGF檢測(cè)：按放射免疫藥盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。13統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SAS

5、 611 for Windows軟件進(jìn)行方差分析，Newman-Kewls（Q）檢驗(yàn)及直線相關(guān)分析。2結(jié)果BDR組及PDR組血清中IGF-1及EGF含量明顯高于對(duì)照組，且PDR組中IGF-1及EGF含量明顯高于BDR組（附表）。附表PDR組、BDR組、正常對(duì)照組血清IGF-1、EGF含量比較（）例數(shù)IGF-1（nmolL）EGF（ngml）對(duì)照組2019098±75760738±0128BDR組2040577±8020*1179±0075*PDR組2068752±13258*1619±0228*F值24744571P值001001注：

6、與對(duì)照組比較*P005*P001與BDR組比較P005，P001對(duì)IGF-1及EGF的測(cè)定值進(jìn)行相關(guān)分析，顯示兩者血清含量呈明顯正相關(guān)（r08504，P001）。 3討論本研究結(jié)果表明隨DR的加重，血清中IGF-1、EGF含量增高，BDR、PDR及對(duì)照組中IGF-1、EGF血清含量的兩兩比較均有顯著性差異。Mayer3的研究表明PDR患者玻璃體IGF-1明顯增高，存在虹膜紅變者IGF-1水平明顯高于其他患者。Patel1對(duì)正常視網(wǎng)膜、PDR視網(wǎng)膜及PDR視網(wǎng)膜前膜用免疫組織化學(xué)的方法進(jìn)行EGF測(cè)定，結(jié)果顯示非糖尿病眼神經(jīng)視網(wǎng)膜層為弱染色，PDR視網(wǎng)膜及視網(wǎng)膜前膜為強(qiáng)染色，表明在DR中血液、玻璃

7、體及視網(wǎng)膜IGF-1、EGF含量增高。視網(wǎng)膜血管缺血、缺氧，可使血視網(wǎng)膜屏障破壞，IGF可使視網(wǎng)膜血流增加4，這些因素都使血液中的某些物質(zhì)易于透過(guò)血視網(wǎng)膜屏障分布到視網(wǎng)膜間質(zhì)中去。我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)病情較重的PDR，例如并發(fā)新生血管性青光眼或玻璃體積血的PDR患者，其血清中的IGF-1、EGF含量明顯較其他患者高，除視網(wǎng)膜自身分泌因素外，隨DR病程的延長(zhǎng)，血視網(wǎng)膜屏障破壞程度不斷加重，使血清中IGF-1、EGF較易直接滲入玻璃體內(nèi)，也使單核細(xì)胞更易侵入眼內(nèi)，于局部釋放IGF-1、EGF，可能也是眼內(nèi)IGF-1、EGF增高的原因之一。通過(guò)直線相關(guān)分析顯示血清IGF-1、EGF含量呈顯著正相關(guān)，說(shuō)明

8、二者具有協(xié)同作用。本課題受山東省衛(wèi)生廳科研基金資助，基金號(hào)97058作者單位：250021 濟(jì)南，山東省立醫(yī)院眼科（趙博軍、毛瑞和、申家泉、陳桂云），核醫(yī)學(xué)科（劉占鋒）4參考文獻(xiàn)1Patel B，Hiscott P，Charteris D，et alRetinal and preretinal localisation of epidermal growth factor，transforming growth factor alpha，and their receptor in proliferative diabetic retinopathyBr J Ophthalmol，1994，78：714-7182曹景泰綜述生長(zhǎng)因子與糖尿病視網(wǎng)膜病變國(guó)外醫(yī)學(xué)眼科學(xué)分冊(cè)，1994，18：168-1743Mayer SR，Pfeiffer A，Blum WF，et alVitreous levels of the insulin-like growth factors and ，and the insulin-like growth factor binding proteins 2 and 3，increase in neovascular eye diseaseJ Clin Invest，1993，92：2620-26254Froesch ER，Hu