骨髓血管和血流的研究進(jìn)展 (1)

1、    骨髓血管和血流的研究進(jìn)展 (1)    研究骨髓血管和血流在各種生理和病理?xiàng)l件下的改變，對認(rèn)識(shí)血液系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸，以及指導(dǎo)治療都有著十分重的意義。由于骨髓位于骨性硬鞘內(nèi)，研究方法具有一定的特殊性。本文綜述了骨髓血管、血流的各種研究方法，及其應(yīng)用于各種血液系統(tǒng)疾病研究所取得的進(jìn)展。 骨髓含豐富的血管系統(tǒng)，它是骨髓造血功能維持的必條件。因此了解它在各種生理和病理?xiàng)l件下的改變，對認(rèn)識(shí)血液系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸無疑有著十分重的意義。與其它臟器不同，骨髓位于硬性骨鞘內(nèi)，因此，對它的研究存在一定的特殊性

2、。為了研究在各種生理和病理?xiàng)l件下骨髓微循環(huán)的改變，人們在研究方法上進(jìn)行了多方面的探索，取得了許多新的進(jìn)展。 1骨髓血管、血流的研究方法 1.1一般形態(tài)學(xué)和免疫組化 通過骨髓組織切片的一般形態(tài)學(xué)觀察，計(jì)算血竇面積，也可反映骨髓的血流狀況。 perez-Atayde等1在骨髓石蠟切片中，用抗因子相關(guān)抗原、 cD31和 cD34單抗的免疫組化的方法能清晰地顯示血管內(nèi)皮細(xì)胞，因而可計(jì)算骨髓的血管數(shù)目。 1.2電鏡觀察 透射電鏡可觀察骨髓血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)；最近，有作者采用原位血管造型和掃描電鏡相結(jié)合的方法，可清楚地顯示血管和血竇的狀態(tài)。 1.3骨髓血流原位觀察 宋增璇等2建立了小鼠刮骨后原位觀察骨

3、髓的方法，用直射光在顯微鏡下放大70100倍，可觀察到骨干段髓腔全層，骨髓血管系統(tǒng)圖像較清晰。如在物鏡視野中安裝可變速的模擬血流裝置，可用同步法間接測量血流速度。 1.4骨髓血流放射性元素檢測法 1.4.1放射性微球法(radioactive microsphere)利用不溶性材料如炭化塑料制成直徑15微米左右的球形體，用同位素131 i、141 ce等標(biāo)記。在血流經(jīng)過的部位，微球僅在毛細(xì)血管內(nèi)沉積，沉積的數(shù)目與器官的血流量成正比。 iversen等3用大鼠實(shí)驗(yàn)，從頸總動(dòng)脈插管入左心室注射微球；另一根導(dǎo)管從肱動(dòng)脈插入，送至腋區(qū)，以便收集動(dòng)脈血。從注射前30秒鐘開始收集，持續(xù)到注射結(jié)束后1分鐘

4、止，然后活殺動(dòng)物沖出骨髓，測定骨髓和動(dòng)脈血的放射活性。按公式計(jì)算骨髓血流。 1.4.2正電子發(fā)射顯像術(shù)(positron emission tomography PET)4其原理：動(dòng)物或人持續(xù)吸入含 c15O2的混合空氣， c15O2可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成 h2O， h2O在骨髓內(nèi)逐漸蓄積達(dá)到最高值然后減少。在濃度達(dá)到最高時(shí)于骨上方用正電子發(fā)射照像儀測定其放射活性，同時(shí)取橈動(dòng)脈血測定放射活性。按公式計(jì)算骨髓血流。用這種方法測得正常人骨髓血流為10.0±3.0ml/100cm3· min-1。另外， semb等5利用131 i標(biāo)記的碘安替比林（131 i ap）清除法測動(dòng)物骨髓血流，

5、 lahtinen等6用133 xe清除法測人骨髓的血流，原理與此相同。 1.5核磁共振成像（ mRI） Kang等7給健康成年狗一次靜脈注射 gadopentetete dimeglumine 0.2m mol/kg,14分鐘后在髖骨部位做核磁共振連續(xù)成像。將核磁共振所得的數(shù)據(jù)與微球法測得的血流相比，有得高的相關(guān)性，說明核磁共振成像對骨髓血流的測定是可信的。 1.6氧分壓傳感針間接測定骨髓血流法 最近，沈安華等8用氧分壓傳感針法間接測定骨髓血流。即將針炙針頭（直徑不超過0.4mm）鍍上高純度金，制成針狀電極，又稱傳感針，它與參比電極組成電解電池。將傳感針插入骨髓組織中，在傳感針上氧發(fā)生還原反

6、應(yīng)產(chǎn)生電流，經(jīng)轉(zhuǎn)化得到氧分壓的數(shù)值在顯示器上顯示出 來。氧分壓的變化間接反映出了骨髓血流的變化。這種方法靈敏度高，達(dá)1.5×1011 a/Pa，操作簡單，并能長期、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地監(jiān)測某一部位的氧分壓。該方法已用于動(dòng)物骨髓血流的研究。 綜上所述，研究骨髓血管和血流的方法各有其特點(diǎn)，但也各有其限制，有的只適用于動(dòng)物，有的需用核素，有的需暴露血管，有的不能作動(dòng)態(tài)觀察等。比較起來，新近發(fā)展的氧分壓傳感針法具有一定的優(yōu)越性，操作較簡便，結(jié)果較.準(zhǔn)確，而且有可能用于臨床。 2血液疾患時(shí)骨髓血管、血流的改變 2.1急性白血病 Iversen等9采用放射性微球法觀察了大鼠急性粒細(xì)胞白血病時(shí)骨髓血流的改

7、變，發(fā)現(xiàn)接種白血病細(xì)胞后5小時(shí)骨髓血流有短暫的升高，然后逐漸減少，至25天左右降至最初的50，同時(shí)肝、脾的血流也減少。作者認(rèn)為骨髓血流減少可能是由于白血病細(xì)胞大量增生壓迫血管所致，并指出白血病細(xì)胞對血供的需求低于正常骨髓。 petrakis等早年測量過急性淋巴細(xì)胞白血?。?aLL）和急性早幼粒細(xì)胞性白血病（ aPL）患者的骨髓內(nèi)壓力，發(fā)現(xiàn)患者高于正常人10 20mmHg；這與 iversen等的觀察是一致的。但是對于急性白血病時(shí)骨髓血流的改變也有不一致的發(fā)現(xiàn)。 petrakis等1953年用放射性131 i清除法測量急性白血病患者骨髓的血流，發(fā)現(xiàn)高于正常人。這些觀察結(jié)果的差異與檢測方法有關(guān)，或

8、者與白血病發(fā)展的階段有關(guān)，尚未獲得滿意的解釋。 關(guān)于急性白血病時(shí)骨髓血管數(shù)目的改變， petez-Atayde等1采用免疫組化顯示骨髓血管內(nèi)皮細(xì)胞方法，發(fā)現(xiàn)兒童 aLL骨髓血管數(shù)目明顯高于正常，完全緩解后血管的數(shù)目仍維持在較高的水平。 aguayo等10發(fā)現(xiàn)急性髓細(xì)胞白血病（ aML）患者有相同的表現(xiàn)。對于白血病時(shí)骨髓微血管數(shù)目增多的機(jī)理， fiedler等11證明人 cML時(shí)存在一個(gè)旁分泌環(huán)，即白血病細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（ vEGF），促使內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生 gM cSF， gM cSF又反作用于白血病細(xì)胞，促使其增殖。 katoh等12的發(fā)現(xiàn)也支持這一結(jié)論。 2.2骨髓慢性增生性疾患 l

9、ahtinen等13證明真性紅細(xì)胞增多癥時(shí)骨髓血流比正常人高。 lahtinen等6利用133 xe清除法研究了慢性粒細(xì)胞白血?。?cGL）、骨髓纖維化患者骨和骨髓的血流改變，發(fā)現(xiàn)這些疾患時(shí)骨和骨髓的血流都增加， martiat等4利用 pET技術(shù)也有類似發(fā)現(xiàn)，并同時(shí)發(fā)現(xiàn)慢性淋巴白血病、慢性溶血患者骨髓血流并不增加，因而他認(rèn)為骨髓慢性增生性疾患時(shí)血流的增加與其細(xì)胞數(shù)無關(guān)，而與血管增生有關(guān)。這一點(diǎn)在骨髓切片中已經(jīng)證實(shí)。 aguayo等10利用免疫組化的方法也發(fā)現(xiàn) cML、 mDS患者骨髓微血管密度（微血管的面積百分比）比正常人高。多發(fā)性骨髓瘤病人骨的微血管密度和血管通透性也比正常人高，這一點(diǎn)已經(jīng)

10、得到證實(shí)14，15。            摘研究骨髓血管和血流在各種生理和病理?xiàng)l件下的改變，對認(rèn)識(shí)血液系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸，以及指導(dǎo)治療         本篇論文是由3COME文檔頻道的網(wǎng)友為您在網(wǎng)絡(luò)上收集整理餅投稿至本站的，論文版權(quán)屬原作者，請不用于商業(yè)用途或者抄襲，僅供參考學(xué)習(xí)之用，否者后果自負(fù)，如果此文侵犯您的合法權(quán)益，請聯(lián)系我們。2.3 G cSF和 epo應(yīng)用對骨髓血流的影響 I

11、versen等16發(fā)現(xiàn)給健康成年大鼠皮下注射 rhG-CSF10 g/kg后骨髓的血流逐漸增高，到8小時(shí)達(dá)到最高，為對照的2倍。骨組織的血流不受注射的 rhG-CSF的影響。給大鼠皮下注射 epo1000 g/kg×3次，間隔6小時(shí)，骨髓血流也逐漸增加，72小時(shí)后增至正常時(shí)的2倍。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果為臨床應(yīng)用 epo和 g-CSF提供了某些參考。例如骨髓移植時(shí)可以用 epo和 g-CSF促使骨髓血流增加，從而有利于造血細(xì)胞的種植。關(guān)于 epo和 g-CSF增加骨髓血流的原理， iversen等17認(rèn)為這些細(xì)胞因子對骨髓的血管有直接的擴(kuò)張作用，但其直接的聯(lián)系尚未發(fā)現(xiàn)。一氧化氮在這些細(xì)胞因子引

12、起的血管擴(kuò)張中可能起信使的作用。 2.4放療和化療對骨髓血管、血流的影響 Narayan等18給 c3H小鼠靜脈注射5-FU150mg/kg或分次全身照射8Gy，采用骨髓切片和掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，給予發(fā)現(xiàn)5-FU或全身照射后第5天骨髓細(xì)胞大量減少，靜脈竇明顯擴(kuò)張，融合，推測可能是由于骨髓細(xì)胞數(shù)量減少，因而減少了對竇壁的壓力所致。到第21天，靜脈竇擴(kuò)張消失，血管系統(tǒng)的體積恢復(fù)正常，僅靜脈竇的形態(tài)和大小變化不一致。這為臨床對白血病的治療提供了有益的指導(dǎo)，即大劑量持續(xù)較長時(shí)間用藥與較短時(shí)間內(nèi)用藥在骨髓內(nèi)達(dá)到的有效藥物濃度是相當(dāng)?shù)模L時(shí)間用藥反而增加了化療的毒副作用。    

13、; 3展望 如前所述，與其它臟器不同，骨髓位于硬性骨鞘內(nèi)，因此其血管和血流也有其特殊性，研究方法也應(yīng)有所不同。從目前的研究結(jié)果來看，動(dòng)物白血病時(shí)隨著疾病的進(jìn)展，骨髓血流逐漸減少。以此為依據(jù)， nooter等19采用先給白血病大鼠注射少量的環(huán)酰胺，再給予柔紅霉素的方法，明顯提高了柔紅霉素的療效，認(rèn)為其機(jī)理可能是由于環(huán)磷酰胺使骨髓細(xì)胞減少，血流改善，局部組織酸度降低，因而提高了柔紅霉素的親脂性和對細(xì)胞的通透性。但對人類白血病骨髓血管和血流的檢測結(jié)果，多認(rèn)為血管增多，血流增加。因而，有作者提出，對白血病治療也可象實(shí)體瘤一樣，可通過抑制骨髓血管生長來抑制白血病細(xì)胞的生長。由此也可看出，有關(guān)生

14、理和病理情況下骨髓血管和血流改變特性的研究，對指導(dǎo)臨床治療和提出新的治療對策都是有重意義的。目前國內(nèi)外對于骨髓血管和血流的研究尚未受到廣泛的重視，但我們相信，隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)和生物傳感技術(shù)的發(fā)展，必將有更加敏感、更加簡便的測定骨髓血管和血流的方法問世，使人們對骨髓血管和血流與造血細(xì)胞增殖、生長和發(fā)育的關(guān)系有更深入的了解。 作者單位：300020，天津，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)血液學(xué)研究所 參考文獻(xiàn) 1 perez-Atayde AR, sallan SE, Tedrow U, et al .Am J Pathol,1997;150(3):815 2宋增璇，姜學(xué)英，楊崇禮，中華血液學(xué)雜志

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