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文檔簡(jiǎn)介
1、基因工程學(xué)案考綱內(nèi)容】、基因工程得誕生、基因工程得原理及技術(shù)3、基因工程得應(yīng)用4 、蛋白質(zhì)工程 【基礎(chǔ)知識(shí)梳理】一、基因工程得概念 :按照人們得愿望,進(jìn)行嚴(yán)格得設(shè)計(jì) ,并通過 與_ _等技術(shù) ,賦予生物以新得遺傳特性 ,從而創(chuàng)造出更符合人們需要得新得 _與 _ _.由于基因工程在 _分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)與施工得 , 因此又叫做 _ .二、 N重組技術(shù)得基本工具1、限制酶 ( 全稱: _)( )來源:主要從 _中分離純化出來(2 )特點(diǎn):識(shí)別 分子得 _ _ _,并且使每一條鏈中特定部位得 _之間得 鍵斷開。( 3) 結(jié)果:產(chǎn)生黏性末端或平末端、DA連接酶( )類型:根據(jù)酶得來源不同, 可分為 _
2、 _ _與_,( 2)作用:連接雙鏈 NA片段,恢復(fù)被限制酶切開得兩個(gè)核苷酸之間得 _ _。3、載體(1 )種類:通常利用 _作為載體 , 另外還有 _、_等質(zhì)粒得化學(xué)本質(zhì) : _分子(2)特點(diǎn):能 _、有 _、有 _三、基因工程得基本操作程序1、_ _得獲?。?)目得基因 : 編碼蛋白質(zhì)得結(jié)構(gòu)基因 。()獲取目得基因得方法:(3)PC技術(shù)擴(kuò)增目得基因 原理 : _ 過程 : 第一步 : 加熱至 9095DN_ _;第二步 : 冷卻到 5, _ _結(jié)合到互補(bǔ) NA鏈;第三步 : 加熱至 70 , _酶從引物起始互補(bǔ)鏈得合成。、 _ _ _ 得構(gòu)建 就是實(shí)施基因工程得第二步 , 也就是基因工程得
3、( )目得:使目得基因在受體細(xì)胞中 _, 并且可以 _,使目得基因能夠 _ _。(2)組成 : _ _ _ _( 如抗生素基因 ) 啟動(dòng)子 :就是一段有特殊結(jié)構(gòu)得 _片段,位于 _,就是 _ _酶識(shí)別與結(jié)合得部位,能驅(qū)動(dòng)基因 _ _, 最終獲得所需得蛋白質(zhì)。 終止子 : 也就是一段有特殊結(jié)構(gòu)得 , 位于 _。 標(biāo)記基因得作用: _ _常用得標(biāo)記基因就是抗生素基因、將目得基因?qū)胧荏w細(xì)胞生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法受體細(xì)胞體細(xì)胞原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目得基因插入 T質(zhì)粒得 DNA上 _導(dǎo) 入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞得 A表達(dá)將含有目得基因得表達(dá)載體提純?nèi)÷?(受精卵 ) _ _ 受 精
4、卵發(fā)育獲得具有新性狀得動(dòng) 物處理細(xì)胞微生物細(xì)胞壁得通透性增加重組質(zhì)粒與 混合感受態(tài)細(xì)胞吸收 _ _、目得基因得檢測(cè)與鑒定(1)利用 _檢測(cè)目得基因得有無;(2)利用 _檢測(cè)目得基因得轉(zhuǎn)錄 ;( 3)利用 _ _ _檢測(cè)目得基因得翻譯 ;() 利用 生物學(xué)水平得檢測(cè)鑒定重組性狀得表達(dá)。四、基因工程得應(yīng)用1、植物基因工程(1)主要用于提高農(nóng)作物得抗逆能力(如 _、 _、 _與 _ )。(2)改良農(nóng)作物得 _ .(3)利用植物生產(chǎn) _ 等方面。2、動(dòng)物基因工程(1) 用于提高動(dòng)物 _ _速度。(2)用于改良畜產(chǎn)品得 _ _ _.(3)建立_ ,用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn) _ _。()用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作 _得供體。
5、3、基因治療(1)概念: 把_導(dǎo)入病人體內(nèi),使該基因得表達(dá)產(chǎn)物 ()效果: 治療_得最有效得手段。( 3)分類: _ _與 _ _ _.4、基因工程藥物 : 、_、_ _、激素等。五、蛋白質(zhì)工程1、概念理解 :基礎(chǔ) :蛋白質(zhì)分子得 _及其與 _得關(guān)系。操作 : _ _或_ _。 結(jié)果: _ _. 目得 : 滿足人類得生產(chǎn)與生活得需求 .( )操作過程 :_ 設(shè)計(jì)預(yù)期得蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) _ _ _ _ 合成 D基因表達(dá)產(chǎn)生需要得蛋白質(zhì) .判斷正誤 :( )E·coli D 連接酶既可連接平末端 , 又可連接黏性末端( )(2) 質(zhì)粒就是小型環(huán)狀 DNA分子,就是基因工程常用得載體 ( )(3
6、)載體得作用就是攜帶目得基因?qū)胧荏w細(xì)胞中, 使之穩(wěn)定存在并表達(dá) ( )() 抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)(2 14·江蘇 ,23D)( )( ) 應(yīng)用 DNA探針技術(shù) ,可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目得基因得存在及其完全表達(dá)(21·四川,5D) ()( )將人得干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌(7 )由大腸桿菌工程菌獲得人得干擾素后可直接應(yīng)用(8)利用乳腺生物反應(yīng)器能夠獲得一些重要得醫(yī)藥產(chǎn)品, 獲得能產(chǎn)生人干擾素得菌株 ( )? ( ), 如人得血清白蛋白, 這就是因?yàn)閷⑷说醚灏椎鞍谆驅(qū)肓藙?dòng)物得乳腺細(xì)胞中 ( )(9)蛋白質(zhì)工程就是在分
7、子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子得結(jié)構(gòu)( )(10)目前在抗菌性與溶血性均較強(qiáng)得多肽 P1 得基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱得多肽藥物 , 首先要做得 就是依據(jù) P氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽 (2 ·廣東 3)()(1 )為培育抗除草劑得作物新品種 , 導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體 ( ) (1) 目前 ,植物基因工程技術(shù)主要應(yīng)用于提高農(nóng)作物得抗逆性、生產(chǎn)某些天然藥物、改良農(nóng)作物得品質(zhì)、作器官移植得供體 ?(? )( 13)基因工程藥物主要來源于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)? ?( )【課后習(xí)題】 1如圖為 A 分子在不同酶得作用下所發(fā)生得變化, 圖中依次表示限制酶、 DNA聚合
8、酶、DNA連接酶、解旋酶作用得正確順序就是 ( )A. ?B 。 ?D. 下列關(guān)于載體得敘述中,錯(cuò)誤得就是 ( )A。載體與目得基因結(jié)合后 , 實(shí)質(zhì)上就就是一個(gè)重組 DA分子 。對(duì)某種限制酶而言 , 載體最好只有一個(gè)切點(diǎn),但還要有其她多種酶得切點(diǎn)C。目前常用得載體有質(zhì)粒、 噬菌體得衍生物與動(dòng)植物病毒 D。載體具有某些標(biāo)記基因 , 便于對(duì)其進(jìn)行切割3.若要利用某目得基因 (見圖甲)與 1噬菌體載體 (見圖乙)構(gòu)建重組 DNA(見圖丙 ), 限制性核酸內(nèi)切酶得 酶切位點(diǎn)分別就是 g(AGATCT)、coR(GAT)與Sau3(G C)下列分析合理得?;?C。就是 ( )用 oR切割目得基因與 P1
9、噬菌體載體B 。用 gl 與 EoR切割目得因與 P噬菌體載體用 B l 與 Sau3A切割目得基因與噬菌體載體D用 EcoR與 Sa切割目得基因與 P噬菌體載體右圖表示用化學(xué)方法合成目得基因得過程。據(jù)圖分析 下列敘述正確得就是( )A過程需要 DNA連接酶B。過程需要限制性核酸內(nèi)切酶C。目得基因得堿基序列就是已知得D。若某質(zhì)粒能與目得基因重組, 則該質(zhì)粒與目得基因得堿基序列相同5。下列用于判斷目得基因就是否轉(zhuǎn)移成功得方法中,不屬于分子檢測(cè)得就是( )。通過害蟲吃棉葉瞧其就是否死亡 B 。轉(zhuǎn)基因生物基因組 DNA與 DN探針能否形成雜交帶 C。轉(zhuǎn)基因生物中提取得 mRNA與 N探針能否形成雜交
10、帶 。轉(zhuǎn)基因生物中提取得蛋白質(zhì)能否與抗體形成雜交帶6、將 d( 腺苷酸脫氨酶基因 )通過質(zhì)粒 pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶.下列敘述錯(cuò)誤得就是 ( )A、每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B 、每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位C、每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)ada D、每個(gè)插入得 ada 至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子7、在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑得轉(zhuǎn)基因煙草過程中,下列操作錯(cuò)誤得就是()A、用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒得核酸B、用 DA 連接酶連接經(jīng)切割得抗除草劑基因與載體、重組 DNA分子導(dǎo)入原生質(zhì)體、除草劑得培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞、 0年
11、諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了“發(fā)現(xiàn)與發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“得三位科學(xué)家。將綠色熒光蛋白 基因得片段與目得基因連接起來組成一個(gè)融合基因, 再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi), 表達(dá)出得蛋白 質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中得主要作用就是A. 追蹤目得基因在細(xì)胞內(nèi)得復(fù)制過程B 。追蹤目得基因插入到染色體上得位置C.追蹤目得基因編碼得蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)得分布D 。追蹤目得基因編碼得蛋白質(zhì)得空間結(jié)構(gòu)9??咕膶?duì)治療癌癥有一定作用 , 下圖表示抗菌肽合成過程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤得就是 ( )錯(cuò)誤! ?錯(cuò)誤 ! ?錯(cuò)誤! ?錯(cuò)誤 ! ?錯(cuò)誤! ?錯(cuò)誤 !A. 用 PC克隆目得基因不需要 DNA解旋酶?;虮磉_(dá)載
12、體含有啟動(dòng)子與終止子C。篩選菌種時(shí)用基因探針檢測(cè)相關(guān)蛋白質(zhì)D. 分離純化得目得就是獲得較純凈得抗菌肽非選擇題: 1、回答有關(guān)基因工程得問題: ?(1 )構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí) ,用不同類型得限制酶切割 A 后,可能產(chǎn)生黏性末端 , 也可能產(chǎn)生 末 端若要在限制酶切割目得基因與質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生 ( 相同、不 同) 黏性末端得限制酶 .(2) 利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí) , 構(gòu)建得表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等 , 其中啟動(dòng)子得作用就 是 。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí) , 常用 處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體 進(jìn)入; 為了檢測(cè)胰島素基因就是否轉(zhuǎn)錄出了mRN, 可用標(biāo)
13、記得胰島素基因片段作探針與m NA雜交, 該雜交技術(shù)稱為 。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄得 mRA 就是否翻譯成, 常用抗原抗體雜交技術(shù) .(3) 如果要將某目得基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞 , 先要將目得基因插入農(nóng)桿菌 i 質(zhì)粒得 中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過N重組將目得基因插入植物細(xì)胞得上 .(4 )重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因得作用就是為了 。2、科學(xué)家從預(yù)期人得生長(zhǎng)激素得功能出發(fā) ,推測(cè)相應(yīng)得脫氧核苷酸序列,并人工合成了雙鏈DNA片段 ,獲得雙鏈 DNA??茖W(xué)家將人得生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌得質(zhì)粒進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。已知限制酶得識(shí)別序列與切點(diǎn)就是G CC,限制酶得識(shí)
14、別序列與切點(diǎn)就是 -GATC. 據(jù)圖回答 :(1 )獲得生長(zhǎng)激素基因得方法有 _。用 PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到得耐高溫酶通常就是指 ;步驟用到得酶有 _ _。( 2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí) , 必須有 _、目得基因、終止子以及 _。(3)為了精確地獲取圖中得目得基因 ,應(yīng)用 _切割質(zhì)粒 ,用切割目得基因。(4) 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌 B之前,要將細(xì)菌 B放入一定濃度得 _溶液中處理 , 使之成為感受態(tài)得細(xì)菌。 人得基因之所以能與大腸桿菌得質(zhì)粒進(jìn)行重組并發(fā)揮其功能, 就是因?yàn)槎叩每臻g結(jié)構(gòu) 都就是 _ _ _ 。(5) 人體得生長(zhǎng)激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)就是因?yàn)開 _ _ 。( 6)將得到得大
15、腸桿菌 B 涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素得培養(yǎng)基上,能夠生長(zhǎng)得 ,說明已導(dǎo)入了 _ _ _ ,反之則沒有導(dǎo)入。導(dǎo)入重組質(zhì)粒以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)與篩選,可用 _制成探針 , 檢測(cè)就是否導(dǎo)入了重組基因 ,在培養(yǎng)基中加入 _可將含 有目得基因得細(xì)胞篩選出來。(7 )上述方法制備人得生長(zhǎng)激素,運(yùn)用得現(xiàn)代生物工程技術(shù)就是_。3、胰島素可以用于治療糖尿病 ,但就是胰島素被注射到人體后 , 會(huì)堆積在皮下 ,要經(jīng)過較長(zhǎng)得時(shí)間才能進(jìn)入 血液, 而進(jìn)入血液得胰島素又容易分解,因此, 治療效果受到影響 .如圖就是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素得生產(chǎn)過程,請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題 :(1 )構(gòu)建新得蛋白質(zhì)模型就是蛋白質(zhì)工程得關(guān)
16、鍵, 圖中構(gòu)建新得胰島素模型得主要依據(jù)就是 _( ) 通過 DN合成形成得新基因應(yīng)與 結(jié)合后轉(zhuǎn)移到 _ _ _ _中才能得到準(zhǔn)確表達(dá)。(3) 若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素 , 需用到得生物工程有 _、_與發(fā)酵工程.( )圖中從胰島素模型到新得胰島素基因合成得基本思路就是什么? _ _4。如圖就是從酵母菌中獲取棉株需要得某種酶基因得流程,結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問題。(1) 圖中 cNA文庫(kù)_( 填“大于”、“等于”或者“小于”)基因組文庫(kù)。(2) 過程提取得 NA需要 得切割 ,B 就是 _ _過程。(3) 為在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目得基因,可用_ _擴(kuò)增得方法 , 其原理就是 _(4)農(nóng)
17、桿菌中得 T質(zhì)粒上得 T- NA具有 得特點(diǎn)。目得基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳得關(guān)鍵就是_, 可以用 _技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。 ) 如果要想使該酶活性更高或具有更強(qiáng)得耐受性, 需要對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造 , 這要利用基因工程得延伸蛋白質(zhì)工程。首先要設(shè)計(jì)預(yù)期得_ _ , 再推測(cè)應(yīng)有得氨基酸序列 , 找到相對(duì)應(yīng)得基因工程答案判斷 : ××××× ×××選擇題 :CDD A CACC、()平 相同 (2) N聚合酶識(shí)別與結(jié)合得部位Ca2+分子雜交技術(shù)蛋白質(zhì)()T DNA染色體 DNA (4) 鑒別與篩選含有目得基因得細(xì)胞2、( )從 cDNA 文庫(kù)中獲取、從基因組文庫(kù)中獲取、人工合成目得基因或PCR 擴(kuò)增技術(shù)(任選其中兩項(xiàng)即可) q 酶(耐高溫得 DN 聚合酶)限制酶與 D A 連接酶(2)啟動(dòng)子 標(biāo)記基因( )限制酶 限制酶( )CaCl2 規(guī)
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