臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)重要知識(shí)點(diǎn)匯總

1、免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？1）識(shí)別階段 2）活化和增值階段 3）免疫效應(yīng)中樞免疫器官和外周免疫器官有哪些器官組成？各有什么功能？1）中樞免疫器官：免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟的場(chǎng)所，如骨髓，胸腺2)外周免疫器官：免疫細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)答的場(chǎng)所。如脾臟，淋巴結(jié)，黏膜，扁桃體等。T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞的主要功能分別是什么？1）T細(xì)胞： 介導(dǎo)細(xì)胞免疫，輔助體液免疫。2）B細(xì)胞： 產(chǎn)生體液免疫3）NK細(xì)胞：介導(dǎo)天然免疫，發(fā)揮細(xì)胞毒作用。根據(jù)作用方式及其特點(diǎn)的不同，機(jī)體存在兩類免疫簡(jiǎn)述各自的概念和特征？1)先天性免疫或固有性免疫，是個(gè)體出生是就具有的天然免疫，可通過(guò)遺傳獲得，是機(jī)體在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中逐漸建立起來(lái)的

2、主要針對(duì)入侵病原體的天然防御功能。其主要特征是反應(yīng)迅速，針對(duì)外來(lái)異物的范圍較廣，不針對(duì)某個(gè)特定異物抗原，也稱非特異性免疫。2)適應(yīng)性免疫，是個(gè)體出生后，接觸到生活環(huán)境中的多種異物抗原，并在不斷刺激中逐漸建立起來(lái)的后天免疫，也稱獲得性免疫。其主要特征是針對(duì)某個(gè)特定的異物抗原而產(chǎn)生免疫應(yīng)答，開始的應(yīng)答過(guò)程比較緩慢，一旦建立清除該抗原的效率很高，特異性很強(qiáng)，也稱特異性免疫。簡(jiǎn)述抗原抗體反應(yīng)的原理。答：抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原表位與抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性，這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的，它們之間的結(jié)合是抗原表位與抗體超變區(qū)溝槽分子表面的結(jié)合簡(jiǎn)述抗原抗體反應(yīng)的類型。答

3、：抗原抗體反應(yīng)分為五種類型：顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的凝集反應(yīng)；可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的沉淀反應(yīng)；抗原抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體所致的細(xì)胞溶解反應(yīng)；細(xì)菌外毒素或病毒與相應(yīng)抗體結(jié)合所致的中和反應(yīng)；免疫標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)等。什么是帶現(xiàn)象?答：在抗原抗體反應(yīng)等價(jià)帶前后，由于抗體或抗原過(guò)量(形成前帶或后帶)，上清液中可測(cè)出游離的抗體或抗原，形成的沉淀物少，不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)，這種現(xiàn)象在做血清學(xué)試驗(yàn)時(shí)稱為帶現(xiàn)象。影響抗原抗體反應(yīng)的環(huán)境條件有哪些?在實(shí)驗(yàn)中如何控制這些條件因素?答：環(huán)境條件包括：電解質(zhì)，酸堿度和溫度。穩(wěn)定條件：電解質(zhì)：常用O85氯化鈉或各種緩沖液作抗原及抗體的稀釋液及反應(yīng)液；酸堿度：pH

4、過(guò)高或過(guò)低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì)，抗原抗體反應(yīng)一般在pH為68時(shí)進(jìn)行；溫度：一般以15，40為宜，最佳反應(yīng)溫度為37。簡(jiǎn)述單克隆抗體制備技術(shù)的主要步驟。單克隆抗體是應(yīng)用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)進(jìn)行制備的，其主要操作步驟包括抗原免疫、親本細(xì)胞的選擇和制備、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選和克隆化、雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)接種或體外增量培養(yǎng)、單克隆抗體的純化與鑒定。試述免疫血清應(yīng)如何進(jìn)行純化。免疫血清的純化主要是指提純免疫血清中的IgG并去除無(wú)關(guān)的雜抗體。提純IgG類抗體的方法有：硫酸胺鹽析法粗提、離子交換層析法和親和層析法，采用親和層析法提取IgG時(shí)，可使用純化抗原或葡萄球菌蛋白A交聯(lián)sephamse 4B制成層

5、析柱。另外，還可通過(guò)吸附法獲得單價(jià)特異性抗血清。方法是將不含特異性抗原的雜抗原與戊二醛等雙功能試劑混合制成固相吸附劑，以吸附免疫血清中的雜抗體，或?qū)㈦s抗原交聯(lián)于sephamse 4B上，通過(guò)親和層析去除雜抗體。敘述雜交瘤技術(shù)的基本原理。雜交瘤技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。這種雜交瘤細(xì)胞具有兩種親本細(xì)胞的特性，即既能夠分泌抗體又能在體外長(zhǎng)期繁殖，經(jīng)過(guò)克隆化后成為單個(gè)細(xì)胞克隆，分泌的抗體即為單克隆抗體。簡(jiǎn)述間接血凝試驗(yàn)的基本原理。間接血凝試驗(yàn)是將可溶性抗原(或抗體)吸附于人的0型紅細(xì)胞或綿羊、家兔的紅細(xì)胞制成抗原

6、致敏的紅細(xì)胞，與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在有電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，又稱被動(dòng)血凝試驗(yàn)簡(jiǎn)述抗人球蛋白試驗(yàn)的原理(又稱Coombs試驗(yàn))、類型及其在臨床上的應(yīng)用。Coombs試驗(yàn)又稱抗人球蛋白試驗(yàn)，其原理是不完全抗體多半是7S的IgG類抗體，能與相應(yīng)的抗原牢固結(jié)合，但在一般條件下不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)，利用抗球蛋白抗體作為第二抗體，連接與紅細(xì)胞表面抗原結(jié)合的特異抗體，可使紅細(xì)胞凝集。 Coombs試驗(yàn)有二種類型：(1)直接Coombs試驗(yàn)：用于檢測(cè)紅細(xì)胞結(jié)合的不完全抗體。(2)間接Coombs試驗(yàn)：用于檢測(cè)血清中游離的不完全抗體。抗球蛋白試驗(yàn)主要應(yīng)用于那些方面？輸血

7、：對(duì)于“危險(xiǎn)”受體（指曾經(jīng)輸血、肌肉注射過(guò)血液制品或母子間血型不合的妊娠而可能產(chǎn)生免疫性血型抗體的人）的配血試驗(yàn)必須包括各種不完全抗體的檢查，以抗球蛋白法最為可靠。血型抗原抗體的檢查：主要檢查Rh 者，其體內(nèi)是否有抗-D抗體，應(yīng)用抗球蛋白試驗(yàn)對(duì)外表為D 陰性的供體血液作常規(guī)檢查。最可靠和靈敏的方法是將待檢D 陰性的紅細(xì)胞與高效價(jià)的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清檢查細(xì)胞上有無(wú)致敏抗體。對(duì)新生兒溶血性貧血性疾病的診斷：母體產(chǎn)生的最常見(jiàn)的免疫性抗體為Rh 抗體和ABO 抗體，一般為7S 的IgG，可通過(guò)胎盤屏障，作用于胎兒紅細(xì)胞，引起新生兒溶血性疾病，可借抗球蛋白試驗(yàn)檢出而采取預(yù)防性措施

8、。對(duì)溶血性貧血的研究：獲得性溶血性貧血患者大多數(shù)可借助該方法證實(shí)有自身紅細(xì)胞的抗體存在。對(duì)細(xì)菌或立克次體的不完全抗體的檢查。Coombs 試驗(yàn)還可采用專一性特異性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗補(bǔ)體血清等，分析結(jié)合于紅細(xì)胞上的不完全抗體免疫球蛋白的亞類。什么是協(xié)同凝集試驗(yàn)？主要用于何種檢測(cè)？協(xié)同凝集試驗(yàn)與間接凝集反應(yīng)的原理相類似，但所用的載體為金黃色葡萄球菌。這種細(xì)菌的細(xì)胞壁中含有A蛋白（SPA），SPA 能與特異性抗體IgG 的Fc段結(jié)合（IgG3除外）?？贵w的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍保持與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的特性。當(dāng)這種葡萄球菌與IgG抗體連接時(shí)

9、，就成為抗體致敏的載體顆粒，若與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。可用于細(xì)菌、病毒、毒素及各種可溶性抗原的檢測(cè)。何謂間接凝集反應(yīng)？將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯(lián)于與免疫無(wú)關(guān)大小適當(dāng)?shù)念w粒表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜電解質(zhì)存在條件下，出現(xiàn)特異性的凝集現(xiàn)象，稱為間接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng)如何進(jìn)行分類？各試驗(yàn)的原理是什么根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體分為正向間接凝集試驗(yàn)和反向間接凝集試驗(yàn)；根據(jù)載體種類，分為間接血凝試驗(yàn)和膠乳間接凝集試驗(yàn)；根據(jù)反應(yīng)方式分為間接凝集試驗(yàn)、間接抑制凝集試驗(yàn)和協(xié)同凝集試驗(yàn)。間接凝集試驗(yàn)是用抗原致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體。將可溶性抗原

10、與載體顆粒結(jié)合，再與標(biāo)本中的抗體反應(yīng)，通過(guò)抗體橋聯(lián)，形成肉眼可見(jiàn)的凝集顆?；蚰瘔K，為陽(yáng)性反應(yīng)。反向間接凝集試驗(yàn)選用已知特異性抗體致敏載體檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原。用特異性抗體致敏顆粒，與樣品中的待檢抗原反應(yīng)，通過(guò)抗原橋聯(lián)，形成肉眼可見(jiàn)的凝集為陽(yáng)性。臨床上用于檢測(cè)HbsAg、AFP 等。間接凝集抑制試驗(yàn)診斷試劑為已知抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體，用于檢測(cè)標(biāo)本中與致敏抗原相同的抗原。將標(biāo)本與抗體試劑相反應(yīng)，然后加入致敏抗原，若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，說(shuō)明標(biāo)本中不存在相應(yīng)抗原;如未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，則說(shuō)明待檢標(biāo)本中含有相應(yīng)抗原，凝集反應(yīng)被抑制。同理，用抗體致敏載體顆粒及相應(yīng)抗原作為診斷試劑，檢測(cè)標(biāo)本中的抗體，稱為

11、反向間接凝集試驗(yàn)。協(xié)同凝集試驗(yàn)與間接凝集反應(yīng)的原理相似，但所用載體為金黃色葡萄球菌，該菌細(xì)胞壁上的SPA 能與特異性抗體的IgG 的Fc 段結(jié)合（IgG3除外），抗體的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合。當(dāng)這種葡萄球菌與IgG 抗體連接時(shí)，就成為抗體致敏的載體顆粒，若與相應(yīng)抗原接觸，即出現(xiàn)反向間接凝集反應(yīng)。間接血凝試驗(yàn)是以紅細(xì)胞作為載體的間接凝集試驗(yàn)，用已知的抗原或抗體致敏紅細(xì)胞，然后與樣品中的抗體或抗原在適宜條件下反應(yīng)，出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集者為陽(yáng)性。根據(jù)紅細(xì)胞凝集的程度判斷陽(yáng)性反應(yīng)的強(qiáng)弱。膠乳凝集試驗(yàn)是以聚苯乙烯膠乳微粒作為載體的間接凝集試驗(yàn)。HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞

12、的機(jī)制是什么？答：1.淋巴細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，5到7天死亡；DNA的主要合成途徑被A阻斷2.骨髓瘤細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，5到7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的旁路途經(jīng)受阻3.骨髓瘤細(xì)胞和脾細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，可長(zhǎng)期生長(zhǎng)繁殖。利用淋巴細(xì)胞的HGRT將合成為嘌呤堿并最終與一起合成從淋巴細(xì)胞獲得產(chǎn)生某種抗體的遺傳信息，從骨髓瘤細(xì)胞獲得不斷繁殖的能力簡(jiǎn)述免疫系統(tǒng)的三個(gè)生理功能。答：免疫系統(tǒng)的三個(gè)生理功能為免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視免疫防御：是機(jī)體排斥外來(lái)抗原性異物的一種免疫保護(hù)功能。該功能正常時(shí)，機(jī)體可抵御病原微生物及其毒性產(chǎn)物的感染和損害，即抗感染免疫；異常情況下，反應(yīng)過(guò)高會(huì)引起超敏反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)低或

13、缺失可發(fā)生免疫缺陷。免疫自穩(wěn)：是機(jī)體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一種生理功能。該功能正常時(shí)，機(jī)體可及時(shí)清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細(xì)胞和免疫復(fù)合物等異物，而對(duì)自身成分保持免疫耐受；該功能失調(diào)時(shí)，可發(fā)生生理功能紊亂或自身免疫性疾病。免疫監(jiān)視：是機(jī)體免疫系統(tǒng)及時(shí)識(shí)別、清除體內(nèi)突變、畸變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的一種生理功能。該功能失調(diào)時(shí)，有可能導(dǎo)致腫瘤發(fā)生，或因病毒不能清除而出現(xiàn)持續(xù)感染。決定抗原抗體最佳配比的方法有幾種?(1)抗原稀釋法：將可溶性抗原作一系列倍比稀釋，然后向各管中加入一定濃度的適量抗血清，37反應(yīng)后，產(chǎn)生的沉淀量隨抗原量變化而不同，以沉淀物最多的管為最適比例管。(2)抗體稀釋法：是將恒定量抗

14、原與不同倍比稀釋的抗體反應(yīng)，出現(xiàn)沉淀物最多的管為抗體最適比例管。(3)棋盤格法：亦稱方陣法。抗原抗體同時(shí)稀釋，可一次完成抗原和抗體的滴定，并找出抗原、抗體的最適比。是前二法的結(jié)合簡(jiǎn)述單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)的基本原理和技術(shù)要點(diǎn)。(1)原理：待測(cè)抗原從局部含有定量抗體的凝膠內(nèi)自由向周圍擴(kuò)散，抗原抗體特異性結(jié)合，在兩者比例合適的部位，形成白色沉淀環(huán)，沉淀環(huán)的大小與抗原的濃度呈正相關(guān)。(2)技術(shù)要點(diǎn)：將抗體和熱融化瓊脂(約50)混合，傾注成平板。待凝固后在瓊脂板上打孔，孔中加入已稀釋的抗原液，和不同濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品，置3712溫箱，2448h后觀察孔周圍沉淀環(huán)。量取沉淀環(huán)直徑，通過(guò)抗原標(biāo)準(zhǔn)品，計(jì)算待測(cè)抗原的

15、濃度。在雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)中，如何判定結(jié)果?雙向免疫擴(kuò)散中，出現(xiàn)沉淀線，表明存在相應(yīng)的抗原、抗體，不出現(xiàn)沉淀線則表明缺乏抗原或抗體。沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致，沉淀線靠近抗原孔，提示抗體含量高；靠近抗體孔，提示抗原含量較多免疫電泳技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是什么?免疫電泳有哪些用途?1)優(yōu)點(diǎn)：免疫電泳技術(shù)是將免疫擴(kuò)散和電泳相結(jié)合的一種免疫學(xué)分析技術(shù)，既有抗原抗體反應(yīng)的高度特異性，又有電泳分離技術(shù)的快速、靈敏和高分辨力，廣泛應(yīng)用于牛物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。(2)用途：純化抗原或抗體的成分分析，分析其純度；正常及異常體液中蛋白質(zhì)成分的分析，如無(wú)丙種球蛋白血癥、冷球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤、白血病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝病

16、等病人的血清蛋白成分的分析，多發(fā)性骨髓瘤血清M蛋白的檢測(cè)和鑒定；免疫后不同抗體組分的動(dòng)態(tài)變化研究對(duì)流免疫電泳時(shí)，抗體為什么流向負(fù)極?大部分蛋白質(zhì)抗原在堿性溶液中帶負(fù)電荷，電泳時(shí)從負(fù)極向正極泳動(dòng)，而抗體IgG分子量大，暴露的極性基團(tuán)較少，在緩沖液中解離的也少，向正極的泳動(dòng)速度較慢，電泳時(shí)由電滲引向負(fù)極的液流速度超過(guò)了IgG向正極的泳動(dòng)，帶動(dòng)抗體流向負(fù)極，使抗原和抗體定向?qū)α鞑l(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的沉淀線。簡(jiǎn)述火箭免疫電泳的原理和主要用途。(1)原理：火箭免疫電泳是將單向免疫擴(kuò)散和電泳相結(jié)合的技術(shù)?？乖陔妶?chǎng)作用下，在含有適量抗體的瓊脂糖凝膠中向正極泳動(dòng)，逐漸形成梯度濃度，在抗原抗體比例適當(dāng)時(shí)形

17、成沉淀，隨著抗原量的減少，沉淀帶越來(lái)越窄，形成火箭峰樣沉淀，峰形高低與抗原量呈正相關(guān)。用已知量標(biāo)準(zhǔn)抗原作對(duì)照，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)檢測(cè)樣品沉淀峰的高度可算出待測(cè)抗原的含量。(2)主要用途：抗原蛋白定量，如IgA、IgG、IgM和sIgA檢測(cè)；C3、C4及其裂解產(chǎn)物檢測(cè)；AFP等檢測(cè)。免疫濁度測(cè)定的基本原理是什么?有哪些類型?(1)基本原理：免疫濁度測(cè)定是將液相內(nèi)的沉淀試驗(yàn)與現(xiàn)代光學(xué)儀器和自動(dòng)分析技術(shù)相結(jié)合的一項(xiàng)分析技術(shù)。當(dāng)可溶性抗原與相應(yīng)的抗體特異結(jié)合，在二者比例合適、并有一定濃度的電解質(zhì)存在時(shí)，可以形成不溶性的免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。這種濁度可用肉眼或儀器測(cè)知，并可通過(guò)濁度推算出復(fù)合物的

18、量，即抗原或抗體的量。(2)類型：按測(cè)量方式可分為透射免疫比濁法和散射免疫比濁法。按測(cè)定速度可分為速率比濁法和終點(diǎn)比濁法。散射免疫比濁法的基本原理是什么?沿水平軸照射的一定波長(zhǎng)的光，在通過(guò)溶液時(shí)，光線可被其中的免疫復(fù)合物粒子顆粒折射，發(fā)生偏轉(zhuǎn)，產(chǎn)生散射光。根據(jù)Rayle培h散射方程，散射光強(qiáng)度與粒子(免疫復(fù)合物)的濃度和體積成正比，通過(guò)測(cè)量散射光的強(qiáng)度，可計(jì)算出待測(cè)抗原的濃度。速率散射比濁法中的“速率”是指什么?所謂速率是指單位時(shí)間內(nèi)抗原與抗體反應(yīng)的速度。抗原與抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的速度，在每個(gè)單位時(shí)間內(nèi)是不相同的，在抗體過(guò)量的情況下，隨著反應(yīng)時(shí)問(wèn)的延長(zhǎng)，免疫復(fù)合物的總量逐漸增加，通常在25

19、s時(shí)出現(xiàn)一個(gè)反應(yīng)最快的速率峰。峰值與抗原量呈正相關(guān)。免疫濁度測(cè)定的反應(yīng)體系中，為什么必須始終保持抗體過(guò)量抗原和抗體的比例是濁度形成的關(guān)鍵因素，抗原和抗體必須在一個(gè)適當(dāng)?shù)臐舛炔艜?huì)出現(xiàn)最高結(jié)合率。當(dāng)抗原過(guò)量時(shí)，由于鉤狀效應(yīng)，形成的免疫復(fù)合物分子小，而且會(huì)發(fā)生再解離，使?jié)岫认陆?，光散射減少。當(dāng)反應(yīng)液中抗體過(guò)量時(shí)，免疫復(fù)合物的形成隨著抗原量的增加而遞增，光散射的強(qiáng)度也隨之遞增，因此，免疫濁度測(cè)定的反應(yīng)體系中必須始終保持抗體過(guò)量，以保證免疫復(fù)合物的生成量與濁度的改變一致，這是免疫濁度測(cè)定的基本原則。單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)有那些影響因素？單向擴(kuò)散試驗(yàn)有下列影響因素： 抗血清的親和力、特異性、及效價(jià)。要求親和力強(qiáng)

20、，特異性好、效價(jià)高。注意存放的方法，防止效價(jià)下降。 標(biāo)準(zhǔn)曲線必須在每次測(cè)定時(shí)同時(shí)制作，絕不可一次作成，長(zhǎng)期應(yīng)用。 測(cè)定時(shí)必須加測(cè)質(zhì)控血清，以保證定量的準(zhǔn)確性。 有時(shí)出現(xiàn)擴(kuò)散環(huán)呈現(xiàn)兩重的雙環(huán)現(xiàn)象，這是出現(xiàn)了抗原性相同的兩個(gè)組分，其擴(kuò)散率不同，例如重鏈病血清中出現(xiàn)的重鏈和正常的 IgA兩種成分并存，皆與抗IgA 抗體發(fā)生反應(yīng)，就形成內(nèi)外兩重環(huán)。 在單擴(kuò)試驗(yàn)時(shí)，有時(shí)回出現(xiàn)結(jié)果與真實(shí)含量不符，這主要出現(xiàn)在 Ig 測(cè)定中。如用單克隆抗體或骨髓瘤純抗原免疫動(dòng)物獲得的抗血清，都存在單一結(jié)合價(jià)的現(xiàn)象，若用此作為單擴(kuò)試劑測(cè)量正常人的多態(tài)性抗原，則抗體相對(duì)過(guò)剩，是沉淀圈直徑變小，測(cè)量值降低。 測(cè)得假陽(yáng)性升高現(xiàn)象與

21、上面相反，如用多克隆抗體測(cè)定單克隆病，則抗原相對(duì)過(guò)剩（單一抗原決定簇） ，致使沉淀圈呈不相關(guān)擴(kuò)大，從而造成某一成分的偽性增加。 沉淀反應(yīng)可應(yīng)用在那些方面？沉淀反應(yīng)主要應(yīng)用于體液內(nèi)包括血液、尿液、腦脊液、胸水、淚液、關(guān)節(jié)腔液等內(nèi)的蛋白質(zhì)（如MW1000050000，標(biāo)本濃度為 1mg/L100g/L）測(cè)定，應(yīng)用最廣泛的是可以準(zhǔn)確定量的免疫濁度法，也可用于藥物的測(cè)定。 雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的原理是什么？雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的原理為可溶性抗原和抗體在含有一定電解質(zhì)的瓊脂凝膠板的對(duì)應(yīng)孔中各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在最適當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線，根據(jù)沉淀線的位置、形狀及對(duì)比關(guān)系，可作出對(duì)抗原或抗體的定性分析試對(duì)沉淀反

22、應(yīng)各類試驗(yàn)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。沉淀反應(yīng)可分為單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、絮狀沉淀試驗(yàn)、免疫濁度測(cè)定等試驗(yàn)。 單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)是一種穩(wěn)定、簡(jiǎn)便、不需要特殊設(shè)備、一般試驗(yàn)室都可使用的常規(guī)方法。 雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)簡(jiǎn)單易行，結(jié)果可靠，特異性高，分辨率高于對(duì)流免疫電泳，成本低廉，結(jié)果可經(jīng)染色干燥后長(zhǎng)期保存；缺點(diǎn)是敏感性較低、擴(kuò)散緩慢，不能精確定量。 免疫濁度法快速、敏感，最小檢出量可達(dá) ng 水平。檢測(cè)范圍廣 缺點(diǎn)是所用抗血清質(zhì)量要求高，儀器須裝電腦，價(jià)格較貴。 絮狀沉淀試驗(yàn)較實(shí)用、簡(jiǎn)便、不需要特殊設(shè)備一般試驗(yàn)室都可使用，但須稀釋標(biāo)本比較麻煩。放射免疫分析技術(shù)有何應(yīng)用？答：放射免疫技術(shù)由于其測(cè)定的靈敏

23、度高，特異性強(qiáng)，精密度好，而且可對(duì)半抗原和抗原測(cè)定以及測(cè)定儀器設(shè)備條件要求不高，因此廣泛用于生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)。常用于各種激素、微量半抗原、腫瘤標(biāo)志物、藥物等微量物質(zhì)的測(cè)定。 由于大多數(shù)檢驗(yàn)項(xiàng)目均有 RIA 或 IRMA 試劑盒供應(yīng)，目前仍是基層單位對(duì)超微量物質(zhì)測(cè)定的主要手段。試述放射免疫分析與免疫放射分析。 答：放射免疫分析（RIA）是放射免疫技術(shù)最經(jīng)典的模式。它是以放射性核素標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合特異性抗體為基本原理來(lái)測(cè)定待檢樣品中抗原量的一種分析方法。而免疫放射分析（IRMA）是用放射性核素標(biāo)記的過(guò)量抗體與待檢測(cè)抗原直接結(jié)合，采用固相免疫吸附載體分離結(jié)合與游離標(biāo)記抗體的非競(jìng)爭(zhēng)

24、性放射免疫分析。二者的異同點(diǎn)如下： 標(biāo)記物 RIA 以放射性核素標(biāo)記抗原；IRMA 則是標(biāo)記抗體。 反應(yīng)速率 IRMA 反應(yīng)速度比RIA 快。 反應(yīng)原理 RIA 為競(jìng)爭(zhēng)抑制性結(jié)合，反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原量成反相關(guān)；IRMA為非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，反應(yīng)參數(shù)與待檢抗原成正相關(guān)。 特異性 IRMA 特異性較RIA高。 靈敏度和檢測(cè)范圍 IRMA測(cè)定的靈敏度明顯高于RIA， IRMA標(biāo)準(zhǔn)曲線工作范圍較RIA寬12個(gè)數(shù)量級(jí)。 其他 RIA 所用抗體為多克隆抗體，對(duì)親和力和特異性要求較高，但用量很少；IRMA 為試劑過(guò)量的反應(yīng)，對(duì)抗體親和力的要求不及 RIA，但用量大。此外，RIA 可以測(cè)量半抗原，但I(xiàn)RMA只能測(cè)定至

25、少有兩個(gè)以上表位的抗原。試述用于標(biāo)記的熒光素應(yīng)具備什么條件?DA用于標(biāo)記的熒光素應(yīng)符合以下要求：應(yīng)具有能與蛋白質(zhì)分子形成共價(jià)鍵的化學(xué)基團(tuán)，結(jié)合后不易解離，而未結(jié)合者易清除；熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合后，仍能保持較高的熒光效率；熒光色澤與背景組織的色澤對(duì)比鮮明；與蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響蛋白質(zhì)原有的生化與免疫學(xué)性質(zhì)；標(biāo)記方法簡(jiǎn)單、安全無(wú)毒；與蛋白質(zhì)的結(jié)合物穩(wěn)定，易于保存。試述熒光免疫顯微技術(shù)基本原理。DA熒光免疫顯微技術(shù)是以熒光顯微鏡為檢測(cè)工具，用熒光素標(biāo)記特異性抗體或抗抗體，檢測(cè)固定組織細(xì)胞上的抗原或血清中的抗體，常用于定性和定位檢查的一門技術(shù)。試述熒光免疫顯微技術(shù)的臨床應(yīng)用。DA臨床常應(yīng)用于：血清中

26、自身抗體的檢測(cè)；各種微生物的快速檢查和鑒定；寄生蟲感染的診斷；白細(xì)胞分化抗原的檢測(cè)。時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法具有哪些優(yōu)點(diǎn)?DA時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定法具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍寬，分析速度快，標(biāo)記物制備較簡(jiǎn)便、有效使用期長(zhǎng)，無(wú)放射性污染等優(yōu)點(diǎn)，因此是很有發(fā)展前途的超微量物質(zhì)免疫分析技術(shù)。目前臨床檢驗(yàn)中常用的熒光物質(zhì)有哪些？DA目前臨床檢驗(yàn)中常用的熒光物質(zhì)有：四乙基羅丹明、異硫氰酸熒光素、四甲基異硫氰酸羅丹明、Eu3+的螯合物等。簡(jiǎn)述熒光抗體的制備及純化方法。DA熒光抗體的制備方法純化方法有透析法、凝膠過(guò)濾法、有撐攪拌法及透析法。熒光抗體技術(shù)有哪些優(yōu)缺點(diǎn)，在臨床上有哪些應(yīng)用？熒光抗體技術(shù)的

27、優(yōu)點(diǎn)：（1）能做到快速、敏感、定位。（2）Ag 和Ab 的特異性與形態(tài)的檢查結(jié)合在一起；缺點(diǎn)：對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行微細(xì)結(jié)構(gòu)的觀察做不到；標(biāo)本不能永久保存，熒光有自然消退現(xiàn)象，需及時(shí)觀察及對(duì)照相；有非特異性熒光的干擾。熒光抗體技術(shù)的應(yīng)用：病毒學(xué)方面：病毒鑒定和病毒在感染cell內(nèi)的定位；寄生蟲學(xué)方面：用于寄生蟲的診斷（鑒定、分型）；免疫學(xué)方面：研究、用于自身免疫病的診斷；細(xì)菌學(xué)方面：菌種鑒定和Ag結(jié)構(gòu)的研究。用于標(biāo)記的酶應(yīng)符合哪些要求?DA(1)酶活性高，能對(duì)低濃度底物產(chǎn)生較高的催化反應(yīng)率。(2)具有可與抗原、抗體共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)，標(biāo)記后酶活性保持穩(wěn)定，而且不影響標(biāo)記抗原與抗體的免疫反應(yīng)性。(3)酶催化

28、底物后產(chǎn)生的信號(hào)產(chǎn)物易于判定或測(cè)量，且方法簡(jiǎn)單、敏感和重復(fù)性好。(4)酶活性不受樣品中其他成分(內(nèi)源性酶、抑制物)的影響；用于均相酶免疫測(cè)定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后，酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。(5)酶、輔助因子及其底物均對(duì)人體無(wú)危害，理化性質(zhì)穩(wěn)定，且價(jià)廉易得。簡(jiǎn)述酶免疫技術(shù)的分類。DA(1)酶免疫技術(shù)按實(shí)際用途，分為酶免疫組化和酶免疫測(cè)定兩大類。(2)按抗原抗體反應(yīng)后是否需將結(jié)合的和游離的酶標(biāo)記物分離，分為均相酶免疫測(cè)定和異相酶免疫測(cè)定，異相酶免疫測(cè)定又可分為固相酶免疫測(cè)定和液相酶免疫測(cè)定。簡(jiǎn)述均相酶免疫測(cè)定的原理。DA酶標(biāo)抗原(AgE)與Ab結(jié)合形成AbAgE后，其中的酶(E)活性將減

29、弱或增強(qiáng)。因此，不需對(duì)反應(yīng)液中的AbAgE和AgE進(jìn)行分離，直接測(cè)定反應(yīng)系統(tǒng)中總酶活性的變化，即可推算出被測(cè)樣品中Ag的含量。簡(jiǎn)述雙抗體夾心法的原理。DA連接于固相載體上的抗體和酶標(biāo)抗體，與待檢抗原上兩個(gè)不同的抗原決定基結(jié)合，形成固相抗體一抗原一酶標(biāo)抗體復(fù)合物。由于反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標(biāo)抗體的量相對(duì)于待檢抗原是過(guò)量的，因此復(fù)合物的形成量與待檢抗原的含量成正比。測(cè)定復(fù)合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)量，即可確定待檢抗原含量。斑點(diǎn)-ELISA有哪些優(yōu)點(diǎn)?DA(1)NC膜吸附蛋白力強(qiáng)，微量抗原吸附完全，故檢出靈敏度可較普通的EusA高68倍；(2)試劑用量較EusA省10倍；(3)操作簡(jiǎn)便

30、，試驗(yàn)及結(jié)果判斷不需特殊設(shè)備條件；(4)吸附抗原(抗體)或已有結(jié)果的NC膜可長(zhǎng)期保存(-20可達(dá)半年)。簡(jiǎn)述ELISA的基本原理、方法類型及應(yīng)用。DA(1)基本原理：抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面；測(cè)定時(shí)，將受檢樣品(含待測(cè)抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物；反應(yīng)終止時(shí)，固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)即與標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量成一定比例；經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì)，加入底物進(jìn)行顯色，最后通過(guò)定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測(cè)物質(zhì)含量。(2)方法類型及應(yīng)用：雙抗體夾心法：用于檢測(cè)抗原，適用于檢測(cè)兩個(gè)或兩個(gè)

31、以上抗原決定基的多價(jià)抗原；間接法：用于檢測(cè)抗體；競(jìng)爭(zhēng)法：用于抗原和半抗原的定量測(cè)定，也可對(duì)抗體進(jìn)行測(cè)定；捕獲法：用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測(cè)定。簡(jiǎn)述酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)的原理。DA具抗原及酶活性的Ag-E與Ab結(jié)合形成AgAb后，所標(biāo)的酶(E)因與Ab接觸緊密，空間位阻影響了酶的活性中心，酶活性受到抑制。加入未標(biāo)記抗原(標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的Ag)后，Ag即與Ab叫競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng)系統(tǒng)中限量的Ab形成AgAb復(fù)合物，從而使反應(yīng)液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例減少，具酶活性的游離AgE增多。最終測(cè)得的酶活性隨著反應(yīng)體系中未標(biāo)記抗原(Ag)濃度升高而增強(qiáng)。簡(jiǎn)述免疫印跡法的原理。免疫印跡法由SD

32、S-PAGE、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印和酶免疫測(cè)定三項(xiàng)技術(shù)結(jié)合而成?？乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負(fù)電荷，SDS-PAGE時(shí)從陰極向陽(yáng)極泳動(dòng)，分子量小者，泳動(dòng)速度快；將凝膠中已經(jīng)分離的蛋白質(zhì)條帶在電場(chǎng)作用下轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上；將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用，加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物，使區(qū)帶染色；根據(jù)電泳時(shí)加入的分子量標(biāo)準(zhǔn)，可確定各組分的分子量。何謂金免疫測(cè)定技術(shù)?簡(jiǎn)述其技術(shù)類型及原理。DA金免疫測(cè)定技術(shù)是指用膠體金顆粒作為標(biāo)記物進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的一類免疫學(xué)測(cè)定技術(shù)，其主要技術(shù)類型有斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)和斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)。1)斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)：在以硝酸纖維素膜為

33、載體并包被了抗原或抗體的滲濾裝置中，依次滴加標(biāo)本、免疫金及洗滌液，因微孔濾膜貼置于吸水材料上，故溶液流經(jīng)滲濾裝置時(shí)與膜上的抗原或抗體快速結(jié)合并起到濃縮作用，達(dá)到快速檢測(cè)目的，陽(yáng)性反應(yīng)在膜上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)。2)斑點(diǎn)金免疫層析試驗(yàn)：是將膠體金標(biāo)記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相合的以硝酸纖維素膜為載體的固相膜免疫分析技術(shù)，滴加在膜一端的標(biāo)本溶液受載體膜的毛細(xì)管作用向另一端移動(dòng)，猶如層析一般，在移動(dòng)過(guò)程中被分析物與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結(jié)合而被固相化，無(wú)關(guān)物則越過(guò)該區(qū)域而被分離，然后通過(guò)膠體金的呈色條帶來(lái)判讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。免疫溶血試驗(yàn)的原理和用途。DA原理是補(bǔ)體能使已被抗體致敏了的紅細(xì)胞發(fā)生溶血。免疫溶

34、血試驗(yàn)所參與的成分有補(bǔ)體，抗原(SRBC)及抗體(溶血素)，這三種成分中如有兩種是已知的就可測(cè)知第三個(gè)成分，稀釋該成分可測(cè)定其效價(jià)或含量。如溶血素的滴定，溶血空斑試驗(yàn)，CH50試驗(yàn)，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，抗補(bǔ)體試驗(yàn)等。如何進(jìn)行補(bǔ)體單個(gè)成分的測(cè)定? DA補(bǔ)體單個(gè)成分可測(cè)其溶血活性或含量。測(cè)定溶血活性應(yīng)先制備缺乏該補(bǔ)體單個(gè)成分的“補(bǔ)體試劑"。而后利用免疫溶血試驗(yàn)的原理，將致敏紅細(xì)胞與“補(bǔ)體試劑”混合，再加入待測(cè)血清，孵育后，溶血程度與待測(cè)血清中的該補(bǔ)體成分的溶血功能有關(guān)。測(cè)定含量可用已知抗體以單向瓊脂擴(kuò)散等方法進(jìn)行。血清免疫球蛋白測(cè)定方法有那些？答：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法：原理，優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單，條件要求低，

35、但抗體需要高效價(jià)高特異性，靈敏度： mg/ml 免疫比濁法:原理，優(yōu)點(diǎn)：檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，耗時(shí)短，靈敏度高ug/ml免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何意義？答：IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病， IgG升高則多為細(xì)菌感染導(dǎo)致，新生兒血清IgM升高則常為 宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖?。憾喟l(fā)性骨髓瘤，重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。某患者臨床疑為細(xì)胞免疫功能缺陷，應(yīng)做哪些檢查以協(xié)助診斷？答：從以下幾個(gè)方面檢測(cè)1)皮膚試驗(yàn) ，顯示有遲發(fā)超敏反應(yīng)能力，表示受試驗(yàn)者細(xì)胞免疫功能完善2)T細(xì)胞及其亞群檢測(cè)，常采用熒光抗體檢測(cè)T細(xì)胞表面標(biāo)志分子CD3

36、，CD4等3)T細(xì)胞功能檢測(cè)，利用PHA刺激淋巴細(xì)胞增殖，轉(zhuǎn)化來(lái)判斷T細(xì)胞的功能簡(jiǎn)述原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病的發(fā)病機(jī)制主要包括哪幾種？主要包括：吞噬細(xì)胞趨化和（或）粘附功能障礙。吞噬和殺菌功能障礙。單核吞噬細(xì)胞的特殊異常，如IgG Fc受體缺陷。簡(jiǎn)述AIDS的主要免疫學(xué)特征？免疫系統(tǒng)的CD4T淋巴細(xì)胞受HIV感染，使CD4T細(xì)胞受損而減少。單核-巨噬細(xì)胞、濾泡樹突狀細(xì)胞和朗格漢斯細(xì)胞亦可受HIV 感染而受損。進(jìn)行性細(xì)胞免疫缺陷，繼而體液免疫缺陷。B淋巴細(xì)胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。簡(jiǎn)述體液免疫缺陷的檢測(cè)方法？有血清Ig 的測(cè)定，常用免疫擴(kuò)散法和免疫比濁法。分泌型IgA 的測(cè)定，用單向免疫擴(kuò)散或E

37、LISA 等。同種血細(xì)胞凝集素測(cè)定。特異性抗體產(chǎn)生能力測(cè)定，疫苗接種后抗體產(chǎn)生的測(cè)定?？笽gA抗體的測(cè)定，測(cè)自身抗體。SmIg測(cè)定，檢測(cè)B細(xì)胞數(shù)量和其成熟程簡(jiǎn)述細(xì)胞免疫缺陷的檢測(cè)方法？有遲發(fā)性皮膚過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)，常為初篩試驗(yàn)。T細(xì)胞及其亞群的檢測(cè)，為主要的試驗(yàn)測(cè)定CD3、CD4、CD8 分化抗原進(jìn)行分類鑒定。E 玫瑰花結(jié)試驗(yàn)，現(xiàn)常用CD2 測(cè)定所代替。淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)試驗(yàn)，為體外免疫功能試驗(yàn)，方法有形態(tài)法和同位素法。T細(xì)胞分泌產(chǎn)物功能測(cè)定，測(cè)定激活的T細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。簡(jiǎn)述IDD的共同臨床特點(diǎn)？.對(duì)病原體的易感性強(qiáng)、常發(fā)生反復(fù)感染、嚴(yán)重感染，難以治愈。T細(xì)胞缺陷易發(fā)生病毒真菌和寄生

38、蟲感染。余缺陷病易發(fā)生細(xì)菌感染，尤以化膿感染為主。易發(fā)生惡性腫瘤和并發(fā)自身免疫病。臨床表現(xiàn)和病理?yè)p傷有明顯的多樣性，癥狀各異，復(fù)雜多樣，主要是累及多系統(tǒng)和多器官所致。簡(jiǎn)述IDD的常見(jiàn)發(fā)病原因？遺傳基因異常，常表現(xiàn)為X 連鎖隱性遺傳和常染色體隱性遺傳，顯性遺傳亦有，少見(jiàn)。中樞免疫器官發(fā)育障礙，由遺傳或其他原因所致。免疫細(xì)胞內(nèi)在酶的缺陷，如ADA、PNP、G-6-PD 缺乏所致。免疫細(xì)胞間調(diào)控機(jī)制異常，輔助不足或抑制過(guò)剩均可導(dǎo)致免疫缺陷。簡(jiǎn)述原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病的主要免疫學(xué)和臨床特征？.本組疾病有三種主要免疫學(xué)和臨床特征：全部Ig 缺失或極度降低，如Bruton 綜合征。部分Ig缺失，如選擇性Ig缺

39、陷。Ig量正常，但在抗原刺激后無(wú)免疫應(yīng)答，功能缺陷。敘述AIDS三大標(biāo)志的主要免疫學(xué)檢測(cè)？AIDS 檢測(cè)主要是病毒標(biāo)志、免疫標(biāo)志和相關(guān)標(biāo)志三大類。病毒標(biāo)志主要是直接分離培養(yǎng)檢測(cè)病毒或檢出HIV 組分，P24、gp120 和gp160 的免疫印跡檢測(cè)；免疫標(biāo)志主要是檢測(cè)HIV的抗原或抗體及T細(xì)胞，HIV抗體用ELISA測(cè)定為初篩試驗(yàn)，確認(rèn)試驗(yàn)用免疫印跡法，亦可用PCR法。我國(guó)判定標(biāo)準(zhǔn)為：HIV抗體陽(yáng)性：至少有兩條膜（gp41/gp120/gp160）或至少有一條膜帶與P24 帶同時(shí)測(cè)定；HIV 抗體陰性：無(wú)HIV 抗體特異性條帶出現(xiàn)；HIV 抗體可疑：出現(xiàn)特異性抗體帶，但帶型不足以確認(rèn)陽(yáng)性者，T

40、 細(xì)胞檢測(cè)減少，常1.5×109/L。CD4+T細(xì)胞絕對(duì)值下降至（24）×109/L，CD4/CD8比值1，還有Ig、免疫復(fù)合物等測(cè)定；相關(guān)標(biāo)志是指與HIV感染、AIDS病情有關(guān)的檢測(cè)，如有關(guān)微生物檢測(cè)、白細(xì)胞、ESR等。敘述AIDS的主要發(fā)病機(jī)制？AIDS 的主要發(fā)病機(jī)制：HIV 感染后，主要是損傷CD4+T 細(xì)胞減少和功能缺陷而導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫功能繼而體液免疫功能全面障礙為其主要的發(fā)病機(jī)制。同時(shí)還損傷巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、B細(xì)胞和腦組織小膠質(zhì)細(xì)胞，導(dǎo)致相應(yīng)的功能障礙。HIV損傷T細(xì)胞是通過(guò)HIV外膜蛋白gp120 和gp41 與T細(xì)胞發(fā)生拈附、溶解、使病毒核心進(jìn)入靶細(xì)胞

41、，在靶細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，繁殖，最后以芽生方式破壞細(xì)胞膜而移出，進(jìn)行感染擴(kuò)散，從而破壞CD4+T細(xì)胞，導(dǎo)致免疫缺陷。論述流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用。1.淋巴細(xì)胞及其亞型的分析2.淋巴細(xì)胞功能的分析3.淋巴造血系統(tǒng)及白血病免疫分型4.腫瘤耐藥基因分析5.AIDS檢測(cè)中的應(yīng)用6.自身免疫病相關(guān)HLA分析7.移值免疫中的應(yīng)用何謂重鏈病？重鏈病是由于漿細(xì)胞發(fā)生突變和異常增生，致使血清和尿中出現(xiàn)大量游離的無(wú)免疫功能的免疫球蛋白重鏈所導(dǎo)致的疾病。何謂輕鏈??？輕鏈病是突變的單克隆漿細(xì)胞產(chǎn)生的大量輕鏈，血漿中輕鏈含量異常增加，增加的輕鏈從腎臟排泄，血和尿中可查及大量的輕鏈蛋白。何謂免疫球蛋白異常增生性疾?。棵庖咔?/p>

42、蛋白異常增生性疾病是指由于漿細(xì)胞的異常增殖而導(dǎo)致的免疫球蛋白異常增生造成機(jī)體病理?yè)p傷的一組疾病。何謂漿細(xì)胞異常增殖？漿細(xì)胞異常增殖通常是指單克隆漿細(xì)胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。何謂ANA，簡(jiǎn)述熒光免疫組化法(間接法)檢測(cè)血清總ANA的原理。ANA即抗核抗體 ，指各種成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體，可與不同的細(xì)胞核反應(yīng)，無(wú)器官特異性和種屬特異性 間接法檢測(cè)ANA原理：用小鼠肝切片或印片或HEP2細(xì)胞作為細(xì)胞核基質(zhì)抗原，加待測(cè)血清，若含有ANA，則與細(xì)胞核基質(zhì)抗原反應(yīng)，再加熒光素標(biāo)記的抗抗體(二抗)，結(jié)合一抗，在熒光顯微鏡下見(jiàn)到細(xì)胞核有熒光著色為陽(yáng)性反應(yīng)。 AN

43、A有哪些種類，它們?cè)赟LE診斷中的價(jià)值如何？答：抗核抗體是一種廣泛存在的自身抗體，主要包括，抗DNP抗體，抗DNA抗體， 抗ENA抗體，抗組蛋白抗體。約99%（86%100%）的活動(dòng)期SLE病人ANA陽(yáng)性，ANA陰性幾乎可除外SLE的診斷。你知道哪些自身抗體，臨床應(yīng)用價(jià)值如何？答：1）ANA：在未經(jīng)治療的SLE患者中陽(yáng)性率可達(dá)90%以上，其他自身免疫病也可陽(yáng)性。可作為自身免疫病，尤其是SLE的篩選指標(biāo)。2）抗Sm抗體：SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指標(biāo)。3）抗dsDNA抗體： SLE的特征性標(biāo)志抗體，是SLE重要診斷指試述自身免疫病的防治原則。答：自身免疫病的防治原則大致為：（1）預(yù)

44、防和控制病原體的感染，避免因自身組織細(xì)胞的抗原性發(fā)生改變和交叉抗原誘發(fā)的免疫應(yīng)答，同時(shí)也避免感染引起的抗原提呈細(xì)胞和T細(xì)胞的激活。（2）使用免疫抑制劑如環(huán)孢霉素A、FK-506、皮質(zhì)激素、中藥雷公藤治療主要以抗體引起的自身免疫病，用Th2因子治療主要以T細(xì)胞引起的身身免疫病。（3）特異性抗體治療，如用抗CD3單抗，抗炎癥性細(xì)胞因子單抗等。（4）疫苗激發(fā)免疫耐受。如口服II型膠原等自身預(yù)防和治療類風(fēng)溫關(guān)節(jié)炎等試述系統(tǒng)性紅斑狼瘡，自身抗體的檢測(cè)。答：疾病診斷相關(guān)的主要自身抗體:1抗核抗體2抗DNA抗體3抗磷脂抗體和抗血小板抗體4抗紅細(xì)胞抗體5RF 6抗細(xì)胞質(zhì)抗體自身免疫病的共同特征。1.多數(shù)病因不

45、明；2.有遺傳傾向；3.患者以女性居多，并隨年齡增加發(fā)病率有所增加；4.患者血清中游多種自身抗體或自身反應(yīng)致敏淋巴細(xì)胞存在；5.疾病有重疊現(xiàn)象；6.病程一般較長(zhǎng)，多遷延為慢性；7.病損局部可發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞，中性粒細(xì)胞等浸潤(rùn)；8.免疫抑制劑治療可取的一定療效。簡(jiǎn)單敘述型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)。答:型超敏反應(yīng)的特點(diǎn)是： 具有明顯的個(gè)體差異和遺傳背景；反應(yīng)發(fā)生快， 幾秒至幾十分鐘內(nèi)出現(xiàn)癥狀， 恢復(fù)也較迅速；由結(jié)合在肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞上的IgE抗體所介導(dǎo)；通常反應(yīng)發(fā)生后效應(yīng)器官出現(xiàn)功能紊亂， 而沒(méi)有嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷；補(bǔ)體不參與該反應(yīng)。I型超敏反應(yīng)的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法有哪些？1）皮試檢測(cè)變應(yīng)原。2）免疫球

46、蛋白檢測(cè)：總IgE和 特異性IgE。3）嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)。以血型不合引起的輸血反應(yīng)為例，簡(jiǎn)述型超敏反應(yīng)靶細(xì)胞損傷機(jī)制。答：抗ABO血型抗體多為IgM型(1分)，當(dāng)血型不合進(jìn)行輸血時(shí)，血型抗體可與紅細(xì)胞表面相應(yīng)的血型抗原物質(zhì)結(jié)合(1分)，通過(guò)三個(gè)機(jī)制溶解紅細(xì)胞：抗體和補(bǔ)體介導(dǎo)的紅細(xì)胞溶解(2分)，免疫調(diào)理作用(1分)，ADCC作用試述III型超敏反應(yīng)發(fā)生機(jī)制。 答：III型超敏反應(yīng)，IC沉積引起組織損傷的機(jī)制如下：（1）激活補(bǔ)體IC沉積可激活補(bǔ)體，產(chǎn)生C3a、C5a等過(guò)敏毒素，使趨化至局部的肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒，釋放組胺等活性介質(zhì)，造成血管通透性增加、滲出和局部水腫。同時(shí)吸引

47、中性粒細(xì)胞聚集于IC沉積的部位。（2）中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)趨化至IC沉積部位的中性粒細(xì)胞在吞噬IC時(shí)釋放多種溶酶體酶，使血管基底膜和周圍組織細(xì)胞民生損傷，造成以上中性細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥。（3）血小板活化IC和C3b可使血小板在局部聚集并活化，釋放血管活性胺類物質(zhì)，使血管擴(kuò)張、通盤性增加、加劇局部滲出和水腫，并激活凝血系統(tǒng)，形成微血栓，造成局部組織缺血、出血和壞死。Rh血型不符引起的新生兒溶血癥屬于哪一種類型的超敏反應(yīng)性疾病?試述其發(fā)生機(jī)制。答:（1） Rh血型不符引起的新生兒溶血癥為型超敏反應(yīng)性疾病。（2）Rh血型不符引起的新生兒溶血癥發(fā)生于Rh一母親所懷的Rh胎兒，尤其多見(jiàn)于再次妊娠所分娩的新生兒

48、。當(dāng)首次妊娠分娩時(shí)，胎兒的Rh紅細(xì)胞可進(jìn)入母體，剌激母體產(chǎn)生抗Rh抗體。當(dāng)再次妊娠仍為Rh胎兒時(shí)，母體產(chǎn)生的抗Rh抗體(IgG)即可通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)， 與胎兒Rh紅細(xì)胞結(jié)合，導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞的破壞。從而引起流產(chǎn)或出生后的嚴(yán)重溶血現(xiàn)象，甚至死亡。試述型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制答：型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制：型超敏反應(yīng)是由于變應(yīng)原再次進(jìn)入體內(nèi)后引發(fā)的超敏反應(yīng)，其發(fā)生通常分三個(gè)階段：（1）致敏階段 在此階段，變應(yīng)原進(jìn)入機(jī)體，刺激機(jī)體特異的B淋巴細(xì)胞，使其增殖分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞分泌產(chǎn)生針對(duì)特異變應(yīng)原的IgE抗體，此抗體吸附于肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上，使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。（2）發(fā)敏階段 當(dāng)有相同變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)

49、體時(shí)，與致敏靶細(xì)胞表面的IgE Fab段超變區(qū)特異性結(jié)合，觸發(fā)靶細(xì)胞的細(xì)胞膜活化，使其脫顆粒及合成新的生物活性介質(zhì)。（3）效應(yīng)階段 顆粒中的生物活性介質(zhì)及新合成的生物活性介質(zhì)作用于相應(yīng)的效應(yīng)器官，引起效應(yīng)器官病理改變單克隆抗體：是指僅識(shí)別單一抗原表位的B細(xì)胞雜交瘤產(chǎn)生的同源抗體，具有特異性強(qiáng)、效價(jià)高、生物活性單一、理化性狀高度均一等特點(diǎn)。佐劑：是指先于抗原或與抗原一起注入機(jī)體，能夠增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)?；蚬こ炭贵w：是指應(yīng)用DNA重組及蛋白工程技術(shù)對(duì)編碼抗體的基因按不同的需要進(jìn)行改造和裝配，經(jīng)導(dǎo)人適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞后重新表達(dá)的抗體，主要包括人源化抗體、小分子抗體、雙價(jià)

50、特異性抗體和抗體融合蛋白等類型。雙特異性抗體：又稱雙功能抗體，它不同于天然抗體，其兩個(gè)抗原結(jié)合部位具有不同的特異性，可以同時(shí)與兩種不同特異性的抗原發(fā)生結(jié)合。滴度(效價(jià))：血清標(biāo)本進(jìn)行一系列倍比稀釋后進(jìn)行反應(yīng)，以出現(xiàn)明顯凝集反應(yīng)的血清最高稀釋度、即滴度(效價(jià))。凝集反應(yīng)：凝集反應(yīng)是指細(xì)菌或紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在適當(dāng)條件下結(jié)合形成凝集的現(xiàn)象?，F(xiàn)也指顆粒化抗原或抗體與相應(yīng)抗體或抗原的反應(yīng)。直接凝集反應(yīng)：細(xì)菌、螺旋體和紅細(xì)胞等顆粒抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱為直接凝集反應(yīng)。凝集原：指凝集反應(yīng)中的抗原。凝集素：指凝集反應(yīng)中的抗體。試管凝集試驗(yàn)：是在試管內(nèi)顆粒性抗原與相

51、應(yīng)抗體直接結(jié)合，在一定條件下，會(huì)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。間接凝集反應(yīng)：將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象稱間接凝集反應(yīng)或被動(dòng)凝集反應(yīng)(passive agglutination test)。沉淀反應(yīng)：沉淀反應(yīng)是指可溶性的抗原和抗體特異性結(jié)合后，所形成的復(fù)合物以沉淀的形式出現(xiàn)。凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn)：又稱凝膠擴(kuò)散，是將可溶性抗原與相應(yīng)抗體分別放人凝膠內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)散，兩者在比例合適的位置形成肉眼可見(jiàn)的沉淀線或沉淀環(huán)。免疫電泳：是凝膠電泳和凝膠擴(kuò)散相結(jié)合。在電場(chǎng)作用下，位于瓊脂凝膠中的抗原樣品因各組分的電泳遷移率不

52、同而彼此分開形成不同的區(qū)帶。電泳結(jié)束后，在瓊脂板中間所挖的長(zhǎng)形槽內(nèi)加人相應(yīng)的抗血清，由于經(jīng)電泳分離后的各種抗原成分在瓊脂中呈放射狀擴(kuò)散，而抗體呈直線擴(kuò)散，因而形成的沉淀線多呈弧狀。對(duì)流免疫電泳：是在電場(chǎng)作用下的免疫雙擴(kuò)散?？乖蜿?yáng)極移動(dòng)，而抗體向陰極移動(dòng)，在一定時(shí)間內(nèi)，相向移動(dòng)的抗原和抗體在兩孔間相遇，在濃度比例適當(dāng)處形成沉淀線。帶現(xiàn)象: 在抗原抗體特異性反應(yīng)時(shí)，生成結(jié)合物的量與反應(yīng)物的濃度有關(guān)，當(dāng)抗原與抗體達(dá)到最適比時(shí)， 沉淀物形成最多。 如果抗原或抗體極度過(guò)剩則無(wú)沉淀物形成， 這種現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。出現(xiàn)在抗原過(guò)量時(shí)，稱為后帶。出現(xiàn)在抗體過(guò)量時(shí)，稱為前帶。放射化學(xué)純度：指單位標(biāo)記物中結(jié)合于被標(biāo)

53、記物上的放射性占總放射性的百分率，一般要求大于 90%。比放射性 ：指單位化學(xué)量標(biāo)記物中所含的放射性強(qiáng)度，也可理解為每分子被標(biāo)記物平均所掛放射性原子數(shù)目，常用Ci/g，mCi/mg或Ci/mmol等單位表示。放射免疫分析 ：是該類技術(shù)最經(jīng)典的模式。它是以放射核素標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)特異性抗體的基本原理來(lái)測(cè)定待檢樣品中抗原量的一種分析法。熒光免疫技術(shù)：是將抗原抗體反應(yīng)的特異性與熒光物質(zhì)檢測(cè)的敏感性和直觀性結(jié)起來(lái)的一種免疫分析技術(shù)。熒光效率：是指熒光物質(zhì)將吸收的光能轉(zhuǎn)變成為熒光的百分率。熒光壽命：指熒光物質(zhì)被一瞬時(shí)光脈沖激發(fā)后產(chǎn)生的熒光隨時(shí)間而衰減到一定程度時(shí)所用的時(shí)間。熒光的淬滅

54、：指熒光分子在某些理化因素作用下、熒光分子的輻射能力受到激發(fā)光較長(zhǎng)時(shí)間的照射后會(huì)減弱的現(xiàn)象。熒光素：是能產(chǎn)生熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物。熒光抗體：熒光素與特異性抗體以化學(xué)共價(jià)鍵的方式結(jié)合而成，是免疫熒光技術(shù)的關(guān)鍵試劑。非均相熒光免疫測(cè)定法：在抗原抗體反應(yīng)后，先把Ab*Ag與Ab*分離，然后測(cè)定Ab*Ag或Ab*中的標(biāo)記物的量，從而推算出標(biāo)本中的Ag量，該方法稱非均相熒光免疫測(cè)定法。均相熒光免疫測(cè)定法：在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標(biāo)記物失去熒光特性，則不需進(jìn)行Ab*Ag與Ab*的分離，可以直接測(cè)定游離的Ab*量，從而推算出標(biāo)本中的Ag量，該方法稱為均相熒光免疫測(cè)定法。時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定

55、：時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定是用鑭系稀土元素螯合物(如螯合物)標(biāo)記抗體或抗原，檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗原或抗體的熒光免疫測(cè)定技術(shù)酶免疫技術(shù)：是指利用酶的高效催化和放大作用與特異性免疫反應(yīng)結(jié)合而建立的一種標(biāo)記免疫技術(shù)。封閉：是指在抗原或抗體包被ELISA板后，用15牛血清白蛋白或520小牛血清等再包被，以防止非特異性吸附。異相EIA：是指在酶免疫測(cè)定中，抗原抗體反應(yīng)后，需分離游離的和與抗原(或抗體)結(jié)合形成復(fù)合物的酶標(biāo)記物，然后對(duì)經(jīng)酶催化的底物顯色程度進(jìn)行測(cè)定，再推算出樣品中待測(cè)抗原(或抗體)的含量。包被：是指將抗原或抗體固相化的過(guò)程。均相酶免疫測(cè)定：是指抗原抗體反應(yīng)平衡后，無(wú)需分離F和B，直接根據(jù)反應(yīng)前后

56、酶活性的改變進(jìn)行待檢物質(zhì)的測(cè)定。腫瘤抗原: 腫瘤在發(fā)生、發(fā)展中產(chǎn)生的或過(guò)度表達(dá)的抗原物質(zhì)。腫瘤相關(guān)抗原：非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也存在的抗原，含量在細(xì)胞癌變時(shí)明顯增高。腫瘤特異性抗原：腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞不存在的抗原。封閉因子:一種小分子的多肽,可存在于腫瘤患者的血清中。體外培養(yǎng)時(shí),它可抑制非特異性致有絲分裂因子,如植物血凝素或刀豆素A對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化移植(transplantation)：指健康細(xì)胞、組織或器官?gòu)钠湓课灰浦驳阶泽w或異體的一定部位、用以代替或補(bǔ)償機(jī)體所喪失的結(jié)構(gòu)和功能的現(xiàn)代醫(yī)療手段。移植抗原：代表個(gè)體特異性的由MHC編碼的HLA是引起排斥反應(yīng)的同種抗原移

57、植排斥反應(yīng)(transplantation rejection)：針對(duì)移植抗原產(chǎn)生的引起移植物功能或受者機(jī)體損害的免疫應(yīng)答。宿主抗移植物反應(yīng)(host versus graft reaction, HVGR)：宿主針對(duì)供體組織或細(xì)胞的HLA抗原產(chǎn)生的移植排斥反應(yīng)移植物抗宿主反應(yīng)(graft versus host reaction, GVHR)：一定條件下移植物中的過(guò)客（免疫）細(xì)胞針對(duì)移植物產(chǎn)生的排斥反應(yīng)。免疫缺陷(immunodeficiency):由遺傳因素或其他原因?qū)е碌拿庖呦到y(tǒng)發(fā)育或免疫應(yīng)答障礙而導(dǎo)致的一種或多種免疫功能不全.免疫缺陷病:由免疫缺陷所致的各種臨床綜合特征的疾病.獲得性免疫缺陷綜合征 (AIDS)：，由HIV感染引起，因CD4+T細(xì)胞質(zhì)和量的缺失，導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重缺陷，臨床上以反復(fù)機(jī)會(huì)感染、惡性腫瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性變?yōu)橹饕卣?。流式?xì)胞術(shù)：是指借助流式細(xì)胞儀，精確、快速地對(duì)生物細(xì)胞的理化特性和生物學(xué)特性進(jìn)行多參數(shù)定量分析，并對(duì)特定細(xì)胞群體分選的新技術(shù)。細(xì)胞分選：是指從細(xì)胞群體中將選定的細(xì)胞分離出來(lái)。熒光補(bǔ)償技術(shù)：是指利用已知標(biāo)準(zhǔn)樣品或根據(jù)細(xì)胞樣品的生物學(xué)意義，合理設(shè)置各熒光信號(hào)之間的相互補(bǔ)償值。M蛋白:單克隆免疫球蛋白，是B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均