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1、細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的檢測(cè)方法1. 淀粉: 碘液 (越深濃度越大)2. 還原糖: 斐林試劑、班氏試劑。3. CO2: Ca(OH)2溶液、溴麝香草酚藍(lán)水溶液4. 脂肪:蘇丹或蘇丹染液5. 蛋白質(zhì): 雙縮脲試劑6. 染色體:龍膽紫、醋酸洋紅溶液7. DNA: 甲基綠;8. RNA:吡羅紅9. 線粒體:健那綠實(shí)驗(yàn)藥品的用途1.NaOH: 用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H值2. Ca(OH)2: 鑒定CO2 3.HCl:解離或改變?nèi)芤旱膒H值4.NaHCO3:提供CO2 5.NaCl:配制生理鹽水及其他不同濃度的鹽溶液,可用于測(cè)定動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度或用于提取DNA6.酒精:用于洗去浮色(50%) 、消毒處理
2、(70%)、色素提?。o水乙醇)、葉片脫色及配制解離液(95%)7.蔗糖:配制蔗糖溶液,用于測(cè)定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原不同濃度的酒精在高中生物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用(一)體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精 1、作用:洗去浮色。 2、應(yīng)用:脂肪的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)(二)體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精1、作用: 解離(15%鹽酸和95%酒精11混合)2、應(yīng)用 觀察植物細(xì)胞的有絲分裂(三)體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精1、作用:消毒殺菌2、應(yīng)用:微生物的培養(yǎng)技術(shù)、植物組培(四)無水酒精 1、作用:提取色素2、應(yīng)用:葉綠體中色素的提取與分離(五)工業(yè)酒精(一般是體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精) 1、作用:燃燒加熱2、應(yīng)用: 包括各類必須加熱的實(shí)
3、驗(yàn), (六)鹽酸 酶在不同pH下的活性:提供酸性環(huán)境 15%的HCl和95%的酒精:解離 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布中,改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合探究點(diǎn)一顯微觀察類實(shí)驗(yàn)1觀察類實(shí)驗(yàn)總結(jié)實(shí)驗(yàn)名稱細(xì)胞狀態(tài)染色劑生物材料觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布死細(xì)胞甲基綠、吡羅紅人的口腔上皮細(xì)胞觀察線粒體活細(xì)胞健那綠觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂死細(xì)胞無(為固定裝片)蝗蟲精母細(xì)胞低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化死細(xì)胞改良苯酚品紅染液洋蔥根尖細(xì)胞觀察細(xì)胞的有絲分裂死細(xì)胞龍膽紫(或醋酸洋紅)觀察多種多樣的細(xì)胞活或死細(xì)胞無(無需染色)酵母菌細(xì)胞、水綿
4、細(xì)胞、葉的保衛(wèi)細(xì)胞、魚的紅細(xì)胞等觀察葉綠體活細(xì)胞蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻葉)觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原活細(xì)胞紫色洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞1光學(xué)顯微鏡的使用適用于觀察生物的微觀結(jié)構(gòu),如觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)。(1)使用低倍鏡應(yīng)注意正確對(duì)光和調(diào)焦(粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋的調(diào)節(jié))。(2)高倍鏡的使用方法包括:低倍鏡下找到清晰物像并移至視野中央。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使高倍物鏡正對(duì)通光孔。調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至物像清晰。2玻片標(biāo)本的制作適用于顯微觀察,凡需在顯微鏡下觀察的生物材料,必須先制成玻片標(biāo)本。包括:(1)壓片法(如洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂)。壓片的一般過程是:取材固定解離(對(duì)不易分散的材料用HCl處理)漂洗染色壓片觀察。(2)裝
5、片法(如高倍鏡下觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng))。其過程是:將材料放在載玻片水滴中展平放蓋玻片時(shí)應(yīng)從一側(cè)慢慢蓋在水滴上,防止氣泡產(chǎn)生對(duì)材料染色或改變?nèi)芤簼舛扔^察。3觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)處理實(shí)驗(yàn)該實(shí)驗(yàn)需要增強(qiáng)細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性,一般有三種方法可加速細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),一是光照1520 min,二是提高盛放黑藻的水溫,三是切傷一小部分葉片。4觀察細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn)(1)注意取材:觀察對(duì)象應(yīng)選擇分裂旺盛的部位(根尖、莖尖分生區(qū)),取材必須選擇在分裂旺盛的時(shí)期,這樣才能保證制作的裝片可觀察到較多的細(xì)胞分裂圖像。(2)本實(shí)驗(yàn)所用試劑及作用:解離液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的HCl和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精按11混合,目的是使組織中的
6、細(xì)胞分散開;染色劑:0.01 g/mL或0.02 g/mL的龍膽紫(或醋酸洋紅)。(3)實(shí)驗(yàn)步驟:取材、解離、漂洗、染色、制片、觀察。(4)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)成敗的要素:一是取材,盡量取生長(zhǎng)點(diǎn)部位;二是解離時(shí)間要適宜,否則細(xì)胞不容易分散開;三是漂洗必須徹底,否則鹽酸會(huì)影響染色;四是染色時(shí)間要適宜,過深或過淺,染色體的形態(tài)和數(shù)目不易觀察清楚。5觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原實(shí)驗(yàn)(1)取材:選取成熟的植物細(xì)胞(含有大的液泡)。(2)試劑:質(zhì)量濃度為0.3 g/mL的蔗糖溶液;質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的氯化鈉溶液;質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的硝酸鉀溶液。探究點(diǎn)二鑒定類實(shí)驗(yàn)1生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的
7、鑒定要特別注意的是斐林試劑與雙縮脲試劑都由NaOH和CuSO4組成,但二者有以下不同:(1)溶液濃度不同;(2)使用原理不同斐林試劑作用原理:還原糖中的醛基在加熱條件下能將Cu(OH)2中的Cu2還原成Cu,從而生成磚紅色的Cu2O沉淀;雙縮脲試劑作用原理:雙縮脲在堿性溶液中能與Cu2結(jié)合生成紫色絡(luò)合物,蛋白質(zhì)分子中含有雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵;(3)使用方法不同(見下表)。3葉綠體中色素的提取和分離(1)區(qū)分色素提取和分離的原理色素提取的原理丙酮提取法:綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑丙酮中,所以,可以用丙酮提取綠葉中的色素。色素分離的原理紙層析法:色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快;反之則慢。(2)注意事項(xiàng)濾液細(xì)線要畫得細(xì)且直,以防止色素帶重疊而影響分離效果;待濾液干燥后要再畫一兩次,目的是積累更多的色素,使分離后的色素帶明顯;分離色素時(shí)層析液不能沒及濾液細(xì)線,以防止色素溶解于層析液中而無法分離;覆蓋燒杯或試管加棉塞,以防止層析液揮發(fā)。4實(shí)驗(yàn)條件的控制方法增加水中氧氣:泵入空氣或吹氣或放入綠色植物;減少水中氧氣:容器密封或油膜覆蓋或用涼開水;除去容器中CO2:密閉實(shí)驗(yàn)裝置中放入NaOH溶液或KOH溶液;除去葉片中原有淀粉
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