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文檔簡介

1、在進行分析測試方面的研究時,一般采用移液槍(pipette)量取少量或微量的液體。對于移液槍的正確使用方法及其一些細節(jié)操作,是很多人都會忽略的?,F(xiàn)在分幾個方面詳細敘述。量程的調(diào)節(jié) 在調(diào)節(jié)量程時,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液槍。槍頭(吸液嘴)的裝配 在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這時錯誤的做法,因為這樣會導(dǎo)致移液槍的

2、內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的第一道對準第一個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。 移液的方法 移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下23毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。一是前進移液法。用大拇指將

3、按鈕按下至第一停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第一停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第一停點排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。移液器的正確放置使用完畢,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。維

4、護保養(yǎng)時的注意事項 如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。 最好定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60 的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。 高溫消毒之前,要確保移液器能適應(yīng)高溫。 校準是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來進行。 使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。 如果漏液,原因大致有一下幾方面:1、槍頭是否匹配;2、彈簧活塞是否正常;3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題??梢韵任艓状我后w,然后再移液??烧{(diào)式自動取液器的操作方法:用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的

5、旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字,在取液器下端插上一個塑料吸頭,并旋緊以保證氣密,然后四指并攏握住取液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留12秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到第一停點,停留一秒鐘(粘性大的液體要加長停留時間),再按壓到第二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸 移液器使用注意事項(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶

6、液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。(2)為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層”液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20時重0.9982g.(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。 所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,

7、否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。 數(shù)字清清楚楚在顯示窗中, 旋轉(zhuǎn)到所需量程 (7)在設(shè)置量程時,請注意(8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作移液器的種類和使用 準確的分析方法對于生物化學(xué)實驗是極為重要的,在各種生物化學(xué)分析技術(shù)中,首先要熟練掌握的就是準確的移液技術(shù)。為此要用到各種形式的移液管,其中有一些是學(xué)生們在化學(xué)實驗中未用過而在生化實驗中是常用的。1 滴管使用方便,可用于半定量移液,其移液量為1

8、mL5mL,常用2mL,可換不同大小的滴頭。滴管有長、短兩種,新出的一種帶刻度和緩沖泡的滴管,可以比普通滴管更準確地移液,并防止液體吸入滴頭。2 移液管(吸管)吸管使用前應(yīng)洗至內(nèi)壁不掛水珠,1mL 以上的吸管用吸管專用刷刷洗,0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗滌劑浸泡,必要時可以用超聲清洗器清洗。由于鉻酸洗液致癌,應(yīng)盡量避免使用。若有大量成批的吸管洗后沖洗,可使用沖洗桶,將吸管尖端向上置于桶內(nèi),用自來水多次沖洗后再用蒸餾水或無離子水沖洗。吸管分為兩種,一種是無分度的,稱為大肚吸管,精確度較高,其相對誤差A(yù) 級為0.70.8,B 級為1.50.16,液體自標線流至口端(留有殘液),

9、A 級等待15s,B 級等待3s。另一種吸管為分度吸管,管身為一粗細均勻的玻璃管,上面均勻刻有表示容積的分度線,其準確度低于胖肚吸管,相對誤差A(yù) 級為0.80.2,B 級為1.60.4,A 級、B 級在吸管身上有A、B 字樣,有”快”字則為快流式,有”吹”字則為吹出式,無”吹”字的吸管不可將管尖的殘留液吹出。吸、放溶液前要用吸水紙擦拭管尖。3 微量進樣器微量進樣器常用作氣相和液相色譜儀的進樣器,在生化實驗中主要是用作電泳實驗的加樣器,通常可分為無存液和有存液兩種。(1)10L 以下的極微量液體進樣。無存液微量進樣器:進樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處,不會出現(xiàn)存液。(2)10L100L 有存液

10、微量進樣器:不銹鋼的針尖管部分是空管,進樣器的柱塞不能到達,因而管內(nèi)會存有空氣或液體,其使用注意事項是:不可吸取濃堿溶液,以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件;因為有存液,所以吸液時要來回多拉幾次,將針尖管內(nèi)的氣泡全部排盡;針尖管內(nèi)孔極小,使用后尤其是吸取過蛋白質(zhì)溶液后,必須立即清洗針尖管,防止堵塞。若遇針尖管堵塞,不可用火燒,只能用0.1mm 的不銹鋼絲耐心串通;進樣器未潤濕時不可來回干拉芯子,以免磨損而漏氣;若進樣器內(nèi)發(fā)黑,有不銹鋼氧化物,可用芯子蘸少量肥皂水,來回拉幾次即可除之。4 自動取液器這種取液器在生化實驗中大量地使用,它們主要用于多次重復(fù)的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的準

11、確度(即容量誤差)為(0.51.5),移液的精密度(即重復(fù)性誤差)更小些,為0.5。取液器可分為二種:一種是固定容量的,常用的有100 L 等多種規(guī)格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭,吸頭通常是一次性使用,當(dāng)然也可以超聲清洗后重復(fù)使用,而且此種吸頭還可以進行120高壓滅菌;另一種是可調(diào)容量的取液器,常用的有200L、 500L 和1000L 等幾種??烧{(diào)式自動取液器的操作方法是用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字,在取液器下端插上一個塑料吸頭,并旋緊以保證氣密,然后四指并攏握住取液器上部,用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到第一停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留12秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到第一停點,停留一秒鐘(粘性大的液體要加長停留時間),再按壓到第二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。自動取液器的使用注意事項是:吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏

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