診斷酶學(xué)(第五版)12

1、診診 斷斷 酶酶 學(xué)學(xué)臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)林孟戈林孟戈 本章學(xué)習(xí)過(guò)程中請(qǐng)你思考本章學(xué)習(xí)過(guò)程中請(qǐng)你思考:1 1、酶學(xué)分析中工具酶參與的指示反應(yīng)有哪些？、酶學(xué)分析中工具酶參與的指示反應(yīng)有哪些？2 2、血清酶活性濃度的測(cè)定技術(shù)有哪些？、血清酶活性濃度的測(cè)定技術(shù)有哪些？3 3、同工酶及其亞型的測(cè)定有哪些方法？、同工酶及其亞型的測(cè)定有哪些方法？ 4 4、臨床常用血清酶測(cè)定有何臨床意義？、臨床常用血清酶測(cè)定有何臨床意義？5 5、連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定酶活性濃度的原理和應(yīng)用。、連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定酶活性濃度的原理和應(yīng)用。第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述（一）酶的組成、結(jié)構(gòu)和功能（一）酶的組成、結(jié)構(gòu)和功能 酶的本質(zhì)酶的

2、本質(zhì)-絕大部分的酶是蛋白質(zhì)，有些酶是核酸絕大部分的酶是蛋白質(zhì)，有些酶是核酸 和酶蛋白組成的復(fù)合體，極少數(shù)酶的本質(zhì)是核酸。和酶蛋白組成的復(fù)合體，極少數(shù)酶的本質(zhì)是核酸。 酶的特性酶的特性-極高的催化效率、高度的特異性極高的催化效率、高度的特異性 (specificity)(specificity)以及催化作用的可調(diào)節(jié)性以及催化作用的可調(diào)節(jié)性一、酶的概念與特征一、酶的概念與特征 酶的結(jié)構(gòu)和功能酶的結(jié)構(gòu)和功能 酶是蛋白質(zhì)，具有一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)，有些酶還具酶是蛋白質(zhì)，具有一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)，有些酶還具 有四級(jí)結(jié)構(gòu)。有四級(jí)結(jié)構(gòu)。 單體酶單體酶(monomeric enzyme)-(monomeric enz

3、yme)-只由一條多肽鏈構(gòu)成只由一條多肽鏈構(gòu)成 寡聚酶寡聚酶 (oligomeric enzyme)-(oligomeric enzyme)-由多個(gè)相同或不同由多個(gè)相同或不同 亞基以非共價(jià)鍵連接的酶亞基以非共價(jià)鍵連接的酶 多酶體系多酶體系(multienzyme system)-(multienzyme system)-由幾種不同功能由幾種不同功能 的酶彼此聚合而成的多酶復(fù)合物的酶彼此聚合而成的多酶復(fù)合物 酶的必需基團(tuán)酶的必需基團(tuán)(essential group)-(essential group)-與酶的活性密與酶的活性密 切相關(guān)的基團(tuán)切相關(guān)的基團(tuán) 酶的活性中心酶的活性中心(active c

4、enter)-(active center)-組成具有能與底組成具有能與底 物結(jié)合并起催化反應(yīng)的特定空間結(jié)構(gòu)區(qū)域物結(jié)合并起催化反應(yīng)的特定空間結(jié)構(gòu)區(qū)域（二）酶的催化作用機(jī)制（二）酶的催化作用機(jī)制酶主要通過(guò)與底物形成一種或多種中酶主要通過(guò)與底物形成一種或多種中 間復(fù)合物來(lái)降低反應(yīng)的活化能。間復(fù)合物來(lái)降低反應(yīng)的活化能。 在酶促反應(yīng)中，酶與底物結(jié)合時(shí)，底在酶促反應(yīng)中，酶與底物結(jié)合時(shí)，底物首先和酶分子上的活性中心相結(jié)合，物首先和酶分子上的活性中心相結(jié)合，形成酶底物中間復(fù)合物（形成酶底物中間復(fù)合物（ESES），降低），降低反應(yīng)的活化能，顯著提高了反應(yīng)速度。反應(yīng)的活化能，顯著提高了反應(yīng)速度。（三）酶的命名、

5、分類與編號(hào)（三）酶的命名、分類與編號(hào) 酶的命名酶的命名-習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法 酶的分類酶的分類-可分為六大類可分為六大類 氧化還原酶氧化還原酶(oxido-reductases)(oxido-reductases)、轉(zhuǎn)移酶、轉(zhuǎn)移酶(transferases)(transferases)、水解酶、水解酶(hydrolases)(hydrolases)、裂解酶、裂解酶( (或裂或裂合酶合酶)(lyases)(lyases)、異構(gòu)酶、異構(gòu)酶(isomerases)(isomerases)、合成酶、合成酶( (或連接或連接酶酶)(synthetases)(synthetases

6、或或ligases)ligases) 酶的編號(hào)酶的編號(hào)-用用4 4個(gè)數(shù)字加以系統(tǒng)編號(hào)個(gè)數(shù)字加以系統(tǒng)編號(hào) 第一個(gè)數(shù)字表示酶的類別，第二個(gè)表示亞類，第一個(gè)數(shù)字表示酶的類別，第二個(gè)表示亞類， 第三個(gè)表示亞第三個(gè)表示亞- -亞類，第四個(gè)表示酶的編號(hào)序數(shù)。亞類，第四個(gè)表示酶的編號(hào)序數(shù)。 酶的命名酶的命名-習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法習(xí)慣命名法、系統(tǒng)命名法（四）酶分類與編號(hào)（四）酶分類與編號(hào) 習(xí)慣用名習(xí)慣用名 英文縮寫(xiě)英文縮寫(xiě) ECEC編號(hào)編號(hào) 系統(tǒng)名系統(tǒng)名乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶 LDLD（LDHLDH） 1.1.1.27 L1.1.1.27 L乳酸：乳酸：NAD+NAD+氧化還原酶氧化還原酶單胺氧化酶單胺氧化酶

7、 MAO 1.4.3.4 MAO 1.4.3.4 單胺：氧化還原酶單胺：氧化還原酶-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 -GT/GGT 2.3.2.2 -GT/GGT 2.3.2.2 -谷氨酰肽：氨基酸谷氨酰肽：氨基酸-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 AST 2.6.1.1 L-AST 2.6.1.1 L-門冬氨酸：門冬氨酸：-酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷草轉(zhuǎn)氨酶）（谷草轉(zhuǎn)氨酶） (GOT)(GOT)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 ALT 2.6.1.2 L-ALT 2.6.1.2 L-丙氨酸：丙氨酸：-酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶酮戊二酸氨基轉(zhuǎn)移酶（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）（谷丙

8、轉(zhuǎn)氨酶） (GPT)(GPT)肌酸激酶肌酸激酶 CK 2.7.3.2 CK 2.7.3.2 三磷酸腺苷：肌酸轉(zhuǎn)磷酸酶三磷酸腺苷：肌酸轉(zhuǎn)磷酸酶堿性磷酸酶堿性磷酸酶 ALP(AKP) 3.1.3.1 ALP(AKP) 3.1.3.1 正磷酸單酯磷酸水解酶正磷酸單酯磷酸水解酶臨床酶學(xué)分析中常用酶的名稱與編號(hào)臨床酶學(xué)分析中常用酶的名稱與編號(hào)二、同工酶的概念與特征二、同工酶的概念與特征同工酶是指催化相同化學(xué)反應(yīng)，但酶蛋同工酶是指催化相同化學(xué)反應(yīng)，但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。不同的一組酶。根據(jù)同工酶的來(lái)源和結(jié)構(gòu)不同，從基因根據(jù)同工酶的來(lái)源和結(jié)

9、構(gòu)不同，從基因角度可將其分為單基因決定的同工酶、復(fù)角度可將其分為單基因決定的同工酶、復(fù)等位基因同工酶、多基因決定的同工酶和等位基因同工酶、多基因決定的同工酶和修飾同工酶四類。修飾同工酶四類。 三、工具酶三、工具酶通常把酶學(xué)分析中作為試劑用于測(cè)定化通常把酶學(xué)分析中作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工具酶。合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工具酶。常用工具酶多為氧化還原酶類。常用工具酶多為氧化還原酶類。 1 1偶聯(lián)偶聯(lián)H H2 2O O2 2的工具酶及其指示反應(yīng)的工具酶及其指示反應(yīng) 利用葡萄糖氧化酶等工具酶使相應(yīng)底物被氧化生利用葡萄糖氧化酶等工具酶使相應(yīng)底物被氧化生成成H H2 2O O2

10、2。在。在PODPOD的直接催化下，的直接催化下，H H2 2O O2 2氧化芳香族胺氧化芳香族胺色素原生成有色的色素色素原生成有色的色素 , ,再進(jìn)行比色測(cè)定。再進(jìn)行比色測(cè)定。 2 2NAD(P)+NAD(P)+或或NAD(P)HNAD(P)H偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng)偶聯(lián)的脫氫酶及其指示反應(yīng) 作為工具酶的脫氫酶如作為工具酶的脫氫酶如LDLD將底物的氫原子去除后將底物的氫原子去除后傳遞給傳遞給NAD(P)+NAD(P)+而形成而形成NAD(P)HNAD(P)H。因。因NAD(P)HNAD(P)H在在340nm340nm有特征性光吸收，可借此用分光光度法進(jìn)行有特征性光吸收，可借此用分光光度法進(jìn)行

11、檢測(cè)。檢測(cè)。 （一）工具酶參與的指示反應(yīng)（一）工具酶參與的指示反應(yīng) （二）酶循環(huán)法（二）酶循環(huán)法 （405nm405nm）（三）代謝物濃度的酶法測(cè)定技術(shù)（三）代謝物濃度的酶法測(cè)定技術(shù) 直接法直接法 1 1終點(diǎn)法終點(diǎn)法 酶偶聯(lián)法酶偶聯(lián)法 2 2動(dòng)力學(xué)法動(dòng)力學(xué)法 第二節(jié)第二節(jié) 酶測(cè)定技術(shù)酶測(cè)定技術(shù)酶活性測(cè)定主要利用酶有加速化學(xué)反酶活性測(cè)定主要利用酶有加速化學(xué)反應(yīng)（催化）的特性，通過(guò)測(cè)定被加速應(yīng)（催化）的特性，通過(guò)測(cè)定被加速化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率，根據(jù)酶促反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率，根據(jù)酶促反應(yīng)中底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來(lái)計(jì)中底物的減少量或產(chǎn)物的生成量來(lái)計(jì)算酶活性濃度的高低。算酶活性濃度的高低。 酶促反應(yīng)

12、動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 酶促反應(yīng)酶促反應(yīng) 酶促反應(yīng)進(jìn)程酶促反應(yīng)進(jìn)程一、酶活性測(cè)定一、酶活性測(cè)定 （一）定時(shí)法測(cè)定酶活性（一）定時(shí)法測(cè)定酶活性 終點(diǎn)法終點(diǎn)法是在酶促反是在酶促反應(yīng)平衡期（應(yīng)平衡期（SS或或PP不不變）任何一點(diǎn)進(jìn)行測(cè)定，變）任何一點(diǎn)進(jìn)行測(cè)定，故不需終止反應(yīng)。故不需終止反應(yīng)。 1 1直接法直接法 是在不終止酶促反應(yīng)條件下，直接通是在不終止酶促反應(yīng)條件下，直接通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系中底物或產(chǎn)物理化特過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系中底物或產(chǎn)物理化特性的變化如吸光度、熒光、旋光性、性的變化如吸光度、熒光、旋光性、pHpH、電導(dǎo)率、粘度等，從而計(jì)算出酶、電導(dǎo)率、粘度等，從而計(jì)算出酶活性濃度?；钚詽舛?。 2 2間接法

13、間接法 在原反應(yīng)體系中加入另一些酶試劑，在原反應(yīng)體系中加入另一些酶試劑，所進(jìn)行的酶促反應(yīng)和被測(cè)酶反應(yīng)偶聯(lián)所進(jìn)行的酶促反應(yīng)和被測(cè)酶反應(yīng)偶聯(lián)起來(lái)。起來(lái)。 連續(xù)測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度連續(xù)測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時(shí)間變化的多點(diǎn)數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接隨時(shí)間變化的多點(diǎn)數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接計(jì)算酶活性濃度的方法。計(jì)算酶活性濃度的方法。 （二）連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定酶活性（二）連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定酶活性 酶偶聯(lián)反應(yīng)酶偶聯(lián)反應(yīng) A B C DA B C D 酶學(xué)分析中作為試劑用于測(cè)定酶學(xué)分析中作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活性濃度的酶化合物濃度或酶活性濃度的酶 EiEi指示酶指

14、示酶EaEa輔助酶輔助酶ExExEiEiEaEa工具酶工具酶L-L-丙氨酸丙氨酸 -酮戊二酸酮戊二酸 -丙酮酸丙酮酸 L-L-谷氨酸谷氨酸丙酮酸丙酮酸 NADH H+ 乳酸乳酸 NAD+ALT（樣品）（樣品）LD（試劑）（試劑）酶耦聯(lián)法測(cè)定酶耦聯(lián)法測(cè)定ALTALT340nmA/min-酮酸酮酸標(biāo)本中標(biāo)本中GLDH標(biāo)本中標(biāo)本中試劑試劑1試劑試劑2酶耦聯(lián)法測(cè)定舉例酶耦聯(lián)法測(cè)定舉例( (三三) )干擾因素干擾因素 1 1其他酶和物質(zhì)的干擾其他酶和物質(zhì)的干擾 2 2酶的污染酶的污染 3 3非酶反應(yīng)非酶反應(yīng) 4 4分析容器的污染分析容器的污染 5 5沉淀形成沉淀形成 （四）血清酶活性濃度測(cè)定條件的優(yōu)化（

15、四）血清酶活性濃度測(cè)定條件的優(yōu)化 (1)(1)方法選擇方法選擇 (2)(2)儀器和設(shè)備儀器和設(shè)備 (3)(3)試劑試劑 (4)(4)儀器參數(shù)的設(shè)置儀器參數(shù)的設(shè)置 1 1方法類型方法類型 2 2波長(zhǎng)波長(zhǎng) 3 3樣品量與試劑量樣品量與試劑量 4. 4. 稀釋水量稀釋水量 5 5反應(yīng)時(shí)間反應(yīng)時(shí)間 6 6孵育時(shí)間孵育時(shí)間 7. 7. 延遲時(shí)間延遲時(shí)間 8. 8. 監(jiān)測(cè)時(shí)間監(jiān)測(cè)時(shí)間 9. 9. 試劑吸光度上、下試劑吸光度上、下 限限 10. 10. 底物耗盡限額底物耗盡限額 11. 11. 線性度線性度 12. 12. 試劑空試劑空 白速率白速率 13. 13. 線性范圍線性范圍 14. 14. 計(jì)算因

16、子計(jì)算因子F F值值 ( (五五) )部分分析前因素對(duì)酶活性測(cè)定的干擾部分分析前因素對(duì)酶活性測(cè)定的干擾 1 1溶血溶血 2 2抗凝劑抗凝劑 3 3標(biāo)本儲(chǔ)存溫度標(biāo)本儲(chǔ)存溫度（六）酶活性濃度的單位（六）酶活性濃度的單位 1. 1. 酶活性單位酶活性單位 （1 1）慣用單位）慣用單位 （2 2）國(guó)際單位）國(guó)際單位-在特定的條件下，一分鐘內(nèi)使底在特定的條件下，一分鐘內(nèi)使底 物轉(zhuǎn)變一微摩爾的酶量為一個(gè)國(guó)際單位。物轉(zhuǎn)變一微摩爾的酶量為一個(gè)國(guó)際單位。 （3 3）KatalKatal單位單位-在規(guī)定條件下，每秒鐘催化轉(zhuǎn)化在規(guī)定條件下，每秒鐘催化轉(zhuǎn)化 一摩爾底物的酶量。一摩爾底物的酶量。1katal1katal

17、606010106 6U U 2. 2. 酶活性濃度單位酶活性濃度單位 以每單位體積所含的酶活性單位數(shù)表示。以每單位體積所含的酶活性單位數(shù)表示。 （1 1）表示方法）表示方法-U-UL L （2 2）酶活性濃度單位的計(jì)算）酶活性濃度單位的計(jì)算-用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè) 定時(shí)，根據(jù)摩爾消光系數(shù)計(jì)算。定時(shí)，根據(jù)摩爾消光系數(shù)計(jì)算。3. 3. 參考值和正常上限倍數(shù)的應(yīng)用參考值和正常上限倍數(shù)的應(yīng)用 （1 1）參考區(qū)間）參考區(qū)間 （2 2）正常上限倍數(shù)的應(yīng)用）正常上限倍數(shù)的應(yīng)用 正常上限正常上限(upper limits of normal(upper limits of normal， ULN)UL

18、N)倍數(shù)作為酶活性濃度的表示法，倍數(shù)作為酶活性濃度的表示法， 就是測(cè)定值除以正常上限值。就是測(cè)定值除以正常上限值。（七）系數(shù)（七）系數(shù)K K值的計(jì)算與應(yīng)用值的計(jì)算與應(yīng)用1. 系數(shù)系數(shù)K值的意義與設(shè)置值的意義與設(shè)置2. 系數(shù)系數(shù)K值的類型與計(jì)算值的類型與計(jì)算（八）臨床酶學(xué)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化（八）臨床酶學(xué)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化 1. 1. 標(biāo)準(zhǔn)化途徑標(biāo)準(zhǔn)化途徑 1 1使用推薦方法和參考方法使用推薦方法和參考方法 2 2使用公認(rèn)的酶校正物或酶參考物使用公認(rèn)的酶校正物或酶參考物 2. 2. 酶活性濃度測(cè)定的參考系統(tǒng)酶活性濃度測(cè)定的參考系統(tǒng) 1 1建立原級(jí)參考方法建立原級(jí)參考方法 2 2制備原級(jí)參考物制備原級(jí)參考物 3

19、 3建立參考實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建立參考實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)（一）測(cè)定原理（一）測(cè)定原理（二）免疫化學(xué)測(cè)定的優(yōu)缺點(diǎn)（二）免疫化學(xué)測(cè)定的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)主要有：優(yōu)點(diǎn)主要有：靈敏度高靈敏度高特異性高特異性高 能用于一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白能用于一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白 特別適用于同工酶的測(cè)定特別適用于同工酶的測(cè)定 局限性主要有：局限性主要有：制備足夠量的提純酶作為抗原和制備足夠量的提純酶作為抗原和 具有免疫化學(xué)性質(zhì)的抗血清較困難具有免疫化學(xué)性質(zhì)的抗血清較困難 測(cè)定步驟多，操作繁瑣測(cè)定步驟多，操作繁瑣 測(cè)定成本高測(cè)定成本高二、酶質(zhì)量測(cè)定二、酶質(zhì)量測(cè)定三、同工酶檢測(cè)三、同工酶檢測(cè) ( (一一) )電泳法電泳法-瓊脂糖凝膠電泳

20、、聚丙烯酰瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰 胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、 毛細(xì)管電泳毛細(xì)管電泳 用電泳法進(jìn)行同工酶分析時(shí)，如顯示的用電泳法進(jìn)行同工酶分析時(shí)，如顯示的 區(qū)帶數(shù)與同工酶數(shù)不一致時(shí)，要特別注意區(qū)帶數(shù)與同工酶數(shù)不一致時(shí)，要特別注意 巨分子酶的存在。巨分子酶的存在。 ( (二二) )層析法層析法血血 清清 LD LD 電電 泳泳 圖圖 譜譜 分分 析析正常和病理狀況時(shí)血清正常和病理狀況時(shí)血清CK同工酶譜同工酶譜( (三三) )免疫分析法免疫分析法 免疫抑制法免疫抑制法 利用同工酶的一種亞基與相應(yīng)的抗利用同工酶的一種亞基與相應(yīng)的抗體結(jié)合后，酶活性受到抑制，測(cè)定加與不加抗體前

21、后體結(jié)合后，酶活性受到抑制，測(cè)定加與不加抗體前后樣品中酶活性的變化，可以計(jì)算出該型同工酶的活性。樣品中酶活性的變化，可以計(jì)算出該型同工酶的活性。 不加抗不加抗CK-MMCK-MM血清時(shí)樣品的血清時(shí)樣品的CKCK活性：活性：CK-MMCK-MM和和CK-MBCK-MB活性；活性； 加入抗加入抗CK-MMCK-MM血清時(shí)樣品的血清時(shí)樣品的CKCK活性：活性：5050CK-MBCK-MB的活性；的活性； 加入抗加入抗CK-MMCK-MM血清時(shí)樣品的血清時(shí)樣品的CKCK活性活性2 2：CK-MBCK-MB活性；活性； 所測(cè)所測(cè)CK-MMCK-MM和和CK-MBCK-MB之總活性之總活性CK-MBCK-

22、MB活性活性CK-MMCK-MM活性。活性。 ( (四四) )動(dòng)力學(xué)分析法動(dòng)力學(xué)分析法 1 1底物特異性分析法底物特異性分析法 2 2抑制劑分析法抑制劑分析法 3 3pHpH分析法分析法 4 4熱失活分析法熱失活分析法 ( (五五) )蛋白酶水解法蛋白酶水解法第三節(jié)第三節(jié) 常用酶及同工酶測(cè)定的臨床應(yīng)用常用酶及同工酶測(cè)定的臨床應(yīng)用 一、血清酶一、血清酶血清酶活性升高的原因：血清酶活性升高的原因：組織器官受損造成細(xì)胞破壞或細(xì)胞膜通透性增組織器官受損造成細(xì)胞破壞或細(xì)胞膜通透性增高，細(xì)胞內(nèi)的某些酶大量釋放入血；高，細(xì)胞內(nèi)的某些酶大量釋放入血；細(xì)胞的轉(zhuǎn)換率增高或細(xì)胞的增殖加快，其特異細(xì)胞的轉(zhuǎn)換率增高或細(xì)

23、胞的增殖加快，其特異的標(biāo)志酶釋放入血；的標(biāo)志酶釋放入血；細(xì)胞內(nèi)酶的合成或誘導(dǎo)增強(qiáng)；細(xì)胞內(nèi)酶的合成或誘導(dǎo)增強(qiáng)；酶的清除受阻。酶的清除受阻。1 1、血清酶的來(lái)源、血清酶的來(lái)源 （1 1）血漿特異酶）血漿特異酶 （2 2）非血漿特異酶）非血漿特異酶 外分泌酶外分泌酶 細(xì)細(xì)胞酶胞酶2 2、血清酶的去路、血清酶的去路 （1 1）血清酶的半壽期）血清酶的半壽期 （2 2）血清酶的失活和排泄）血清酶的失活和排泄（一）血清酶的來(lái)源與去路（一）血清酶的來(lái)源與去路 （二）血清酶的生理差異（二）血清酶的生理差異 1 1性別性別 2 2年齡年齡 3 3進(jìn)食進(jìn)食 4 4運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng) 5 5妊娠妊娠 6 6其他其他 常用的酶

24、譜：常用的酶譜：(1)(1)心肌酶譜心肌酶譜-ASTAST、LDLD、CKCK、CK-MBCK-MB、CK-CK- MB MB亞型或亞型或CK-MMCK-MM亞型亞型(2)(2)肌酶譜肌酶譜-LDLD、ASTAST及其同工酶、及其同工酶、CK-MMCK-MM亞型亞型(3)(3)肝酶譜肝酶譜-ALTALT、LDLD、-GT-GT、ALPALP、ChEChE、MAOMAO(4)(4)腫瘤酶譜腫瘤酶譜-ACPACP及其同工酶、及其同工酶、ALPALP及其同工酶、及其同工酶、 -GT-GT及其同工酶、及其同工酶、AFUAFU、AMYAMY及其同工酶、及其同工酶、LPSLPS(5)(5)胰酶譜胰酶譜-A

25、MYAMY及其同工酶、及其同工酶、LPSLPS、彈力蛋白酶、彈力蛋白酶-1-1、 磷脂酶磷脂酶A2A2（三）血清酶的臨床應(yīng)用（三）血清酶的臨床應(yīng)用 二、尿液酶二、尿液酶三、漿膜腔積液酶三、漿膜腔積液酶 四、腦脊液酶四、腦脊液酶 五、同工酶的診斷價(jià)值五、同工酶的診斷價(jià)值 LDLD同工酶同工酶心肌梗死、肝功能損傷和惡性腫瘤心肌梗死、肝功能損傷和惡性腫瘤 CKCK同工酶同工酶心肌梗死、肌肉疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病心肌梗死、肌肉疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病 ASTAST同工酶同工酶肝臟、心肌等細(xì)胞損傷程度的判斷肝臟、心肌等細(xì)胞損傷程度的判斷 GPGP同工酶同工酶急性心肌梗死急性心肌梗死 ARSARS同工酶同工酶膀胱癌

26、膀胱癌 ALDALD同工酶同工酶肝臟疾病、心肌梗死、神經(jīng)肌肉系肝臟疾病、心肌梗死、神經(jīng)肌肉系 統(tǒng)疾病和惡性腫瘤統(tǒng)疾病和惡性腫瘤 -GT-GT同工酶同工酶肝臟占位性病變肝臟占位性病變 AMSAMS同工酶同工酶急性胰腺炎、腮腺炎急性胰腺炎、腮腺炎 ALPALP同工酶同工酶肝膽疾病、骨骼疾病肝膽疾病、骨骼疾病 ACPACP同工酶同工酶前列腺疾病前列腺疾病 GST GST 同工酶同工酶肝臟疾病、肺癌肝臟疾病、肺癌 1 1、轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶、轉(zhuǎn)氨酶及其同工酶DeRitisDeRitis比值（比值（ASTASTALTALT）對(duì)于急、慢性肝炎的診對(duì)于急、慢性肝炎的診 斷、鑒別診斷以及判斷轉(zhuǎn)歸也有特別價(jià)值。急

27、斷、鑒別診斷以及判斷轉(zhuǎn)歸也有特別價(jià)值。急 性肝炎時(shí)比值性肝炎時(shí)比值1 1，肝硬化時(shí)比值，肝硬化時(shí)比值22，肝癌時(shí)，肝癌時(shí) 比值比值33?！懊改懛蛛x酶膽分離”現(xiàn)象現(xiàn)象重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死，重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死， 血中血中ALTALT逐漸下降，而膽紅素卻進(jìn)行性升高，常逐漸下降，而膽紅素卻進(jìn)行性升高，常 是肝壞死的前兆。是肝壞死的前兆。2 2、-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶及其同工酶-GT-GT同工酶分為同工酶分為-GT-GT1 1、-GT-GT2 2、-GT-GT3 3和和-GT-GT4 4四種，正常人只見(jiàn)四種，正常人只見(jiàn)-GT-GT2 2和和-GT-GT3 3。重癥肝膽疾病

28、。重癥肝膽疾病和肝癌時(shí)常有和肝癌時(shí)常有-GT-GT1 1出現(xiàn)，乙醇性肝壞死和膽總管出現(xiàn)，乙醇性肝壞死和膽總管結(jié)石時(shí)常有結(jié)石時(shí)常有-GT-GT2 2增加，增加，-GT-GT4 4與膽紅素增高密切相與膽紅素增高密切相關(guān)。關(guān)。3 3、肌酸激酶及其同工酶和亞型、肌酸激酶及其同工酶和亞型 在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在3 3種同工酶，即種同工酶，即CK-BB(CKCK-BB(CK1 1) )，CK-MB(CKCK-MB(CK2 2) )和和CK-MM(CKCK-MM(CK3 3) )。在細(xì)胞線粒體內(nèi)還存在。在細(xì)胞線粒體內(nèi)還存在另一另一CKCK同工酶，即所謂線粒體同工酶，即所謂線粒體CK(CK-Mt)CK(

29、CK-Mt)，也稱，也稱CKCK4 4。CK-MMCK-MM亞型測(cè)定對(duì)早期亞型測(cè)定對(duì)早期AMIAMI的檢出更為敏感，一的檢出更為敏感，一般以般以CK-MM3CK-MM3CK-MMlCK-MMl1 10 0作為診斷作為診斷 AMIAMI的標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)CK-MB2CK-MB2亞型在亞型在AMIAMI早期診斷和判斷有無(wú)再灌注上早期診斷和判斷有無(wú)再灌注上有很高的靈敏度和特異性。一般有很高的靈敏度和特異性。一般CK-MB21CK-MB219U9UL L或或CK-MB2CK-MB2CK-MB11CK-MB115 5可作為可作為AMIAMI的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。4 4、乳酸脫氫酶及其同工酶、乳酸脫氫

30、酶及其同工酶 AMIAMI時(shí)，時(shí)，LDLD由于分子量較大，在常用心肌酶中升高最遲，通常在梗死由于分子量較大，在常用心肌酶中升高最遲，通常在梗死8-8-18h18h升高，升高，48-144h48-144h達(dá)峰值，可顯著升高達(dá)峰值，可顯著升高(5ULN)(5ULN)，因其半壽期較長(zhǎng)，增高，因其半壽期較長(zhǎng)，增高持續(xù)時(shí)間可達(dá)持續(xù)時(shí)間可達(dá)5-10d5-10d，此時(shí)其他酶已恢復(fù)正常，在亞急性心肌梗死診斷上，此時(shí)其他酶已恢復(fù)正常，在亞急性心肌梗死診斷上有一定價(jià)值。有一定價(jià)值。 測(cè)定血清及胸腹水中測(cè)定血清及胸腹水中LDLD含量常用來(lái)鑒別其為漏出液抑或滲出液，若胸含量常用來(lái)鑒別其為漏出液抑或滲出液，若胸水水LD

31、LD血清血清LDLD0.60.6、腹水、腹水LDLD血清血清LDLD0.40.4為滲出液，反之為漏出液。為滲出液，反之為漏出液。 骨骼肌和肝細(xì)胞損傷時(shí)常出現(xiàn)骨骼肌和肝細(xì)胞損傷時(shí)常出現(xiàn)LD5LD5LD4LD4。急性肝炎時(shí)。急性肝炎時(shí)LD1LD1和和LD2LD2相對(duì)下相對(duì)下降，降，LD5LD5升高；慢性肝炎時(shí)升高；慢性肝炎時(shí)LD5LD5升高，且升高，且LDlLDlLD3LD3；肝硬化時(shí)僅表現(xiàn)；肝硬化時(shí)僅表現(xiàn)LD2LD2下下降和降和LD5LD5升高；肝癌時(shí)升高；肝癌時(shí)LD5LD5升高，但升高，但LD1LD1LD3LD3。惡性腫瘤如轉(zhuǎn)移到肝臟往往。惡性腫瘤如轉(zhuǎn)移到肝臟往往伴有伴有LD4LD4、LD5L

32、D5升高。升高。5 5、堿性磷酸酶及其同工酶、堿性磷酸酶及其同工酶 人體各組織人體各組織ALPALP同工酶可分為同工酶可分為3 3大類，即胎盤大類，即胎盤ALPALP、腸腸ALPALP和肝骨腎和肝骨腎ALPALP同工酶。同工酶。 肝硬化、膽石癥和腫瘤引起的膽汁淤積，肝硬化、膽石癥和腫瘤引起的膽汁淤積，ALPALP增高增高達(dá)達(dá)ULNULN的的520520倍。倍。9090以上的肝外膽道阻塞患者血清以上的肝外膽道阻塞患者血清ALPALP升高，升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。升高，升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。 胃腸道腫瘤；肺癌等惡性腫瘤時(shí)出現(xiàn)類腸型胃腸道腫瘤；肺癌等惡性腫瘤時(shí)出現(xiàn)類腸型AL

33、PALP，稱為稱為KasaharaKasahara同工酶和類胎盤同工酶稱為同工酶和類胎盤同工酶稱為ReganRegan或或NagaoNagao同工酶。同工酶。6 6、酸性磷酸酶及其同工酶、酸性磷酸酶及其同工酶 ACPACP同工酶分前列腺同工酶分前列腺ACP (PAP)ACP (PAP)和非前列腺和非前列腺ACP(ACP(如紅細(xì)胞如紅細(xì)胞ACPACP、溶酶體、溶酶體ACPACP、破骨細(xì)胞或、破骨細(xì)胞或吞噬細(xì)胞吞噬細(xì)胞ACPACP等等) )兩大類，在前列腺中含有兩大類，在前列腺中含有豐富的豐富的PAPPAP。 ACPACP及其同工酶測(cè)定主要用于診斷前列腺及其同工酶測(cè)定主要用于診斷前列腺癌。癌。7 7、淀粉酶及其同工酶、淀粉酶及其同工酶 根據(jù)臟器來(lái)源分為胰型同工酶根據(jù)臟器來(lái)源分為胰型同工酶(P-AMY)(P-AMY)和唾液型同工酶和唾液型同工酶(S-AMY)(S-AMY)，兩者再可用醋酸纖維薄膜電泳進(jìn)一步分成，兩者再可用醋酸纖維薄膜電泳進(jìn)一步分成P Pl l、P P2 2、P P3 3、S S1 1、S S2 2和和S S3 3等同工酶亞型。等同工酶亞