槐米中蘆丁含量的測定

1、BREAD PPT DESIGN 槐樹原產于中國。它用途廣泛，功能大，是一種集藥用、食用、保健、觀賞于一身的優(yōu)良樹種。槐樹自古是治病的重要藥源植物，被譽為“金藥樹”槐樹依據其花色分為白、青、黃、金槐等4個類別.除了國槐外，槐樹還有龍爪槐、蝴蝶槐、金葉國槐、五色槐、黃金槐、雙季米槐、香花槐和金花槐等變種。 它全身都是藥，花、葉、枝、根、果實及種子均可入藥，以槐花入藥最普遍。洋槐五月開花，其花一般食用，國槐七八月才開花，其花入藥。故我國藥用槐米多出自國槐。金藥樹槐樹BREAD PPT DESIGN槐米2010年中華人民共和國藥典規(guī)定，槐樹的藥用部分為干燥的花朵及花蕾。前者習稱“槐花”，后者習稱“槐

2、米”。槐米中含有蘆丁、槲皮素、皂甙、多糖黏液質等成分，其中,蘆丁是主要藥用成分,因此對其研究有非?，F(xiàn)實的意義。BREAD PPT DESIGN蘆丁 蘆丁是一種黃酮類化合物?；泵字械奶J丁隨槐花的產地及收取時間的不同其含量在10%28%之間，我國蘆丁生產主要以槐米為原料。 BREAD PPT DESIGN蘆丁的藥理作用抗炎作用抗氧化作用抗菌作用抗癌作用對腦缺血損傷的保護作用對腎臟缺血損傷的保護作用降血壓作用胃腸粘膜保護作用BREAD PPT DESIGN蘆丁的化學特性 蘆丁分子式C27H30O16，分子量610.51，為淺黃色針狀結晶，難溶于冷水，可溶于熱水、甲醇、乙醇、吡啶，易溶于堿水。BREA

3、D PPT DESIGN蘆丁提取技術概述1 13 32 24 45 5醇溶劑浸提法熱水提取法堿提酸沉降法 超聲輔助提取法 微波提取法BREAD PPT DESIGN超聲波輔助提取法利用超聲波的空化效應、湍利用超聲波的空化效應、湍流效應、微擾效應、界面效流效應、微擾效應、界面效應和聚能效應等物理作用，應和聚能效應等物理作用，加速被破碎物細胞壁的破裂，加速被破碎物細胞壁的破裂，促進細胞內含物的溶出，從促進細胞內含物的溶出，從而實現(xiàn)天然產物低溫、快速而實現(xiàn)天然產物低溫、快速提取的目標。具有雜質含量提取的目標。具有雜質含量低、有效成分含量高、提取低、有效成分含量高、提取時間短的優(yōu)點。時間短的優(yōu)點。蘆丁

4、為細胞中的次生代謝產蘆丁為細胞中的次生代謝產物，存在于細胞質中；通過物，存在于細胞質中；通過粉碎，破壞細胞壁和細胞膜，粉碎，破壞細胞壁和細胞膜，也就使蘆丁易于被提取出來。也就使蘆丁易于被提取出來。堿液對蘆丁有增溶作用，用堿液對蘆丁有增溶作用，用堿液浸泡后，能使更多的蘆堿液浸泡后，能使更多的蘆丁溶解出來，同樣也有利于丁溶解出來，同樣也有利于蘆丁的提取。蘆丁的提取。BREAD PPT DESIGN水平水平因素因素ABC料液比提取時間溫度11:1071521:15102531:201335因素設計查正交實驗表，根據L9（34）設計實驗BREAD PPT DESIGN試驗號試驗號水平組合水平組合實驗條

5、件實驗條件料液比提取時間溫度1A1B1C11:107152A1B2C21:1010253A1B3C31:1013354A2B1C21:157255A2B2C31:1510356A2B3C11:1513157A3B1C31:207358A3B2C11:2010159A3B3C21:201325BREAD PPT DESIGN實驗流程槐米粉碎槐米粉碎過過40篩目篩目按一定料按一定料液比混合液比混合加入亞硫氫鈉、加入亞硫氫鈉、硼砂硼砂, ,用氫氧化用氫氧化鈉調鈉調PHPH至至9 9超聲提取超聲提取酸沉酸沉用鹽酸將用鹽酸將PHPH調至調至3 3離心過濾離心過濾蘆丁粗提產品蘆丁粗提產品濾液靜置、干燥濾液

6、靜置、干燥BREAD PPT DESIGN蘆丁標準曲線的繪制 精密稱取在120減壓干燥至恒重的蘆丁標準品200mg，置100mL容量瓶中，加甲醇70mL，置水浴上微熱使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取10mL，置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻即得（每1mL中含無水蘆丁0.2mg）。精密量取上述標準溶液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL與6.0mL分別置25mL容量瓶中，各加水至6mL，加5亞硝酸鈉溶液1mL使混勻，放置6分鐘，加10硝酸鋁溶液1mL搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15分鐘；按照分光光度法，在500nm

7、的波長處比色測定吸光度，以吸光度為縱坐標，蘆丁濃度為橫坐標，繪制標準曲線。BREAD PPT DESIGN 取干燥蘆丁粗品約1g，精密稱定，加甲醇溶解后移入100mL容量瓶，再加甲醇洗滌并入容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻。精取10mL置100mL容量瓶，加水至刻度，搖勻。精密量取3mL置25mL容量瓶中，按照標準曲線制備項下的方法，自“加水至6mL”起依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的濃度，計算即得槐米中蘆丁的提取得率。蘆丁的提取率測定BREAD PPT DESIGN蘆丁的純化大孔樹脂減法測定法減法測定法樹脂的預處理 新鮮樹脂先用乙醇浸泡2次，每次12h，濾去浮游物和破碎樹脂，再用

8、甲醇浸泡23次至上清液澄清，最后用去離子水清洗12次.采用濕法上柱，并用和洗脫劑同濃度的甲醇水溶液沖洗23柱體積，以達到該濃度下的平衡狀態(tài)。 用過的樹脂，用足量甲醇浸泡使吸附物解吸達到再生的目的。如果反復使用樹脂吸附效果下降，可用3%NaOH及10%NaCl混合液浸泡清洗12h，濾去溶劑并用去離子水充分洗滌至呈中性時即可。BREAD PPT DESIGN提純方法 將粗品溶于75%的75甲醇溶液中( m:v1:7)，待完全溶解趁熱過濾；濾液緩慢加入大孔樹脂色譜柱中( 粗品蘆丁與樹脂質量比1:10)，待濾液完全浸入大孔樹脂后，分別以75%的甲醇溶液為洗脫劑自然流速進行洗脫，待洗脫液顏色由無色變深后

9、，開始第一次收集，至顏色由深變淺結束，將收集的洗脫液在常溫下自然靜置析晶，過濾并用少量甲醇洗滌濾餅后真空干燥，獲取最終產品; 第一次收集結束后，改用純甲醇溶液進行洗脫，待顏色有淺變深開始第二次收集，直顏色變無色結束，將第二次收集的洗脫液減壓蒸餾獲取浸膏，干燥后獲得的產品用作下次純化工藝過程的粗品蘆丁原料。BREAD PPT DESIGN蘆丁對超氧陰離子O2清除作用用鄰苯三酚自氧化法,利用O2清除劑能使鄰苯三酚自氧化產物在325 nm處的吸收峰受到抑制這一特點,用紫外分光光度計進行檢測,間接測得O2生成及O2的清除率。原理BREAD PPT DESIGN用實驗純化所制的蘆丁配置成20、40、60、80、100mol/L的溶液.取0. 05 mmol/L pH 8. 2的Tris-HCl緩沖液4. 5mL于試管中, 25預熱20m in，加入0. 1mmol/L鄰苯三酚0. 2mL，