抗青枯病病菌植物殺菌劑的研究

1、抗青枯病病菌植物殺菌劑的研究方案與結(jié)果如表3所示。1.1.1 歸模型建立與檢驗(yàn)采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)表3中的結(jié)果進(jìn)行二次多項(xiàng)式逐步回歸分析，得到水杉提取物、馬尾松提取物、銀杏提取物、野艾蒿提取物、乳化劑濃度的回歸模型：Y=9.21557+0.23618X1+0.40726X2-0.18255X3-009647X4+0.20597X5+0.30484X12-0.06404X22+016521X32-0.11773X42-0.16560X52+0.35570X1X2-025177X1X3-0.12333X1X4-0.10692X1X5+0.16473X2X3-032470X2X4+0.31145

2、X2X5-0.05836X3X4-0.05252X3X5+001042X4X5。由表4可知，回居方程的失擬性檢驗(yàn)，F(xiàn)l=1.49864Y=9.21557+0.23618X1+0.40726X2-0.18255X3+0.20597X5+0.30484X12+0.16521X32-0.16560X52+035570X1X2-0.25177X1X3-0.32470X2X4+031145X2X5。1.1.2 主效應(yīng)分析P值即概率，反映某一事件發(fā)生的可能性大小。各因素的P值可以反映出各因素對(duì)試驗(yàn)指標(biāo)的重要性，P值越小，表明該因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響越大，即重要性越大。由表4可知，5個(gè)試驗(yàn)因素對(duì)抑菌效果影響大&

3、#39;依次為馬尾松提取物濃度>水杉提取物濃度>乳化劑濃度>銀杏提取物濃度野艾蒿提取物濃度。1.1.3 單因子效應(yīng)分析當(dāng)水杉提取物濃度、馬尾松提取物濃度、銀杏提取物濃度、野艾蒿提取物濃度、乳化劑濃度這5個(gè)影響因素中的任意4個(gè)為0,其中一個(gè)對(duì)抑菌效果的影響見圖6。由圖6可知，在-2.00水平下，水杉和銀杏提取物的抑菌效果隨濃度升高而下降，但在02.0水平時(shí)，卻隨濃度升高而升高，這可能是由于植物提取物間存在看抑制作用，在低濃度時(shí)，水杉和銀杏對(duì)其他植物的抑制較弱，體現(xiàn)了其他植物較好的抑菌效果，而到達(dá)0水平時(shí)，抑菌效果的下降則與水杉和銀杏與其他植物間的抑制作用逐漸增強(qiáng)直接相關(guān)。到達(dá)高

4、水平時(shí)，抑菌效果又明顯增加，表明銀杏和水杉提取物的抑菌效果強(qiáng)于植物間的抑制作用。在-2.00水平下，馬尾松提取物和乳化劑濃度的升高均可以增加抑菌效果，但在02.0水平時(shí)，再增加乳化劑濃度卻使抑菌效果略微下降，這可能是乳化劑濃度過高導(dǎo)致植物提取物不能充分溶解；而抑菌效果隨馬尾松提取物濃度的增加呈線性上升趨勢(shì)，表明馬尾松提取物濃度對(duì)抑菌效果的影響明顯。野艾蒿提取物濃度的改變對(duì)抑菌效果的影響不明顯。1.1.4 雙因子效應(yīng)分析從交互項(xiàng)系數(shù)可以看出，馬尾松與水杉提取物、馬尾松提取物與乳化劑以及馬尾松與野艾蒿提取物3種組分的交互作用達(dá)到極顯著水平；水杉與銀杏提取物的交互作用達(dá)到顯著水平，表明4種組分之間的

5、配比對(duì)抑菌作用有顯著影響，響應(yīng)面結(jié)果如圖7至圖10所示。在水杉提取物濃度較低時(shí)，馬尾松提取物濃度的增加對(duì)抑菌效果的影響不明顯，而當(dāng)濃度增大到02.0水平時(shí)，馬尾松提取物濃度的改變對(duì)抑菌效果的影響明顯。在馬尾松提取物為低濃度水平時(shí)，水杉濃度在-2.00.5水平時(shí)，抑菌直徑呈下降趨勢(shì)，在1.02.0水平，則有所上升?？梢娫?0.51.0水平下的水杉與其他植物間具有較強(qiáng)的抑制作用,在低于這個(gè)濃度時(shí)，其他植物的抑菌效果顯然強(qiáng)于水杉的抑制作用，而高濃度的水杉提取物則對(duì)抑菌效果影響明顯。當(dāng)乳化劑濃度處于較低水平時(shí)，馬尾松提取物濃度的增加對(duì)抑菌效果的影響不明顯，可能是馬尾松提取物并未能全部溶于溶劑中,但在高

6、濃度的乳化劑下，隨著馬尾松提取物濃度的增加抑菌效果明顯；而馬尾松提取物濃度較低時(shí)，乳化劑濃度的增加可使馬尾松提取物濃度下降導(dǎo)致抑菌效果減在水杉提取物濃度身氐和銀杏提取物濃度最高以及銀杏提取物濃度身氐和水杉提取物濃度最高時(shí)，抑菌直徑達(dá)到最大。而在銀杏和水杉濃度都為最高時(shí)，抑菌直徑卻較小，可見這2種植物間存在抑制作用。在馬尾松提取物濃度為-2.0水平時(shí)，隨野艾蒿提取物濃度的增加抑菌效果呈上升趨勢(shì)；當(dāng)野艾蒿濃度為-2.0水平時(shí)，隨著馬尾松提取物濃度增加抑菌效果逐漸加強(qiáng)。而在-2.01.5水平時(shí),隨著兩者濃度等量增大時(shí)抑菌效果也逐漸增大，兩者都處于2.0水平時(shí)，抑菌效果卻下降，可見兩者存在相互促進(jìn)作用

7、，而高濃度提取物的抑菌效果的下降可能與提取物不能充分溶解有關(guān)。1.1.5 有效植物提取物最適乳油配方尋優(yōu)及驗(yàn)證對(duì)不同設(shè)計(jì)水平下的組合進(jìn)行模擬試驗(yàn)，從55=3125個(gè)組合中，獲得抑菌直徑9.30mm的方案1940個(gè)。根據(jù)頻次分析結(jié)果和實(shí)際情況取任一值即可得出優(yōu)化組合，現(xiàn)取中值可得出，各組分的優(yōu)化組合為水杉提取物濃度506mg/mL,馬尾松提取物濃度827mg/mL,銀杏提取物濃度481mg/mL,野艾蒿提取物濃度409mg/mL,乳化劑濃度0.205mL/mL溶劑，預(yù)測(cè)抑菌直徑為9.49mm。經(jīng)多次的驗(yàn)證性試驗(yàn)，該乳油配方的抑菌直徑為9.28mm,與預(yù)測(cè)值無顯著差異(F=2177,P>0.

8、05),說明該模型與試驗(yàn)相吻合，能適用于生產(chǎn)實(shí)踐。3討論3.1 抗青枯病病原菌植物提取物的篩選相關(guān)研究表明，幾乎每種植物都能產(chǎn)生抑菌活性，但是抑菌效力和抑菌范圍存在看差異。冀玉良等研究發(fā)現(xiàn)，銀杏、大蒜、黃花蒿、紫莖洋蘭等植物對(duì)青枯病菌均有較好的抑制作用8,10,18-19。本試驗(yàn)從銀杏、樟樹、水杉、馬尾松、八角金盤、冬青衛(wèi)矛、龍葵、野艾蒿中篩選出銀杏、馬尾松、野艾蒿、水杉4種較農(nóng)用鏈毒素具有明顯抑菌效果的植物，其中馬尾松的抑菌效果最強(qiáng)，這可能與其所含的菇類化學(xué)物質(zhì)有關(guān)，如薄采穎等研究表明，松針葉二菇酸對(duì)番茄灰毒病菌也有明顯抑制作用20。由此表明，馬尾松提取物具有較強(qiáng)的抑菌作用，可作為新型植物源

9、農(nóng)藥重點(diǎn)開發(fā)的研究對(duì)象。3.2 有效植物提取物乳油配方的優(yōu)化大量研究證明,二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)與傳統(tǒng)的單因子試驗(yàn)法、正交試驗(yàn)法相比,能根據(jù)預(yù)測(cè)值直接尋求最優(yōu)區(qū)域，從多角度對(duì)模型進(jìn)行模擬分析，以充分發(fā)掘模型所提供的信息21-23。故本試驗(yàn)以各有效植物提取物、乳化劑濃度為試驗(yàn)因素，采用二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化，得到最優(yōu)乳油配方為：水杉提取物506mg/mL,馬尾松提取物827mg/mL,銀杏提取物481mg/mL,野艾蒿提取物409mg/mL,吐溫-800205mL/mL溶劑，經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)后抑菌直徑與預(yù)測(cè)值9.49mm無顯著差異。由單因子效應(yīng)分析可知，馬尾松提取物濃度與抑菌效果的關(guān)系呈線性上

10、升趨勢(shì)，較其他植物提取物對(duì)抑菌效果有極顯著影響。毛勝鳳等研究發(fā)現(xiàn)，馬尾松提取物在濃度為12.5100.0mg/mL時(shí)抑菌效果隨著濃度的增大而增大24。本試驗(yàn)中馬尾松濃度在25400mg/mL范圍內(nèi)，抑菌直徑呈線性上升趨勢(shì)，而濃度高于400mg/mL后抑菌效果趨于平緩，表明在低濃度時(shí)馬尾松抑菌效果隨濃度增大而顯著增大，但高于一定水平時(shí)，馬尾松的抑菌效果則會(huì)趨于穩(wěn)定，這可能與溶劑的溶解度大小有關(guān)。從雙因子互作效應(yīng)分析可知，馬尾松提取物濃度較高時(shí)，隨著乳化劑濃度的增加抑菌效果明顯增加，研究表明天然的植物源殺菌劑在作用于寄主時(shí)，其滲透性、延展性都是有限的，須添加助劑使其充分發(fā)揮藥效25-26。本試驗(yàn)研

11、究表明，吐溫-80乳化劑的添加能增加有效植物提取物的滲透性和延展性，可達(dá)到增效的作用。在乳油劑型中，溶劑是其加工和使用中不可或缺的重要組分，用于溶睇口稀釋原藥協(xié)助乳化分散，增加乳油流動(dòng)性27-28。根據(jù)蔡亞東的研究表明，龍葵素乳油具較好擴(kuò)散性和溶解度的溶劑為N,N-二甲基甲酰胺和二甲苯，而丙酶則相對(duì)效果較差29。本試驗(yàn)通過對(duì)溶劑的擴(kuò)散情痛口溶解度的測(cè)定，確定丙酮為有效植物提取物乳油的最佳溶劑。由此可見，溶劑的選擇具有針對(duì)性。綜上所述，經(jīng)二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)優(yōu)化得到植物提取物的最適乳油配方，抑菌效果顯著優(yōu)于農(nóng)用鏈毒素。但該乳油配方仍存在著不少問題，如植物活性成分難分離、易分解的問題還有待解決，乳

12、油劑型的穩(wěn)定性還有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：1肖相政，劉可星，廖宗文.生物有機(jī)肥對(duì)番茄青枯病的防效研究及機(jī)理初探J.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2009,28(11):2368-2373.2張彥，車建美，劉波，等.蠟樣芽抱桿菌ANTI-8098A在番茄內(nèi)的定殖和對(duì)青枯病的防治研究J.中國生物防治學(xué)報(bào)，2011,27(2):221-227.3高君君.植物根際促生菌的篩選及其對(duì)番茄青枯病的生防作用D.揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2011:16-17.4李永剛.一種植物源殺菌劑的研制及其在番茄葉霉病防治中的應(yīng)用D.哈爾濱：東1旅業(yè)大學(xué)，2003:10-11.5王志學(xué)，黃廷鋅，胡永蘭，等.抑菌植物研究初報(bào)幾微生物學(xué)雜志，19

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