頭屑評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

1、1. 去屑產(chǎn)品功效評(píng)價(jià)22. 去屑產(chǎn)品功效評(píng)價(jià)方法22.1. 實(shí)驗(yàn)室評(píng)估22.1.1. 按頭屑的嚴(yán)重程度評(píng)分22.1.2. 按馬拉色菌菌量分級(jí)32.2. 受試者自評(píng)62.3. 儀器檢測(cè)法6頭屑評(píng)定方法1. 去屑產(chǎn)品功效評(píng)價(jià) 與脂溢性皮炎相比，頭皮屑炎癥反應(yīng)較輕，除少數(shù)嚴(yán)重患者尋求藥物治療外，絕大多數(shù)患者將各類(lèi)頭屑洗發(fā)用品作為治療首選。頭皮屑的發(fā)生與馬拉色菌的感染密切相關(guān)的觀點(diǎn)已得到廣泛認(rèn)可，關(guān)于去頭屑產(chǎn)品功效，主要采用隨機(jī)雙盲自身對(duì)照研究，通過(guò)研究者評(píng)估、受試者自評(píng)及馬拉色菌定量培養(yǎng)方法，比較試驗(yàn)前后兩側(cè)頭皮的臨床評(píng)分及馬拉色菌量的變化來(lái)評(píng)價(jià)去頭屑香波的功效，同時(shí)進(jìn)行安全性評(píng)估。關(guān)于頭皮屑嚴(yán)重

2、度評(píng)分方法目前沒(méi)有具體的統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，大多采用肉眼觀察。2. 去屑產(chǎn)品功效評(píng)價(jià)方法2.1. 實(shí)驗(yàn)室評(píng)估2.1.1. 按頭屑的嚴(yán)重程度評(píng)分 頭屑的嚴(yán)重程度評(píng)分（頭皮粘附鱗屑評(píng)分，adherent scalp flaking score）。國(guó)外的研究中最常采用的是“黏著性頭屑十級(jí)評(píng)分法”，即0級(jí)表示無(wú)頭屑（無(wú)），1-2級(jí)為小片粉狀灰白粗糙鱗屑（少量），3-4級(jí)為小至中等大小屑片（輕度），5-6級(jí)為與頭皮疏松相連的大而薄的屑片（中度），7-8 級(jí)為大的黏著性屑片（明顯），9-10級(jí)為與頭皮緊密附著的白至黃色的較厚鱗屑（嚴(yán)重）。參照依據(jù)：A randomized, double-blind, pla

3、cebo-controlled trial of ketoconazole 2% shampoo versus selenium sulfide 2.5% shampoo in the treatment of moderate to severe dandruff引文出處：試驗(yàn)中多將頭皮分多個(gè)區(qū)域進(jìn)行綜合評(píng)分，或?qū)ζば甲顕?yán)重的區(qū)域評(píng)分，并以評(píng)分在某界定值以上作為受試者納入的標(biāo)準(zhǔn)。臨床上將頭皮屑程度分為4級(jí)：0=無(wú)鱗屑；1=輕度鱗屑；2=中度鱗屑；3=重度鱗屑；4=極重度鱗屑。例：某去屑產(chǎn)品效果評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)納入受試者評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)前兩天不洗頭發(fā)，固定兩名專(zhuān)業(yè)醫(yī)生檢查，左右二側(cè)均選取頭皮屑最嚴(yán)重部位

4、，按每1平方厘米大小頭皮區(qū)域中皮屑片數(shù)評(píng)分，0=無(wú)頭皮屑；l=輕度，每平方厘米頭皮上皮屑數(shù)少于5片；2=中度，每平方便米頭皮上皮屑數(shù)5-10片；3=重度，每平方厘米頭皮上皮屑數(shù)10-20片。4=極重度，每平方厘米頭皮上皮屑數(shù)多20片以上。每側(cè)對(duì)稱(chēng)分別選取3處觀察區(qū)，將每處頭皮屑的評(píng)分值相加，取均值用于統(tǒng)計(jì)分析。受試者納入標(biāo)準(zhǔn)：頭皮屑評(píng)分在中度以及中度以上。2.1.2. 按馬拉色菌菌量分級(jí)作為評(píng)價(jià)去屑產(chǎn)品功效的試驗(yàn)指標(biāo)，除頭皮屑的嚴(yán)重度評(píng)分外，已將馬拉色菌的檢測(cè)作為功效評(píng)估的重要指標(biāo)，馬拉色菌菌量分級(jí)已被用于評(píng)價(jià)去頭屑香波的有效性。在對(duì)去屑香波抗馬拉色菌活性的評(píng)估中，無(wú)論使用鏡檢法還是培養(yǎng)法，大

5、多數(shù)試驗(yàn)仍局限在定性研究上。作為一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)室評(píng)估指標(biāo)，馬拉色菌的定量檢測(cè)在今后去頭屑化妝品功效研究中顯得極有意義 。（1）鏡檢法（引文1：馬拉色菌顯微鏡檢查的方法學(xué)比較；引文2：美蘭染色法在馬拉色菌檢測(cè)中的應(yīng)用） 載液：10%氫氧化鉀水溶液；派克墨水染液：派克墨水50ml+氫氧化鉀10g, 加水至100ml；美蘭染液：美蘭0.3g，加水至100ml；龍膽紫染液。美蘭染色法和派克墨水染色法在頭皮屑疾病中馬拉色菌的檢出率沒(méi)有顯著性差異，但派克墨水染色更具有對(duì)馬拉色菌染色的特異性，頭皮屑是單一由馬拉色菌感染的疾病，可采用美蘭或派克墨水染色法之一。美蘭染色后在上述三種標(biāo)本可見(jiàn)圓形或卵圓形的深藍(lán)色孢

6、子或菌絲背景可見(jiàn)淺藍(lán)色皮屑未見(jiàn)脂滴氣泡等孢子或菌絲與背景區(qū)分較明顯 派克墨水染色后在上述三種標(biāo)本中可見(jiàn)圓形或卵圓形的淺藍(lán)色孢子或菌絲背景呈淺紅色皮屑不著色可見(jiàn)脂滴氣泡等。兩種染液對(duì)馬拉色菌均上色迅速可在滴加染液后立即觀察。兩種染色法染色效果見(jiàn)圖1-2：不同載液馬拉色菌檢出率比較：龍膽紫法檢出率>派克墨水法>10%氫氧化鉀法。龍膽紫法須沖洗染液、烘干玻片并且油鏡觀察, 步驟較繁瑣，不如派克墨水法簡(jiǎn)便快捷。在菌量較少的標(biāo)本中必須用龍膽紫法染色才能有較高的檢出率。三種載液染色后馬拉色菌檢出結(jié)果比較入表1所示：取材方法：透明膠布粘貼法：用1.5cm長(zhǎng)和1 cm寬的透明膠布貼于頭皮處，1mi

7、n后快速撕下。將此帶有皮屑的膠布貼附于加有1滴載液的玻片上(盡量貼平，不要有氣泡)，立即鏡檢。銼刀刮取法：用銼刀輕銼頭皮處，取皮屑放在玻片上，加1滴載液，蓋片(或透明膠布)后鏡檢。鏡檢見(jiàn)皮屑內(nèi)有數(shù)量不等的圓形孢子和(或)短小、稍彎曲、粗壯的菌絲。對(duì)所取標(biāo)本分別滴加1-2滴10%氫氧化鉀載液、美蘭染液或派克墨水染液染色后在顯微鏡下觀察記錄檢出陽(yáng)性率及染色效果。取材方法比較：在取材方法上, 透明膠帶粘貼法和鈍刀刮取法進(jìn)行比較, 檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但膠帶粘貼法不損傷皮膚，安全性較高, 可以多處反復(fù)取材，用于頭屑檢測(cè)。兩種取材方法鏡檢結(jié)果如下：1）檢測(cè)孢子數(shù)量 國(guó)外研究多采用單位面積頭皮上定植孢

8、子數(shù)量的變化作為功效評(píng)價(jià)指標(biāo)。馬拉色菌是雙相嗜脂性條件致病菌，分布在皮脂腺分泌旺盛區(qū)域，可通過(guò)鏡檢來(lái)檢測(cè)該菌。采用膠帶法對(duì)馬拉色菌顯微鏡下高倍視野孢子密度以及菌的分布密度進(jìn)行分級(jí)評(píng)價(jià)。該方法材料簡(jiǎn)單，取材方便，并能較準(zhǔn)確地反映頭皮上菌的分布密度，對(duì)無(wú)頭皮屑者也適用。在鏡檢法中，采用膠帶法對(duì)馬拉色菌顯微鏡下高倍視野孢子密度作為抗馬拉色菌的評(píng)價(jià)指標(biāo)。 直接計(jì)數(shù)法：方法步驟：用市售透明膠帶（寬1 cm）在有頭皮屑者頭皮屑最嚴(yán)重部位取材。將黏過(guò)頭皮的膠帶剪成約5cm長(zhǎng)，均勻平鋪在加有派克墨水+10g/L KOH染液或美蘭染液的載玻片上，染色約20-30s后在顯微鏡下觀察并記錄馬拉色菌密集程度及染色效果

9、。美蘭染液將孢子或菌絲染為深藍(lán)色，派克墨水染液將孢子或菌絲染為淺藍(lán)色。美蘭染色后可見(jiàn)圓形或卵圓形的深藍(lán)色孢子或菌絲，背景可見(jiàn)淺藍(lán)色皮屑，未見(jiàn)脂滴、氣泡等，孢子或菌絲與背景區(qū)分較明顯。派克墨水染色后標(biāo)本中可見(jiàn)圓形或卵圓形的淺藍(lán)色孢子或菌絲，背景呈淺紅色，皮屑不著色，可見(jiàn)脂滴、氣泡等。兩種染液對(duì)馬拉色菌均上色迅速，可在滴加染液后立即觀察。采用標(biāo)準(zhǔn)：在高倍鏡下選取5個(gè)視野，平均每高倍視野0分<5個(gè)孢子，陰性；1分=較少，（10±3）個(gè)“+”；2分=中等，（20±5）個(gè)“+”；3分-4分=大量或密布（40±10）個(gè)“+”。 參考標(biāo)準(zhǔn)：引文3：The importan

10、ce of microscopic examination in the management of desquamative diseases of the scalp 計(jì)算機(jī)圖像分析檢測(cè)：一項(xiàng)比較去屑香波功效的試驗(yàn)研究采用具一定壓力的自動(dòng)黏著性圓盤(pán)，將其放在頭皮屑最嚴(yán)重的區(qū)域約5秒鐘，取下后染色20分鐘，經(jīng)計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)計(jì)算每平方毫米皮屑區(qū)定植的孢子數(shù)量，通過(guò)使用不同香波前后單位面積頭皮孢子數(shù)量的變化作為抗馬拉色菌功效判讀的指標(biāo)。（2）培養(yǎng)法（陽(yáng)性率法+菌落數(shù)法）在培養(yǎng)法中，因馬拉色菌在體外生長(zhǎng)有較嚴(yán)格的脂質(zhì)要求，培養(yǎng)較普通酵母樣菌困難，國(guó)內(nèi)所作研究中多采用特殊培養(yǎng)基，將馬拉色菌培養(yǎng)陽(yáng)

11、性率作為去屑香波功效的察指標(biāo)。 實(shí)際上，97%健康者頭皮中可攜帶馬拉色菌，所以培養(yǎng)陽(yáng)性率等定性指標(biāo)并不敏感，也難客觀反映去屑香波抗馬拉色菌的功效。有學(xué)者已提出應(yīng)用定量法評(píng)價(jià)抗真菌藥物的有效性。主要通過(guò)取樣培養(yǎng)后定量馬拉色菌菌落數(shù)的方法來(lái)評(píng)價(jià)去屑的有效性。 例：去屑產(chǎn)品受試者標(biāo)本取樣以及培養(yǎng)：每一受試者頭皮分左右兩側(cè)，左右對(duì)稱(chēng)在距離頭皮正中線(xiàn)2em及前額發(fā)際線(xiàn)分別為5cm、12cm及19cm連線(xiàn)交接處各取三處直徑2厘米大小正方形區(qū)域（面積4cm2），以滅菌后的一次性微孔透氣膠帶取材或無(wú)菌棉拭子取材。以無(wú)菌棉拭子蘸取適量生理鹽水，每區(qū)域反復(fù)擦洗頭皮三次，每側(cè)共九次，擦洗下的頭皮屑棉拭置lml生理鹽

12、水消毒離心管中，經(jīng)震蕩均勻后接種至含5芝麻油的氯霉素沙堡氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿（直徑9cm）上，37恒溫箱培養(yǎng)7-10天，所有生長(zhǎng)出的菌落隔天觀察菌落形態(tài)，并挑取培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的單菌落行染色鏡檢確定是否為馬拉色菌。實(shí)驗(yàn)室觀染色時(shí)將各菌種挑取少量于載玻片上分別滴加美蘭染液派克墨水染液染色并在顯微鏡下觀察記錄上色時(shí)間及染色效果（陽(yáng)性率法）。統(tǒng)一第八天計(jì)算每平方厘米頭皮馬拉色菌菌落數(shù)（菌落數(shù)法）。2.2. 受試者自評(píng)在研究者進(jìn)行臨床評(píng)估的同時(shí), 頭屑者使用香波后的自身感受日漸受到重視。越來(lái)越多的研究采用受試者自我評(píng)價(jià)來(lái)綜合評(píng)估去屑香波的功效。受試者的自我評(píng)價(jià)有不同的評(píng)分方法，如一項(xiàng)對(duì) 1%聯(lián)苯芐唑香波治療

13、頭皮屑的療效觀察中，研究者及受試者各自對(duì)各種臨床療效進(jìn)行評(píng)估，其評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為0分=加重，1分=無(wú)改善，2分=中度改善，3分=完全改善；研究者及受試者均認(rèn)為2分或 3分以上才判定為有效。自評(píng)方法需要受試者認(rèn)真細(xì)致，密切配合，如結(jié)果可靠，可在較大程度上減少研究者評(píng)估的主觀性和片面性，并可對(duì)香波的安全性以及受試者對(duì)香波美容效果的滿(mǎn)意和接受的程度作出評(píng)價(jià)，使臨床評(píng)估更加全面客觀，故自評(píng)方法已在國(guó)外的評(píng)估試驗(yàn)中廣泛采用。2.3. 儀器檢測(cè)法（1） 紫外線(xiàn)增強(qiáng)可視法（ultravioletlight-enhanced visualization，ULEV）（國(guó)內(nèi)暫無(wú)使用此方法進(jìn)行頭屑檢測(cè)） 引文4：Quantification of dandru