萱草_Hemerocallishybrida_再生植株過程中根的誘導(dǎo)

1、 第41卷第1期2002年2月復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版Journal of Fudan University (Natural Science Vol. 41No. 1Feb. 2002文章編號:042727104(2002 0120089203萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株過程中根的誘導(dǎo)王曉娟1, 金1, 沈延松2, 蔣如敏1, 陳家寬1(1. 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物多樣性與生態(tài)工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 上海200433;2. 上海四季花木生態(tài)、科技發(fā)展有限公司, 上海200051摘要:利用1/2MS 培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基, 附加不同濃度的NAA 作為外源激素, 分別對

2、萱草愈傷組織塊和無根再生苗進(jìn)行根的發(fā)生誘導(dǎo)試驗(yàn), 結(jié)果愈傷組織上均不易生根; 而無根再生苗根的誘導(dǎo)效果較好, 特別是在含有0. 075mg/L NAA 的培養(yǎng)基上, 生根數(shù)量和生根率均最佳. 為工廠化生產(chǎn)提供了相關(guān)的技術(shù)資料. 關(guān)鍵詞:萱草; 愈傷組織; 組織培養(yǎng); 根中圖分類號:Q 813. 1文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A萱草(Hemerocallis hybri da 是一種重要的花境植物, . . 45株, . , 是一項(xiàng)目前被廣泛應(yīng)用. , 僅見有少量簡短的報(bào)道13, 而未見到有關(guān)觀賞型萱. 本研究擬從萱草快繁生產(chǎn)商品化優(yōu)良種苗的目的出發(fā), 在已成功地獲得了愈傷組織的基礎(chǔ)上, 研究在大規(guī)模組織培養(yǎng)情

3、況下, 萱草無根再生苗根的發(fā)生誘導(dǎo), 獲取相關(guān)的技術(shù)參數(shù), 為大規(guī)模組織培養(yǎng)提供技術(shù)參數(shù).1材料與方法供試材料:本研究選用從荷蘭引進(jìn)的優(yōu)良萱草品種(Hemerocallis hy 2bri da Stella D Oro 通過組織培養(yǎng)成功獲得的愈傷組織塊和無根再生苗作為材料.培養(yǎng)基的設(shè)置:根據(jù)前人的經(jīng)驗(yàn)15,1/2MS 基本培養(yǎng)基是誘導(dǎo)生根的優(yōu)良培養(yǎng)基, 附加適量的生長素將促進(jìn)生根的速度和增加根的數(shù)量6,7. 因而本試驗(yàn)選用1/2MS 培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基, 分別附加0, 0. 025,0. 05,0. 075,0. 1mg/L 的NAA 共5個(gè)濃度梯度進(jìn)行較細(xì)致對比研圖1萱草愈傷組織塊、無根

4、再生苗和生根苗究. 采用125mL 的三角瓶分裝, 每瓶50mL 培養(yǎng)基, 每瓶內(nèi)分別接種4棵Fig. 1Callus , re 2grown shoot無根再生苗和愈傷組織塊(圖1 . without root and shoot with re 2培養(yǎng)條件:接種后置于組織培養(yǎng)室內(nèi)22恒溫培養(yǎng), 每天光照10h , grown root of 光照強(qiáng)度為25. 125. 3mol m -2. s -1Hemerocallis hybrida收稿日期:2001205217基金項(xiàng)目:上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(20005212, 女, 博士后; 通訊聯(lián)系人陳家寬教授. 作者簡介:王曉娟(1972

5、 90復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版 第41卷2結(jié)果與討論2. 1萱草愈傷組織生根試驗(yàn)中根發(fā)生的情況本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn), 愈傷組織塊在5種生根培養(yǎng)基中均不生根; 無根再生苗上如形成愈傷組織, 也不易生根; 只有不發(fā)生愈傷組織的無根再生苗較易生根, 表明本試驗(yàn)萱草組織培養(yǎng)過程中再生植株的生根情況可能受再生苗中積累的內(nèi)含激素有關(guān). 根的發(fā)生主要集中在再生苗的根基部, 大部分根發(fā)自切口處, 新生根一般白色或淺黃色, 根長23cm (圖1 , 沿三角瓶作平行生長. 2. 2萱草無根再生苗誘導(dǎo)生根試驗(yàn)中生長素濃度的調(diào)控?zé)o根再生苗在經(jīng)過18d 的培養(yǎng)后, 生根率達(dá)到80. 9%96. 3%.作為外源生長素添加的較低濃度

6、的NAA , 對萱草無根再生苗的生根效果具有顯著的促進(jìn)作用, 但在不同的濃度下效果有所差異. 由表1結(jié)果可知, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根率效果最好:從接種后的第8天以后, 生根率以大約每2天20%的速度遞增, 到第16天時(shí)達(dá)到平臺區(qū), 到第18天可達(dá)到96. 3%的生根率, 因而易于批量化生產(chǎn). 建議在工業(yè)化生產(chǎn)中收獲培養(yǎng)到1618d 的再生苗進(jìn)入下一步的移栽.表1不同NAA 質(zhì)量濃度下生根誘導(dǎo)率的試驗(yàn)結(jié)果Tab. 1Results of the root inductivity in different concentration of NAA%t /d

7、00250. 72. 22. 211. 011. 025. 746. 361. 880. 99. 411. 522. 348. 971. 286. 387. 810. 013. 340. 057. 876. 784. 495. 64. 46. 67. 427. 259. 675. 792. 696. 31. 46. 89. 634. 264. 482. 283. 695. 90750. 16810121416182. 3萱草無根再生苗誘導(dǎo)生根試驗(yàn)中根的數(shù)量變化由表2可知, 不同的培養(yǎng)基上萱草無根再生苗的發(fā)根率不同, 而且每一無根再生苗上的生根數(shù)量也存在著顯著差異. 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看, 在第18天的

8、發(fā)根植株中, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 誘導(dǎo)生根的效果最好, 生根數(shù)5株-1的植株達(dá)到58. 0%, 說明萱草無根再生苗根的誘導(dǎo)以1/2MS +0. 075mg/L NAA 為最佳的配方. 一般而言, 生根數(shù)量越高的植株其苗的素質(zhì)好, 移栽成活率也高. 至于萱草再生植株中以每株幾條根為好, 我們將在移栽實(shí)驗(yàn)中作進(jìn)一步的研究. 2. 4萱草商品化快繁過程中相關(guān)參數(shù)的確定陳宗禮等8的研究認(rèn)為, 采用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行商品化快繁, 其商品苗總產(chǎn)量與再生小苗誘導(dǎo)生根之間存在重要聯(lián)系:(1 再生植株誘導(dǎo)生根的周期; (2 再生植株誘導(dǎo)生根率; (3 有效生根苗在總生根苗中所占比率; (

9、4 一年內(nèi)再生植株誘導(dǎo)生根苗的代數(shù). 由我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可確定萱草采用體外培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行商品化生產(chǎn)中部分技術(shù)參數(shù)范圍如下:(1 萱草再生植株誘導(dǎo)生根的周期為1618d ; (2 萱草再生植株的誘導(dǎo)生根率達(dá)90%以上; (3 生根數(shù)以平均3株-1等條件為有效生根苗, 則萱草的有效生根苗占總生根苗的80%左右. (4 一年內(nèi)無根再生苗誘導(dǎo)生根的代數(shù)大約為2022代/年(1618d/代 , 這是萱草在本培養(yǎng)條件下的最低繁殖代數(shù). 以上參數(shù)表明, 在本條件下萱草的生根試驗(yàn)完全符合工廠化生產(chǎn)的要求. 第1期王曉娟等:萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株過程中根的誘導(dǎo)表2不同NAA 質(zhì)量濃

10、度下生根株數(shù)和生根數(shù)量的變化Tab. 2Number of the induced shoots and roots in different concentration of NAA培養(yǎng)基每株生根數(shù)2121/2MS344638132108431218106114231812641311213322723024103181831181511167212211156110562118178524149610781111342024111021171471817183410118724162526187826212120322315216132058691110251822302315202119

11、1925381322207191511766712639731369013913691不同天數(shù)的生根株數(shù)總誘導(dǎo)株數(shù)/%N 1820. 027. 320. 913. 618. 217. 215. 615. 620. 531. 115. 125. 623. 38. 127. 957. 611. 58. 458. 08. 610. 017. 18. 655. 7511/2MS +0. 025mg/L NAA234511/2MS +0. 05mg/L NAA234511/2MS +0. 075511/2MS +0. 1mg/L NAA2345表示第18天各種生根數(shù)不同的株數(shù)占第18天生根的總株數(shù)的比例

12、. N 18參考文獻(xiàn):1黃濟(jì)明. 幾種花卉的組織培養(yǎng)J.植物生理學(xué)通訊, 1983, (3 :44248.2倪新, 馬毓. 多倍體萱草的組織培養(yǎng)及其繁殖J.園藝學(xué)報(bào), 1984, 11(3 :2022205. 3楊乃博. 雜種大花萱草的試管繁殖J.植物生理學(xué)通訊, 1985, (5 :39.4黃純真. 應(yīng)用組織培養(yǎng)方法獲得四種花木試管植物的初步試驗(yàn)J.植物生理學(xué)通訊, 1980, (6 :37240. 5盧天玲, 黃壽先. 黃花菜組織培養(yǎng)簡報(bào)J.植物生理學(xué)通訊, 1981, (6 :49250.6陳小蘭, 胡瓊?cè)A, 王紅霞. 金百合的離體快速繁殖J.植物生理學(xué)通訊,2000, 36(4 :33

13、4.7王紅霞, 胡瓊?cè)A, 陳小蘭. 通江百合的離體快速繁殖J.植物生理學(xué)通訊, 2000, 36(2 :132.8陳宗禮, 劉建玲, 延志蓮, 等. 植物快繁中有效快繁速度與商品苗總產(chǎn)量的計(jì)算與控制J.西北植物學(xué)報(bào), 1999, 19(3 :4222427.(下轉(zhuǎn)第96頁 96復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版 第41卷G enetic Mode of N asal ShapesCHE N Li , LI Hui , XI A Y uan 2min , J I N Li , LU Da 2ru(Modern Center f or A nthropologic , School of L if e Scie

14、nces , Fudan U niversity , S hanghai , China , 200433Abstract :Among all human characteristics , facial features were found to be one of the most genetic 2related features. Nasal shapes are classified in pedigrees and random populations. It is found that 4characters (nasal root height , hard nasal b

15、ridge shape , soft nasal bridge shape , nasal tip trend are all monogene controlled. Partial correlation analysis and principle component analysis show that there is correlation among these 4characters.K eyw ords:nasal shapes ; genetic mode ; gene frequencies ; pedigree analysis ; Jinhui , Shanghai

16、; partial correlation analysis ; principle component analysis(上接第91頁hybridaWANG X iao 2juan 1, J I N Liang 1, SHE N Y an 2song 2, J I ANG Ru 2min 1, CHE N Jia 2kuan 1(1. Minist ry of Education Key L aboratory f or Biodiversity Science and Ecological Engineering , School of L if e Sciences , Fudan U

17、niversity , S hanghai 200433, China ; 2. S hanghai Four Seasons Horticultural&Environmental Technology Co. , L td. S hanghai 200051, China Abstract :1/2MS culture media containing different concentration of NAA were used to regenerate roots from Hemerocallis hybrida calli and re 2grown shoots without roots. The results showed that no roots were regenerated fromcalli while a large number of roots were induced from re 2grown shoots