甲硝唑環(huán)氧乙烷殘留量的檢測

1、    甲硝唑環(huán)氧乙烷殘留量的檢測        摘要目的：建立甲硝唑中殘留環(huán)氧乙烷的測定方法。方法：采用頂空氣相色譜法，以SE-30毛細(xì)管柱為色譜柱，F(xiàn)ID檢測器。用模擬基質(zhì)進(jìn)行校正因子的測定，以氯仿為內(nèi)標(biāo)測定甲硝唑中的環(huán)氧乙烷。結(jié)果：日內(nèi)精密度為0.31%，方法平均回收率為101.4%，最低檢測限為0.02g/g。結(jié)論：簡化了測定水不溶物中環(huán)氧乙烷(標(biāo)準(zhǔn)加入法)的方法，排除由于藥物吸水性和頂空體積變化帶來的方法誤差，方法簡便、準(zhǔn)確。關(guān)鍵詞甲硝唑；環(huán)氧乙烷；殘留Determ

2、inationfor rseidue of ethylene oxide on metronidazoleFeng Xiaoming(Feng XM),Ma Jiazhen(Ma JZ)NICPBP,Beijing 100050ABSTRACTOBJECTIVE：To established a method for the determination of ethylene oxide in metronidazole.METHOD:Headspace GC method was adopted for the determination with SE-30 capillary colum

3、n and FID detector.The correct factor in metronidazole which is free of ethylene oxide,chloroform was used as internal standard.RESULTS:The average was determined recovey was 101.4%(S=3.3%),precision was 0.31% and the limit of quantiation was 0.02g/g.CONCLUSION:The method reduced the error come from

4、 the hydrophilic character of drug and the variation of headspace volume.It was simple and accurate.KEY WORDSmetronidazole,ethylene oxide,residue甲硝唑中的環(huán)氧乙烷是在滅菌過程中引入的，由于毒性作用，其殘留量必須加以控制(不得過10g/g)，但由于甲硝唑只溶于酸性介質(zhì)，而環(huán)氧乙烷遇酸則水解為乙二醇，難以測定。對于不溶物中殘留有機(jī)溶劑的測定，常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法以消除標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品測定基質(zhì)不一致(或干擾)所帶來的誤差，方法繁鎖，不利于常規(guī)檢測，本方法采用內(nèi)標(biāo)

5、法，以二氯甲烷為內(nèi)標(biāo)，以甲硝唑原料作為基質(zhì)測定校正因子，方法快速簡便、準(zhǔn)確。1儀器與試藥1.1儀器氣相色譜儀：Autosystem 9000,頂空進(jìn)樣器(帶22ml樣品瓶):SH-40,積分儀:1022型，以上儀器均為Perkin Elmer公司制造。1.2試劑和材料環(huán)氧乙烷：含量100%,3M Surgical公司制造，二氯甲烷(AR級)，雙蒸餾水，甲硝唑原料：天津河北制藥廠一分廠提供(和樣品同一批號、不含環(huán)氧乙烷)。2色譜條件色譜柱：毛細(xì)管柱,SE-30(或類似柱),polydimethylsiloxane涂漬，長約30m,內(nèi)徑:0.32mm;液膜厚度:1.25m；檢測器:FID;載氣：氮

6、氣(純度95.5%以上)；載氣流量:24ml/min;壓力控制20PSI；分流比120,燃?xì)饬髁浚嚎諝?50ml/min,氫氣：35ml/min；溫度：檢測器:190,汽化室:200,爐溫:40,保持1.5min,按30/min升至180保持4min;頂空送樣器條件：樣品溫度:70;傳送溫度:110;進(jìn)樣針溫度:100;加熱時間:15min,加壓時間:1min,進(jìn)樣時間:0.08min。3實(shí)驗(yàn)方法3.1溶液配制3.1.1環(huán)氧乙烷儲備液的配制在100ml量瓶中加入80ml雙蒸餾水，具塞稱重(精確至0.0001g),迅速加入11.5ml環(huán)氧乙烷后搖勻，加塞后再次稱重，兩次重量之差即為加入的環(huán)氧乙烷

7、重量，稀釋至刻度，計(jì)算此儲備液環(huán)氧乙烷的含量(11.34mg/ml)存放于冰箱中備用。3.1.2內(nèi)標(biāo)溶液的配制取250ml量瓶加入少量雙蒸水，用微量注射器加入5l(相當(dāng)于6.8mg)二氯甲烷，用雙蒸水定容，搖勻備用。3.3校正溶液的配制精密量取環(huán)氧乙烷儲備液44l,加至50ml量瓶中，用內(nèi)標(biāo)溶液定容(含環(huán)氧乙烷10g/ml),此溶液須在1d內(nèi)使用。3.2系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)3.2.1柱效Allech Associates,Inc制造，批測試柱,n1000。3.2.2分離度R1.5。3.2.3日內(nèi)精密度平行精密稱取5份同一批號甲硝唑原料各1000mg,精密量取校正溶液1ml(10g/ml),置樣品瓶中

8、，密塞，按2所述條件在8h內(nèi)測定，結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.31%。3.3校正因子的測定操作同3.2.3法(色譜見1)，計(jì)算校正因子。1校正溶液色譜A-內(nèi)標(biāo)峰；B-環(huán)氧乙烷(氯仿)3.4樣品中環(huán)氧乙烷的測定取甲硝唑樣品1000mg,加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，密塞，按2所述條件測定，記錄峰面積(色譜見2)，計(jì)算樣品中環(huán)氧乙烷的含量，結(jié)果批號為98048，96190，98049，96189，96191和98050的EO含量(g/g)均為0.0。2樣品色譜A-內(nèi)標(biāo)峰3.5加樣回收率的測定精密稱取以下3個批號的樣品中各1000mg,分別加入含內(nèi)標(biāo)和環(huán)氧乙烷5.5,7.5和17.5g/ml的溶液1ml,測定環(huán)氧乙烷(平行測定3次)，計(jì)算加入的環(huán)氧乙烷量，結(jié)果見表1。3.6最低檢測濃度以色譜信號衰減度為2，信噪比為41,最低檢測濃度為0.02g/g。4結(jié)果與討論試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，采用頂空氣相色譜法按以上方法檢測甲硝唑殘留環(huán)氧乙烷，其系統(tǒng)適應(yīng)性、方法精密度符合美國藥典1995年版要求，方法加樣回收率、精密度均可滿足測試要求。檢測6個批號樣品均未檢出殘留環(huán)氧乙烷(不大于10g/g),符合限量要求。表1加樣回收率測試結(jié)果樣品/批號測得值標(biāo)準(zhǔn)加入量/g測得值/g回收率/%標(biāo)準(zhǔn)偏差/%平均