刺莖楤木根皮抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究

1、刺莖楤木根皮抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究        【摘要】  目的 探討刺莖楤木根皮的抗炎鎮(zhèn)痛作用。 方法抗炎實(shí)驗(yàn)采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹角叉菜膠致鼠足腫脹大鼠棉球肉芽腫等常規(guī)炎癥模型；鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)采用熱板法和醋酸扭體法。結(jié)果刺莖楤木根皮提取物可明顯抑制二甲苯致小鼠耳廊腫脹及角叉菜膠引起的大鼠足跖腫脹，能顯著抑制大鼠棉球肉芽腫的增重及醋酸致小鼠扭體反應(yīng)，可明顯延長熱板引起小鼠疼痛反應(yīng)的痛閥值。結(jié)論刺莖楤木根皮有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用。 【關(guān)鍵詞】  刺莖楤木 抗炎 鎮(zhèn)痛Abstract:ObjectiveT

2、o study the anti-inflammatory and analgesic effects of Aralia echinocaulis Foot bark. MethodsA few conventional models, such as the mouse ear swelling induced by xylene; Analgesic experiments adopted hot-plate procedure and torsion body method. ResultsAralia echinocaulis Foot bark obviously inhibite

3、d the swelling of mouse ear induced by xylene and edema of rat hind paw elicited by egg white, significantly depressed the increase of proliferation of granuloma led by implanting cotton pellet and the torsion boby of rats,decreased pain threshold induced by hot-plate method. ConclusionAralia echino

4、caulis Foot bark has anti-inflammatory and analgesic effects.Key words:Aralia echinocaulis;  Anti-inflammation;  Analgesia刺莖楤木Aralia echinocaulis Hand. -Mazz又稱棘莖楤木、紅楤木、紅鳥不宿等，主要以根皮入藥，具行氣活血、消腫、清熱解毒、祛風(fēng)除濕之功效，主治跌打損傷、風(fēng)濕痹痛、胃脘痛、瘡瘍腫毒等1。生長在有“硒都”之稱的湖北恩施深山叢林中的刺莖楤木，資源極為豐富，民間中醫(yī)應(yīng)用廣泛，且療效顯著2，但藥效學(xué)研究報(bào)道較少。本文旨

5、在研究刺莖楤木根皮的抗炎鎮(zhèn)痛作用，為該植物資源的開發(fā)和臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1  材料與儀器1.1  試劑和儀器 二甲苯為北京化學(xué)試劑廠生產(chǎn)；阿司匹林為南京第二制藥廠生產(chǎn)；角叉菜膠（Carraseenan）為Sigma產(chǎn)品；氫化可的松為江西國藥廠生產(chǎn)。TG328A型分析天平；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；TDL-5型低速臺(tái)式離心機(jī)；DL-50型超級(jí)恒溫器，GJ-8402型熱板測(cè)痛儀。1.2  動(dòng)物SD大鼠70只，體重（130.0±21.0）g，昆明種小鼠120只，體重（20.0±2.1）g，兼用，由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.3

6、60; 刺莖楤木根皮提取物的制備 刺莖楤木根皮購自恩施州中藥材公司。刺莖楤木根皮水提液：取刺莖楤木根皮，用水煎煮3次，過濾后，濃縮成1 g/ml的溶液，即得，以下簡稱水提液；刺莖楤木根皮醇提液：取刺莖楤木根皮粗粉，乙醇回流提取3次，除去乙醇以后制成1 g/ml的醇提取液，以下簡稱醇提液，水提液和醇提液均由本院中藥制劑實(shí)驗(yàn)室制備。2  方法2.1  二甲苯致小鼠耳腫廓脹實(shí)驗(yàn)3昆明種小鼠40只，隨機(jī)分為4組，給藥組分別ig水煎液25，50 ml/kg，陽性藥組ig阿司匹林0.2 g/，對(duì)照組ig等量生理鹽水，1次/d，連續(xù)給藥3 d，在末次給藥1 h后，以50 l二甲

7、苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳廓作為對(duì)照，4 h后，剪下兩耳，用直徑6 mm打孔器取耳片，稱重，以兩耳重量差表示炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度，抑制率。抑制率(%)=1（給藥組兩耳片重量差/空白組兩耳片重量差）×100%。2.2  角叉菜膠致大鼠足腫脹實(shí)驗(yàn)4SD大鼠30只隨機(jī)分成3組，用足容積測(cè)量器測(cè)量大鼠右后肢踝關(guān)節(jié)以下容積。給藥組分別ip醇提液4 g/kg和2 g/kg，空白對(duì)照組ip等量生理鹽水，給藥30 min后，將1%角叉菜膠溶液0.1 ml注入右后肢腳掌皮下，記錄致炎前后不同時(shí)間右后肢踝關(guān)節(jié)以下容積。腫脹率（%）= 致炎前后足跖容量之差/致炎前的足跖容積×100%，抑

8、制率（%）= 空白組與給藥組平均腫脹率之差/空白組平均腫脹率×100%。2.3  大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn)4，5 SD大鼠40只，隨機(jī)分為4組，在乙醚淺麻醉下，將稱重?zé)o菌棉球分別埋藏于大鼠雙側(cè)背部皮下，左右各一個(gè)，手術(shù)次日給藥組分別ip醇提液4 g/kg和2 g/kg，陽性藥組ip氫化可的松2.5 mg/kg，空白對(duì)照組ip等量生理鹽水，1次/d，連續(xù)5 d，第6天將大鼠處死，取出無菌棉球及肉芽組織，于60烤箱內(nèi)干燥后稱重，計(jì)算肉芽組織重量用帶肉芽的棉球重量,減去原棉球重量,即為肉芽組織重量及抑制率（%）=1（給藥組肉芽組織干重/空白組肉芽組織干重）×100%

9、。2.4  小鼠熱板法致痛實(shí)驗(yàn)5，6 選用雄性健康小鼠，放入（55±1.0）熱板測(cè)痛儀上，實(shí)驗(yàn)室溫度控制在（19±2）。觀察小鼠出現(xiàn)舔足的潛伏期，作為痛閾指標(biāo)，選擇痛閾在520 s的小鼠40只，隨機(jī)分為4組，給藥組分別灌胃水煎液15 ml/kg和30 ml/kg，陽性藥組灌胃阿司匹林0.2 g/kg，對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，分別記錄給藥前和1次性給藥后30，60，90 min出現(xiàn)舔足的潛伏期。2.5  小鼠醋酸致痛扭體法實(shí)驗(yàn)5，6 取健康小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組，給藥組分別灌胃水煎液15 ml/kg和30 ml/kg，陽性藥

10、灌胃阿司匹林0.2 g/kg，對(duì)照組灌胃等量生理鹽水，1次性給藥30 min后，各組均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml，觀察30 min內(nèi)小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，求得扭體反應(yīng)抑制率。抑制率（%）=1-（ 給藥組扭體反應(yīng)次數(shù)/空白組扭體反應(yīng)次數(shù)）×100%。2.6   統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS10.0 for Windows統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)。1         3  結(jié)果3.1  刺莖楤木根皮對(duì)二甲

11、苯致小鼠耳廓腫脹的影響結(jié)果見表1。刺莖楤木根皮水煎液組（50 ml/kg·d）與生理鹽水組比較兩耳重量差有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），阿司匹林組與生理鹽水組比較兩耳重量差有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。刺莖楤木根皮水煎液組（25 ml/kg·d）與生理鹽水組比較兩耳重量差無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明刺莖楤木根皮對(duì)二甲苯引起的耳廓腫脹有明顯的抑制作用。表1  刺莖楤木根皮對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(略)3.2  刺莖楤木根皮對(duì)角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響 結(jié)果見表2。刺莖楤木根皮醇提液各組與空白對(duì)照組比較致炎后不同時(shí)間的容積均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0

12、.05或P<0.01）。結(jié)果表明刺莖楤木根皮醇提液能明顯抑制角叉菜膠引起的大鼠足腫脹。給藥劑量為4 g/kg，14 h的抑制率分別為88.0%，64.1%，40.0%，45.5%；劑量為2 g/時(shí), 抑制率為47.4%，47.2%，32.6%，23.7%。表2   刺莖楤木根皮對(duì)角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響(略)3.3  刺莖楤木根皮對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響結(jié)果見表3。刺莖楤木根皮醇提液各組、氫化可的松組與空白對(duì)照組比較肉芽組織干重有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），結(jié)果表明刺莖楤木根皮醇提液對(duì)大鼠無菌棉球植入法誘發(fā)肉芽腫有明顯的抑制作用。表3  刺莖

13、楤木根皮醇提液對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響(略)3.4  刺莖楤木根皮對(duì)熱板致小鼠痛閾的影響見表4。刺莖楤木根皮水煎液各組在給藥60 min時(shí)，阿司匹林組與生理鹽水組比較不同時(shí)間出現(xiàn)舔足的潛伏期均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），刺莖楤木根皮水煎液各組在給藥前和給藥后30 min與生理鹽水組比較出現(xiàn)舔足的潛伏期均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明刺莖楤木根皮水煎液各劑量對(duì)熱板致小鼠痛閾值均有明顯提高作用。  表4 刺莖楤木根皮對(duì)熱板致小鼠痛閾的影響 （略）3.5  刺莖楤木根皮對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響結(jié)果見表5。刺莖楤木根皮水煎液各組、阿司匹林組與生理鹽水組

14、比較扭體次數(shù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)果表明刺莖楤木根皮水煎液各劑量組能明顯減少小鼠扭體次數(shù)。表5  刺莖楤木根皮子對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(略)4  討論刺莖楤木根皮能明顯抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹及角叉菜膠致大鼠足跖腫脹炎癥反應(yīng)。在以肉芽組織增生為指標(biāo)的慢性炎癥模型實(shí)驗(yàn)中，刺莖楤木根皮能夠顯著抑制異物所致大鼠炎癥的肉芽增生，證明其具有明顯的抗炎作用。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)表明該提取液對(duì)化學(xué)致痛和熱板致痛有一定的鎮(zhèn)痛效果。刺莖楤木根皮能明顯減少醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)，又能明顯延長熱刺激小鼠痛閾值，說明該藥有鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺莖楤木根皮具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛作用，初步分析其抗炎鎮(zhèn)痛作用可能涉及中樞及外周系統(tǒng)，而對(duì)該藥有效成分及作用機(jī)制的探討，則有待于進(jìn)一步的深入研究。湖北恩施刺莖楤木資源極為豐富，民間廣為傳用，療效較好，是一類值得關(guān)注的資源植物。【】  1包柏林,王忠壯.棘莖楤木的資源學(xué)和生藥學(xué)研究J.中藥雜志,2004，29(6):508.2顏益志.楤木在土家族