出口蜂蜜中穩(wěn)定碳同位素測(cè)定方法 液相色譜_元素分析同位素比值質(zhì)譜聯(lián)用法編制說(shuō)明（可編輯）

1、出口蜂蜜中穩(wěn)定碳同位素測(cè)定方法 液相色譜_元素分析-同位素比值質(zhì)譜聯(lián)用法編制說(shuō)明 出口蜂蜜中穩(wěn)定碳同位素測(cè)定方法 液相色譜/元素分析-同位素比值質(zhì)譜聯(lián)用法編制說(shuō)明標(biāo)準(zhǔn)制定的任務(wù)來(lái)源及意義1、任務(wù)來(lái)源 本標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)下達(dá)的任務(wù),名稱為進(jìn)出口蜂蜜中各組分碳同位素比值的檢測(cè),計(jì)劃編號(hào)為2011B154,由中華人民共和國(guó)江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局負(fù)責(zé)制定。2、制定標(biāo)準(zhǔn)的意義 蜂蜜是蜜蜂采集開(kāi)花植物的花蜜、分泌物或蜜露,與自身分泌物結(jié)合后,經(jīng)充分釀造而成的天然甜味物質(zhì),蜂蜜的成分除了葡萄糖和果糖外,還有多種氨基酸、維生素、生物酶和微量元素等成分,具有優(yōu)良的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健作用,長(zhǎng)期以來(lái)深

2、受人們的喜愛(ài)。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外蜂蜜摻假程度越來(lái)越嚴(yán)重,少數(shù)不法商人為了牟取暴利,在純正的蜂蜜中摻入相對(duì)便宜的糖漿。這對(duì)我國(guó)蜂產(chǎn)品市場(chǎng)造成了極大負(fù)面影響,欺騙了廣大消費(fèi)者。因此,開(kāi)發(fā)有效、靈敏的蜂蜜摻假檢測(cè)方法變得極為迫切。 近年來(lái),碳同位素質(zhì)譜技術(shù)逐漸成為目前國(guó)際上用于產(chǎn)地溯源和鑒別食品成分摻假的一種直接而有效的工具。植物光合作用中C3和C4兩種代謝途徑的產(chǎn)物碳同位素比值(13C值)有較大差異,利用這個(gè)差異可以通過(guò)測(cè)定蜂蜜的13C值,能夠鑒別蜂蜜(主要含C3植物糖)中是否摻入的C4植物糖漿(如玉米糖漿、甘蔗糖漿)?，F(xiàn)在國(guó)際上通用的是元素分析儀-同位素質(zhì)譜法(EA-IRMS),目前該法已經(jīng)成為各國(guó)蜂

3、蜜檢測(cè)機(jī)構(gòu)的首選方法1-2。但是這種離線方法只能判定較高含量的C4植物糖摻假水平,對(duì)于C3植物糖漿(如大米糖漿、甜菜糖漿)摻假判定存在缺陷。 液相色譜-同位素質(zhì)譜法(LC-IRMS)的引入為更精確的測(cè)定蜂蜜同位素值、判定蜂蜜摻假情況開(kāi)辟了更為廣闊的前景。蜂蜜中各種糖經(jīng)液相色譜在線分離后,通過(guò)IRMS在線測(cè)定各個(gè)組分的13C值。這樣可以克服之前離線方法的缺點(diǎn),提高檢測(cè)方法的靈敏度,并且可以對(duì)C3植物糖的摻假進(jìn)行鑒定。目前國(guó)外著名檢測(cè)機(jī)構(gòu)Applica已利用液相色譜/元素分析-同位素質(zhì)譜法來(lái)鑒別蜂蜜的摻假,提出了純正蜂蜜的同位素比值應(yīng)該滿足的要求5-8,而我國(guó)還沒(méi)有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)來(lái)鑒別蜂蜜摻假。因

4、此迫切需要制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)規(guī)范我國(guó)的蜂產(chǎn)品市場(chǎng),同時(shí)通過(guò)建立不同品種蜂蜜的碳同位素值數(shù)據(jù)庫(kù),為我國(guó)有關(guān)部門進(jìn)一步開(kāi)展蜂蜜的品質(zhì)、來(lái)源以及所標(biāo)注的產(chǎn)品名稱、產(chǎn)地和加工過(guò)程的真實(shí)性的監(jiān)管工作提供科學(xué)根據(jù)和數(shù)據(jù)基礎(chǔ),在保護(hù)消費(fèi)者利益方面起重要作用。 二、編制依據(jù) 本標(biāo)準(zhǔn)的編制遵循GB/T 1.1-2000標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)則和GB/T 20001.4-2001標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則 第4部分:化學(xué)分析方法的要求進(jìn)行編寫(xiě)制訂的。三、標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位在2011年4月收到認(rèn)監(jiān)委的任務(wù)下達(dá)文件后,成立了標(biāo)準(zhǔn)起草小組,第一起草人任組長(zhǎng),對(duì)小組成員進(jìn)行了分工,并制定了時(shí)間進(jìn)度表(見(jiàn)表

5、1)。 本標(biāo)準(zhǔn)起草人通過(guò)查詢相關(guān)資料和文獻(xiàn),結(jié)合蜂蜜檢測(cè)的實(shí)際情況,建立了蜂蜜中各組分碳同位素比值的液相色譜/元素分析-同位素質(zhì)譜測(cè)定方法,選取10種不同蜜源的純正蜂蜜對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證,這些純正蜂蜜樣品主要包括實(shí)驗(yàn)室的蜂蜜監(jiān)控樣品和購(gòu)自蜂農(nóng)的純正蜂蜜,同時(shí)利用該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室已有的糖漿進(jìn)行檢測(cè)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究驗(yàn)證后,該方法能滿足蜂蜜摻假的檢測(cè)要求。表1 本標(biāo)準(zhǔn)制定工作時(shí)間進(jìn)度安排時(shí)間工作內(nèi)容完成情況2011.4 2011.5查閱并整理相關(guān)文獻(xiàn)資料,購(gòu)買標(biāo)準(zhǔn)品或樣品;確定標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)路線。完成2011.42011.5優(yōu)化前處理?xiàng)l件和檢測(cè)條件;對(duì)不同蜜源的蜂蜜和糖漿進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)行方法室內(nèi)和室間驗(yàn)證,起草標(biāo)

6、準(zhǔn)征求意見(jiàn)稿。完成2011.52011.6征求意見(jiàn),匯總意見(jiàn),形成送審稿。完成四、主要試驗(yàn)技術(shù)論證 本標(biāo)準(zhǔn)利用液相色譜-同位素質(zhì)譜法和元素分析-同位素質(zhì)譜法(LC/EA-IRMS)對(duì)蜂蜜中各組分碳同位素進(jìn)行測(cè)定。適用范圍包括油菜蜜、洋槐蜜、葵花蜜、椴樹(shù)蜜、荊條蜜、蘆芯蜜、山花蜜、紫云英蜜、荔枝蜜、蘋(píng)果蜜、苜蓿蜜等11種不同品種的純正蜂蜜。 本標(biāo)準(zhǔn)選取55個(gè)純正蜂蜜進(jìn)行驗(yàn)證(8個(gè)蜂蜜購(gòu)自于蜂農(nóng),11個(gè)蜂蜜來(lái)自于土畜商會(huì),36個(gè)為蜂蜜監(jiān)控樣品)。其中油菜蜜29個(gè),洋槐蜜7個(gè),葵花蜜5個(gè),椴樹(shù)蜜4個(gè),荊條蜜2個(gè),蘆芯蜜2個(gè),山花蜜2個(gè),紫云英蜜、荔枝蜜、蘋(píng)果蜜、苜蓿蜜各1個(gè)。 檢測(cè)每個(gè)樣品的蜂蜜整體

7、、蜂蜜蛋白質(zhì)及各種糖的碳同位素值,根據(jù)Applica實(shí)驗(yàn)室提出的判定準(zhǔn)則,計(jì)算蜂蜜蛋白質(zhì)與蜂蜜同位素差值13Cp-h、果糖、葡萄糖13C值之差13Cfru-glu以及各個(gè)組分13C最大差值13C,根據(jù)上述三個(gè)參數(shù)的閾值來(lái)確認(rèn)蜂蜜是否摻假。 同時(shí)為了研究不同蜜種純正蜂蜜混合后的樣品是否符合Applica實(shí)驗(yàn)室提出的判定準(zhǔn)則,本標(biāo)準(zhǔn)選取了四種純正蜂蜜(油菜、洋槐、椴樹(shù)和葵花)按照不同的比例制備混樣,共11個(gè)?；旌媳壤?jiàn)表2。 表2、四種蜜種純正蜂蜜混合比例表樣品比例 %油菜-洋槐75-2550-5025-75油菜-椴樹(shù)75-2550-5025-75洋槐-椴樹(shù)75-2550-5025-75油菜-洋槐

8、-椴樹(shù)30-30-40油菜-洋槐-葵花30-30-40 同時(shí)將一個(gè)糖漿與一個(gè)純正油菜蜜按照不同比例混合,利用本標(biāo)準(zhǔn)的方法進(jìn)行檢測(cè),蜂蜜和糖漿混合比例分別是95%/5%,90%/10%,85%/15%。 1、元素分析-同位素質(zhì)譜法(EA-IRMS)前處理?xiàng)l件的選擇 元素分析-同位素質(zhì)譜法用于測(cè)定蜂蜜整體同位素值13Ch和蜂蜜中蛋白質(zhì)同位素值13Cp。樣品中的碳元素經(jīng)元素分析儀高溫燃燒后轉(zhuǎn)化為CO2,經(jīng)過(guò)凈化和干燥后通過(guò)同位素質(zhì)譜儀測(cè)定樣品的13C值。本標(biāo)準(zhǔn)的樣品前處理主要參照AOAC 998.12和GB/T 18932.1-2002進(jìn)行操作。 對(duì)于蜂蜜整體13C值的測(cè)定,采用微量進(jìn)樣器移取一定量

9、的未稀釋蜂蜜于錫杯中即可。蜂蜜中蛋白質(zhì)13C值的測(cè)定時(shí),需要將蜂蜜中的蛋白質(zhì)提取出后烘干才能進(jìn)行測(cè)定。 蛋白質(zhì)沉淀劑的選取參照上述兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn),采用鎢酸鈉溶液和硫酸溶液,確保蜂蜜中蛋白質(zhì)充分沉淀后,離心棄上清液后加水清洗蛋白質(zhì)。由于蜂蜜中糖的水溶性大大高于蛋白質(zhì)的水溶性,反復(fù)用水清洗可確保蜂蜜中的糖沒(méi)有影響蛋白質(zhì)13C值的測(cè)定。將清洗后的蛋白質(zhì)烘干后碾磨混勻后進(jìn)行制備,可確保蛋白質(zhì)13C值測(cè)定的取樣代表性,從而能獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。 使用元素分析-同位素質(zhì)譜測(cè)定樣品的同時(shí)通過(guò)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)樣品的13C值進(jìn)行質(zhì)量控制,每個(gè)批次的檢測(cè)樣品間隔對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定,確保測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)樣品的13C值與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)標(biāo)注值相

10、差小于±0.30 。 2、液相色譜-同位素質(zhì)譜法(LC-IRMS)測(cè)定條件的優(yōu)化 液相色譜-同位素質(zhì)譜條件測(cè)定蜂蜜樣品中果糖、葡萄糖、二糖、三糖碳同位素比值(13Cfru、13Cglu、13Cds、13Cts)。樣品按照一定濃度稀釋后,經(jīng)液相色譜進(jìn)行分離,各組分依次被濕法氧化為CO2,再通過(guò)同位素質(zhì)譜儀測(cè)定各個(gè)糖組分的13C值(具體流程見(jiàn)圖1)。測(cè)定方法主要參考Applica實(shí)驗(yàn)室的方法。 由于本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定的是碳同位素比值,因此流動(dòng)相不能含有有機(jī)物和其他含碳的無(wú)機(jī)鹽,本標(biāo)準(zhǔn)采用的流動(dòng)相為100%超純水,色譜柱為鈣離子交換柱,柱溫設(shè)置為85以改善分離效果。蜂蜜中各個(gè)糖組分的分離是以離子交

11、換作用和體積排阻作用,因此各糖的出峰順序依次為寡糖、三糖、二糖、葡萄糖和果糖。圖1、液相色譜-同位素質(zhì)譜測(cè)定示意圖 在進(jìn)行樣品測(cè)定前,需要不斷調(diào)整氧化劑過(guò)二硫酸鈉溶液和催化劑磷酸溶液的流速,確保氧化爐G中體系的氧化能力能夠充分氧化分離后的各個(gè)組分。如圖1分離后的組分在氧化爐G處于99.9下充分氧化為CO2,經(jīng)過(guò)Nifon膜后與流動(dòng)相分離后再經(jīng)干燥器J充分干燥后進(jìn)入同位素質(zhì)譜測(cè)得13C值。 Thermo NC2500 元素分析-同位素質(zhì)譜儀得到的同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)圖譜、11種純正蜂蜜13Ch和13Cp圖譜、11個(gè)蜂蜜混合樣13Ch和13Cp圖譜見(jiàn)圖2-23;Thermo 液相色譜-同位素質(zhì)譜儀得到的

12、同位素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)圖譜、11種純正蜂蜜色譜圖、11個(gè)蜂蜜混合樣色譜圖見(jiàn)圖24-46。 圖2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)EA-IRMS色譜圖 13Ch13Cp圖3油菜蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖4洋槐蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖5葵花蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖6 椴樹(shù)蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖7荊條蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp 圖8蘆芯蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp 圖9山花蜜EA-IRMS色譜圖13Ch 13Cp 圖10紫云英蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp 圖11荔枝蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp 圖12蘋(píng)果蜜EA-IRMS色譜圖

13、13Ch 13Cp 圖13苜蓿蜜EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖14油菜蜜-洋槐蜜75%-25% EA-IRMS色譜圖13Ch 13Cp圖15油菜蜜-洋槐蜜50%-50% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖15油菜蜜-洋槐蜜25%-75% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖16油菜蜜-椴樹(shù)蜜75%-25% EA-IRMS色譜圖 13Ch13Cp圖17油菜蜜-椴樹(shù)蜜50%-50% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖18油菜蜜-椴樹(shù)蜜25%-75% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖19洋槐蜜-椴樹(shù)蜜75%-25% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖20洋槐蜜-椴樹(shù)蜜50

14、%-50% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖21洋槐蜜-椴樹(shù)蜜25%-75% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖22 油菜蜜-洋槐蜜-椴樹(shù)蜜30%-30%-40% EA-IRMS色譜圖13Ch13Cp圖23 油菜蜜-洋槐蜜-葵花蜜30%-30%-40% EA-IRMS色譜圖圖24 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)LC-IRMS色譜圖圖25油菜蜜LC-IRMS色譜圖圖26洋槐蜜LC-IRMS色譜圖圖27葵花蜜LC-IRMS色譜圖圖28椴樹(shù)蜜LC-IRMS色譜圖圖29荊條蜜LC-IRMS色譜圖圖30蘆芯蜜LC-IRMS色譜圖圖31山花蜜LC-IRMS色譜圖圖32紫云英蜜LC-IRMS色譜圖圖33荔枝蜜LC-IR

15、MS色譜圖圖34蘋(píng)果蜜LC-IRMS色譜圖圖35苜蓿蜜LC-IRMS色譜圖圖36油菜蜜-洋槐蜜75%-25% LC-IRMS色譜圖圖37油菜蜜-洋槐蜜50%-50% LC-IRMS色譜圖圖38油菜蜜-洋槐蜜25%-75% LC-IRMS色譜圖圖39油菜蜜-椴樹(shù)蜜75%-25% LC-IRMS色譜圖圖40油菜蜜-椴樹(shù)蜜50%-50% LC-IRMS色譜圖圖41油菜蜜-椴樹(shù)蜜25%-75% LC-IRMS色譜圖圖42洋槐蜜-椴樹(shù)蜜25%-75% LC-IRMS色譜圖圖43洋槐蜜-椴樹(shù)蜜50%-50% LC-IRMS色譜圖圖44洋槐蜜-椴樹(shù)蜜25%-75% LC-IRMS色譜圖圖45油菜蜜-洋槐蜜-

16、椴樹(shù)蜜30%-30%-40% LC-IRMS色譜圖圖46油菜蜜-洋槐蜜-葵花蜜30%-30%-40% LC-IRMS色譜圖五、方法的主要技術(shù)指標(biāo)1、精密度數(shù)據(jù) 選取一個(gè)純正葵花蜂蜜,連續(xù)測(cè)定10次平行樣品,測(cè)定室內(nèi)精密度。室內(nèi)精密度試驗(yàn)由江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局完成,具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,方法的最大相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.45%,見(jiàn)表3。2、純正蜂蜜檢測(cè)情況 本標(biāo)準(zhǔn)選取55個(gè)純正蜂蜜進(jìn)行驗(yàn)證,檢測(cè)每個(gè)樣品的蜂蜜整體、蜂蜜蛋白質(zhì)及各種糖的碳同位素值,詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表4。根據(jù)Applica實(shí)驗(yàn)室提出的判定準(zhǔn)則,若樣品同時(shí)滿足13Cfru-glu±1.00 、13C2.10 和13Cp-h-1.

17、00 這三個(gè)條件,判定為陰性蜂蜜;若上述三個(gè)條件至少一個(gè)無(wú)法滿足,判定為摻假蜂蜜。由表4可見(jiàn),55個(gè)共11種純正蜂蜜全部符合上述判定準(zhǔn)則,13Cfru-glu在-0.990.75范圍內(nèi),13C在0.442.07范圍內(nèi),13Cp-h在-0.921.93范圍內(nèi)。3、純正蜂蜜混合樣的檢測(cè)情況 本標(biāo)準(zhǔn)選取11種純正蜂蜜中的四種,按照不同的比例混合后進(jìn)行檢測(cè),混合比例見(jiàn)表2,一共11個(gè)蜂蜜樣本。按照本標(biāo)準(zhǔn)的EA-IRMS和LC-IRMS法進(jìn)行檢測(cè),詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表5?？梢?jiàn)不管是兩種純正蜂蜜混合樣本還是三種純正蜂蜜的混合樣本,都完全符合純正蜂蜜判定準(zhǔn)則,13Cfru-glu在-0.130.56范圍內(nèi),13C在

18、0.291.80范圍內(nèi),13Cp-h在-0.291.12范圍內(nèi)。4、蜂蜜與糖漿混合樣檢測(cè)情況 本標(biāo)準(zhǔn)選取1個(gè)純正油菜蜂蜜和1種大米糖漿,按照不同的比例混合后進(jìn)行檢測(cè),蜂蜜和糖漿的混合比例依次是95%/5%,90%/10%,85%/15%,一共3個(gè)蜂蜜糖漿樣本。按照本標(biāo)準(zhǔn)的EA-IRMS和LC-IRMS法進(jìn)行檢測(cè),詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表6?？梢?jiàn)三種蜂蜜糖漿的混合樣本全部不符合純正蜂蜜的判定準(zhǔn)則,為陽(yáng)性樣本,13Cfru-glu在0.030.10范圍內(nèi),13C在2.655.89范圍內(nèi),13Cp-h在0.961.32范圍內(nèi)。六、結(jié)論 綜合上述情況,本方法可滿足蜂蜜摻假鑒定的要求,適用于11種純正蜂蜜,同樣適用

19、于不同種類純正蜂蜜的混合蜂蜜,能夠有效鑒定碳-3植物糖的摻假,方法的精密度等各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均符合GB/T 1.1-2000標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)則、GB/T 20001.4-2001標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則 第4部分:化學(xué)分析方法的要求。七、參考文獻(xiàn)AOAC Official Method 998.12, C-4 plant Sugars in Honey.GB/T 18932.1-2002, 蜂蜜中碳-4植物糖含量測(cè)定方法GB/T 1.1-2000標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)規(guī)則GB/T 20001.4-2001標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)規(guī)則 第4部分:化學(xué)分析方法Michael Kru

20、mmen, Andreas W. Hilkert, Dieter Juchelka, et al.A new concept for isotope ratio monitoring liquid chromatography/mass spectrometry. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2004, 18, 2260A. I. Cabanero, J. L. Recio, Mercedes Ruperez,Liquid Chromatography Coupled to Isotope Ratio Mass Spectrometry: A New Perspe

21、ctive on Honey Adulteration Detection. J. Agric. Food Chem. 2006, 54, 9719Lutz Elflein, Kurt-Peter Raezke, Improved detection of honey adulteration by measuring differences between 13C/12C stable carbon isotope ratios of protein and sugar compounds with a combination of elemental analyzer - isotope

22、ratio mass spectrometry and liquid chromatography - isotope ratio mass spectrometry 13-EA/LC-IRMS. Apidologie, 2008, 5, 574Boschker HT, Moerdijk-Poortvliet TC, van Breugel P, et al.A versatile method for stable carbon isotope analysis of carbohydrates by high-performance liquid chromatography/isotop

23、e ratio mass spectrometry. Rapid Commun Mass Spectrom, 2008, 22, 3902表3 葵花蜂蜜的精密度數(shù)據(jù)(n10)次數(shù)13Cfru 13Cglu13Cds13Cts13Ch13Cp1-24.69-24.92-24.54ND-24.56-22.962-24.72-24.99-24.42ND-24.60-23.023-24.79-24.86-24.59ND-24.45-23.054-24.60-24.79-24.60ND-24.61-22.935-24.58-24.88-24.68ND-24.49-23.106-24.55-24.83-2

24、4.42ND-24.63-23.077-24.63-24.86-24.71ND-24.59-22.958-24.78-24.9-24.44ND-24.47-22.929-24.73-24.86-24.69ND-24.70-23.0910-24.77-24.93-24.57ND-24.41-23.12RSD %0.360.230.45-0.380.33表4純正蜂蜜的13C值數(shù)據(jù)source13Cfru 13Cglu13Cds13Cts13Cfru-glu13C13Cp-h13Ch13Cp葵花-24.49-24.69-26.15ND0.202.030.54-24.66-24.12蘋(píng)果-25.10-

25、25.10-26.42ND0.001.560.12-24.98-24.86油菜-27.34-27.55-26.52ND0.201.170.47-26.85-26.38荔枝-24.53-24.70-24.34ND0.171.000.68-24.38-23.70油菜-26.58-26.76-26.05ND0.181.561.49-26.69-25.20油菜-27.38-27.58-27.96ND0.200.800.17-27.33-27.16油菜-27.68-27.73-28.32ND0.050.64-0.38-27.85-28.23紫云英-23.89-24.37-22.87ND0.482.01-

26、0.92-23.96-24.88油菜-28.86-28.95-28.72ND0.092.071.93-28.82-26.89洋槐-21.66-21.20-21.18ND-0.461.81-0.53-22.46-22.99葵花-24.69-24.92-24.54ND0.231.961.60-24.56-22.96油菜-26.93-27.12-27.78ND0.181.400.38-26.77-26.38油菜-26.51-26.64-27.86ND0.131.910.39-26.34-25.95油菜-27.60-27.67-29.01ND0.061.830.25-27.43-27.18蘆芯-24.

27、56-24.69-25.91-25.660.141.35-0.58-24.72-25.29蘆芯-24.26-24.30-25.12-24.870.041.420.67-24.38-23.70洋槐-23.83-23.32-25.31ND-0.511.99-0.32-23.70-24.02洋槐-24.27-24.15-25.34ND-0.121.24-0.48-24.10-24.58黃荊條-24.98-24.80-25.55ND-0.181.621.01-24.94-23.93荊條-26.59-26.60-28.62ND0.012.030.14-26.74-26.60油菜-22.69-22.36-

28、23.88ND-0.331.520.20-23.14-22.94油菜-23.68-23.43-24.44ND-0.251.630.85-23.66-22.81山花-22.75-22.26-23.83ND-0.491.57-0.03-22.84-22.87山花-25.69-25.66-25.41ND-0.031.971.76-25.48-23.72油菜-25.95-26.70NDND0.750.96-0.28-25.74-26.02油菜-27.92-28.28-28.70ND0.361.280.47-27.89-27.42油菜-27.58-27.90-25.90ND0.322.000.52-27

29、.17-26.65油菜-28.34-28.72NDND0.381.340.45-27.83-27.38油菜-28.26-28.70-29.42ND0.441.740.21-27.89-27.68葵花-24.60-25.03-24.65ND0.430.440.34-24.93-24.59葵花-24.80-24.66-25.76ND-0.141.940.95-24.77-23.82葵花-23.74-24.09-24.64ND0.351.520.92-24.04-23.12苜蓿-24.56-24.57-25.58ND0.011.650.56-24.49-23.93油菜-24.44-24.53-24.

30、59ND0.090.950.87-24.51-23.64油菜-24.36-24.42-25.36ND0.061.821.08-24.62-23.54洋槐-23.50-23.32-23.49ND-0.180.95-0.73-23.54-24.27洋槐-24.12-24.02-25.30ND-0.101.28-0.30-24.26-24.56洋槐-24.58-24.62-24.96ND0.041.620.77-24.11-23.34油菜-27.70-27.8-27.88ND0.100.80-0.04-27.08-27.12油菜-27.70-27.76-27.72ND0.060.600.06-27.

31、22-27.16椴樹(shù)-24.31-24.51-25.16ND0.201.680.51-23.99-23.48椴樹(shù)-24.33-24.34-24.64ND0.010.970.57-24.24-23.67椴樹(shù)-24.50-24.6-25.09ND0.101.590.72-24.22-23.50椴樹(shù)-24.55-24.64-24.90ND0.091.170.91-24.64-23.73油菜-27.80-28.05-28.01ND0.251.190.93-27.79-26.86油菜-28.03-28.36-28.26ND0.331.490.97-27.84-26.87洋槐-24.66-23.67-24.28ND-0.991.100.18-23.75-23.57油菜-25.74-25.49-26.46ND-0.251.030.04-25.47-25.43油菜-28.02-28.16-28.10ND0.141.791.42-27.79-26.37油菜-28.00-28.30NDND0.301.911.40-27.79-26.39油菜-27.14-26.44-28.44ND-0.702.000.06-27.09-27.03油菜-25.92-26.5-26.73ND0.581.01-