室內(nèi)空氣中細(xì)菌的測定

1、室內(nèi)空氣中細(xì)菌的測定三、原理：三、原理： 空氣中附著于塵?；蝻w沫小滴上的細(xì)菌，經(jīng)空氣中附著于塵?；蝻w沫小滴上的細(xì)菌，經(jīng)過一段時間，可自然沉降于培養(yǎng)基的表面上，經(jīng)過一段時間，可自然沉降于培養(yǎng)基的表面上，經(jīng)培養(yǎng)后，計數(shù)其生長的菌落數(shù)，再按公式推算出培養(yǎng)后，計數(shù)其生長的菌落數(shù)，再按公式推算出每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù)。每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù)。（二）試劑與材料：（二）試劑與材料： 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基： （1）成份：）成份： 蛋白胨蛋白胨 10克克 牛肉浸膏牛肉浸膏 3克克 氯化鈉氯化鈉 5克克 磷酸二氫鈉磷酸二氫鈉 1克克 瓊脂瓊脂 1520克克 蒸餾水蒸餾水 1000毫升毫升（二）試劑與材料

2、：（二）試劑與材料： 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：（2）制法：將上述成分混合后，加熱溶解。調(diào)節(jié)）制法：將上述成分混合后，加熱溶解。調(diào)節(jié)PH值。過濾除去沉渣，分裝于三角燒瓶中，經(jīng)值。過濾除去沉渣，分裝于三角燒瓶中，經(jīng)121（103kPa）高壓蒸氣滅菌）高壓蒸氣滅菌20分鐘，然后傾注適量分鐘，然后傾注適量（1520毫升）于已滅菌處理的平皿內(nèi)，制成營養(yǎng)瓊毫升）于已滅菌處理的平皿內(nèi)，制成營養(yǎng)瓊脂平板備用。若當(dāng)天不用，應(yīng)置冰箱內(nèi)保存。脂平板備用。若當(dāng)天不用，應(yīng)置冰箱內(nèi)保存。五、操作步驟：五、操作步驟：（一）制作營養(yǎng)瓊脂平板（無菌操作）（一）制作營養(yǎng)瓊脂平板（無菌操作） 操作者面前點燃酒精燈操作者面前

3、點燃酒精燈 打開已滅菌處理的平皿打開已滅菌處理的平皿 傾注適量營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（傾注適量營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（15152020毫升）毫升） 冷凝（大約冷凝（大約1515分鐘）分鐘）（二）選擇采樣點的要求：（二）選擇采樣點的要求：1采樣點的數(shù)量采樣點的數(shù)量 根據(jù)監(jiān)測室內(nèi)面積大小和現(xiàn)場情況而確定，以根據(jù)監(jiān)測室內(nèi)面積大小和現(xiàn)場情況而確定，以期能正確反映室內(nèi)空氣污染物的水平。原則上小于期能正確反映室內(nèi)空氣污染物的水平。原則上小于50的房間應(yīng)設(shè)（的房間應(yīng)設(shè)（13）個點；）個點；50100設(shè)設(shè)（35）個點；）個點；100以上至少設(shè)以上至少設(shè)5個點。在對角線個點。在對角線上或梅花式均勻分布。上或梅花式均勻分布。2采

4、樣點應(yīng)避開通風(fēng)口，離墻壁距離應(yīng)大于。采樣點應(yīng)避開通風(fēng)口，離墻壁距離應(yīng)大于。3采樣點的高度：原則上與人的呼吸帶高度相一采樣點的高度：原則上與人的呼吸帶高度相一致。相對高度之間。致。相對高度之間。六、結(jié)果與計算：六、結(jié)果與計算：1 1、奧梅梁斯基公式：、奧梅梁斯基公式：100cm100cm2 2的培養(yǎng)皿讓空氣沉降的培養(yǎng)皿讓空氣沉降5 5分鐘，培養(yǎng)出的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)于分鐘，培養(yǎng)出的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)于1010升空氣中的細(xì)菌升空氣中的細(xì)菌數(shù)。數(shù)。 X=X=（N N100100100100）/R/R2 2 式中：式中：XX每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù)每立方米空氣中的細(xì)菌數(shù) NN平板直接計數(shù)的平均菌落數(shù)平板直接計數(shù)的平均菌

5、落數(shù) RR平皿的底面積半徑（平皿的底面積半徑（cmcm）：）：9cm9cm2 2、直接計數(shù)：、直接計數(shù)： CFUCFU（菌落形成單位（菌落形成單位/ /皿），注明（沉皿），注明（沉降法，皿徑降法，皿徑9cm9cm） 3、將五個采樣點的菌落數(shù)平均計算出室內(nèi)平均的菌落數(shù)。 1 2 3 4 5 平均 細(xì)菌數(shù)（CFU/皿）感應(yīng)式菌落計數(shù)儀感應(yīng)式菌落計數(shù)儀旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)旅店業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) GB 9663-1996 醫(yī)院空氣消毒效果和污染狀況的評價：醫(yī)院空氣消毒效果和污染狀況的評價： 空氣消毒效果的比較應(yīng)在消毒前后取樣進行培養(yǎng)，空氣消毒效果的比較應(yīng)在消毒前后取樣進行培養(yǎng)，如消毒后空氣中細(xì)菌數(shù)明顯下降，說明消毒

6、效果好，下如消毒后空氣中細(xì)菌數(shù)明顯下降，說明消毒效果好，下面規(guī)定適用面規(guī)定適用GB159821995規(guī)定：規(guī)定：類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)10cfu/m3，且未檢出致病菌為消毒合格；，且未檢出致病菌為消毒合格；類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)200cfu/m3, 且未檢出致病菌為消毒合格；且未檢出致病菌為消毒合格；類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)類區(qū)域細(xì)菌總數(shù)500cfu/m3, 且未檢出致病菌為消毒合格。且未檢出致病菌為消毒合格。類環(huán)境包括層流潔凈手術(shù)室和層流潔凈病房只能類環(huán)境包括層流潔凈手術(shù)室和層流潔凈病房只能采用層流通風(fēng)才能空氣中的微生物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。采用層流通風(fēng)才能空氣中的微生物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。類環(huán)境包

7、括普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒類環(huán)境包括普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保護性隔離室、供應(yīng)室潔凈區(qū)、燒傷病房、室、普通保護性隔離室、供應(yīng)室潔凈區(qū)、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、采用循環(huán)風(fēng)紫外線空氣消毒器或靜重癥監(jiān)護病房、采用循環(huán)風(fēng)紫外線空氣消毒器或靜電吸附式空氣消毒器，這類均為有人房間，必須采電吸附式空氣消毒器，這類均為有人房間，必須采用對人無毒無害且可連續(xù)消毒才能使空氣中的微生用對人無毒無害且可連續(xù)消毒才能使空氣中的微生物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。物減到此標(biāo)準(zhǔn)以下。類環(huán)境包括兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、類環(huán)境包括兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應(yīng)室清潔區(qū)、急診室、化驗室、換藥室、治療室、供應(yīng)室清潔區(qū)、急診室、化驗室、各類普通病房室和房間，采用紫外線消毒，化學(xué)消各類普通病房室和房間，采用紫外線消毒，化學(xué)消毒劑熏蒸或噴霧消毒。毒劑熏蒸或噴霧消毒。 補充：補充：1.撞擊式空氣采樣法：用空氣動力泵抽氣進入狹縫，撞擊式空氣采樣法：用空氣動力泵抽氣進入狹縫，使氣流速度加快，撞擊于正在轉(zhuǎn)動的平皿上。并粘使氣流速度加快，撞擊于正在轉(zhuǎn)動的平皿上。并粘附其上，培養(yǎng)。附其上，培養(yǎng)。CFU/m32.吸收法：氣流經(jīng)過一定的吸收液，培養(yǎng)。吸收法：氣流經(jīng)過一