2013高考生物 考前回扣 生物技術(shù)實踐（含解析）新人教版

1、2013高考生物考前回扣-生物技術(shù)實踐一、網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建二、基礎(chǔ)回扣考點1：微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1培養(yǎng)基及其種類(1)成分：包含碳源、氮源、水分、無機(jī)鹽(有些微生物還需在培養(yǎng)基中額外補充生長因子)。(2)制備：計算稱量溶化滅菌倒平板。(3)種類劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑 (如瓊脂)觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)、菌種保藏用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微

2、生物2微生物的純化培養(yǎng)的方法(1)平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落。(2)稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。3微生物的分離和計數(shù)(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。測定微生物數(shù)量的常用方法統(tǒng)計菌落數(shù)目公式：每克樣品中菌株數(shù)(CV)M或顯微鏡直接計數(shù)。過程：土壤取樣樣品的稀釋微生物的

3、培養(yǎng)與觀察。設(shè)置重復(fù)組與對照組a設(shè)置重復(fù)組統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時，要至少涂布3個平板作重復(fù)組，增強(qiáng)實驗結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性。b設(shè)置對照組判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染時，需將未接種的培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基同時進(jìn)行培養(yǎng)；判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用時，需將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對比得出結(jié)論。(2)分解纖維素的微生物的分離實驗原理即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。實驗流程：土壤取樣梯度稀釋挑選菌落4測定微生物數(shù)量的方法(1)直接計數(shù)法：常用的是顯微鏡直接計數(shù)。(2)間接計數(shù)法：常用的是稀釋涂布平板計數(shù)法?？键c2：酶的應(yīng)用1直接使用酶、固定化

4、酶和固定化細(xì)胞的比較直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞制作方法化學(xué)結(jié)合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是催化反應(yīng)單一或多種單一一系列反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)缺點對環(huán)境條件非常敏感，易失活；難回收，成本高，影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列酶促反應(yīng)反應(yīng)物不易與酶接近，尤其是大分子物質(zhì)，反應(yīng)效率下降優(yōu)點催化效率高、耗能低、低污染既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；可以重復(fù)利用成本低、操作容易2酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用(1)加酶洗衣粉中酶制劑的種類與功效加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖

5、維素酶，其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子的物質(zhì)，使洗衣粉具有更好的去污能力。(2)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用在果汁生產(chǎn)中，果膠不僅會影響出汁率，還會使果汁混濁。果膠酶能夠分解果膠，將其變成可溶性的半乳糖醛酸，使渾濁的果汁變澄清?？键c3：生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用1果酒、果醋制作的注意事項(1)材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前應(yīng)先沖洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會

6、。(2)防止發(fā)酵液被污染需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮，因為操作的每一步都可能混入雜菌。為避免雜菌污染：榨汁機(jī)要洗凈并晾干，發(fā)酵裝置要洗凈并用70%的酒精消毒；若用簡易的發(fā)酵裝置，每隔一定時間排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。(3)控制發(fā)酵條件果酒果醋溫度20左右，最適合繁殖；1825，酒精發(fā)酵3035，最適合生長氧氣前期通O2，然后控制無O2氧氣充足其他時間：1012天；pH：5.06.0時間：約78天2.腐乳制作的注意事項(1)影響腐乳品質(zhì)的條件：水、鹽、酒、溫度、發(fā)酵時間等。水的控制：含水量約70%，用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。鹽的控制：鹽濃度過高，會影響腐乳的口味；濃

7、度過低，腐乳易腐敗變質(zhì)。酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量過高，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗。溫度的控制：溫度為1518，適合毛霉生長。發(fā)酵時間控制在6個月左右。(2)防止雜菌污染用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作要迅速小心。加放鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。3泡菜制作的注意事項(1)泡菜壇的選擇：選擇氣密性好的泡菜壇。用水封閉壇口使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕，這是最簡易的造成無氧環(huán)境的方法。這樣，壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵。如不封閉，則會有許多需氧菌生長，蔬菜會腐爛。(

8、2)腌制條件的控制：腌制過程中要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。發(fā)酵時間受到溫度的影響：1820，腌制15天左右。溫度高，時間短一些。溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時間過短，都容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。4.生物成分提取物質(zhì)方法原理步驟血紅蛋白凝膠色譜法根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小樣品處理粗分離純化純度鑒定電泳法根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的大小、形狀的不同玫瑰精油水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來水蒸氣蒸餾，分離油層(加 NaCl) 除水過濾橘皮精油壓榨法通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗壓榨、過濾、靜置再次過濾胡蘿卜素萃取法使提取

9、物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物粉碎、干燥萃取、過濾濃縮考點4：DNA和血紅蛋白的提取和分離1DNA粗提取與鑒定(1)哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，不適于作為DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。(2)實驗過程中兩次用到蒸餾水：第一次目的是使成熟的雞血細(xì)胞漲破，釋放出DNA；第二次目的是稀釋NaCl溶液，使DNA析出。(3)鑒定DNA：加入二苯胺試劑并沸水浴加熱，觀察是否出現(xiàn)藍(lán)色。2血紅蛋白的提取和分離操作程序(1)樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。(2)粗分離透析：除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)。(3)純化：用凝膠色譜法對血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。(4)純

10、度鑒定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳方法，來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量。三、考題預(yù)測1(2013山東師大附中高三模擬)下面是與植物芳香油的提取相關(guān)的問題，請回答。(1)玫瑰精油的提取可使用左圖所示裝置，這種方法叫_法；蒸餾時收集的蒸餾液_(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油。(2)橘皮精油提取的原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用_法提取橘皮精油。(3)胡蘿卜素是_色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的是_法，加熱時應(yīng)該注意控制_，一般情況下，提取胡蘿卜素時，提取效率與原料顆粒的含水量成_比。(4)將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定，右上圖為鑒定結(jié)果示意圖，請據(jù)圖回答：A、B、C、D四點中，屬于

11、標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點是_。2(2013海淀區(qū)高三質(zhì)檢)常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精但對酒精的耐受能力較差。下面是利用木糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精的釀酒酵母的培育過程，請分析回答下列問題：(1)將自然界中采集到的葡萄帶回實驗室，用_將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，瓶中的液體經(jīng)適當(dāng)稀釋后，接種于固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)，獲得各種菌落。(2)將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中，無氧條件下培養(yǎng)一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌_。從存活的酵母菌提取DNA，從中獲取目的基因并用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增。這里目的基因是指控制_合成的基因。

12、(3)將目的基因連接到一種穿梭質(zhì)粒上。該質(zhì)粒既含有大腸桿菌的復(fù)制起點pMBlori，也含有酵母菌復(fù)制起點ARS，還具有兩種標(biāo)記基因，即氨芐青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。你認(rèn)為這種質(zhì)粒的特點是_ 。(4)大腸桿菌被該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化后，應(yīng)接種于含_的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。將質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌時，由于氨芐青霉素不能抑制酵母菌繁殖，應(yīng)選擇缺乏_能力的釀酒酵母作為受體菌。(5)對轉(zhuǎn)基因釀酒酵母發(fā)酵能力進(jìn)行測試，結(jié)果如上圖所示，據(jù)圖分析，將轉(zhuǎn)基因釀酒酵母接種在以_為碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵能力測試，最初培養(yǎng)基中的葡萄糖被快速消耗，隨著發(fā)酵繼續(xù)進(jìn)行，釀酒酵母能夠_，說明所需菌株培育成功。3(12分)(2013北京崇文一

13、模)請回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題。(1)從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于_；它的同化作用類型是_。(2)下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。成 分含 量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g顯色劑0.2 g瓊脂12.0 g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基(選擇、鑒別)。該培養(yǎng)基中的碳源是_。(3)培養(yǎng)大腸桿菌時，常用的接種方法是平板劃線法和_。為防止雜菌污染需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_。(4)現(xiàn)有一升水樣，用無菌吸管吸取1 mL水樣至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度。各取0.1 m

14、L已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_。(5)以下微生物發(fā)酵生產(chǎn)特定產(chǎn)物時，所利用主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌相同的是_。A制作果酒 B由果酒制作果醋C制作泡菜 D制作腐乳(6)利用培養(yǎng)基不僅可以分離培養(yǎng)微生物，也可以進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。與微生物培養(yǎng)明顯不同的是，用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要加入_。4.下面是某研究小組開展的“豬血漿某白蛋白的提取及分子量測定”研究，請協(xié)助完成有關(guān)問題：材料儀器：新鮮豬血、低速冷凍離心機(jī)、透析袋、電泳儀等?；瘜W(xué)試劑：pH為7.4的緩沖液、檸檬酸鈉、奈氏試劑(與NH反應(yīng)出現(xiàn)黃色或紅棕色沉淀

15、)、飽和(NH4)2SO4溶液、生理鹽水等。實驗步驟：(1)樣品獲?。合蛐迈r豬血中加入_，靜置一段時間后取上層血漿。(2)鹽析法粗提蛋白質(zhì)：向血漿中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液，使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到50%，充分混合后靜置、離心，取沉淀物。向沉淀物中加入適量生理鹽水使之溶解，再向其中加入一定體積的飽和(NH4)2SO4溶液，使(NH4)2SO4的濃度達(dá)到33%，充分混合后靜置、離心，取沉淀物。重復(fù)步驟、23次，最后用生理鹽水將沉淀溶解即得粗提品。鹽析粗提“血漿某白蛋白”的主要原理是_，重復(fù)步驟、的主要目的是_。(3)透析除鹽：將粗提品裝入透析袋，以pH為7.4的緩沖液作透析

16、液，每隔4 h更換一次透析液，每次更換前利用奈氏試劑檢測透析液中NH的量。利用緩沖液作透析液的目的是_。檢測中，若觀察到透析液_時，即可終止透析。(4)凝膠色譜法分離：透析后的樣品經(jīng)凝膠柱洗脫，獲得純凈血漿某白蛋白樣品。(5)分子量測定：化學(xué)物質(zhì)SDS能使蛋白質(zhì)變性，解聚成單條肽鏈。在聚丙烯酰胺凝膠電泳中加入一定量的SDS，電泳遷移率完全取決于肽鏈的分子大小。下圖為本實驗中用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血漿某白蛋白的結(jié)果。根據(jù)電泳結(jié)果，某同學(xué)得出“提取的血漿某白蛋白有兩條肽鏈”的結(jié)論，這種說法可靠嗎？理由是_。5.(2013.北京市宣武區(qū)第一次質(zhì)量檢測)植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法，過程如

17、下圖所示，回答相應(yīng)的問題。(1)為了獲得脫毒植株，外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織，其原因是_。(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加植物激素，其目的是誘導(dǎo)外植體_。(3)在生產(chǎn)實踐中為獲得大量的細(xì)胞產(chǎn)物，如紫杉醇，可將_放入液體培養(yǎng)基中，經(jīng)機(jī)械作用分散成單個細(xì)胞，制備成細(xì)胞浮液，再經(jīng)過_即可獲得大量細(xì)胞。(4)組織培養(yǎng)過程需要植物生長和繁殖的最適條件，否則在光學(xué)顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_異常 ，進(jìn)而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。(5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)不僅應(yīng)用于花卉和果樹的快速大量繁殖以及脫毒植株的獲取，還廣泛用于_、_、_等育種過程中。 答案與解析1【解析】(1)玫瑰精

18、油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，揮發(fā)性較強(qiáng)，能隨水蒸氣一同蒸餾，將玫瑰精油給帶出來；收集的蒸餾液是玫瑰精油和水的混合物，只需向混合液中加入NaCl，增加鹽濃度，就會出現(xiàn)明顯的分層，用分液漏斗將其分開。(2)橘皮精油提取時易發(fā)生焦糊，一般采取壓榨法。(3)胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑，由于胡蘿卜素的水溶性和揮發(fā)性差，因而不能用蒸餾法提?。挥捎诤}卜素的熔點高，因而不能用壓榨法提取易采取萃取的方法提?。惠腿〉臏囟群蜁r間會影響萃取的效果，一般萃取時間長，溫度高，需要萃取的胡蘿卜素就能夠充分溶解，效果好。萃取前要對胡蘿卜素進(jìn)行干燥和粉碎，這說明原料顆粒含水越高，則萃取的效率

19、就越低。(4)提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定時采取的是對照點樣：A、D點點標(biāo)準(zhǔn)樣品，B、C點點提取樣品?！敬鸢浮?1)蒸餾不是(2)壓榨(3)橘黃萃取溫度和時間反(4) AD2【解析】(1)為了避免培養(yǎng)的微生物中有其他雜菌的感染，應(yīng)該將葡萄用無菌水進(jìn)行沖洗。(2)由題干信息知“木糖為唯一碳源”，酵母菌的死亡與此有關(guān)，而存活的酵母菌的核DNA將控制與木糖分解有關(guān)的酶的合成。(3)此質(zhì)粒含有的復(fù)制起點有大腸桿菌的復(fù)制起點pMBlori和酵母菌復(fù)制起點ARS，這說明目的基因可在兩種細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制。(4)由于氨芐青霉素對大腸桿菌具有抑殺作用，因此對穿梭質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的大腸桿菌進(jìn)行篩選時應(yīng)該使用含氨芐青

20、霉素的培養(yǎng)基，如果大腸桿菌能存活，說明轉(zhuǎn)化成功；又知氨芐青霉素不能抑制酵母菌繁殖，因此對酵母菌進(jìn)行篩選時應(yīng)用缺乏尿嘧啶合成能力的培養(yǎng)基培養(yǎng)，結(jié)果合成了尿嘧啶，說明轉(zhuǎn)化成功。(5)由坐標(biāo)曲線知酵母菌對葡萄糖與木糖的利用情況不同，最初時利用的葡萄糖多于木糖，由此斷定接種的碳源應(yīng)該同時含有葡萄糖、木糖；發(fā)酵成功，說明釀酒酵母能夠不斷的利用木糖進(jìn)行發(fā)酵且發(fā)酵產(chǎn)物乙醇對酵母菌無傷害?！敬鸢浮?1)無菌水(2)不能利用木糖發(fā)酵(或缺乏木糖發(fā)酵途徑)木糖發(fā)酵有關(guān)的酶(3)既可在大腸桿菌細(xì)胞中復(fù)制，也可在釀酒酵母細(xì)胞中復(fù)制(4)氨芐青霉素尿嘧啶合成(5)葡萄糖和木糖利用木糖產(chǎn)生酒精，并且酒精濃度升高對木糖發(fā)酵

21、無明顯影響3.【解析】(1)大腸桿菌不能制造有機(jī)物，必須以現(xiàn)成的有機(jī)物來合成組成自身的物質(zhì)，屬于異養(yǎng)型生物，在生態(tài)系統(tǒng)中主要分解有機(jī)物，屬于分解者。(2)根據(jù)表中培養(yǎng)基的組成可看出，該培養(yǎng)基中的碳源是乳糖、蔗糖(蛋白胨)，由于在培養(yǎng)基中添加了顯色劑，可判斷此培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。(3)培養(yǎng)大腸桿菌等微生物時，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。為防止雜菌污染需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。(4)根據(jù)公式計算：每升原水樣中大腸桿菌數(shù)(555657)30.11031035.6108。(5)制作果酒用到的微生物是酵母菌，是真核生物；制作果醋和制作泡菜分別用的微生物是醋酸菌和乳酸菌，二者都是原核生物；制作腐乳用到的微生物是霉菌，屬于真核生物；而大腸桿菌屬于原核生物。(6)植物組織培養(yǎng)與微生物培養(yǎng)明顯不同的就是，組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基