魚腥草制劑抗炎動物模型的建立及研究

1、魚腥草制劑抗炎動物模型的建立及研究    【摘要】  目的建立魚腥草制劑抗炎動物模型。方法耳根皮下注射制劑、小鼠耳二甲苯致炎、耳圓片稱重建立炎癥模型，檢驗魚腥草制劑的抗炎效果。結(jié)果二甲苯最佳致炎時間為1 h；魚腥草制劑在小鼠體內(nèi)作用約2 h時對致炎鼠療效最好；給藥次數(shù)為第6次時，小鼠耳腫脹度最??；以80 l/20 g的劑量給藥組腫脹度抑制率最大，建立了魚腥草制劑鼠耳腫脹法抗炎動物模型。結(jié)論魚腥草制劑鼠耳腫脹法抗炎動物模型可用于魚腥草制劑藥效研究。5種魚腥草制劑均有明顯的抗炎效果，其中8號制劑抗炎效果最好。論文論文參考網(wǎng) 【關(guān)鍵詞】 

2、魚腥草 動物模型 抗炎作用The Establishment of Animal Model and Studies on the Effect of Anti-inflammation of Houttuynia cordata ThunbZHANG Jian, WU Xian?jin, LU Hong?mei, QUAN Qing?li, ZHONG Na, TAN Yong?guang1.Huaihua College, Huaihua, Hunan 418008, China;2.Research Center for Modernization of Chinese Herbal M

3、edicine, Central South University, Changsha, Hunan 410083, ChinaAbstract:ObjectiveTo establish the animal model of the anti-inflammatory properties of Houttuynia cordata Thunb. MethodsTo make the inflammation model via injecting preparation into hypodermic，inducing mice ear edema by xylene，and ear w

4、afer-weighting.Then test the effects of anti-inflammation of Houttuynia cordata Thunb. ResultsThe best inducing mice ear edema time for xylene was 1h and the effect of anti-inflammation of the preparation reached the best after injected 2h. When the mouse had been injected with preparation for 6 tim

5、es, the degree of edema was the lowest. When the mouse had been dosed with 80 l/20 g, the degree of edema inhibition was the highest.The animal model of the anti-inflammatory properties of mice ear turgidity of Houttuynia cordata Thunb.preparation was established. ConclusionThe animal model of the a

6、nti-inflammation is an ideal model for studying Houttuynia cordata Thunb. The five kinds of Houttuynia cordata Thunb.preparations have obvious anti-inflammatory effect on mice in which the number eight was the best.Key words:Houttuynia cordata Thunb.；  Animal Model；  Anti-inflammatory effe

7、ct    魚腥草Houttuynia cordata Thunb.，別名為蕺菜、側(cè)耳根、臭根草，是三白草科蕺菜屬多年生草本植物，全草因有魚腥氣味而得名1,2。魚腥草含有多種營養(yǎng)及藥用成分，具有清熱解毒、利尿消腫、強身健體、抗輻射等功效，為藥食兩用的植物。現(xiàn)代藥學(xué)研究可知，魚腥草的主要藥用成分為魚腥草素（癸酰乙醛）、月桂醛、蒎浠、芳樟醇、蕺菜鹼、異槲皮苷、鉀鹽、黃酮類等。藥理實驗表現(xiàn)為抗菌、抗病毒和利尿作用3,4。    魚腥草很早就被用于中藥藥方，現(xiàn)被制成抗炎制劑。目前有從魚腥草的根、莖、葉等部位提取的各種注射液，由于不同部位制成的

8、注射液有效成分含量不同，因而抗炎效果不同。而對于同一部位提取的不同種魚腥草制劑，它們的抗炎效果也不同，關(guān)于這方面的研究尚未見報道。本實驗通過建立抗炎癥動物模型，對魚腥草不同制劑的抗炎作用進行分析，旨在探索魚腥草制劑的抗炎效果，為篩選優(yōu)良抗炎藥物提供依據(jù)。1  器材1.1  動物BALB/C純系小鼠，清潔級，由中山大學(xué)實驗動物中心提供（動物質(zhì)量合格證：粵檢證字2003A062號）。1.2  儀器微量進樣器（100，25 l，上海安亭微量進樣器廠），AL104型電子天平（梅特勒-托利儀器廠），打孔器（廣州市新風(fēng)工業(yè)公司）。1.3  試劑5種魚腥草制劑（由湖南

9、正清制藥集團有限公司提供），地塞米松磷酸鈉注射液（安陽九州藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號H41023673），氯化鈉注射液（湖南科倫制藥有限公司），二甲苯（分析純，湖南師大化學(xué)試劑廠），乙醚（分析純，長沙市國營延風(fēng)化學(xué)試劑廠）。2  方法2.1  二甲苯最佳致炎時間的確定隨機取8只小鼠，（20±2） g，雌性，雌雄各半，用100%乙醚麻醉后，以二甲苯20 l/只劑量快速推注至右耳前后兩面中心，每面10 l，任其自行浸潤擴散；左耳不做任何處理。觀察并計算耳腫脹程度隨時間的變化情況。2.2  魚腥草制劑最佳藥效時間的確定隨機取16只小鼠（20±2）g，分為

10、4組。第1組作為空白對照，致炎1h后斷頸處死，其余3組分別以80l/只劑量右耳根皮下注射給藥（正大青春寶魚腥草注射液，批號0405051），第2組末次給藥30 min后用二甲苯20 l/只劑量致炎，1 h后處死；第3組末次給藥1 h后致炎，1 h后處死；第4組末次給藥2 h后致炎，1 h后處死。剪下雙耳，用8 mm直徑打孔器在以耳三根血管交匯點為圓心位置處打下圓耳片5，電子天平稱重，確定魚腥草制劑最佳藥效時間。2.3  魚腥草制劑給藥次數(shù)的確定隨機取16只小鼠（20±2）g，分為4組、分別給藥1，2，4，6次，以80 ml/g劑量在右耳根皮下注射給藥（正大青春寶魚腥草注射液

11、，批號0405051），末次給藥2 h后用二甲苯20 l/只劑量致炎，1 h后斷頸處死，剪下雙耳，用8 mm直徑打孔器在同一部位打下圓耳片，電子天平稱重，確定魚腥草制劑的給藥次數(shù)。論文論文參考網(wǎng) 2.4  魚腥草制劑給藥劑量的確定隨機取25只小鼠（20±2）g，分成5組，分別以40，80，160，320 l/20 g不同劑量在右耳根皮下注射給藥（正大青春寶魚腥草注射液，批號 0405051），2次/d，共6次，陰性對照組以80 l/20 g劑量注射氯化鈉注射液6次，末次給藥 h后分別用二甲苯20 l/只致炎，1 h后斷頸處死，剪下雙耳，用8 mm直徑打孔器在同一部位打下圓耳

12、片，電子天平稱重，觀察不同劑量的藥效，確定給藥劑量6。2.5  魚腥草制劑藥效實驗取合格小鼠95只，分成7組，1到5組每組15只，陰性對照組、陽性對照組每組10只，第1到第5組小鼠右耳分別給以魚腥草5，6，7，8，9號制劑，陰性對照組為生理鹽水，陽性對照組為地塞米松注射液，給藥1次/12 h，連續(xù)3d。末次給藥1 h后二甲苯致炎，1 h后斷頸處死，剪下雙耳，用8 mm直徑打孔器打下耳圓片，電子天平稱重。以右耳重減去左耳重量之差（mg）為腫脹度評價藥效。3  結(jié)果3.1  確定二甲苯最佳致炎時間實驗二甲苯致炎1 min時小鼠出現(xiàn)瘙癢，耳充血及紅腫；1020 min時

13、耳紅腫嚴(yán)重；40 min時耳紅腫充血；60 min時耳充血。結(jié)果表明，致炎藥物在小鼠體內(nèi)作用4060 min左右時炎癥癥狀最明顯，致炎藥物作用1 h時腫脹度最大。結(jié)果見圖1。3.2  確定魚腥草制劑最佳藥效時間實驗結(jié)果顯示，魚腥草制劑有明顯抗炎效果；在致炎時間相同條件下，末次給藥2 h后致炎，小鼠耳腫脹度最小，說明魚腥草制劑在小鼠體內(nèi)作用約2 h時對致炎鼠耳的療效最好，表明魚腥草制劑在小鼠體內(nèi)最佳藥效時間為2 h。結(jié)合炎癥在小鼠體內(nèi)的時間的關(guān)系，確定末次給藥1 h后致炎，致炎后1 h后處死實驗鼠，測定實驗結(jié)果，這樣既能讓二甲苯在小鼠體內(nèi)充分作用，又能讓魚腥草制劑起到最大的抗炎效果。結(jié)

14、果見圖2。3.3  確定魚腥草制劑給藥次數(shù)的實驗結(jié)果見圖3。由圖3可見，隨著給藥次數(shù)增多，抗炎效果在個體中的差異越小而且小鼠耳腫脹度也隨之減??；當(dāng)給藥次數(shù)為6次時，小鼠耳腫脹度最小，因此確定給藥次數(shù)為6次（2次/d）。3.4  確定魚腥草制劑給藥劑量實驗不同劑量的魚腥草制劑的抗炎效果是不同的，其中劑量為80 l/20 g的給藥組腫脹度最小，說明此劑量應(yīng)是最佳藥效的給藥劑量，確定給藥劑量為80 l/20 g。結(jié)果見圖4。3.5  鼠耳腫脹法抗炎作用系列實驗確定二甲苯最佳致炎時間為1 h；魚腥草制劑在小鼠體內(nèi)作用約2 h后對致炎鼠耳療效最好；給藥次數(shù)為6次時，小鼠耳腫

15、脹度最??；以80 l/20 g的劑量給藥組腫脹度抑制率最大，建立了魚腥草制劑鼠耳腫脹法抗炎動物模型。    運用此動物模型對不同魚腥草制劑進行實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同的魚腥草制劑均有明顯的抗炎效果，其中8號制劑抗炎效果最好，5，9，6，7號制劑療效依次減弱，這說明8號魚腥草的有效抗炎成分含量最多，而其它的制劑因為含有不同量的有效成分，也有一定的抗炎效果。5種取自魚腥草同一部位不同干燥時間段的制劑抗炎效果是不同的，干燥時間的差異可能造成了它們抗炎效果的差異，8號魚腥草制劑是5種待測制劑中藥效最佳制劑。結(jié)果見表1。表1  不同制劑的抗炎效果（略）4 

16、討論    通過對小鼠耳腫脹時間、藥效與時間的關(guān)系、給藥劑量、給藥次數(shù)確定的探究，建立了魚腥草制劑鼠耳腫脹法抗炎動物模型。運用此抗炎動物模型，探討魚腥草制劑的抗炎效果，發(fā)現(xiàn)不同干燥程度的魚腥草制劑抗炎效果是不同的。8號制劑即干燥8d后的制劑抗炎效果最佳，其余4種5，9，6，7號的抗炎效果依次減弱，這可能是由于提取前處理過程不同所致，干燥8 d后再提取制劑應(yīng)是魚腥草干燥處理的最佳方案。    魚腥草制劑與傳統(tǒng)陽性抗炎藥物地塞米松比較，不同的魚腥草制劑均有明顯的抗炎效果，且抗炎效果因小鼠個體差異而不同。實驗表明，雄性個體較雌性對魚腥草制劑更為敏感。    魚腥草及其制劑，具有廣譜消炎、抗菌、抗病毒感染及增強動物機體免疫功能7，是一種極有開發(fā)價值的藥用植物，值得進一步研究。 【參考文獻】  1江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典M.上海：上?？萍汲霭嫔?，1986：1439.2戴偉鋒，楊國榮，周 強.魚腥草中總黃酮提取工藝考察J.云南化工，2006，33(1)：12. 3張 儉，伍賢進.魚腥草在家畜疾病防治上的應(yīng)