組織基因組DNA提取試劑盒磁珠法

1、組織基因組 DNA 提取試劑盒（磁珠法）使用說明書 （ Cat#Yu-TD02-1）【產(chǎn)品介紹】組織基因組 DNA 提取試劑采用國內領先的專利技術合成的納米磁珠顆粒和 多次實驗優(yōu)化的緩沖液體系， 能從樣品中分離純化高質量 DNA 。在一定條件下， 磁珠表面修飾的基團高效吸附目的DNA ，而當條件改變時，磁珠釋放吸附的DNA ，達到快速分離純化 DNA 的目的。整個過程安全、無毒、便利，提取的 DNA 質量穩(wěn)定、 純度高。純化后的 DNA 適用于多種后續(xù)實驗。 本試劑盒可以從 少量動物組織中分離純化出高質量、高濃度的 DNA ?！井a(chǎn)品特點】1. 效率高： DNA 提取得率高，操作簡便。2. 安全

2、、無毒害： 整個操作過程無需使用苯酚、氯仿等有毒物質，提取環(huán)境更 加安全。3. 高純度： OD260/230在 1.5左右， OD260/280 在 2.0左右?？芍苯佑糜诟鞣N 分子生物學實驗?！驹噭┖薪M成】試劑盒組成數(shù)量保存條件裂解吸附液50mL× 1 瓶室溫避光保存Buffer AW112mL×1 瓶室溫避光保存Buffer AW29mL×1 瓶室溫保存洗脫液5mL× 1 瓶室溫保存磁珠0.5mL×1 管室溫保存使用說明書1份【規(guī)格】 50T/盒 【自備試劑】 無水乙醇，異丙醇【貯藏與有效期】裂解吸附液和 Buffer AW1 必須室溫（

3、15-25）避光保存；磁珠室溫保存； 其他所有試劑室溫保存，有效期為 1 年?！咀⒁馐马棥?、Buffer AW1 使用前，加入 18mL 無水乙醇，混勻，使乙醇含量為 60%。2、Buffer AW2 使用前，加入 21mL 無水乙醇，混勻，使乙醇含量為 70%。3、磁珠使用前必須充分混勻。4、組織最好置于組織核酸( DNA/RNA )保存液( Cat#Yu-TP01)或液氮中保存。 【操作步驟】1、樣本的處理1.1、液氮中保存的組織 將組織在液氮中磨成粉末后，使液氮充分揮發(fā)。再以 50-100mg 組織中加入 1mL 裂解吸附液，充分研磨。以下進入步驟 2。1.2、組織保存液中保存的樣本

4、取出在組織保存液中保存的組織，加入 1mL 無 水乙醇洗滌組織兩次。再以 50-100mg組織中加入 1mL 裂解吸附液，充分研磨。 以下進入步驟 2。2、吸取 400L 研磨后的裂解吸附液轉入 1.5mL 的 EP管中，加入 5L 蛋白酶 K， 601500rpm10分鐘。3、取出 EP管，加入 250L 異丙醇和 10L 混勻的磁珠，閉蓋，充分混勻。室溫 1500rpm 振蕩 10min。4、取出 EP管，瞬時離心，將 EP管放于磁力架上，吸附磁珠 4 分鐘。5、在磁力架上，打開 EP 管蓋，吸棄液體，保留磁珠。6、加入 600L Buffer AW1，閉蓋。從磁力架上取下 EP 管，充分

5、混勻使磁珠完 全分散至洗液中。注：可以在漩渦振蕩儀上 3000rpm振蕩 20秒，使 EP 管壁上的磁珠完全分散至 洗液中。7、將 EP 管放回磁力架，吸附磁珠 3 分鐘至液體清澈 (吸附磁珠 2 分鐘后，顛 倒磁力架 3次，使 EP 管蓋上殘留的磁珠被充分回收) 。打開 EP管蓋子，吸棄液 體，保留磁珠(需吸干 EP管底和管蓋中的殘留液體) 。 注：由于各個實驗室磁力架磁力不盡相同，吸附時間可以延長，直至液體清澈。8、加入 600L Buffer AW2，閉蓋。從磁力架上取下 EP 管，充分混勻使磁珠完 全分散至洗液中。注：可以在漩渦振蕩儀上 3000rpm振蕩 20秒，使 EP 管壁上的磁

6、珠完全分散至 洗液中。9、將 EP 管放回磁力架，吸附磁珠 2 分鐘至液體清澈 （吸附磁珠 1 分鐘后，顛 倒磁力架 3次，使EP管蓋上殘留的磁珠被充分回收） 。打開 EP管蓋子，吸棄液 體，保留磁珠（需吸干 EP管底和管蓋中的殘留液體） 。 注：由于各個實驗室磁力架磁力不盡相同，吸附時間可以延長，直至液體清澈。10、加入 600L 無水乙醇，閉蓋。從磁力架上取下 EP 管，充分混勻使磁珠完全 分散至無水乙醇中。注：可以在漩渦振蕩儀上 3000rpm振蕩 20秒，使 EP管壁上的磁珠完全分散至 無水乙醇中。11、將 EP管放回磁力架，吸附磁珠 1 分鐘至液體清澈 （吸附磁珠 30秒后，顛 倒磁

7、力架 3次，使EP管蓋上殘留的磁珠被充分回收） 。打開 EP管蓋子，吸棄液 體，保留磁珠（需吸干 EP管底和管蓋中的殘留液體） 。注：由于各個實驗室磁力架磁力不盡相同，吸附時間可以延長，直至液體清澈。12、開蓋， 37金屬浴晾干 3 分鐘。13、在 EP 管中加入 50-100 L 洗脫液，充分吹打混勻磁珠。閉蓋， 50 金屬浴 1500rpm 振蕩孵育 5min。注：洗脫液的量可以根據(jù)需要調整。 50振蕩洗脫后不能離心收集磁珠， 離心會導致 EP 管中的殘留物進入洗脫液，從而抑制后續(xù)實驗。14、將 EP管放入磁力架上，吸附磁珠 2 分鐘至液體清澈。打開蓋子，吸取洗脫 液轉移至新的 EP 管（RNase-free）中。洗脫液即可直接用于下游實驗， 也可 -80 保