LCMS譜圖的判斷及分析方法的選擇

1、LCMS譜圖的判斷及分析方法的確定、LCMS®圖的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及MS棒圖判斷：a）LCMS格譜圖的標(biāo)準(zhǔn)：1、UV譜圖主峰的保留時間應(yīng)大于2To（進(jìn)樣峰時間），并小于全部運(yùn)行時間的 4/5 ;2、 UV譜圖的吸收波長以客戶指定波長為準(zhǔn)（一般為220nm，弱紫外樣品（紫外吸 收在220nm是波谷，MS信號相對較強(qiáng)）可用ELSD譜圖交貨或以客戶要求為準(zhǔn)；3、UV譜圖主峰吸收一般應(yīng)高于100mau對信噪比良好的樣品，可以適當(dāng)降低峰 高要求到高于50mau當(dāng)所有可見的UV峰都積分后仍合格的，可認(rèn)為合格；4、 UV譜圖中，主峰理論塔板數(shù)在 10000以上（即峰寬小于0.5分鐘），峰對稱因 子應(yīng)在 0

2、.9-1.2 （即對稱性較好）。5、MS譜圖應(yīng)保證準(zhǔn)分子離子峰可見，其它峰是二聚峰，以及合理的碎片或加合峰。6、 MS范圍：通常在100-1000之間，對分子量很小或很大的樣品， 應(yīng)調(diào)整MS范圍, 保證最大值超過 2M+2，3 最小值小于 M/2。7、紫外積分超過2%勺雜質(zhì)，如果雜質(zhì)的 MS和主峰一致，需檢查結(jié)構(gòu)是否有異構(gòu) 體。如客戶確認(rèn)有異構(gòu)體并同意可以合并純度交貨，方能判斷合格，否則應(yīng)重 新分離或用其它手段如NMR!定結(jié)構(gòu)。8、紫外無積分或積分結(jié)果小于 1%的色譜峰，在 TIC 中峰高不得超過主峰的 1/2。（特殊情況除外：難電離樣品；Agile ntLCMSTIC中雜質(zhì)絕對吸收小于500

3、00b）MS棒圖的判斷（正離子檢測）：1、 MS譜圖中分子離子峰的值應(yīng)為：EM+1（Exact Mass）（即M+H +）2、常見的合理的加合離子有： M+Na +、M+K+、2M+H+、2M+Na+、M/2+H+3、加有緩沖溶液或溶劑的體系還可引進(jìn)M+X+ （X=§劑或緩沖溶液中的陽離子）女口：用堿性體系方法分析時常見的加合離子有：M+NH+ （我們的堿性體系用的 銨鹽緩沖溶液） （用島津儀器分析時?？梢姷降募雍想x子還有： M+Na+X +）4、若有小于分子離子峰的碎片離子，要根據(jù)化合物結(jié)構(gòu)來判斷是否是其合理的碎片，碎片M所出碎片峰的MS值應(yīng)為M或M+2（出M還是M+2由斷裂機(jī)理決

4、定）5、同位素效應(yīng)：一般帶 Cl 或 Br 的樣品，棒圖中同位素效應(yīng)比較明顯（見附圖） ；6、若棒圖中有不能解釋的碎片或加合離子、且豐度較高，則需要進(jìn)行NMR僉證c）MS棒圖的判斷（負(fù)離子檢測）：1、MS譜圖中分子離子峰的值應(yīng)為：EM-1 （Exact Mass）（即M-H-）2、加有緩沖溶液或溶劑的體系還可引進(jìn)M+X - （X=§劑或緩沖溶液中的陰離子）3、其他常見合理加合離子及碎片離子同理正離子檢測、LCMS分析方法的分類及其適用范圍（反相色譜）：a）從流動相體系劃分，可分為：酸性方法和堿性方法（方法確定的原理：先根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)算出其ClogP的值來大致確定其適用的分析方法，若

5、計算出的方法不合適，再根據(jù)其譜圖的具體情況進(jìn)行修改。）一般來說：酸性方法適用于大部分化合物；常規(guī)樣品通常用10-80AB極性較小的樣品可以考慮用30-90AB或50-100AB極性較大的樣品可以選擇 0-30AB或0-60AB 堿性方法適用的情況為：1、極性很大，用酸性方法（0-30AB時出峰仍太靠前；2、用酸性方法時出峰形狀很寬，對稱性不好；3、用酸性方法時目標(biāo)物在進(jìn)樣峰的位置即被沖出，形成如下圖所示的雙峰；4、有些物質(zhì)在酸性體系易成鹽、不穩(wěn)定，也會形成如上圖所示的情況5、負(fù)離子檢測一般在堿性體系中進(jìn)行b）從質(zhì)譜（MSD的檢測離子的極性劃分，可分為：正離子方法和負(fù)離子方法一般來說：正離子方法適用于大部分化合物； 而羧酸、醛以及羧醛等結(jié)構(gòu)的樣品一 般在正離子方法中電離不好，則需換用負(fù)離子方法來進(jìn)行分析。c）從大氣壓電離質(zhì)譜（API-MS電離模式劃分，可分為：（氣動輔助）電噴霧（API-ES、 大氣壓化學(xué)電離（APC）、大氣壓光致電離（APP）一般來說：ESI源適合于大部分有極性的、含雜原子的化合物；如果樣品在ESI源下電離很弱（紫