熒光顯微鏡操作手冊(cè)

1、熒光顯微鏡操作手冊(cè)O(shè)lympusBX51物鏡：4 ×0.16（無 DIC）10×0.4020×0.7540× 1.00oil100×1.40oil熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤：1. WU藍(lán)2. WIB綠（長通）3. WIBA 綠（帶通）4. WIG 紅5. CFP 青6. YFP 黃操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下）DIC 觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（ “”為開， “”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺(tái)上，用樣品夾夾好3.將起偏器、檢偏器、 DIC 棱鏡推入光路，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置， DIC 棱鏡應(yīng)與相應(yīng)的物鏡倍數(shù)相匹配4.先選用低倍物鏡（

2、“ 10×”）5.調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6.換到高倍鏡頭，觀察樣品7.DIC 觀察時(shí)，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈電源開關(guān)3. 將樣品置于載物臺(tái)上，用樣品夾夾好4. 檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外5. 將熒光光路 shutter 打開（“”為開， “”為關(guān)） ，需保護(hù)樣品時(shí)關(guān)閉 shutter6. 光路選擇拉桿推至最里邊7. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置8. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度9. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，10. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品11. 拍照時(shí)光路選擇拉

3、桿完全拉出普通明場觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（ “”為開， “”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺(tái)上，用樣品夾夾好3.起偏器、檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置， DIC 棱鏡撥到明場（ BF）位置4.先選用低倍物鏡（ “ 4×”）5.調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6.依次換到高倍鏡頭，觀察樣品7.光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次開啟）2. 將透射光調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)3. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，

4、關(guān)閉軟件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況OlympusIX71物鏡：物鏡倍數(shù)相差環(huán)4 ×0.13PHL10× 0.30PH120× 0.45PH140× 0.60PH260× 1.35 oil（無相差）熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： 1. WU藍(lán)2. WIB綠（長通）3.WIBA綠（帶通）4.WIGA紅5.CFP6.YFP操作步驟：相差觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（ “”為開， “”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺(tái)上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4.從低倍鏡開始觀察，調(diào)節(jié)到與鏡頭相匹配的相差

5、環(huán)，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)節(jié)焦距，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡， （注意調(diào)節(jié)相差環(huán)）觀察樣品7. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈開關(guān)3. 將樣品置于載物臺(tái)上4.將熒光光路shutter 打開（“”為開， “”為關(guān)） ，需保護(hù)樣品時(shí)關(guān)閉shutter5. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置6. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置7. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度8. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，9. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品10. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置普通明場觀察：1. 打開明場電

6、源開關(guān)（ “”為開， “”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺(tái)上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4.從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（BF ）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡，觀察樣品7. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次開啟）2. 將透射光強(qiáng)調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān)4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）7. 關(guān)閉

7、電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況Olympus SZX16物鏡：1×變倍：0.711.5熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤：UVGFPHQRFP2藍(lán)綠紅操作步驟：明場觀察 ：1. 將樣品置于載物臺(tái)上2. 推入光路選擇拉桿，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到空位3. 選擇合適的光源冷光源觀察使用不透明的底板（黑或白） ，打開環(huán)形光電源開關(guān)（ “”為開，“”為關(guān)），調(diào)節(jié)光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品底光源觀察使用透明玻璃底板，打開底座電源開關(guān)（ “”為開， “”為關(guān)） ，將 LBD 濾片推入光路，調(diào)節(jié)反光鏡方向、對(duì)比度和光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品4. 拍照時(shí)將光路選擇拉桿拉出熒光觀察：1

8、. 將樣品置于載物臺(tái)上2. 一般選擇黑色不透明底板3. 打開汞燈電源開關(guān)4. 熒光光路擋板推出5. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置6. 找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比7. 觀察樣品8. 拍照時(shí)將光路選擇拉桿拉出關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源 （注意： 汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉， 關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次開啟）2. 將明場光強(qiáng)調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)3. 取出樣品，將變倍比調(diào)到最小4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況軟件應(yīng)用1.雙擊打開 DP Controller軟件2.點(diǎn)擊預(yù)覽鍵，選擇i

9、mage size( 一般 1360 X 1024) 、 objective、 ISO sensitivity(明場拍照選擇 ISO200，熒光拍照選擇 ISO400) 、 exposure mode(一般選擇 manual) ，調(diào)節(jié)exposure time3.調(diào)節(jié)黑 / 白平衡（明場拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點(diǎn)擊 color 面板，點(diǎn)擊 onetouch 在圖片背景位置選個(gè)小框，軟件自動(dòng)做好平衡4.若需添加標(biāo)尺，點(diǎn)擊scale 面板，選中 show scale ，選擇標(biāo)尺顯示模式和長度，選中free size，改變標(biāo)尺長度5. 若需調(diào)整圖象色階，點(diǎn)擊 level 面板，拖動(dòng)小滑塊調(diào)整色階，可以改變圖象對(duì)比度6. 點(diǎn)擊 capture 面板，還可再次調(diào)節(jié)曝光時(shí)間、圖象亮度及對(duì)比度。點(diǎn)擊拍照鍵，獲取圖象7. 此時(shí)彈出 DP manager 軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤上8.若需將不同通道圖象合成，可點(diǎn)擊DP manager 軟件中 image image composition，選擇需合成圖片的名稱，點(diǎn)擊apply ， merging image 生成，保存合成圖象9.若需拍攝 Timelapse, 點(diǎn)擊 Timelapse/Movie 面板， 選擇拍攝模式， 選擇拍攝時(shí)間、 間隔時(shí)間等參數(shù)，再點(diǎn)擊 ca