化痰降氣膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾病治療作用的內(nèi)在機(jī)理研究

1、化痰降氣膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾病治療作用的內(nèi)在機(jī)理研究         08-06-07 15:26:00     編輯：studa20          作者：李澤庚， 張杰根， 彭波， 張念志， 韓明向【關(guān)鍵詞】  化痰降氣膠囊；,慢性阻塞性肺疾??；,腫瘤壞死因子；,白三烯；,大鼠摘要：目的：探討化痰降氣膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性慢性阻塞性肺疾病治療作用的內(nèi)在機(jī)理。方法：采用經(jīng)鼻腔注入肺炎

2、克雷伯桿菌反復(fù)感染復(fù)制慢性阻塞性肺疾病模型大鼠，實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、模型組和化痰降氣膠囊組。并用酶聯(lián)吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)方法，測定各組大鼠支氣管灌洗液腫瘤壞死因子（TNF）、白三烯（LTB4）水平。結(jié)果：模型組支氣管灌洗液TNF，LTB4水平較正常組顯著升高(P0.01)；化痰降氣膠囊組支氣管灌洗液TNF，LTB4水平均明顯降低(P0.05)。結(jié)論：化痰降氣膠囊可降低TNF，LTB4的含量，控制慢性炎癥反應(yīng)。關(guān)鍵詞：化痰降氣膠囊；  慢性阻塞性肺疾??；  腫瘤壞死因子；  白三烯；  大鼠Effect on the Level of TNF, LTB4 i

3、n Bronchoalveolar Lavage Fluid of Model Rats with Chronic Obstructive Pulmonary Disease by Huatanjiangqi CapsuleAbstract:Objective:To observe the effects of Huatanjiangqi Capsule, a combination of traditional Chinese medical herbs on the changes of TNF,LTB4 in Bronchoalveolar Lavage Fluid, in order

4、to provide basis for the explanation of the mechanisms of Huatanjiangqi Capsule and discover it's pathophysiological characters.Methods:According to the principle of random, 36 Wistar rats(male)were divided into control group, model group and Huatanjiangqi Capsule group. model group was establis

5、hed by repeatedly intranasal infecting of klebsiella pneumoniae twice a week. TNF，LTB4 in bronchoalvolar lavage fluid of three groups were measured by ELISA.Results:TNF,LTB4 in bronchoalveolar lavage fluid of model group were significantly higher than in control group(P0.01), and the level of TNF,LT

6、B4 of Huatanjiangqi Capsule group were lower than those of the model group(P0.05).Conclusion:Huatanjiangqi Capsule could relieve the clinical symptoms and major injury of lung induced by superexcretion of inflame cytokine through dereasing the levels of TNF,LTB4 in the rats with Chronic Obstructive

7、Pulmonary Disease.Key words:Huatanjiangqi Capsule;  Chronic Obstructive Pulmonary Disease(COPD);  Tumor Necrosis Factor alpha(TNF);  Leukotrienes B4(LTB4);  Rats    化痰降氣膠囊系經(jīng)多年臨床實(shí)踐篩選出的治療慢性支氣管炎驗(yàn)方。 腫瘤壞死因子（TNF）、白三烯（LTB4）是參與炎癥反應(yīng)的主要細(xì)胞因子之一，在慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用1。為了進(jìn)

8、一步探討化痰降氣膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾病的作用機(jī)理，我們觀察了其對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠支氣管灌洗液(BALF) TNF，LTB4水平的影響。1  材料和方法1.1  細(xì)菌肺炎克雷伯桿菌由安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院微生物室提供，是從COPD患者痰液中分離、鑒定，使用前接種于普通牛肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，置37恒溫箱內(nèi)增殖48 h，用無菌生理鹽水稀釋適當(dāng)濃度并計(jì)數(shù)為6×108 CFU/ml(經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定)。1.2  藥物化痰降氣膠囊由紫蘇子、白芥子、金沸草、白前等中藥組成，由安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院制劑室提供。1.3  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組清潔級(jí)雄性Wistar大鼠3

9、6只，質(zhì)量為(200±20) g，河南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物飼養(yǎng)室為清潔級(jí)，控制溫度(22±2)，正常飼養(yǎng)7 d后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為正常對(duì)照組(對(duì)照組)、慢性阻塞性肺疾病模型組(模型組)，化痰降氣膠囊組，每組12只。模型組：采用經(jīng)鼻腔注入肺炎克雷伯桿菌反復(fù)感染復(fù)制慢性阻塞性肺疾病模型，方法：經(jīng)鼻腔注入該菌菌液0.1 ml，2次/周，持續(xù)8周1；化痰降氣膠囊組：灌胃治療(劑量每鼠4粒/d，溶于1 ml生理鹽水中)，在大鼠經(jīng)鼻染菌滿4周時(shí)進(jìn)行；對(duì)照組：正常飼養(yǎng)，大鼠經(jīng)鼻腔注入常規(guī)培養(yǎng)液0.1 ml(不含菌)，2次/周，持續(xù)8周。1.4  觀察指標(biāo)與測試1.4.

10、1  支氣管灌洗大鼠用3%戊巴比妥鈉(30 mg/kg)腹腔麻醉后，迅速用器械分離氣管，用10 ml生理鹽水進(jìn)行在體肺泡灌洗，緩慢的經(jīng)氣道把液體注入肺臟，再回抽液體，如此反復(fù)進(jìn)行3次，最終回收量為6 ml，4 1 500 r/min離心5 min，提取上清液，20凍存待檢。離心細(xì)胞再用生理鹽水洗滌后，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板做細(xì)胞計(jì)數(shù)。1.4.2  指標(biāo)測定 TNF，LTB4試劑來自TPI.INC。TNF，LTB4測定采用ELISA法，均按說明書操作。1.5  統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)(±s)表示，組間比較用t檢驗(yàn)。應(yīng)用SPSS11.0軟件進(jìn)行處理。2 

11、結(jié)果2.1  支氣管灌洗液白細(xì)胞總數(shù)和分?jǐn)?shù)計(jì)數(shù)見表1。模型組BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于對(duì)照組(P0.01)，模型組BALF中巨噬細(xì)胞百分比雖低于對(duì)照組，但其絕對(duì)值(41.2×107 L)明顯高于對(duì)照組(15.1×107 L)；化痰降氣膠囊組BALF白細(xì)胞計(jì)數(shù)同對(duì)照組相比也有明顯差異，但其值同模型組相比則明顯下降。2.2  支氣管灌洗液LTB4,TNF的含量見表2。模型組BALF中LTB4，TNF含量明顯高于對(duì)照組(P0.01)；而化痰降氣膠囊組LTB4，TNF含量同模型組相比明顯下降，但與對(duì)照組比較仍有差異(P0.05)。表1  各組大鼠支氣管灌洗液白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類比較（略）與對(duì)照組比較，*P0.05，*P0.01；M：單核局噬細(xì)胞，N：中性粒細(xì)胞，L：淋巴細(xì)胞表2  各組大鼠支氣管灌洗液LTB4、TNF的含量比較（略）與對(duì)照組比較，*P0.05，*P0.013  討論目前普遍認(rèn)為，COPD是以氣道、肺實(shí)質(zhì)和肺血管的慢性炎癥為特征，在肺的不同部位有肺