東北紅豆杉插穗生根試驗-李京文

1、北京林業(yè)大學(xué)Beijing Forestry University北京林業(yè)大學(xué) 畢業(yè)論文（設(shè)計）學(xué) 院 繼續(xù)教育學(xué)院 所屬教學(xué)站點 遼寧函授站（分院） 專 業(yè) 名 稱 園 林 學(xué) 制 專升本3年 年 級 2013級 姓 名 李京文 指 導(dǎo) 教 師 張新山 北京林業(yè)大學(xué)成人高等學(xué)歷教育畢業(yè)論文（設(shè)計）真實性承諾書茲有學(xué)生 李京文 ，系北京林業(yè)大學(xué)成人高等學(xué)歷教育 園林 專業(yè) 2013 級學(xué)生（身份證。畢業(yè)論文（設(shè)計）的題目是： 東北紅豆杉插穗生根的試驗研究 。本人保證該畢業(yè)論文（設(shè)計）創(chuàng)作的真實性，若經(jīng)有關(guān)部門發(fā)現(xiàn)本論文（設(shè)計）系抄襲或他人創(chuàng)作，本人接受北

2、京林業(yè)大學(xué)做出的相應(yīng)處罰。承諾人： 李京文 所屬函授站： 遼寧函授站（分院） 2015年 4月 9日北京林業(yè)大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計）任務(wù)書學(xué) 院 繼續(xù)教育學(xué)院 所屬教學(xué)站點 遼寧函授站（分院） 專 業(yè) 名 稱 園林 年 級 2013級 姓 名 李京文 畢業(yè)論文（設(shè)計）題目 東北紅豆杉插穗生根的 試驗研究 指導(dǎo)教師姓名 張新山 論文（設(shè)計）指導(dǎo)委員會主任簽字 2015年 4月 19日內(nèi)容和要求：一、研究的目的和意義通過對東北紅豆杉扦插試驗研究，分析總結(jié)其生根成活的機(jī)理，提煉其高效地營養(yǎng)繁殖技術(shù)，以便為生產(chǎn)上切實提高紫杉捍插成活率提供科學(xué)的依據(jù)，并起到對生產(chǎn)實踐的指導(dǎo)作用。二、主要內(nèi)容和寫作要求1主要

3、內(nèi)容主要內(nèi)容包括緒論、材料與方法、結(jié)果與分析、結(jié)論等部分，其中第2和第3部分是重點內(nèi)容。分析部分盡量采用數(shù)理統(tǒng)計分析的方法。2 寫作要求 2.1結(jié)合當(dāng)前生產(chǎn)實際，選擇或調(diào)查總結(jié)主題。 2.2論文設(shè)計要全面、細(xì)致、科學(xué)；結(jié)果與分析應(yīng)透徹到位，提供必要的調(diào)查數(shù)據(jù)與分析數(shù)表；結(jié)論應(yīng)準(zhǔn)確、簡明、高度概括總結(jié)。 2.3數(shù)據(jù)翔實，材料真實，實事求是。 2.4論點突出，論據(jù)充分。 2.5文字精練，語句通暢，首尾呼應(yīng)，前后緊密銜接，文字量充足（1萬字以上）。按論文正文中出現(xiàn)的順序列出直接引用的主要參考文獻(xiàn)。三、工作進(jìn)度第一階段：（2014 年9月至2014 年10月）協(xié)商選題 、布置任務(wù)書，確定實驗方案，收集

4、相關(guān)基礎(chǔ)資料，撰寫題綱。第二階段：（2014年11 月至2015年3月）進(jìn)行實驗與調(diào)查，補(bǔ)充調(diào)查及相關(guān)數(shù)據(jù)資料，撰寫論文初稿。第三階段：（2015年3 月至2015年5月）進(jìn)行論文初稿的兩輪修改，并定稿。四、文獻(xiàn)資料要求查詢與東北紅豆杉育苗技術(shù)有關(guān)的論文10篇。指導(dǎo)教師簽字： 2015年 4月 19 日北京林業(yè)大學(xué)成人本科畢業(yè)論文(設(shè)計) 第 13 頁東北紅豆杉插穗生根的試驗研究遼寧函授站（分院） 園本131 李京文指導(dǎo)教師 張新山摘要本文為了解決東北紅豆杉種源不足、種子繁殖困難等問題進(jìn)行了相關(guān)扦插技術(shù)試驗，研究不同插穗處理、不同激素處理對東北紅豆杉插穗生根的影響，以滿足生產(chǎn)對東北紅豆杉苗木的

5、大量需求。試驗結(jié)果表明：插穗最佳處理組合是平切綠葉全留完全木質(zhì)化插穗；插穗激素處理的最好組合是IBA100mg/l6h。關(guān)鍵詞：東北紅豆杉，插穗，處理，激素 目錄1緒論31.1研究目的意義31.2研究現(xiàn)狀綜述32材料與方法72.1試驗地概況72.2試驗材料72.3試驗設(shè)計72.3.1插穗處理對插穗生根的影響72.3.2激素處理對生根的影響83結(jié)果與分析103.1不同插穗處理對插穗生根影響的結(jié)果與分析103.1.1不同基部剪切方式對插穗生根的影響113.1.2不同綠葉保留量對插穗生根的影響113.1.3不同木質(zhì)化程度對插穗生根的影響123.2 激素處理對插穗生根影響的分析124結(jié)論與討論144.

6、1結(jié)論144.2討論14致謝15參考文獻(xiàn)161緒論1.1研究目的意義紫杉（Taxus cuspidate Sieb.et Zucc)又稱東北紅豆杉、赤柏松，為紅豆杉科，紅豆杉屬的常綠喬木，也可為灌木。喬木高達(dá)20cm，胸徑達(dá)1m。資料表明：全世界紅豆杉屬植物共有11種，我國有4種和1個變種。世界主要分布于俄羅斯的庫貝島，千島，烏蘇里，黑龍江及朝鮮北部，日本的北海道，本粥、四國、九州等地。紫杉在我國主要分布于黑龍江省、吉林省和遼寧省三個省區(qū)，山東的青島有栽培。黑龍江省主要分布于張廣才嶺的東南部及老爺嶺，小興安嶺南部的伊吉密河及穆陵。吉林省紫杉自然分布區(qū)約為北緯42°30´42

7、°44´，東經(jīng)126°131°之間，主要分布于吉林省東部林區(qū)的撫松縣、長白縣。遼寧省主要分布于寬甸縣、桓仁縣、本溪縣，同時旅大地區(qū)，安東市鎮(zhèn)江公園有栽培。我國目前進(jìn)行的扦插比較廣泛的是矮叢紫杉（T.cuspidata var.nana）的扦插。矮叢紫杉，又名枷羅木，屬于紅豆杉科紅豆杉屬，是東北紅豆杉的一個變種，國內(nèi)主要分布在吉林、遼寧等地。常綠灌木，無主干，側(cè)枝多斜生，小枝呈不規(guī)則互生，葉條形而直，螺旋狀著生，枝基部葉扭轉(zhuǎn)排成兩列，小枝葉呈羽狀，小嫩枝葉黃綠色，老葉干紫褐色。矮叢紫杉除用于提取紫杉醇外，還是十分重要的園林綠化樹種。它的樹形艷麗多姿，甚為美

8、觀。種子成熟后鮮紅色，掩掖于綠葉叢中，非常鮮艷奪目，是公署、花壇、庭院綠化的優(yōu)良樹種。紫杉是國家珍稀保護(hù)植物，其枝繁葉茂，碧綠蒼翠，樹形優(yōu)美，凌冬不凋，為珍貴的庭園綠化樹種，常用于園林造型、綠籬、盆景樁頭。此外，紫杉具有較高的經(jīng)濟(jì)價值，木材紅色，堅硬致密，可供建筑、制作家具、文具、精美器具和雕刻之用。也可提取紅色染料，種子可榨油，葉有利尿通經(jīng)之效；全株可提取紫杉醇，治療乳腺癌、肺癌、肝癌等。種子的假種皮味甜可食，但量過多會中毒。由于紫杉種子不易采得，成熟后多被野生動物所食，而且種子長期休眠、播種育苗比較困難，為了大量繁殖其苗木，解決種源不足和種子繁殖困難等問題，滿足城市綠化建設(shè)的需要，廣大林業(yè)

9、、園林科技人員對紫杉的扦插技術(shù)進(jìn)行了探討和研究。1.2研究現(xiàn)狀綜述1.2.1影響扦插成活的因素（1）內(nèi)因樹種不同樹種扦插生根率不同。根據(jù)不同樹種不定根發(fā)生部位分為三種生根類型，即潛伏不定根原基生根型，側(cè)芽或潛伏芽下段分生組織生根型，皮部生根型和愈傷組織生根型。潛伏不定根原基生根型是插條再生能力最強(qiáng)的一種類型，屬易生根的類型，愈傷組織生根型是難生根的類型。王傳永（2005）研究表明生根率高的樹種一般生根較早，同時基部剪口生根的比例也較高7。不同品種間根原始體的數(shù)量和分布狀況也會影響扦插成活率。郭朝霞等(2000)通過剝皮觀察銀中楊等皮下潛在根原始體數(shù)目發(fā)現(xiàn)，銀中楊的潛在根原始體數(shù)目少于易生根的小

10、黑楊和小青楊，而多于難生根的山新楊8。插穗年齡和位置隨著年齡的增加，樹木體內(nèi)各種組織的活力逐漸衰退，枝條內(nèi)所含生根抑制物質(zhì)(如單寧、酚類等)也相應(yīng)增加。一方面在扦插處理時較難激活各種組織為分生態(tài)，另一方面酸類、單寧類物質(zhì)極大地降低了插穗吸水性，對插穗莖部組織的生理活動產(chǎn)生障礙9。插穗的位置效應(yīng)表現(xiàn)在同一枝條上的不同部位不僅反映了枝條的幼嫩程度，也反映了插穗內(nèi)養(yǎng)分的累積程度。同一枝條的梢部處于幼化狀態(tài)分生能力強(qiáng)，但碳水化合物和氮素化合物等營養(yǎng)積累少；枝條基部的細(xì)胞分生能力相對變?nèi)酰荒墚a(chǎn)生足夠的生長素，但隨著自身的老化（木質(zhì)化程度提高）也積累了一定的養(yǎng)分。而王濤試驗證實養(yǎng)分含量豐富的插穗生根率、

11、成活率高，插穗自身的養(yǎng)分是扦插生根前維持生存的重要能源10。穗條規(guī)格和狀態(tài)插穗的規(guī)格（粗度、長度）和狀態(tài)（切口處理，留葉量等）主要影響到了插穗內(nèi)部的水分、營養(yǎng)物質(zhì)的含量，一般插穗扦插后到生根前（包括愈傷組織的形成）是一個水分和能量消耗的過程，如供給不足，插穗就會逐漸枯萎甚至死亡。插穗直徑不同所含營養(yǎng)物質(zhì)數(shù)量不同，插穗越粗積累的營養(yǎng)物質(zhì)越多，成活率則高。房倫革等（2007）用木質(zhì)化或半木質(zhì)化的插穗在溫室中扦插生根率較高，根系發(fā)達(dá)，生根后生長勢強(qiáng)，苗粗壯。這是因為木質(zhì)化程度高，枝葉中葉綠素含量高，養(yǎng)分充足，超氧化物酶活性強(qiáng)，利于生根。且研究發(fā)現(xiàn)下剪口平切或略斜切的插穗生根率高達(dá)97%和95%11。

12、（2）外因扦插環(huán)境環(huán)境因子的選擇，主要考慮插條水分平衡、干物質(zhì)積累與消耗、葉面溫度與生根溫度的控制。全光間歇自動電子噴霧裝置是扦插時調(diào)節(jié)環(huán)境因子的理想設(shè)備，一般來說扦插前期應(yīng)保持較高濕度，一般控制在85%90%，中后期可降至65%80%，溫度為2030，光照12h/d。扦插后覆膜可以增溫保濕，提高成活率。程廣有等（2003）研究表明插穗生根率和根長因插床溫度的不同而存在顯著或極顯著差異。插床溫度在20-23時，生根率為66.3%顯著高于10-15的插床；插穗在室內(nèi)自然溫度的插床上生根率為49%12。房倫革等（2007）研究表明在溫室中扦插東北紅豆杉苗木生長期長，達(dá)280d以上，生根率高達(dá)97，

13、生長量大，當(dāng)年生根數(shù)平均達(dá)到15根，根長平均為20cm，當(dāng)年新枝長平均為15cm，故應(yīng)采用溫室中扦插東北紅豆杉為好13。王小平等（2005）對東北紅豆杉扦插枝條愈傷組織的結(jié)構(gòu)研究表明東北紅豆杉扦插枝條初期水份及無機(jī)鹽的獲得較困難，為此在扦插育苗過程中，要注意加強(qiáng)扦插床面的空氣濕度，以保證扦插枝條獲得足夠的水份來進(jìn)行光合作用，另外在扦插苗移栽后也要注意移栽地環(huán)境的濕度和光照，以保證移栽苗獲得足夠的水份14。扦插基質(zhì)扦插基質(zhì)不同，生根率不同，且差異很大，最大差異為52%，混合土層扦插生根率最高。這是因為河沙雖透氣性較好，但養(yǎng)分少，保濕能力差，溫濕度較難控制，前期生根較快，但后期因養(yǎng)分少而生長緩慢。

14、原圃土相對其它基質(zhì)而言，透氣性較差，表土易板結(jié)，理化性質(zhì)不穩(wěn)定，所以各種細(xì)菌較多，不利于插穗生根。而腐殖土雖養(yǎng)分較充足，但透氣較差，理化性質(zhì)不穩(wěn)定，所含細(xì)菌較多。分層基質(zhì)扦插成活率高是因為風(fēng)化沙(鐵板沙)無菌，理化性能較好，而有機(jī)土層可提供生根后營養(yǎng)供應(yīng)，河沙透氣性好，瀝水不易使表土板結(jié)。生根是扦插成活的關(guān)鍵，深入研究扦插表現(xiàn)良好的基質(zhì)具有的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，各地依據(jù)這種性質(zhì)配置基質(zhì)，對降低扦插成本，提高扦插成活率和保存率具有重要的意義。劉建慧等（2005）試驗結(jié)果顯示，在運用植物快繁計算機(jī)自動控制溫濕度的情況下，以珍珠巖為扦插基質(zhì)時，可促使曼地亞紅豆杉早20d發(fā)根，提高生根率25%，每插穗

15、增加根量5.5條15。傅瑞樹等（2005）做了4種基質(zhì)對比試驗，河沙+珍珠巖(8:2)為最佳基質(zhì)，可使生根率達(dá)84.3%，成苗率達(dá)81.7%，其次是河沙+火燒土(5:5)，之后是黃土，最后為單一河沙16。陳輝等（1999）研究認(rèn)為，不同長度的插穗最佳基質(zhì)有差異，穗長為8cm時，以黃心土54%和珍珠巖46%混配做基質(zhì)為最佳，而穗長為5cm時，以珍珠巖做基質(zhì)為最佳17；鄧先珍等（2002）對南方紅豆杉進(jìn)行扦插，結(jié)果顯示，苗床基質(zhì)以善土+蛭石(1:1)、善土+河沙(1:2)、善土+河沙+蛭石(1:1:1)為好18。房倫革（2007）對東北紅豆杉的研究表明，混合土層基質(zhì)扦插生根率最高達(dá)97，河沙壤生根

16、率84，原圃土插穗生根率45，腐殖土為7919。扦插時間扦插時間反映的是不同時期的氣候條件和當(dāng)時母樹枝條的發(fā)育程度，因此由于不同地區(qū)、不同年份氣候的差異和母本生長發(fā)育的不同，扦插時間規(guī)律會略有變化。一方面，從氣候的角度考慮，扦插時間過早，由于氣溫和地溫都很低，加上為避免扦插水份虧缺經(jīng)常灌水也會降低地溫，插穗遲遲不能生根，最后導(dǎo)致霉?fàn)€。扦插時間過晚，在8、9月份高溫季節(jié)，萌發(fā)展葉先于發(fā)根，葉表蒸發(fā)快，插穗未發(fā)根不能主動吸水造成水份虧缺而死亡，或是由于地表溫度高，接近地表的幼莖灼傷猝倒而死亡。另一方面，從母樹枝條的發(fā)育程度考慮，春夏季節(jié)，樹木生長處于旺盛期，枝條內(nèi)生長素含量高，營養(yǎng)物質(zhì)有了一定積累

17、，有利于插穗生根。而9月份后，枝條內(nèi)部生長素含量減少，枝條木質(zhì)化程度提高，枝條代謝活動降低，不利于插穗生根。外源激素處理植物促根劑的選擇應(yīng)用，是提高林木扦插成活率的關(guān)鍵技術(shù)之一。枝條離體培養(yǎng)時，由于受傷的刺激，使得枝條組織的生理活動向有利于傷口愈合的方向進(jìn)行，同時促進(jìn)了激素的產(chǎn)生，使激素向基部運輸。由于激素在扦穗基部的富集，影響了內(nèi)部養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化與再分配，使下切口附近變成了吸收體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的中心，并促進(jìn)了多種酶的生成或活性增強(qiáng)，從而促進(jìn)了形成層細(xì)胞的分裂活動。但是難生根樹種體內(nèi)的內(nèi)源激素往往含量很低，當(dāng)以適量外源激素處理后，使插穗基部的激素含量增高，加強(qiáng)了激素的作用，提高了碳、氮等養(yǎng)分元素在基部

18、的分配數(shù)量、分配速度和利用效率，從而為插穗生根作好了充分的物質(zhì)準(zhǔn)備。程廣有等研究表明東北紅豆杉扦插前用生長調(diào)節(jié)物質(zhì)處理后效果好于對照，且生長調(diào)節(jié)物質(zhì)之間生根效果不同，以生根粉ABT和IBA促進(jìn)插穗生根的效果較好20。孫鳳發(fā)(2007)等采用不同濃度的吲哚丁酸、奈乙酸以及清水，通過對照實驗表明，用吲哚乙酸的效果要比奈乙酸好，濃度以100ppm為最佳，浸泡時間3個小時為宜。最好的方法是用100ppm吲哚丁酸浸扦插部位3小時，成活率可達(dá)到95%21。1.2.2東北紅豆杉插穗生根過程及生根機(jī)理東北紅豆杉插穗的生根有兩種類型，嫩枝是愈傷組織生根，即首先產(chǎn)生愈傷組織，然后愈傷組織分化逐漸產(chǎn)生不定根。從插穗

19、的表面上看，其生根部位是在傷口處，即插穗的切口處。木質(zhì)化插穗是皮部和愈傷組織生根并存的，首先是皮部生根，且大部分是皮部生根。從表面上看是從插穗基部至插入土中的部分，解剖觀察是在插穗莖切面形成層部位產(chǎn)生根原始體進(jìn)而產(chǎn)生不定根，在傷口部位則是愈傷組織生根。郭爾慶等（2007）對東北紅豆杉研究發(fā)現(xiàn)插穗在扦插15d后個別頂芽開始變色，30d左右切口基本愈合，45d后切口處明顯膨大，80d左右開始在愈合瘤上長出不定根，能從基質(zhì)中吸收水分和礦質(zhì)營養(yǎng)，這時頂芽亦開始伸長。到秋季停止生長時，根系基本形成，每個插穗平均有側(cè)根17條，側(cè)根平均長度3.8cm，平均生根率為87.8%；新梢平均生長量為1.3cm22。

20、張春梅等（2007）研究表明無論是愈傷組織生根還是皮部生根類型，插穗生根都受到一類具有特殊作用的生理活性物質(zhì)植物激素的調(diào)節(jié)與控制。植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)中的生長(IAA)在合適的濃度下對根的形成和生長有促進(jìn)作用。生長素影響根的產(chǎn)生并對植物器官的伸長生長有明顯的促進(jìn)作用；細(xì)胞分裂素(ZT)主要促進(jìn)細(xì)胞分裂和細(xì)胞體積擴(kuò)大；IAA/ZT值又影響愈傷組織的產(chǎn)生與分化。當(dāng)比值高時，誘導(dǎo)根的分化；兩者的濃度大致相等時，愈傷組織只生長而不分化；比值較低時，則誘導(dǎo)芽的形成，插穗ZT含量隨扦插后生根的時期不同而基本上呈下降的趨勢，一般是插前和初期較高，而中后期則含量下降。東北紅豆杉插穗生根還受到其它內(nèi)含物的影響。通過

21、對東北紅豆杉插穗葉綠素含量、可溶性糖含量、超氧化物歧化酶活性及根系活力等生理指標(biāo)的測定得出，完全木質(zhì)化插穗的各項指標(biāo)均高于半木質(zhì)化插穗和嫩枝插穗，其生根情況亦遠(yuǎn)好于半木質(zhì)化插穗和嫩枝插穗，為選擇不同木質(zhì)化程度的插穗提供了可靠的理論依據(jù)23。本試驗采用同一起源的紅豆杉為試材，就不同生長素處理對東北紅豆杉硬枝扦插插穗成活與根系生長狀況進(jìn)行了初步研究，旨在探討紅豆杉在露地條件下的扦插技術(shù)，以期為東北紅豆杉擴(kuò)繁提供切實可行的技術(shù)支撐。2材料與方法2.1試驗地概況本試驗于2012年在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物園進(jìn)行，試驗地位于沈陽市東陵區(qū)，東經(jīng)123°19，北緯41°40，海拔35.8m，屬于

22、半濕潤大陸氣候，冬季多受大陸性氣候影響，寒冷而干燥，春秋雨季較短，風(fēng)較大，年平均氣溫為6.8-8.0，平均積溫為3281，日照時數(shù)平均為2372.5h，無霜期為146163d，年降水量平均為721.9mm。試驗地內(nèi)部設(shè)有全光噴霧系統(tǒng)，地勢平坦、光照充足、通風(fēng)良好和排水方便，土壤質(zhì)地是沙壤土，靠近水源和電源。2.2試驗材料插條取自沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)天柱山生長的17年生、高3-4m、樹形良好、無病蟲害、生長健壯的優(yōu)良母樹，剪取靠近樹冠中下部外圍、枝齡小、粗細(xì)均勻、葉色鮮綠、優(yōu)樹陰面的枝條以制備插穗。2.3試驗設(shè)計2.3.1插穗處理對插穗生根的影響 插床與基質(zhì)：床長10m、寬lm，上設(shè)高60cm的塑料拱棚

23、，整個試驗地上方設(shè)高為2m的高架蔭棚。以粗新河沙作為基質(zhì)進(jìn)行對比試驗，基質(zhì)厚15cm20cm，扦插前灌透底水，隔日用4高錳酸鉀液進(jìn)行插床消毒。 插穗處理：選取紫杉母樹中上部的完全木質(zhì)化、半木質(zhì)化、嫩枝枝條作為穗材，基部切口平切、斜切、馬耳形，穗長1520cm，基部保留1cm2cm木質(zhì)部，保留綠葉1/3、1/2、全保留，使插穗保持良好形狀，用100ppm萘乙酸浸泡插穗基部十二小時。 扦插：分不同木質(zhì)化程度、剪切方式、綠葉保留量每處理100個插穗，5月27日上午扦插，扦插密度10cm×10cm、扦插深度35cm，插后用細(xì)眼噴壺澆水，使插穗基部密接基質(zhì)。 插后處理：每天上午10點和下午2點

24、揭開拱棚放風(fēng)半小時至一個小時，澆水使棚內(nèi)相對濕度保持在80以上、地溫18oC以上、氣溫20oC30oC。插穗生根后可減少澆水、放風(fēng)的次數(shù)，且60天后揭開拱棚。 采用插穗木質(zhì)化程度、基部剪切方式、綠葉保留量三因素、三水平正交試驗。利用L9（34）正交表設(shè)計試驗。表1 試驗因素與水平表因素 水平 1 2 3基部剪切方式（A） 平切（A1） 斜切（A2） 馬耳形（A3）綠葉保留量（B） 保留1/3（B1） 保留1/2（B2） 全保留（B3）木質(zhì)化程度（C） 嫩枝（C1） 半木質(zhì)化（C2） 完全木質(zhì)化（C3） 根據(jù)表2劃分試驗小區(qū)，進(jìn)行正交試驗。插床設(shè)在蔭棚下，每一處理插穗100株，分別標(biāo)記，用200

25、ppmNAA處理6小時，6月12日扦插，扦插后管理。每天上午9點和下午3點揭開拱棚放風(fēng)1小時，澆水使棚內(nèi)相對濕度保持在80%以上，地溫18以上，氣溫白天2030，夜間15以上。插穗生根后可減少澆水的次數(shù)，且生根后揭開拱棚。入冬前灌透底水，復(fù)膜，用草簾覆蓋越冬。表2 正交試驗設(shè)計試驗號 處理123456789A1B1C1A1B2C2A1B3C3A2B1C2A2B2C3A2B3C1A3B1C3A3B2C1A3B3C2平切、 保留1/3、 嫩枝平切、 保留1/2、 半木質(zhì)化平切、 全保留 完全木質(zhì)化斜切 保留1/3、 半木質(zhì)化斜切、 保留1/2、 完全木質(zhì)化斜切、 全保留、 嫩枝馬耳形、保留1/3、

26、 完全木質(zhì)化馬耳形、保留1/2、 嫩枝馬耳形、全保留、 半木質(zhì)化2.3.2激素處理對生根的影響采用三因素三水平（表3）按L9（34）正交試驗設(shè)計，選擇激素種類、藥劑濃度和浸泡時間三種因素，每處理100株，根據(jù)檢索資料經(jīng)驗選擇基部帶有23年生老枝的當(dāng)年生新梢插穗，剪切方式為平切，扦插用床為半徑7m的圓形砂床，面積為150m2，基質(zhì)為細(xì)河砂，厚度為15cm，基質(zhì)下為鵝卵石，以便于排水透氣，插前對扦插基質(zhì)用多菌靈溶液消毒。噴灌設(shè)施為全光照噴霧扦插育苗裝置（原則上應(yīng)在床面上部1.5m左右高設(shè)置遮蔭網(wǎng)，透光度為25%30%）。枝條進(jìn)行扦插前基部要用激素進(jìn)行處理，所用的激素有IBA和NAA、ABT-1生根

27、粉。所采用的濃度是100mg/L、200mg/L、500mg/L。插穗的浸泡時間為6h、10h、16h。將插穗下部2cm浸入藥液中。具體處理如下表所示：表3 試驗因素與水平表因素 水平 1 2 3激 素（A） IBA（A1） NAA（A2） ABT-1（A3）濃 度（B） 100 mg/L（B1） 200 mg/L（B2） 500 mg/L（B3）浸泡時間（C） 6h（C1） 10h（C2） 16h（C3） 表4 正交試驗激素處理組合試驗號A(激素種類)B(濃度)C(浸泡時間)1IBA10062IBA200103IBA500164NAA200105NAA500166NAA10067ABT500

28、168ABT10069ABT20010扦插與插后管理：當(dāng)苗床做好及扦插枝條處理好后，開始扦插枝條。用鐵線或竹筷在已消過毒的插床上以3cm×3cm株行距按深約35cm扎小孔。將插穗放入孔內(nèi)，用手壓實，使插穗與基質(zhì)緊密結(jié)合，然后用清水澆透。扦插作業(yè)時最好選擇陰天，在陽光強(qiáng)烈的時段扦插時要及時用噴霧器將插過的扦插苗灑水降溫，防止插穗失水萎焉。苗床溫度一般為2030，相對濕度75%90%。扦插作業(yè)完成后，立即進(jìn)行全光霧噴灑保濕。噴水量和噴水間歇的時間應(yīng)根據(jù)氣候條件進(jìn)行調(diào)節(jié)，原則上在睛天要保證針葉上附著一層水膜或掛著水滴為適度，切勿使葉片處于缺水干燥狀態(tài)；陰天延長噴水間隙；雨天停止噴水。當(dāng)插穗

29、普遍生根時，減少噴霧時間，允許葉片上產(chǎn)水膜蒸發(fā)掉之后再延長15min后開始噴霧，待大量根系形成后根系能夠主動向沙床深處吸取水分時，可在10:0016:00區(qū)段每隔1h間歇噴水15min，補(bǔ)充水分，其它時間段不用噴水補(bǔ)濕。3結(jié)果與分析3.1不同插穗處理對插穗生根影響的結(jié)果與分析插穗本身的生物學(xué)特性是進(jìn)行扦插繁殖的先決條件，也是決定插穗成活與否及生根能力的主要因素之一，而插穗的木質(zhì)化程度是其中的主導(dǎo)因子。在影響插穗生根能力的外部環(huán)境中有相當(dāng)一部分是可以人為控制的，特別是扦插技術(shù)措施，因此，本試驗將插穗木質(zhì)化程度、基部剪切方式和綠葉保留量形成三因素、三水平、三次重復(fù)的正交試驗，試驗結(jié)果見表5、表6、

30、表7、表8。表5 正交試驗結(jié)果分析表（生根率）試驗號處理1（A） 2（B） 3（C） 4（空）生根率總和IIIIII123456789A1B1C1A1B2C2A1B3C3A2B1C2A2B2C3A2B3C1A3B1C3A3B2C1A3B3C21 1 1 11 2 2 21 3 3 32 1 2 32 2 3 12 3 1 23 1 3 23 2 1 33 3 2 10.100.400.500.600.900.100.600.500.800.600.800.900.900.800.701.000.800.800.851.001.000.900.900.801.000.801.001.552.20

31、2.402.502.601.602.602.102.50總和4.407.308.2520.05T1T2T36.15 6.65 5.80 6.656.70 6.90 7.20 6.407.20 6.50 7.60 7.00表6 方差分析表變差來源 自由度離差平方和均方均方比F0.05重復(fù)間剪切方式A綠葉保留B木質(zhì)化程度C空列誤差22223150.74570.06130.00910.35130.02020.42590.37790.03050.00460.17570.00630.028413.30*1.0740.1602 6.185*0.23703.683.683.683.683.29總和sum26

32、1.614由方差分析可知，不同木質(zhì)化程度對生根率有顯著影響。表7 正交試驗結(jié)果分析表（平均生根量）試驗號處理1（A） 2（B） 3（C） 4（空）平均生根量（株/條）總和IIIIII23456789A1B1C1A1B2C2A1B3C3A2B1C2A2B2C3A2B3C1A3B1C3A3B2C1A3B3C21 1 1 11 2 2 21 3 3 32 1 2 32 2 3 12 3 1 23 1 3 23 2 1 33 3 2 1 0.30 2.00 4.70 4.50 5.00 1.90 2.50 1.60 11.605.5010.521.014.511.04.517.75.512.215.0

33、26.648.731.325.115.435.614.645.620.839.174.450.341.121.855.821.769.0總和33.7120.4257.9402.0 T1T2T3142.3 126.9 64.30 130.9113.2 109.9 166.4 124.7246.5 165.2 171.7 146.4表8 方差分析表變差來源自由度離差平方和均方均方比F0.05重復(fù)間 剪切方式A綠葉保留B木質(zhì)化程度C空列誤差22223153141.8173.09178.30826.2627.77345.101570.9136.5689.15413.139.2623.00 68.281

34、.59 3.88*17.96*0.403.683.683.683.68總和264592.33由方差分析可知，不同綠葉保留量和不同木質(zhì)化程度對插穗的平均生根量有顯著影響。3.1.1不同基部剪切方式對插穗生根的影響本試驗采用了三種基部剪切方式：平切、斜切、馬耳形。經(jīng)田間觀察和試驗結(jié)果方差分析可知，不同剪切方式對插穗生根率和生根量沒有顯著影響。而且，切口較大的馬耳形在生根過程中如控制好腐爛現(xiàn)象其生根量較大。根據(jù)試驗觀察，紫杉插穗生根是皮部生根和愈傷組織生根并存的，所以以傷口較大的馬耳形切口為好，但必須嚴(yán)格控制腐爛現(xiàn)象。本次試驗嚴(yán)格控制了腐爛問題，得到該結(jié)果。生產(chǎn)上為了方便作業(yè)也可用平切，因為剪切方式

35、對生根沒有顯著影響。3.1.2不同綠葉保留量對插穗生根的影響對于樹木來說，葉子與根系具有同等重要的作用，葉子是植物進(jìn)行光合作用，合成有機(jī)質(zhì)，呼吸空氣，蒸騰水分的器官。本試驗對綠葉保留量與生根能力的關(guān)系進(jìn)行了研究，經(jīng)方差分析得出，綠葉保留量對插穗生根量有顯著影響。保留1/3葉片插穗的平均生根量為12.2條，保留1/2的平均生根量為14.1條，全保留的平均生根量為18.3條，即全保留的平均生根量最大。紫杉插穗生根期長，僅僅依靠插穗本身貯存的營養(yǎng)物質(zhì)是不夠的，還需要葉片通過光合作用合成有機(jī)物質(zhì)。此外，葉片還是樹木進(jìn)行呼吸、蒸騰的器官，蒸騰、呼吸與水分、礦質(zhì)元素的代謝有密切關(guān)系，去掉葉片破壞了水分、礦

36、質(zhì)元素代謝的平衡，從而也影響了插穗的根系生長。因此，在插穗修剪過程中，除去部分多余枝葉，保持良好穗形外，應(yīng)盡量保留綠葉。3.1.3不同木質(zhì)化程度對插穗生根的影響木質(zhì)化程度對于插穗的生根能力影響很大。本試驗采用嫩枝（當(dāng)年生）、半木質(zhì)化枝條（一年生）和完全木質(zhì)化枝條（二年生以上）三個水平進(jìn)行正交試驗，經(jīng)方差分析可知，不同木質(zhì)化程度對生根率和平均生根量均有顯著影響；嫩枝插穗的生根率為61.3%、平均生根量為7.1條；半木質(zhì)化插穗的生根率為80.0%、平均生根量為18.4條；完全木質(zhì)化插穗的生根率為84.4%、平均生根量為19.1條。因此完全木質(zhì)化在生根量和生根率方面明顯地高于半木質(zhì)化插穗和嫩枝插穗。

37、而且通過觀察，嫩枝插穗腐爛率較高、枝條細(xì)弱極易倒伏，不便管理。故在穗條豐富的情況下，選擇木質(zhì)化插穗為宜。3.2 激素處理對插穗生根影響的分析應(yīng)用適宜種類、濃度的激素，采用適宜的處理時間處理插穗，可以促進(jìn)插穗內(nèi)部新陳代謝作用，如呼吸作作增強(qiáng)，水分吸收能力提高，貯藏物質(zhì)迅速分解轉(zhuǎn)化，促進(jìn)可塑性物質(zhì)在插穗下部積累。同時，激素促進(jìn)形成層細(xì)胞分裂，回事插穗愈傷組織的形成。試驗結(jié)果見表9、表10。表9 正交試驗結(jié)果分析表（愈傷組織發(fā)生率）試驗號A（激素種類）B（濃度）mg/lC（處理時間）h愈傷組織發(fā)生率（%）111156.79212271.57313339.23421256.79522345.00623

38、139.23731350.77832145.00933245.00K1167.59164.35141.02和449.38K2141.02161.56173.36K3140.77123.46135.0055.8654.7947.0147.0153.8557.7946.9241.1545.00R(極差)8.9413.6412.79注：對照的愈傷組織發(fā)生率為39.23%從表9可以看到，第2因素（濃度）的極差最大（13.64），其次是第3因素（處理時間12.79），說明濃度對結(jié)果影響最大，其次是處理時間。從平均值上看，激素采用IBA成活效果最好，愈傷組織發(fā)生率為55.86%，濃度采用100mg/l最好

39、，愈傷組織發(fā)生率為54.79%，處理4h最好，愈傷組織發(fā)生率為57.79%，因此各種因素的最好搭配是A1B1C2，且看出激素種類1（即IBA）明顯優(yōu)于2(NAA)、3(ABT)，濃度100mg/l、200mg/l明顯好于500mg/l，處理10h對插穗愈傷組織形成的影響優(yōu)于處理6h、16h。表10 方差分析表變異來源自由度平方和均方FF0.05激素種類濃度處理時間誤差2222158.22346.79283.5976.2678.11173.40141.8038.132.074.553.7219.00總計8由表10檢驗結(jié)果可以看出：各處理的各水平之間的差異不顯著。4結(jié)論與討論4.1結(jié)論（1）根據(jù)以

40、上分析可以得出插穗處理最佳組合是：A3B3C3,即馬耳形綠葉全留完全木質(zhì)化插穗；或A1B3C3 ，即平切綠葉全留完全木質(zhì)化插穗。（2）根據(jù)以上分析插穗激素處理的最好組合是：激素采用IBA，濃度采用100mg/l，處理6h。插穗激素處理較適濃度均為100mg/l，說明采用激素處理的濃度并非越高越好。激素處理不當(dāng)，會殺死東北紅豆杉的組織細(xì)胞，或使枝條變黑，而其死亡。4.2討論東北紅豆杉硬枝扦插繁殖必須首先對材料進(jìn)行幼化處理，否則愈傷組織發(fā)生率不高。為保證采條的高愈傷組織發(fā)生率，要在枝條貯存營養(yǎng)物質(zhì)最多時采集。一年中從最冷的一月份開始到樹液流動前一周，此時的枝條，為了防寒保護(hù)自身而貯存的營養(yǎng)物質(zhì)最多

41、。這時采條，勞力充足，運輸方便，好保存。如果在樹液流動后采條，枝條中營養(yǎng)物質(zhì)已轉(zhuǎn)移，滿足不了生根時所需要的營養(yǎng)，對生根影響很大；剪條后應(yīng)經(jīng)一晝夜水浸處理，水解出單寧等生根抑制物。然后插條要放到貯藏室內(nèi)貯藏，促進(jìn)其形成愈傷組織。本試驗采用全光霧噴灑扦插繁殖方法，導(dǎo)致地溫較低，在一定程度上對扦插生根造成了影響；其次，全光霧插的方法是在高濕條件下完成插穗的生根過程。所以在高濕條件下極易因細(xì)菌繁殖引起插穗傷口的腐爛，影響愈傷組織的形成和形成層的分化。致謝本文是在導(dǎo)師張新山老師的悉心指導(dǎo)下完成的。無論是在理論學(xué)習(xí)階段，還是在論文的選題、資料查詢、開題、研究和撰寫的每一個環(huán)節(jié)，無不得到導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)和幫助

42、。在此向徐老師表示我最誠摯的謝意！在論文的寫作過程中，也得到了許多同學(xué)的寶貴建議，同窗之誼和手足之情，我將終生難忘！在此一并致以誠摯的謝意。感謝所有關(guān)心、支持、幫助過我的良師益友。我也要感謝我的母校林學(xué)院，是她提供了良好的學(xué)習(xí)環(huán)境和生活環(huán)境，讓我的大學(xué)生活豐富多姿，為我的人生留下精彩的一筆。我愿在未來的學(xué)習(xí)和研究過程中，以更加豐厚的成果來答謝曾經(jīng)關(guān)心、幫助和支持過我的所有領(lǐng)導(dǎo)、老師、同學(xué)、和朋友。學(xué)無止境，明天，將是我終身學(xué)習(xí)另一天的開始！最后，向在百忙中抽出時間對本文進(jìn)行評審并提出寶貴意見的各位專家表示衷心地感謝！北京林業(yè)大學(xué)成人本科畢業(yè)論文(設(shè)計) 第 15 頁 參考文獻(xiàn)1陳慶紅，陳慶瑛.東北紅豆杉研究進(jìn)展J.中國野生植物資源,2005,24(1):4142.2Wani M C ,Taylor H L ,Wall M E ,et al. Plant antitumor agents. VI. The isolatio