第一章第1課時

1、.第1課時工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生知識內(nèi)容要求考情解讀工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生a1.說出基因工程的含義并指出基因工程的主要內(nèi)容。2.說出限制性核酸內(nèi)切酶的含義及作用特點。3.說出DNA連接酶的作用。4.簡述質(zhì)粒的含義、特性及其在基因工程中的作用。5.解釋限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和質(zhì)粒對基因工程誕生的作用。一、基因工程的概念和理論根底基因工程的概述基因工程是狹義的遺傳工程。廣義的遺傳工程泛指把一種生物的遺傳物質(zhì)細(xì)胞核、染色體脫氧核糖核酸等移到另一種生物的細(xì)胞中去，并使這種遺傳物質(zhì)所帶的遺傳信息在受體細(xì)胞中表達(dá)基因工程的核心構(gòu)建重組DNA分子基因工程的誕生時間20世紀(jì)70年代誕生條件

2、基因工程誕生的理論根底DNA是生物遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)；DNA雙螺旋構(gòu)造確實立；遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定基因工程誕生的技術(shù)保障限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和質(zhì)粒載體的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用探究1理性思維六個方面理解基因工程的含義基因工程的核心構(gòu)建重組DNA分子原理基因重組優(yōu)點抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙；定向改造生物的遺傳性狀因此所產(chǎn)生的變異為定向變異操作環(huán)境體外培養(yǎng)液構(gòu)建重組DNA分子操作程度分子程度本質(zhì)外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，實現(xiàn)受體細(xì)胞對該基因的表達(dá)，基因本質(zhì)未變，合成蛋白質(zhì)未變，只是蛋白質(zhì)合成場所的轉(zhuǎn)移結(jié)果獲得人類需要的基因產(chǎn)物或生物類型探究2學(xué)會總結(jié)1不同生物的DNA分子能拼接起來的理論根底1DNA分子的根

3、本組成單位都是四種脫氧核苷酸。2雙鏈DNA分子的空間構(gòu)造都是規(guī)那么的雙螺旋構(gòu)造。3所有生物的DNA堿基對均遵循嚴(yán)格的“堿基互補配對原那么。2外源基因可以在受體內(nèi)表達(dá)的理論根底1基因是控制生物體性狀的構(gòu)造和功能單位，具有相對獨立性。2遺傳信息的傳遞都遵循中心法那么。3生物界共用一套遺傳密碼。例1科學(xué)家們經(jīng)過多年的努力，創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)基因工程，施行該工程的最終目的是A定向提取生物體內(nèi)的DNA分子B定向地對DNA分子進(jìn)展人工“剪切C在生物體外對DNA分子進(jìn)展改造D定向地改造生物的遺傳性狀答案D解析基因工程是在體外進(jìn)展基因重組，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)。重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生人類所需的生物類

4、型和生物產(chǎn)品，也就是定向地改造了生物的遺傳性狀。例22019·浙江鎮(zhèn)海中學(xué)月考關(guān)于基因工程的表達(dá)，錯誤的選項是A利用體外DNA重組技術(shù)定向改造生物的遺傳性狀B在細(xì)胞程度上設(shè)計施工，需要限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和載體C打破物種界限獲得人們需要的生物類型或生物產(chǎn)品D抗蟲煙草的培育種植降低了消費本錢，減少了環(huán)境污染答案B解析基因工程是指按照人類的愿望，將不同生物的遺傳物質(zhì)在體外人工剪切并和載體重組后轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)展擴增，并表達(dá)產(chǎn)生所需蛋白質(zhì)的技術(shù)，可定向改造生物的遺傳性狀，A正確；基因工程是在分子程度上設(shè)計施工的，B錯誤；基因工程可在不同生物間進(jìn)展，故可打破物種界限獲得人們需要的生物類

5、型或生物產(chǎn)品，C正確；抗蟲煙草的培育種植減少了農(nóng)藥的使用，降低了消費本錢，減少了環(huán)境污染，D正確。二、基因工程的操作工具1限制性核酸內(nèi)切酶1來源：從原核生物中別離出來。2作用：對DNA分子上不同的特定的核苷酸序列進(jìn)展識別和切割。3結(jié)果：把雙鏈DNA分子切割成許多不同的片段。2DNA連接酶1作用：具有縫合DNA片段的作用，將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起。2結(jié)果：形成重組DNA分子，將外源基因和載體DNA連接在一起?？紤]DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶的作用和作用部位是否一樣？答案DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶的作用正好相反，前者是“縫合，后者是“切割；但二者作用部位一樣，都作用于特定

6、部位的磷酸二酯鍵。3質(zhì)粒最常用的載體1本質(zhì)：具有自主復(fù)制才能的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。2存在形式：獨立于細(xì)菌擬核DNA之外。3質(zhì)粒作為載體所具備的條件能自主復(fù)制。具有抗生素抗性基因，例如四環(huán)素的抗性基因。4作用：作為基因工程的載體。4第一個人工DNA重組產(chǎn)物是：猿猴病毒DNA與噬菌體DNA連接物。5基因工程誕生的標(biāo)志基因工程開展史上第一個成功的基因克隆實驗是：某些承受了重組DNA分子的大腸桿菌同時具有抗四環(huán)素和抗卡那霉素的性狀。探究圖示解讀1限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀據(jù)圖答復(fù)相關(guān)問題：1把如圖1所示DNA分子切割成2個片段的酶稱為限制性核酸內(nèi)切酶。該限制性核酸內(nèi)切酶的切點在G、A之間，形成

7、2個粘性末端，其特點是堿基序列完全一樣。2此限制性核酸內(nèi)切酶識別特點是只能識別某一特定的核苷酸序列，如圖1中的識別序列為GAATTC。3假如G堿基發(fā)生基因突變，可能發(fā)生的情況是限制性核酸內(nèi)切酶不能識別切割位點。4如圖2所示，限制性核酸內(nèi)切酶斷裂的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。所以，斷裂的位置為2處。2DNA連接酶“分子縫合針觀察上圖答復(fù)相關(guān)問題：1如下圖，DNA連接酶連接的2個DNA片段具有末端堿基互補的特點，形成重組DNA分子。2作用本質(zhì)：恢復(fù)被限制性核酸內(nèi)切酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。3觀察以下圖所示過程，答復(fù)相關(guān)問題：是限制性核酸內(nèi)切酶，是DNA連接酶，二者的作用部位都是磷酸二酯鍵。3分

8、析質(zhì)粒載體構(gòu)造形式圖，答復(fù)以下問題：1質(zhì)粒上抗生素抗性基因有什么作用？答案作為標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。2作為基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體，要求必須對受體細(xì)胞無害，為什么？答案載體假如對受體細(xì)胞有害，其一旦被導(dǎo)入受體細(xì)胞，就會影響受體細(xì)胞的生命活動，甚至?xí)茐氖荏w的生命活動。例32019·杭州七校聯(lián)考用兩種限制性核酸內(nèi)切酶Xba 和Sac 兩種酶切出的粘性末端不同切割某DNA，獲得含目的基因的片段注：圖中箭頭所指的位置是限制性核酸內(nèi)切酶識別和切割的位點。假設(shè)利用該片段形成重組DNA，應(yīng)選用以下圖中答案A解析該Ti質(zhì)粒中含有限制性核酸內(nèi)切酶Xba 和Sac的切割位點，且用這兩種酶切

9、割可將目的基因插入TDNA中，A正確；該Ti質(zhì)粒中不含限制性核酸內(nèi)切酶Sac 的切割位點，B錯誤；該Ti質(zhì)粒中含有限制性核酸內(nèi)切酶Xba 和Sac 的切割位點，但用這兩種酶切割不會將目的基因插入TDNA中，C錯誤；該Ti質(zhì)粒中不含限制性核酸內(nèi)切酶Xba 的切割位點，D錯誤。例42019·浙江金華調(diào)研以下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是A BC D答案C解析限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶三者均作用于磷酸二酯鍵處，限制性核酸內(nèi)切酶使鍵斷開，而DNA聚合酶連接的是單個脫氧核苷酸，DNA

10、連接酶作用于DNA片段，解旋酶作用于氫鍵，使DNA雙鏈翻開，形成DNA單鏈，綜上所述，C正確。易混易錯1限制性核酸內(nèi)切酶與DNA連接酶的比較工程限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶作用使特定部位的磷酸二酯鍵斷裂在DNA片段之間重新形成磷酸二酯鍵應(yīng)用提取目的基因和切割載體用于重組DNA分子的構(gòu)建兩者關(guān)系限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶都作用于相鄰兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，但作用不同，一個是切割，一個是連接2限制性核酸內(nèi)切酶與解旋酶的區(qū)別一樣點：都作用于DNA分子中的化學(xué)鍵。不同點：作用部位不同，前者作用于磷酸二酯鍵，后者作用于氫鍵。3DNA連接酶與DNA聚合酶的比較工程DNA連接酶DNA聚合酶作用本

11、質(zhì)都是催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵連接DNA鏈雙鏈單鏈?zhǔn)欠裥枰０宀恍枰枰狣NA的一條鏈為模板作用部位在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個脫氧核苷酸加到已存在的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵作用結(jié)果將兩個DNA片段連接成重組DNA分子合成新的DNA分子用處基因工程DNA復(fù)制工具酶的發(fā)現(xiàn)和基因工程的誕生1下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖箭頭表示切點，切出的斷面為粘性末端。以下表達(dá)錯誤的選項是限制性核酸內(nèi)切酶1：GATC；限制性核酸內(nèi)切酶2：CCGCGG；限制性核酸內(nèi)切酶3：GGATCC。A不同的限制性核酸內(nèi)切酶有不同的識別序列和切割位點，表達(dá)了酶的專一性B

12、限制性核酸內(nèi)切酶2和3識別的序列都包含6個脫氧核苷酸C限制性核酸內(nèi)切酶1和3剪出的粘性末端一樣D可以識別和切割RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制性核酸內(nèi)切酶2答案D解析不同的限制性核酸內(nèi)切酶有不同的識別序列和切割位點，表達(dá)了酶具有專一性；限制性核酸內(nèi)切酶2和限制性核酸內(nèi)切酶3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC，均含有6個脫氧核苷酸；限制性核酸內(nèi)切酶1和限制性核酸內(nèi)切酶3剪出的粘性末端一樣，均為GATC；三種限制性核酸內(nèi)切酶均不能識別和切割RNA中的核苷酸序列。22019·東陽期中以下有關(guān)基因工程的表達(dá)，正確的選項是ADNA連接酶的作用是將兩個粘性末端的堿基連接起來B目的

13、基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞即發(fā)生基因突變C目的基因與載體結(jié)合的過程發(fā)生在細(xì)胞外D常使用的載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等答案C解析DNA連接酶的作用對象是磷酸二酯鍵，A錯誤；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞屬于基因重組，B錯誤；目的基因與載體在體外重組，重組好之后導(dǎo)入受體細(xì)胞中，C正確；常使用的載體有質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒等，D錯誤。32019·舟山中學(xué)期中對以下圖所示粘性末端的說法錯誤的選項是ADNA連接酶作用位點在b處，催化磷酸基團(tuán)和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵B甲、乙具一樣的粘性末端可形成重組DNA分子，但甲、丙之間不能C甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的D切割甲

14、的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子答案A解析DNA連接酶的作用位點為磷酸二酯鍵，即圖示中的a位置，A錯誤；甲、乙具有一樣的粘性末端TTAA可形成重組DNA分子，但甲、丙粘性末端不同，兩者不能形成重組DNA分子，B正確；限制性核酸內(nèi)切酶特異性識別DNA序列，甲、乙、丙的DNA序列不同，因此粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的，C正確；甲與乙片段形成的重組DNA分子序列與甲的序列不同，識別甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子，D正確。42019·浙江名校協(xié)作體聯(lián)考以下關(guān)于DNA連接酶的理解正確的選項是A其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)BDNA

15、連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵C它不能被反復(fù)使用D在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶答案A解析DNA連接酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，其功能是將末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起，形成重組DNA分子，A正確；DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵，B錯誤；酶可以被反復(fù)使用，C錯誤；DNA聚合酶以一條脫氧核苷酸鏈為模板，將單個脫氧核苷酸連接成DNA單鏈片段，與DNA連接酶的作用機理不同，基因工程中不可用DNA聚合酶代替DNA連接酶，D錯誤。5下面是大腸桿菌及質(zhì)粒載體的構(gòu)造形式圖，請據(jù)圖答復(fù)以下問題：ATGCGC1a代表的物質(zhì)和質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)一樣，都是_，二者還具有其他共同點，如：_，_

16、寫出兩條即可。2假設(shè)質(zhì)粒DNA分子的切割末端為 ，那么與之連接的目的基因切割末端應(yīng)為_；可使用_把質(zhì)粒和目的基因連接在一起。3氨芐青霉素抗性基因在質(zhì)粒DNA上稱為_，其作用是_。4以下常在基因工程中作為載體的是A蘇云金芽孢桿菌抗蟲基因B土壤農(nóng)桿菌中RNA分子C大腸桿菌的質(zhì)粒CGCGT AD動物細(xì)胞的染色體答案1DNA可以自我復(fù)制具有遺傳效應(yīng) 2 DNA連接酶3標(biāo)記基因供重組DNA的鑒定和選擇4C解析質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，是可以自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子，具有一至多個限制性核酸內(nèi)切酶切割位點，進(jìn)入受體細(xì)胞后能自主復(fù)制，具有標(biāo)記基因，便于重組DNA的鑒定與選擇。題組一基因工程的含義與誕生

17、條件1以下關(guān)于基因工程技術(shù)的表達(dá)中，錯誤的選項是A實現(xiàn)了物種間的DNA重組B全過程都在細(xì)胞外進(jìn)展C可定向地改造生物的遺傳性狀D可能通過對天然基因庫的影響對生物圈的穩(wěn)態(tài)帶來不利答案B解析基因工程可以抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，實現(xiàn)物種間的基因重組，A正確；基因工程的核心是形成重組DNA分子，該過程是在細(xì)胞外進(jìn)展的，但是重組DNA分子要導(dǎo)入受體細(xì)胞并使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)展表達(dá)，B錯誤；基因工程可以根據(jù)人們的意愿定向改造生物的遺傳性狀，C正確；基因工程實現(xiàn)了物種間的基因重組，可能通過對天然基因庫的影響給生物圈的穩(wěn)態(tài)帶來不利，D正確。22019·寧波效實中學(xué)期中基因工程誕生的理論根底不包括

18、ADNA是絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)B幾種工具酶的發(fā)現(xiàn)CDNA雙螺旋構(gòu)造確實立D中心法那么的認(rèn)定答案B解析DNA是絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)，這是基因工程誕生的理論根底之一，A不符合題意；幾種工具酶的發(fā)現(xiàn)是基因工程的技術(shù)保障，不是理論根底，B符合題意；DNA雙螺旋構(gòu)造和中心法那么確實立是基因工程誕生的理論根底，C、D不符合題意。題組二限制性核酸內(nèi)切酶32019·紹興一中月考以下有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶識別的表達(dá)，不正確的選項是A從反響類型來看，限制性核酸內(nèi)切酶催化的是一種水解反響B(tài)限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度、pH的影響C一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別雙鏈DNA分子中某種特定的脫氧核苷酸序列D限制

19、性核酸內(nèi)切酶識別序列越短，那么該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越小答案D解析限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，即催化的是一種水解反響，A正確；限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度、pH的影響，在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會降低；在過酸、過堿或溫度過高條件下酶會變性失活，而在低溫條件下酶的活性降低，但不會失活，B正確；一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別雙鏈DNA分子中某種特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點切割磷酸二酯鍵，說明酶具有專一性，C正確；限制性核酸內(nèi)切酶識別序列越短，那么該序

20、列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大，D錯誤。4如下圖是限制性核酸內(nèi)切酶切割某DNA的過程，從圖中可知，該限制性核酸內(nèi)切酶能識別的堿基序列及切點是ACTTAAG，切點在C和T之間BCTTAAG，切點在G和A之間CGAATTC，切點在G和A之間DCTTAAG，切點在C和T之間答案C解析根據(jù)圖示可知，該限制酶的識別序列是GAATTC，切點在G和A之間。5以下關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的表達(dá)中，錯誤的選項是A它能在特殊位點切割DNA分子B同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割不同的DNA分子產(chǎn)生的粘性末端可以很好地進(jìn)展堿基配對C它能任意切割DNA分子，從而產(chǎn)生大量DNA片段D每一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別特定的核苷酸序列答案

21、C解析限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的重要工具之一；每種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別特定的核苷酸序列，并在特定的位點上切割DNA分子；同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割不同的DNA分子產(chǎn)生的粘性末端能進(jìn)展互補配對。題組三DNA連接酶62019·浙江綠色聯(lián)盟期末以下關(guān)于DNA連接酶的作用表達(dá)正確的選項是A將單個核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵B將斷開的兩個DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵C連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D能將任意兩個粘性末端連接起來答案B解析DNA連接酶的作用是將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起重新形成磷酸二酯鍵，形成重組DNA分子，故B正確。7如下圖

22、過程中基因操作的工具是A限制性核酸內(nèi)切酶 BDNA連接酶CRNA轉(zhuǎn)錄酶 D胰島素基因載體答案B解析DNA連接酶的作用是將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接起來，B正確。8以下四條DNA分子粘性末端的縫隙能通過DNA連接酶連接的是A B C D答案D解析DNA連接酶可以將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起，圖中和的末端堿基可以互補連接，D項符合題意。題組四質(zhì)粒9以下有關(guān)細(xì)菌質(zhì)粒的表達(dá)，正確的選項是A質(zhì)粒是存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀的細(xì)胞器B質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞中能自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子C質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后在宿主細(xì)胞內(nèi)才能復(fù)制D細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細(xì)胞外獨立進(jìn)展的答案B

23、解析質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子，可以在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)或宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。10基因工程的運輸工具載體，必須具備的條件之一及理由是A可以在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因B具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點，以便目的基因的表達(dá)C具有某些標(biāo)記基因，以便為目的基因的表達(dá)提供條件D可以在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存，便于進(jìn)展挑選答案A解析可以在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存并大量復(fù)制是載體必須具備的條件之一，以便提供大量的目的基因，A正確；具有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點，以便與目的基因連接，B錯誤；具有某些標(biāo)記基因是為了重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞后便于進(jìn)展挑選，C、D錯誤。題組五綜合

24、應(yīng)用112019·寧波效實中學(xué)期中以下說法正確的選項是A限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是GAATTC，只能在G和A之間切斷DNABDNA連接酶可以將任意2個DNA片段連接在一起C質(zhì)粒是可以自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子D基因工程的載體只有質(zhì)粒一種答案C解析限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，A錯誤；DNA連接酶將具有一樣粘性末端的2個DNA片段之間的磷酸二酯鍵連接起來，B錯誤；質(zhì)粒是基因工程常用的載體，是可以自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子，C正確；常用的基因工程載體有質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒等，D錯誤。1220

25、19·臺州書生中學(xué)期中以下關(guān)于基因工程的有關(guān)表達(dá)，正確的選項是A基因工程常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體B一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點上切割DNAC常用的載體質(zhì)粒都來源于原核生物DDNA連接酶可代替DNA聚合酶用于DNA的復(fù)制答案B解析基因工程常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，載體是工具，不是酶，A錯誤；一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點上切割DNA，B正確；質(zhì)粒一般來源于原核生物，也可以來源于真核生物，如酵母菌，C錯誤；DNA聚合酶以DNA的一條鏈為模板將單個脫氧核苷酸連接成DNA單鏈片

26、段；DNA連接酶不需要模板，將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起，形成重組DNA分子，兩者作用機理不同，DNA復(fù)制中不能用DNA連接酶代替DNA聚合酶，D錯誤。13以下圖所示為一種限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子的示意圖。請據(jù)圖答復(fù)：1這種限制性核酸內(nèi)切酶的切點在_A.GABGCCATDAC之間，形成_個粘性末端，特點是_。2從上述題中可知，限制性核酸內(nèi)切酶的識別特點是_。3假如G點發(fā)生突變，限制性核酸內(nèi)切酶還能不能識別該核苷酸序列？_。答案1A2堿基序列互補2只能識別某種特定的核苷酸序列3不能解析1由題圖可知，該限制性核酸內(nèi)切酶可專一性地識別GAATTC，切點在G和A之間，結(jié)果形成堿基互補的兩個粘性末端。2限制性核酸內(nèi)切酶只能識別某種特定的核苷酸序列。3假如G點發(fā)生突變，那么核苷酸序列發(fā)生改變，這種限制性核酸內(nèi)切酶將不能再識別該核苷酸序列。14限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列和切點是GGATCC，限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列和切點是GATC。在質(zhì)粒上有限制性核酸內(nèi)切酶的一個切點，在外源DNA片段的兩側(cè)各有一個限制性核酸內(nèi)切酶的切點。1請畫出質(zhì)粒被限制性核酸內(nèi)切酶切割后所形成的粘性末端。2請畫出外源DNA片段兩側(cè)被限制性核酸內(nèi)切酶切割后所形成的粘性末端。3在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制性核酸內(nèi)切酶切割后形成的粘