肝靶向納米給藥系統(tǒng)的最新研究進(jìn)展

1、肝靶向納米給藥系統(tǒng)的最新研究進(jìn)展王蔚 ，袁直（功能高分子材料教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南開大學(xué)高分子化學(xué)研究所，天津）摘要：肝臟疾病是威脅人類生命健康的重要疾病之一，對(duì)肝臟疾病檢測(cè)及治療方法的研究也引起人們的極大重視。 靶向藥物遞送系統(tǒng)（）可將藥物選擇性地輸送到靶點(diǎn)組織，從而提高藥物的生物利用率并降低毒 副作用，已引起了研究者的廣泛關(guān)注。 近年來，越來越多的研究嘗試將靶向藥物遞送系統(tǒng)應(yīng)用于肝臟疾病的顯 像檢測(cè)以及藥物基因治療，并取得了十分顯著的成績(jī)。 本文將對(duì)近年來開發(fā)的新型納米肝靶向給藥系統(tǒng)，尤其是配體受體介導(dǎo)的主動(dòng)肝靶向給藥系統(tǒng) 在 藥 物基因遞送以及顯影檢測(cè)方面的最新進(jìn)展做一個(gè)綜述，對(duì) 各 靶向

2、給藥系統(tǒng)的肝靶向能力進(jìn)行了總結(jié)對(duì)比，并對(duì)肝靶向給藥系統(tǒng)的發(fā)展方向進(jìn)行了預(yù)測(cè)。關(guān)鍵詞：肝靶向；藥物遞送；被動(dòng)靶向；主動(dòng)靶向；配體受體介導(dǎo)引言我國(guó)是世界上肝臟疾病的高發(fā)區(qū)，其中乙肝感染者數(shù)量已經(jīng)過億，相當(dāng)于每 個(gè)人中即有 個(gè)乙肝感染者，丙肝病毒感染者也已超千萬大關(guān)，而乙型丙型病毒是導(dǎo)致肝硬化、甚至肝癌的重要因素。 全國(guó)每年超過 萬人死于病毒性肝炎等相關(guān)疾病，而因肝癌死亡的人數(shù)即超過 萬人，在男性中占據(jù)癌癥 死亡人數(shù)的第 位，女性中居第 位。目前，對(duì)于病毒性肝炎、肝硬化、肝纖維化等疾病仍以藥物控制為主。 而對(duì)于早期肝癌患者來說（瘤塊小于），其癌細(xì)胞并未擴(kuò)散到淋巴結(jié)和身體的其它部位，因此手術(shù)切除治療是

3、最為有效手段。然而肝癌 的發(fā)病較隱匿，早期患者無明顯癥狀，而肝癌患者一旦因出現(xiàn)癥狀而前往醫(yī)院就診，其病程大多已進(jìn)入中、 晚期，錯(cuò)過了手術(shù)治療的最佳時(shí)期；此時(shí)即使手術(shù)切除，其治療成功率也僅為 ，。由此可見，實(shí)現(xiàn)肝癌的早期高靈敏檢測(cè)是手術(shù)治療能否成功的關(guān)鍵因素，這對(duì)于顯像學(xué)的發(fā)展提出來更高的要求；而對(duì)于肝炎、肝硬化以及中晚期肝癌患者：非手術(shù)治療，尤其是藥物治療就成為了綜合治療的重要手段之一?；熓抢没瘜W(xué)藥物對(duì)癌細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用，同時(shí)也可控制癌細(xì)胞擴(kuò)散。 目前，化療是治療肝癌的 最普遍采用方法，但傳統(tǒng)的化療方式是通過常規(guī)途徑給藥，當(dāng)達(dá)到一定的血藥濃度后，化療藥物在全身分 布，缺乏選擇性，在殺傷癌細(xì)

4、胞的同時(shí)也對(duì)全身臟器構(gòu)成傷害，不僅影響療效，也給病人帶來巨大痛苦；且 到達(dá)肝臟腫瘤部位的藥物僅為一小部分，大部分藥物不僅未發(fā)揮藥效作用，還會(huì)對(duì)其它正常臟器產(chǎn)生嚴(yán) 重的毒副作用，影響這些藥物的治療效果。 因此，改變化療的給藥途徑、變換藥物劑型等各種各樣的嘗試 從未間斷，其中肝靶向性納米給藥系統(tǒng)的研究已引起越來越多的重視。肝靶向藥物遞送系統(tǒng)（，）可將藥物、基因等化學(xué)物質(zhì)選擇 性地輸送至肝臟，提高負(fù)載物在肝臟部位的濃度、延長(zhǎng)其半衰期，從而達(dá)到減少用藥劑量和給藥次數(shù)，降 低藥物毒副作用，提高轉(zhuǎn)染效率。 隨著對(duì)細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)功能認(rèn)識(shí)的不斷深入，近年來受體介導(dǎo)的肝靶向遞送系統(tǒng)成為研究熱點(diǎn)，。 它是采用物理或

5、化學(xué)的方法將特定的配基引入藥物載體，通過配基與細(xì)胞 膜上的受體發(fā)生特異相互作用，介導(dǎo)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)對(duì)修飾有配基的載體材料的高效內(nèi)吞，從而達(dá)到靶向遞送收稿：；修回：；基金項(xiàng)目：國(guó)家自然基金面上項(xiàng)目（，）， 計(jì)劃（）及天津市科技支撐計(jì)劃重點(diǎn) 項(xiàng)目（）；作者簡(jiǎn)介：王蔚，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)樯镝t(yī)用高分子材料； 通訊聯(lián)系人，：高分子通報(bào) 年 月· ·的目的。 另外，利用 還可將顯影劑高濃度的富集于肝臟部位，提高顯影效果，從而達(dá)到提高檢查靈敏度的作用。 由此可見，開 發(fā) 高 效 的 對(duì)于肝臟疾病的早期檢測(cè) 以及治療均有非常重要的作 用。 而納米技術(shù)近 年來發(fā)展迅速，利用納米

6、尺度的脂質(zhì)體、膠束、微凝膠等作為載體可以起到促進(jìn)藥物溶解、提高藥物穩(wěn)定性、改善藥物釋放行為等功效；更重要的是納米技術(shù)還可以改變藥物在體內(nèi)的分布，即具備一定靶向能力。 因此，將納米技術(shù)與靶向遞送系統(tǒng)相結(jié)合，開發(fā)新型的肝靶向性納米給藥系統(tǒng) 成為了今年來研究的熱點(diǎn)。 本文中將對(duì)目前開發(fā)的主被動(dòng)肝靶向給藥系統(tǒng)進(jìn)行綜述，并對(duì)各靶向給藥 系統(tǒng)的肝靶向能力進(jìn)行對(duì)比總結(jié)。被動(dòng)靶向被動(dòng)靶向（），指的是載藥微粒進(jìn)入體內(nèi)后由于腫瘤與正常組織間血管密度及滲透性的差異或被巨噬細(xì)胞作為外界異物吞噬的自然傾向而產(chǎn)生的體內(nèi)分布特征。 一般認(rèn)為：被動(dòng)靶向的微粒經(jīng)靜脈注射后其在體內(nèi)的分布首先取決于粒徑的大小，小于 的納米囊或納米

7、球可緩慢積集于骨 髓； 的納米粒子可富集于實(shí)體腫瘤部位； 時(shí)一般被 肝、脾 中 巨 噬 細(xì) 胞 攝 取；大 于 的微粒通常被肺毛細(xì)血管床截留，進(jìn)入肺組織或肺氣泡。 由此可見被動(dòng)肝靶向給藥體統(tǒng)主要依賴 于體內(nèi)的單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（，）；早期文獻(xiàn)中也將 稱為網(wǎng)狀內(nèi) 皮系統(tǒng)（，）。單核細(xì)胞發(fā)生于骨髓的多能干細(xì)胞，循環(huán)于血液中，是血液中最大的血細(xì)胞。 目前認(rèn)為單核細(xì)胞是吞噬細(xì)胞的前身，它穿 透 血 管 內(nèi) 皮 進(jìn) 入 組 織 內(nèi)，轉(zhuǎn) 變 為 吞 噬 細(xì) 胞。 肝臟擁有人體內(nèi)數(shù)量最多的吞噬細(xì) 胞 枯否細(xì)胞（），約占吞噬細(xì)胞總數(shù)的 。 研究表明具有以下特征的顆粒會(huì)被 迅速清除 并在肝、脾等器官累積，從而產(chǎn)生

8、一定被動(dòng)靶向功效：（）擁有較大的粒徑（直徑 ）；（）非球形顆 粒；（）表面具有較強(qiáng)疏水性；（）表面具有高密度電荷。 因此利用 吞噬功能就成為了肝靶向給藥的有效途徑。等將負(fù)載阿霉素的聚氰基丙烯酸異己酯（）納米顆粒（，粒徑）用于小鼠轉(zhuǎn)移性肝腫瘤的治療，。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相對(duì)阿霉素注射液（）， 可明顯增加阿霉素在肝臟部位的富集，其肝腫瘤藥時(shí)曲線下面積（）是對(duì)照組的 倍；因此其抑制肝腫瘤轉(zhuǎn)移能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于（兩者腫瘤轉(zhuǎn)移率最大相差），從而大大延長(zhǎng)了小鼠的存活時(shí)間。雖然 靶向?qū)τ谥委煾文[瘤具有一定的促進(jìn)作用，但眾所周知，惡性肝腫瘤往往發(fā)生在肝實(shí)質(zhì)細(xì) 胞，而 會(huì)將大量藥物聚集在 細(xì)胞中，這就造成大量藥物無法直接作

9、用于腫瘤部位，影響治療效果。 因此，開發(fā)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向給藥系統(tǒng)就顯得尤為重要。 不過我們也應(yīng)注意到：與肝部炎癥以及肝纖維化有著重要聯(lián)系，因此在治療此類疾病時(shí)， 的被動(dòng)靶向作用仍然具有十分重要的作用。主動(dòng)靶向主動(dòng)靶向給藥系統(tǒng)（，）的概念是由德國(guó)科學(xué)家 于 年首先提出的。 該系統(tǒng)主要包括三個(gè)部分：靶向基團(tuán)（）、載體（）以及藥物（）。 其基本含義就是載體將藥物通過局部給藥或全身血液循環(huán)選擇性的濃集于靶器官、靶組織、靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的給藥系統(tǒng)。為了降低 系統(tǒng)對(duì)主動(dòng)靶向效率的影響，首先應(yīng)保證藥物載體能逃離 的吞噬，并實(shí)現(xiàn)在血 液內(nèi)的長(zhǎng)效循環(huán)。 因此，一般均需對(duì)納米粒子表面進(jìn)行親水改性并控制其粒徑在 之

10、間（亦 有文獻(xiàn)報(bào)道為）。 由于 具有高親水性、高體積排阻效應(yīng)以及低毒性，已經(jīng)成為目前最 常用的親水改性試劑。按肝靶向的靶細(xì)胞分類，肝靶向遞送系統(tǒng)可分為肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向、非實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向以及肝腫瘤細(xì)胞 靶向，下文中將分別對(duì)這幾種肝靶向給藥系統(tǒng)進(jìn)行詳細(xì)介紹。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞（，）是 肝 臟 中 數(shù) 量 最 多 的 細(xì) 胞，約占肝臟總細(xì)胞數(shù)的 第 期高分子通報(bào)· ·。有關(guān)肝的大多數(shù)病變?nèi)绺伟?、肝炎、肝硬化等多發(fā)生于此，是肝靶向給藥系統(tǒng)理想的靶 標(biāo)之一。 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞表面含有多種受體，如去唾液酸糖蛋白受體可以識(shí)別半乳糖、乳糖等配體；甘草酸甘草次酸受體可以識(shí)別甘草酸以及甘草次酸等。

11、 利用這些受體配體間特異性的相互作用，研究人員研 發(fā)出一系列高效的肝靶向給藥系統(tǒng)。去唾液酸糖蛋白受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng) 目前受體配體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)研究中，應(yīng)用最為廣泛 的 是 去 唾 液 酸 糖 蛋 白 受 體 （，）。 又 名 肝 凝 集 素（）和肝細(xì)胞半乳糖受體，是 世紀(jì)六七十年代由 和 在研究哺乳動(dòng)物血漿 糖蛋 白 代 謝 時(shí) 發(fā) 現(xiàn) 的 一 種 受 體，其在不同種屬 的 哺乳動(dòng)物肝 細(xì) 胞上的數(shù)量不同：如 鼠 肝 細(xì) 胞 上 含 有， 個(gè) 受體，人肝細(xì)胞上含有， 個(gè) 受體，其中約 分布在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞膜 表面。 是現(xiàn)今為止了解得最透徹的肝主動(dòng)靶向受體，它能專一識(shí)別末端帶有半乳糖（）

12、殘 基或乙酰半乳糖胺（）殘基的寡糖或寡糖蛋白，目前已見報(bào)導(dǎo)的 配基有：去唾液糖蛋白、 乳糖酸（，）、半乳糖化配體（，）、無唾液酸胎球蛋白（）以及 豆甾醇糖苷（，）等?；谏鲜鎏匦?，近年來研究者們利用 配基修飾一些外源性功能物質(zhì)，設(shè)計(jì)合成出一系列基 于 受體介導(dǎo)的肝靶 向 給 藥 系 統(tǒng)。 等合 成了乳糖?；?性 殼 聚 糖，并 用 進(jìn) 行 標(biāo) 記，標(biāo)記的乳糖 化 殼 聚 糖 注 射 后 、 和 ，每 克 劑 量 的 肝 蓄 積 率 分 別 是 、 和 ，肝靶向性明顯高于普通殼聚糖，同時(shí)又被游離半乳糖所阻礙，表明肝臟對(duì)其攝取是通過 介導(dǎo)的途徑。 由于此工作考察的是水溶性高分子在肝臟的累積程度

13、而非納米顆粒，因此可以基本排除 吞噬系統(tǒng)對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，這對(duì)于評(píng)價(jià)材料的主動(dòng)肝靶向能力是十分重要的。等將去唾液酸胎球蛋白（）修飾到脂質(zhì)體表面（），并研究了其在小鼠體內(nèi)的分布及對(duì)肝 實(shí)質(zhì)細(xì)胞的靶向能力，結(jié)果顯示： 標(biāo)記的 在肝臟累計(jì)可達(dá)，而非 標(biāo)記的脂質(zhì)體在肝臟的累 計(jì)僅為。等將干擾素（）與半乳糖化的人血清白蛋白（）共價(jià)連接得 到 偶 合 物 ，并用對(duì)偶合物進(jìn)行標(biāo)記。結(jié)果顯示肝細(xì)胞與 （）的結(jié)合率較 （）明顯提高。小鼠體內(nèi)分布研究表明 具有明顯趨肝性（肝臟分布 ）。等，在 受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)領(lǐng)域進(jìn)行了大量研究，并取得了顯著成效。 他們通過超聲乳 化 法 制 備 了 表 面 修 飾 半

14、乳 糖 胺 的 聚 谷 氨 酸聚 乳 酸 （）納 米 膠 束 （粒 徑 為），并探討其作為肝靶向紫杉醇載體的可行性（如圖 所示）。 他們考察了納米粒在大鼠體內(nèi) 的分布；同時(shí)比較不同劑型紫杉醇對(duì)接種 荷瘤裸鼠的腫瘤生長(zhǎng)抑制能力。 結(jié)果表明即使在注射 后，經(jīng)半乳糖胺（）修飾的納米粒在肝臟的富集率仍顯著高于其它臟器，且不隨時(shí)間延長(zhǎng)發(fā)生明顯 變化。 抑瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步顯示經(jīng) 修飾載藥納米粒作用后的裸鼠，其腫瘤生長(zhǎng)受到明顯抑制，而鼠 體重幾乎保持恒定，說明該載藥納米粒能專一高效地殺傷肝癌細(xì)胞，而對(duì)正常組織幾乎不產(chǎn)生影響，。圖半乳糖胺修飾的聚谷氨酸聚乳酸納米粒的制備模式圖 高分子通報(bào) 年 月·

15、·等通過陰離 子 開環(huán)聚合法得到半乳 糖修飾的聚乙二醇聚谷氨酸芐酯嵌段共聚物 （），其可在水溶液中組裝成 的膠束。 作者通過流式細(xì)胞儀比較了不同種類肝癌細(xì)胞對(duì)熒光標(biāo)記納米粒的攝取能力，結(jié)果顯示 細(xì)胞（富含 受體的肝癌細(xì)胞株）內(nèi)的熒光強(qiáng)度要遠(yuǎn)高于 細(xì)胞（ 受體缺失的肝癌細(xì)胞株），說明 受體具有專一性。張先正課題組制備了半乳糖官能化并鍵接 的聚己內(nèi)酯葡聚糖接枝共聚物（），該共聚物不論在體內(nèi)還是體外均能形成穩(wěn)定的膠束（粒徑為）（見圖）。 將半乳糖修飾的膠束經(jīng)尾靜脈注入小鼠體內(nèi) 后，將小鼠解剖，各主要臟器勻漿后，發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟中的綠色熒光強(qiáng) 度明顯高于其它臟器的熒光強(qiáng)度；而未修飾半乳糖膠束組小

16、鼠肝臟勻漿液未發(fā)現(xiàn)綠色熒光，說明半乳糖修飾的膠束具有明 顯 的 肝 臟 靶 向 性，揭 示 了 半 乳 糖 官 能 化 的 膠 束 在 肝 靶 向 藥 物 傳 遞 領(lǐng) 域 的 巨 大 應(yīng) 用 前景。圖 標(biāo)記的半乳糖官能化聚己內(nèi)酯葡聚糖接枝共聚物（）的自組裝過程（上）及 受體介導(dǎo)內(nèi)吞模式圖（下） （） （） 景遐斌課題組制備了乳糖修飾的 共聚物（）和羅丹明標(biāo)記的 共聚物 （），并 通 過 共 混 制 備 了 熒光示 蹤 的 膠 束作為肝靶向 藥 物載體 （），圖 為實(shí)驗(yàn)流程示意圖，經(jīng)尾靜脈將羅丹明標(biāo)記的膠束注射到小鼠體內(nèi)，在不同時(shí)間點(diǎn)將小鼠 處死，取出主要臟器，經(jīng)熒光成像發(fā)現(xiàn)，靶向膠束組小鼠肝臟

17、的熒光亮度明顯強(qiáng)于未修飾乳糖組，靶向組在 時(shí)肝臟的熒光強(qiáng)度最大，在 時(shí)靶向組小鼠肝臟仍可見到很強(qiáng)的熒光，而非靶向組已經(jīng)基本看不 到熒光成像，說明乳糖修飾的膠束具有明顯的肝靶向性。另外，課題組開發(fā)了一類基于豆源甾醇糖苷（）的肝靶向給藥體系。 他們將 鏈接到 脂質(zhì)體表面，并將其用于包載阿霉素（）。 其研究結(jié)果顯示，相比普通脂質(zhì)體 修飾脂質(zhì)體可將更 多的藥物輸送至肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞，而 與肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞間的結(jié)合可以被去唾液酸胎球蛋白（）抑制，體現(xiàn)出 其 受體介導(dǎo)的性質(zhì)。 石靖等也制備了豆甾醇糖苷修飾陽離子脂質(zhì)體（），并研 究了其在小鼠體內(nèi)的分布及對(duì)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的靶向能力，結(jié)果顯示：尾靜脈注射 半小時(shí)后，其 在肝臟

18、的累計(jì)達(dá)到峰值（），而且顯示出明顯的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向能力（其在實(shí)質(zhì)細(xì)胞中的濃度約為非 實(shí)質(zhì)細(xì)胞中的 倍）。甘 草 酸甘草次 酸 受 體 介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng) 甘 草 酸 （，）和 甘 草 次 酸（，）存在于甘草的根、莖部，安全性高、廉價(jià)，具有多種藥理活性，如抗炎、抗菌、抗腫瘤、抗?jié)?、抗肝病毒肝炎及保肝護(hù)肝等，結(jié)構(gòu)如圖 所示。 上世紀(jì) 年代，等發(fā)現(xiàn)甘草次酸能與鼠肝勻漿中的細(xì)胞膜組份微粒發(fā)生可逆性、飽和性結(jié)合，明確指出了肝細(xì)胞膜上存在大量的甘草次酸受體。等則研究了分離鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞對(duì)甘草酸的攝取機(jī)理，證實(shí)了鼠肝細(xì)胞上也存在 甘草酸的結(jié)合位點(diǎn)。 楊山麥、顧云娣小組是國(guó)內(nèi)首個(gè)開展這方面研究的課題組，他們采

19、用膠體金探針法，第 期高分子通報(bào)· ·圖多功能共聚物膠束靶向哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞表面乳糖或半乳糖受體示意圖 從超微水平原位證實(shí)了大鼠肝細(xì)胞膜上確實(shí)含有甘草次酸和甘草酸結(jié)合位點(diǎn)，所得結(jié)果和 及的結(jié)果相符。 基于這些 結(jié) 論，研究者推測(cè)甘草 酸甘 草 次 酸可用作肝靶向給藥系統(tǒng)的導(dǎo)向基團(tuán)。于是，基于甘草酸甘草次酸受體介導(dǎo)的新型肝靶向給藥系統(tǒng)的研究逐漸開展起來。圖 甘草酸（）及甘草次酸（）結(jié)構(gòu)圖 （） （）甘草酸受體課題組，首次制備了甘草酸修飾的脂質(zhì)體（），體內(nèi)分布表明甘草酸修飾的脂 質(zhì)體可在肝臟富集， 的累積量為 ，是非靶向組（）的 倍；進(jìn)一步研究表明 具 有較高的鼠肝細(xì)胞親和性，

20、培養(yǎng)后，鼠肝細(xì)胞對(duì) 的攝取量是 的 倍。 隨后，毛聲 俊、侯世祥在甘草酸修飾的肝靶向給藥系統(tǒng)研究中做了相當(dāng)多的工作。 他們先以牛血清白蛋白為載體，鈣黃綠素為模型藥物，制備了未經(jīng)甘草酸修飾的載藥納米粒子（）和甘草酸修飾的載藥納 米粒（），結(jié) 果 表 明 后 鼠 肝 細(xì) 胞 對(duì) 的 攝 取 量 是 組 的 倍。 平其能、林愛華等，則以殼聚糖為載體，通過離子交聯(lián)法制備了表面修飾甘草酸的殼聚糖納 米粒（），體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 可特異性地在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞富集，富集率為肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的 倍，且呈現(xiàn)明顯的時(shí)間和劑量雙重依賴性，說明甘草酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞對(duì)肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞具 有高度特異性。 這一結(jié)論具有很重要的意義，因

21、為大多數(shù)病變?nèi)绺伟?、肝炎、肝硬化多發(fā)生于肝實(shí) 質(zhì) 細(xì) 胞，因此研制能夠特異靶向肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的給藥系統(tǒng)更具實(shí)際意義。甘草次酸受體在 研究中發(fā)現(xiàn)：甘草次酸與肝細(xì)胞的結(jié)合能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于甘草酸，因此，以甘草次酸作為肝靶高分子通報(bào) 年 月· ·向配體有望獲得更為優(yōu)異的靶向功能。毛聲俊、侯世詳最早研究了此類肝靶向載體，他們以混合類脂（磷脂、膽固醇）為載體，制備了甘草次酸修飾的載鈣黃綠素脂質(zhì)體（），并研究了其對(duì)鼠源細(xì)胞的親和 能力。大鼠肝細(xì)胞內(nèi)吞實(shí)驗(yàn)顯示：鼠肝細(xì)胞對(duì) 的攝取量是普通脂質(zhì)體的 倍，并且游離甘草 次酸能顯著的抑制該過程，而對(duì)照組幾乎不受影響，證實(shí)了甘草次酸受體介導(dǎo)的肝靶向能力。上

22、述研究，在鼠源細(xì)胞水平證實(shí)了甘草次酸介導(dǎo)的給藥體系具有明顯的肝靶向能力，但目前為止甘草酸甘草次酸介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)幾乎全都停留在實(shí)驗(yàn)室階段，很多問題有待進(jìn)一步的討論，如：（） 受體介導(dǎo)的靶向給藥體系是否對(duì)人源肝細(xì)胞具有同樣的親和能力；（）靶向載體將藥物大量聚集 在肝臟部位的同時(shí)，是否會(huì)對(duì)正常肝組織損傷；（）肝臟疾病患者往往伴隨著代謝能力下降等問題，體內(nèi) 環(huán)境會(huì)發(fā)生較大改變。 因此在原位肝腫瘤條件下，該靶向給藥體系能否正常發(fā)揮藥效也是需要進(jìn)一步探討的問題。 基于這些問題，本課題組設(shè)計(jì)了一系列甘草次酸受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)，并對(duì)其肝靶向 能力、體內(nèi)外抑瘤效果、藥代動(dòng)力學(xué)及其對(duì)腫瘤組織及正常組織的

23、損失情況進(jìn)行了長(zhǎng)期、系統(tǒng)的研究。 查 瑞濤等，成功制備了一系列端基偶聯(lián)甘草次酸的聚谷氨酸芐酯肝靶向材料以及側(cè)鏈偶聯(lián)甘草次酸的 殼聚糖納米粒子，并對(duì)其制備條件、穩(wěn)定性及釋藥行為進(jìn)行了系統(tǒng)研究。 在此基礎(chǔ)上黃微等利用開環(huán) 聚合制備了甘草次酸聚乙二醇聚谷氨酸芐酯的載阿霉素膠束（）并考察了其對(duì)人肝癌 細(xì)胞的親和能力，結(jié)果顯示甘草次酸對(duì)人源肝細(xì)胞同樣具有很強(qiáng)的親和性， 細(xì)胞對(duì)靶向組膠束的攝取能力是非靶向組的 倍（見圖 ）。 同時(shí)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明 裸 藥 阿 霉 素 （）、非 靶 組（）和靶向組（）的 值分別為、 和。 甘草次酸修 飾的載藥膠束的 較裸藥 降低了約一半，意味著 能在達(dá)到和裸藥相同療 效的情

24、況下可減少藥物用量，從而降低藥物毒副作用，提高病人依從度。 此外，宋相容課題組制備了甘草次酸修飾負(fù)載基因脂質(zhì)體，結(jié)果表明甘草次酸修飾后可顯著提高脂質(zhì)體對(duì)人肝癌細(xì)胞 的轉(zhuǎn) 染效率，同樣證實(shí)了甘草次酸對(duì)人源肝細(xì)胞的靶向能力。圖 人肝癌細(xì)胞包吞不同納米粒子共聚焦顯微鏡照片： 納米粒子，： 納米粒子 （） （） 在證實(shí)了甘草次酸對(duì)人源細(xì)胞的靶向能力后，本組在動(dòng)物體內(nèi)繼續(xù)研究了甘草次酸藥物載體的趨肝 能力及代謝情況。 田秦等利用標(biāo)記了甘草次酸聚乙二醇?xì)ぞ厶牵ǎ?fù)合納米粒， 并在大鼠體內(nèi)考察了空白納米粒子的分布行為，結(jié)果表明， 復(fù)合納米?？筛叨雀患诟闻K，占總劑量的 ，是對(duì) 照 組（未 修 飾 的 聚 乙

25、 二 醇?xì)?聚 糖 復(fù) 合 納 米 粒）的 倍。 吳 超、郭 偉 英也得到了類 似 結(jié) 果：與 去 斑 蝥 素 溶 液 組 相 比，其制 備的甘草次 酸修飾的去斑 蝥 素脂質(zhì)體 （）在肝臟的靶向指數(shù)為，具有明顯的肝臟靶向性，能提高藥物療效，降低毒副作用。 隨 后，田秦等又利用單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像術(shù)技術(shù)（）考察了 修飾納米粒的肝靶向機(jī)理，第 期高分子通報(bào)· ·對(duì) 的結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了分析，結(jié)果證實(shí)從不同位點(diǎn)（ 位羥基及 位羧基，見圖）連接的 修飾納米粒對(duì)大鼠肝臟均具有很強(qiáng)的肝靶向性。為了研究甘草次酸受體介導(dǎo)肝靶向給藥體系對(duì)藥物代謝的影響。 張闖年等制備了甘草次酸修飾 海藻酸鈉

26、載阿霉素納米粒子（ ），并考察了肝靶向給藥體系的藥代動(dòng)力學(xué)。 研究結(jié)果 顯示：尾靜脈注射 后（）小鼠肝臟藥物濃度達(dá)到峰值（），是非靶向納米粒子組峰值藥物濃度的 倍；此 外，相 對(duì) 阿 霉 素 鹽 酸 鹽 （·）注 射 液，靶向組藥物在肝臟的平均駐留 時(shí) 間（）及半衰期顯著上升，分別是 ·的 倍和 倍，即使在注射藥物 天后，肝臟中仍可檢 測(cè)到較高濃度的阿霉素（）。 由此可知 不僅可以促進(jìn)藥物在肝臟的富集， 而且延長(zhǎng)了藥物在肝臟部位的駐留時(shí)間，顯著提高了藥物的生物利用率。本組前期研究中發(fā)現(xiàn)：包載阿霉素的 復(fù)合納米粒能顯著抑制異位肝癌荷瘤裸鼠的腫 瘤生長(zhǎng)。 但眾所周知，肝臟是人體

27、重要的代謝器官，其發(fā)生病變后，人體環(huán)境會(huì)發(fā)生很大改變。 因此，在 原位肝腫瘤模型條件下研究肝靶向給藥體系的效果就顯得尤為重要。 張闖年等首先建立了原位肝腫瘤 荷瘤小鼠模型，并 在 此 基 礎(chǔ) 上 研 究 了 的 對(duì) 原 位 腫 瘤 的 抑 制 效 果。 結(jié) 果 顯 示： 對(duì)于原位肝腫瘤抑瘤率可達(dá) （），而相同給藥條件下的 ·抑瘤率為（）；同時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)注射 ·組小鼠心肌細(xì)胞有壞死現(xiàn)象且體重有顯著下降，而靶向組 小鼠心肌細(xì)胞正常且體重?zé)o明顯變化。 結(jié)合以上結(jié)果可知，由于 可將藥物集中輸送到肝臟部位并減少其在其它臟器的分布（如心臟），因此其不僅可顯著提高其肝腫瘤抑制能力，而且明

28、 顯降低藥物的毒副作用。在研究中我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)有趣的現(xiàn)象：雖然 將藥物集中輸送到了肝臟，然而組 織切片結(jié)果顯示其對(duì)正常肝細(xì)胞并無明顯傷害。 鑒于此本組展開了進(jìn)一步研究。 田秦等研究了甘 草次酸修飾 殼 聚 糖 硫 酸 酯 膠 束 （）與 人 肝 癌 細(xì) 胞 （）以 及正常人肝細(xì)胞 （）親和性的差異。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示： 細(xì)胞對(duì) 的包吞能力是 細(xì)胞 的 倍；而非肝細(xì)胞（細(xì)胞） 納米粒子以及非甘草次酸修飾納米膠束（）的包吞無顯著差別（如圖 所示）。 這表明甘草次酸受體不僅具有肝細(xì)胞親和能力，而且還具有識(shí) 別肝癌細(xì)胞和正常肝細(xì)胞的功能，因此甘草次酸受體介導(dǎo)的藥物遞送系統(tǒng)可將藥物主要運(yùn)送到肝腫瘤部 位，從

29、而減少對(duì)正常肝組織的影響，這對(duì)于提高藥物利用率、降低藥物毒副作用具有十分重要的意義。圖不同細(xì)胞對(duì)甘草次酸修飾膠束（）及硬脂酸修飾膠束（）的胞吞情況 綜上所述，這些結(jié)果不僅進(jìn)一步闡明了肝細(xì)胞表面存在甘草類物質(zhì)的受體，也證實(shí)了甘草酸甘草次 酸受體介導(dǎo)的肝靶向給藥的可能性。 與去唾液酸糖蛋白受體一樣，甘草酸甘草次酸介導(dǎo)的靶向給藥系 統(tǒng)主要用于肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞給藥，而且，甘草酸甘草次酸介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)可在原位肝腫瘤模型中發(fā)揮優(yōu) 異的治療效果，具有十分良好的應(yīng)用前景。 但該靶向給藥系統(tǒng)還有許多待解決的問題，特別是甘草酸甘高分子通報(bào) 年 月· ·草次酸的受體仍未確定，且配體受體間相互作用機(jī)

30、理也還需進(jìn)一步闡明。膽酸（鹽）介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)膽酸（）是膽汁的主要成分，在體內(nèi)具有特殊的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，可被肝臟特異性吸收，這種吸收是通過肝細(xì)胞膜上的 依賴性轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)（）及 非依賴性轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)（）來實(shí)現(xiàn)的。 以膽酸為藥物載體，不但能夠?qū)崿F(xiàn)藥物的肝靶向性，減少毒副作用，還 能夠提高藥物的口服生物利用度。陳志鵬等制備了膽酸修飾脂質(zhì)體（ ）并研究了其肝靶向能力，結(jié)果顯示與傳統(tǒng)脂質(zhì)體（）相比 的血液循環(huán)時(shí)間及肝臟駐留時(shí)間均顯著延長(zhǎng)，其在肝臟的藥時(shí)曲線下面積值（）是 的 倍，體現(xiàn)出一定的肝靶向能力。 但研究顯示，該給藥體系并未提高藥物在肝臟的峰值濃度。清道夫受體介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)清道夫受體（，）是固有免疫中

31、一類重要的模式識(shí)別受體，分為多種類型（、），其中 主要分布于肝臟部位，參與脂肪、膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)等體內(nèi)過程。 高密度脂蛋白（）的主要功能是清除血液和細(xì)胞中過多的膽固醇，它可將沉積在血管壁 的膽固醇、血小板顆粒剝離下來，然后通過與肝細(xì)胞表面 的高親和性結(jié)合將膽固醇帶入肝臟，經(jīng)膽道腸道排出體外，因此 具有一定的肝細(xì)胞靶向功能。由于脂蛋白提純步驟復(fù)雜、造價(jià)極高，很難在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用，因此研究者多采用基因重組技術(shù)獲得脂蛋白并應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室研究。等利用基因技術(shù)制備了重組人阿樸脂蛋白 （ 、 是 的主要類型），并以 修飾陽離子脂質(zhì)體為載體負(fù)載 用于丙型肝炎的治療（粒徑）。 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示： 肝靶向能力略高于血漿

32、中的天然 ，而兩者修飾脂質(zhì)體均可顯著在肝 臟 富 集。等將 顯 影 劑 （） 連 接 在 重 組 高 密 度 脂 蛋 白 顆 粒 表 面 （），考察其在肝核磁（）顯像中的效果。 結(jié)果顯示， 可被 細(xì)胞胞吞，其中體內(nèi)可迅速富集于肝臟及十二指腸部位，顯示了其作為肝或十二指腸 顯像的前景。表肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向給藥系統(tǒng)總結(jié)配體種類載體藥物在肝組織中的分布載體性質(zhì)及粒徑靶向基團(tuán)含量（）參考文獻(xiàn)乳糖（）半乳糖（）去唾液酸胎球蛋白（）豆甾糖苷（）甘草酸（）甘草次酸（）高密度脂蛋白（）膽酸（） 膠束（）膠束（） 脂質(zhì)體 （ ± ） 陽離子脂質(zhì)體 （） 脂質(zhì)體（ ± ） 納米膠束（）陽離子脂質(zhì)體

33、（）脂質(zhì)體（± ） 脂質(zhì)體中配體含量為含配體化合物在脂質(zhì)體中的投料質(zhì)量百分比。表 中對(duì)靶向肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的給藥系統(tǒng)進(jìn)行了總結(jié)，從表中可見 肝靶向給藥系統(tǒng)擁有很高的 肝靶向能力，其介導(dǎo)給藥體系在肝臟的富集率達(dá)到了 。 然而，有研究表明 的密度和 結(jié)合活性會(huì)隨許多生理和病理?xiàng)l件的變化而發(fā)生改變，并且大多數(shù)肝臟疾病患者的血清中均存在結(jié)合抑 制劑，可能會(huì)導(dǎo)致 結(jié)合活性的降低，使其對(duì)半乳糖配基的特異性識(shí)別作用減弱，因此其在病變模型體內(nèi)的肝靶向能力還有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。 甘草酸甘草次酸修飾的肝靶向給藥系統(tǒng)也具有非常強(qiáng)的趨肝性，其與 體系的肝靶向能力相當(dāng)或略有優(yōu)勢(shì)（ ）。 另外研究表明： 介導(dǎo) 的肝

34、靶向體系具有肝癌細(xì)胞特異選擇性，這對(duì)于開發(fā)新型肝癌診斷顯影劑及降低藥物對(duì)正常肝組織的傷 害都具有十分積極的作用。另外，人們?cè)鴮?duì)膽酸及清道夫受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)寄予厚望，也很多文獻(xiàn)表明它們與肝實(shí)質(zhì)細(xì) 胞有較強(qiáng)的結(jié)合，但其在體內(nèi)并沒有體現(xiàn)出優(yōu)異的肝靶向能力（肝富集率）。造成這種情況的主要 原因是：雖然膽酸及 主要參與肝臟部位的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，然而無法在肝臟長(zhǎng)時(shí)間駐留，從而它們影響了藥 物在肝臟的積累，因此也有研究者將乳糖半乳糖等修飾在其表面進(jìn)行改性以提高其趨肝性，。第 期高分子通報(bào)· ·肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向：肝臟中除了實(shí)質(zhì)細(xì)胞外還有 左右的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，它們?cè)诟闻K中也起著重要的作用。

35、肝臟中的 非實(shí)質(zhì)細(xì)胞主要包括枯否細(xì)胞（，）、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（，） 以及肝星狀細(xì)胞（，）等。 其中 是具有吞噬能力的巨噬細(xì)胞，約占肝細(xì)胞總 量的 ，是吞噬系統(tǒng)中數(shù)量最多的細(xì)胞（約占）；研究表明 與肝部炎癥發(fā)生以及肝纖維化均 有重要聯(lián)系。 而 在肝臟受到炎癥或機(jī)械刺激等損傷時(shí)會(huì)被激活，并通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參 與肝纖維化的形成和肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建。則在幾種急慢性肝病的發(fā)病機(jī)理中均起到重要作用，目 前主要作為抗肝炎藥物的靶標(biāo)。 因此，對(duì)肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞靶向給藥系統(tǒng)的研究對(duì)于治療肝炎、肝纖維化及肝硬化等急慢性疾病有著重要的意義。 本文將主要對(duì)近五年來非實(shí)質(zhì)細(xì)胞肝靶向藥物遞送系統(tǒng)的最 新進(jìn)展進(jìn)行綜述并對(duì)其肝靶

36、向性能進(jìn)行對(duì)比。甘露糖受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)甘露糖受體（，）是分子量為，的跨膜蛋 白，能與 含 有甘露 糖配基的物質(zhì)特異性識(shí)別 結(jié) 合，廣 泛 存 在 于 肝 細(xì) 胞 表 面，。 等將甘露糖修飾的葡萄腦苷酯酶經(jīng)鼠尾靜脈注射， 后檢測(cè)到材料在肝臟的富集率 為 。等制備了 不 同程度甘露糖化的人 血清白蛋白突變體 （：， ），以及他們的三倍體（：），并通過 標(biāo)記法檢測(cè)了其在動(dòng)物體 內(nèi)的分布情況。 結(jié)果顯示：各 突變體均可迅速?gòu)难褐星宄⒗塾?jì)到肝臟，其清除速率與甘露糖化 程度成正相關(guān)，而且近 的 被肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞胞吞。 接下來作者又考察了 在不 同非實(shí)質(zhì)細(xì)胞（細(xì)胞及 細(xì)胞）中的分布，結(jié)果表明標(biāo)記的

37、 幾乎完全與 細(xì)胞 結(jié)合，而很少與 細(xì)胞結(jié)合，表明甘露糖受體主要分布于 細(xì)胞表面。將甘露糖載體應(yīng)用于基因治療領(lǐng)域，及 課題組做了大量工作。等采 用 乳化法制備了甘露糖修飾包含大豆油、 和膽甾烯的乳液（），考察了不同含量 甘露糖的 對(duì)肝巨噬細(xì)胞的靶向效果。 圖 為羅丹明標(biāo)記 與肝巨噬細(xì)胞共培 養(yǎng)后的共聚焦顯微鏡結(jié)果，研究發(fā)現(xiàn)，甘露糖密度越大，對(duì)肝巨噬細(xì)胞（）的靶向效果越 好，且甘露糖受體介導(dǎo)的靶向具有溫度依賴性。 之后，該組又在該體系中引入 ，制備了甘露糖 修飾的 陽 離 子 泡 狀 脂 質(zhì) 體 （，約 ）。 結(jié) 果 顯 示：相 對(duì) ， 可明顯提高基因?qū)Ω事短鞘荏w表達(dá)細(xì)胞的轉(zhuǎn)入效率，而其在動(dòng)物肝

38、臟的累積程度也明顯高 于其它器官（可達(dá)）。 近來，該組又以該載體為基礎(chǔ)，研發(fā)了包載細(xì)胞內(nèi)黏附因子（）干擾小 （）的 ，并將其用于急性肝炎的治療。圖與肝巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)后的共聚焦顯微鏡圖 高分子通報(bào) 年 月· ·甘露糖磷酸胰島素樣生長(zhǎng)因子受體介導(dǎo)的肝靶向給藥系統(tǒng)正常情況下肝星狀細(xì)胞（）處于靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)肝臟受到炎癥或機(jī)械刺激等損傷時(shí)，肝星狀細(xì)胞被激活并轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞細(xì)胞，因此 激活是導(dǎo)致肝纖維化的重要因素。 激 活 后，其 表 面 甘 露 糖磷 酸胰 島 素 樣 生 長(zhǎng) 因 子 受 體（，）表達(dá)上調(diào)。 利用這 種現(xiàn)象，研究者將 直接連接到材料表面，賦予其肝靶向功能。如 等以 敏

39、感多肽 為連接臂將 鍵連到聚羥丙基甲基丙烯酰胺（）上，并負(fù)載型膠原特異三倍體寡核苷酸 （）用于肝纖維化的治療。結(jié)果顯示： 可迅速被肝臟吸收，而 其 中 有 是被肝星形細(xì)胞包 吞，表明 受體介導(dǎo)在此過程中起到了重要作用。 等將多價(jià) 及抗癌藥物阿霉素同時(shí)修飾到人血清白蛋白上（）并將其用于腫瘤治療。 體內(nèi)分布結(jié)果顯示，有近的 聚集在肝臟。 型膠原受體介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng) 肝纖維化患者的肝星形細(xì)胞表面，型膠原受體表達(dá)上 調(diào)，而 型膠原中最主要的作用位點(diǎn)即為 短肽序列。 因此，利用 作為靶向基團(tuán)的載體即成為肝腫瘤藥物載體研究的一個(gè)新方向。等首次將含 片斷的環(huán)肽（ ），兩端半胱氨酸以二硫鍵相連）修飾到人 血

40、清白蛋白表面（），并考察了其在肝纖維化動(dòng)物 模 型 中 的 應(yīng)用。 結(jié) 果 顯 示 有 的 富集于纖維化肝臟；體外實(shí)驗(yàn)也表明 的趨肝性來源于其與 細(xì)胞的特異性結(jié)合。 此后，王 吉 耀 課題組又對(duì)此 體 系 進(jìn) 行 了改 進(jìn)，他 們 將 環(huán) 肽 中 的 一 個(gè) 半 胱 氨 酸 更 換 為 賴 氨 酸（ ），從而用酰胺鍵代替雙硫鍵制備環(huán) 多肽，大大提高了環(huán)肽的體內(nèi)穩(wěn)定性，。透明質(zhì)酸受體介導(dǎo)的靶向給藥系統(tǒng)透明質(zhì)酸（）是一種大分子糖胺聚糖，是構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞間質(zhì) 的 主 要 成 分。 細(xì) 胞膜表面有多種 受 體，包 括 分 化 群 （，）、肝內(nèi)皮細(xì)胞受體（，）、細(xì)胞內(nèi)吞 受體（，）、 介導(dǎo)的游動(dòng)性

41、受體（ ，）和淋巴管內(nèi)皮特異性 受體（，（）等。 其中， 在腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)， 主要存在于肝內(nèi)皮細(xì)胞， 主要存在于肝星形細(xì)胞內(nèi)，因此， 在肝靶向給藥體系中具有重要的位置。等 研 究 發(fā) 現(xiàn)， 包 覆 的 聚 賴 氨 酸聚 乳 酸 膠 束 對(duì) 人 肝 竇 內(nèi) 皮 細(xì) 胞 具 有 明 顯 選 擇 性； 等也發(fā)現(xiàn) 修飾的脂質(zhì)體可被肝竇內(nèi)皮細(xì)胞吞噬并在肝臟顯著聚集，此肝聚集現(xiàn)象可被 游離 抑制，且其聚集程度隨脂質(zhì)體表面 含量增加而增加。課題組利用 的肝靶向功能開發(fā)了一系列顯 影 劑。 如 等將 連 接 到 量 子 點(diǎn) 上（）并應(yīng)用于肝硬化檢測(cè)。 結(jié)果顯示 修飾后，肝細(xì)胞對(duì)量子點(diǎn)的包吞能力大大提高；而體內(nèi) 實(shí)驗(yàn)也表明 可迅速富集于動(dòng)物肝臟（）。 特別值得關(guān)注的是：注射 天后 基 本被正常小鼠排出體外，而在肝硬化小鼠