薄層掃描法測(cè)定恒益調(diào)脂口服液中大黃酚的含量

1、    薄層掃描法測(cè)定恒益調(diào)脂口服液中大黃酚的含量        摘要采用薄層掃描法測(cè)定該制劑中大黃酚含量。測(cè)定方法靈敏度高，分離效果好，加樣回收率1015，同板變異系數(shù)148，異板變異系數(shù)299，符合制劑分析要求。關(guān)鍵詞薄層掃描法；恒益調(diào)脂口服液；大黃酚中號(hào)文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1006-8783(2000)01-0035-02 恒益調(diào)脂口服液由何首烏、決明子、枸杞子等六味藥組成。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道1，何首烏、決明子均含大黃酚。為了控制該藥質(zhì)量，采用薄層掃描法測(cè)定該制劑中大黃酚含

2、量，報(bào)告如下。1實(shí)驗(yàn)儀器與材料日本島津 CS-9000型雙波長(zhǎng)薄層掃描儀；定量點(diǎn)樣毛細(xì)管( Dranmord USA)。硅膠G(青島海洋化工廠)；所用溶劑和試劑均為分析純；大黃酚對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所)；恒益調(diào)脂口服液(珠海恒益保健品有限公司)。2方法2.1溶液的配制對(duì)照品溶液：準(zhǔn)確稱取干燥至恒重的大黃酚對(duì)照品20 mg，置20 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，超聲處理3 min至完全溶解，得質(zhì)量濃度為010 mgmL的對(duì)照品溶液。供試品溶液：取恒益調(diào)脂口服液100 mL，放置24 h后，精密吸取上清液10 mL，置錐形瓶中，加入1 mL濃鹽酸，水浴加熱30 min，立即冷卻，移至分

3、液漏斗中，殘?jiān)铀?0 mL洗滌，水液并入分液漏斗中再分別用16、16、16、16、20 mL乙酸乙酯洗滌殘?jiān)⑤腿?次，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜? mL。陰性對(duì)照溶液：取廠方提供的已配制好的陰性液，按2.1項(xiàng)下“供試品溶液”提取步驟，蒸干，加甲醇溶解制成陰性對(duì)照液。2.2薄層色譜條件薄層板：硅膠G(加=0.5% CMC；105 活化1 h，置干燥器中備用)；展開劑2：石油醚(30°60°)-甲酸乙酯-甲酸(1551)；置10 下分層，取上層液；日光下觀察，色譜見1。2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇取大黃酚對(duì)照品及供試品溶液各2 L，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，展開，置薄層

4、掃描儀中，在波長(zhǎng)370700 nm中進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果選定樣品波長(zhǎng)S=435 nm，參比波長(zhǎng)R=545 nm。1薄層色譜2.4掃描條件雙波長(zhǎng)反射法鋸齒掃描，S=435 nm，R=545 nm；背景校正：ON；靈敏度：中；狹縫：94 mm×04 mm；Sx=3。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備分別吸取大黃酚對(duì)照液1、3、6、9、12 L，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，依法展開測(cè)定，以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y12364959X+6275.66， r0.9986，結(jié)果在010120 gL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。穩(wěn)定性考察在硅膠G板上點(diǎn)2 L供試液，展開后每隔30 min掃描1次，

5、持續(xù)2 h，峰面積積分值分別為：195793.1、189407.8、187954.0、187254.1、191537.4，RSD228，所以大黃酚在2 h內(nèi)穩(wěn)定。精密度試驗(yàn)準(zhǔn)確吸取大黃酚對(duì)照液5 L，點(diǎn)于同一薄層板上，依法展開，測(cè)定，同板平均變異系數(shù)為148，異板平均變異系數(shù)為299，上述結(jié)果表明 RSD均5，符合薄層掃描法的精密度要求。加樣回收率試驗(yàn)在供試品溶液中加入大黃酚對(duì)照品，制成加樣回收試驗(yàn)液，分別吸取供試品溶液，加樣回收溶液交叉點(diǎn)于同一薄層板上，依法展開，測(cè)定，結(jié)果平均回收率為101.51%,RSD為3.23%，見表1。表1加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果m(加入量)/mgm(測(cè)得量)/mg回收率

6、/%101120113011401150113樣品含量測(cè)定吸取供試品2 L點(diǎn)于硅膠G薄層板上，展開，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法測(cè)定，計(jì)算大黃酚的含量，結(jié)果見表2。表2樣品含量測(cè)定結(jié)果批號(hào)(大黃酚)/mg*mL-1RSD/%123495092401754017170167101714198950927014690145701539014882434討論本實(shí)驗(yàn)以大黃酚為測(cè)定指標(biāo)，采用雙波長(zhǎng)薄層掃描法，方便、簡(jiǎn)單易行，且雜質(zhì)成分干擾少，準(zhǔn)確度高，回收率達(dá)101、51。決明子、何首烏均含有蒽醌及其苷類，本文采用的方法測(cè)定的大黃酚是游離與水解后產(chǎn)生的大黃酚的總和。實(shí)驗(yàn)中曾比較乙醚與乙酸乙酯萃取結(jié)果，乙醚分層快，但所提量較乙酸乙酯少，故選用乙酸乙酯作為萃取溶劑。展開劑在常溫下分層，極性較大，大黃酚始終在展開前緣，影響測(cè)定結(jié)果，如在10 下分層則可降低大黃酚Rf值，提高測(cè)定準(zhǔn)確度。朱沛韶（廣東省藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州 510180）陳浩桉（廣東省藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州 510180）何書華（廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)習(xí)生）參