流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定氨芐西林鈉的含量

1、流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定氨芐西林鈉的含量    【摘要】  目的 建立測(cè)定氨芐西林鈉新方法。方法 在氫氧化鈉介質(zhì)中，高碘酸鉀氧化魯米諾產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，氨芐西林鈉顯著增強(qiáng)該體系的發(fā)光，據(jù)此建立了一種簡(jiǎn)單、快速測(cè)定氨芐西林鈉的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光新方法。結(jié)果 在優(yōu)化的試驗(yàn)條件下，線(xiàn)性范圍為0.0110g/ml，檢出限(3)為3.0ng/ml，對(duì)1g/ml氨芐西林鈉進(jìn)行了11次平行測(cè)定，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%。結(jié)論 將本法用于粉針劑中氨芐西林鈉的測(cè)定，結(jié)果令人滿(mǎn)意。 【關(guān)鍵詞】  化學(xué)發(fā)光； 流動(dòng)注射分析； 氨芐西林鈉  &#

2、160; ABSTRACT  Objective  To establish a chemiluminescence (CL) method for the determination of ampicillin sodium.  Method  It was found that the light emission produced by the oxidation of luminol by postassium periodate in the basic medium was enhanced by ampicillin sodium. A n

3、ew, simple and rapid method has been developed for the determination of ampicillin sodium.  Results  In the optimum conditions, CL intensities are proportional to the concentrations of ampicillin sodium in the 0.0110g/ml range. The limit of detection is 3.0ng/ml and the relative standard d

4、eviation (RSD) is 1.4 % for 1.0g/ml (n=11).  Conclusion  The method has been applied to the determination of ampicillin sodium in the commercial preparations, injection, and chemical product with satisfactory results.    KEY WORDS  Chemiluminescence;  Flow-injectio

5、n analysis;  Ampicillin sodium     氨芐西林鈉具有廣譜抗菌作用，可用于治療肺炎、支氣管炎、腸胃炎、白痢、霍亂、傷寒及皮膚感染等。論文論文參考網(wǎng)目前中國(guó)藥典采用高效液相色譜法1測(cè)定氨芐西林含量，此外氨芐西林鈉的含量測(cè)定還有紫外吸收分光光度法2，3、熒光法4，5等。本文報(bào)道一種化學(xué)發(fā)光法測(cè)定氨芐西林鈉含量的方法。    1  材料與方法    1.1  儀器及試劑    IFFLD-型流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光儀(西

6、安瑞邁電子設(shè)備有限公司)。U-4100紫外-可見(jiàn)-近紅外分光光度計(jì)(日立，日本)；F-4500熒光分光光度計(jì)(日立，日本)。    氨芐西林鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(500g/ml)：準(zhǔn)確稱(chēng)取50mg氨芐西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，溶解于100ml的容量瓶中，用二次蒸餾水稀釋至刻度配成儲(chǔ)備液，需要時(shí)用二次蒸餾水稀釋至所需濃度；高碘酸鉀(1.0×10-2mol/L)：準(zhǔn)確稱(chēng)取0.5750g用二次蒸餾水配成儲(chǔ)備液；魯米諾：用0.01mol/L的氫氧化鈉溶液配成0.01mol/L儲(chǔ)備液，需要時(shí)稀釋至所需刻度；其余試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。 

7、60;  1.2  實(shí)驗(yàn)方法    按圖1所示，將高碘酸鉀溶液和魯米諾溶液在d點(diǎn)匯合后再與注入載流中的氨芐西林鈉在e點(diǎn)匯合，    a：二次蒸餾水；b：4.0×10-5mol/L高碘酸鉀；    c：4.0×10-5mol/L魯米諾；S：樣品；P1、P2：蠕動(dòng)泵；    V：注射閥；F：流通池；W：廢液；D：光電倍增管；    PC：個(gè)人電腦；d、e：d和e匯合點(diǎn)    圖1&

8、#160;   測(cè)定氨芐西林鈉的流動(dòng)注射裝置示意圖    氨芐西林鈉對(duì)化學(xué)發(fā)光產(chǎn)生強(qiáng)烈的增強(qiáng)作用，實(shí)驗(yàn)參數(shù)由IFFM-D型流動(dòng)注射分析儀設(shè)定。    標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：準(zhǔn)確移取一定體積的氨芐西林鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(500g/ml)于一系列25ml具塞比色管中，配制成濃度為0.0110g/ml系列溶液。按照?qǐng)D1裝置裝好流路，開(kāi)啟蠕動(dòng)泵，待基線(xiàn)穩(wěn)定后進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定，以峰高定量。    2  結(jié)果與討論    2.1  反應(yīng)動(dòng)力學(xué)  

9、;  實(shí)驗(yàn)表明，該體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在注射2s內(nèi)達(dá)到最大值，5s后體系發(fā)光強(qiáng)度減弱至基線(xiàn)，可見(jiàn)該體系是一個(gè)快速化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。    2.2  參數(shù)的選擇    實(shí)驗(yàn)證實(shí)，溶液采用圖1所示的進(jìn)樣方式，流動(dòng)注射儀兩個(gè)泵的速度均為3.6ml/min(單管)，聚乙烯的內(nèi)徑為0.8mm，進(jìn)樣體積160l，混合管與三通管之間的管長(zhǎng)為8cm，負(fù)高壓為-650V；增益為×2時(shí)，體系具有最大的信噪比。論文參考網(wǎng)    2.3  條件的選擇    (1)氫

10、氧化鈉濃度的影響  氫氧化鈉的濃度對(duì)高碘酸鉀氧化魯米諾化學(xué)發(fā)光有明顯影響，考查1.0×10-38.0×10-2mol/L范圍內(nèi)氫氧化鈉溶液與化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的關(guān)系。試驗(yàn)顯示，氫氧化鈉濃度增大，發(fā)光強(qiáng)度也隨之增大，但基線(xiàn)也隨之升高，故以信噪比(S/N)作為氫氧化鈉濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光影響的衡量標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)氫氧化鈉的濃度為5.0×10-3mol/L時(shí)信噪比最大，故選擇該濃度為最佳濃度。    (2)高碘酸鉀濃度的影響  高碘酸鉀的濃度直接影響化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。試驗(yàn)顯示，隨著高碘酸鉀濃度增大，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和基線(xiàn)也隨著升高。當(dāng)濃度增加到4.

11、0×10-5mol/L時(shí)信噪比達(dá)最大值，故選擇該濃度作為高碘酸鉀的最佳濃度。    (3)魯米諾濃度的影響  在1120mol/L的濃度范圍內(nèi)考查魯米諾濃度對(duì)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響。試驗(yàn)表明，魯米諾濃度在4.0×10-5mol/L時(shí)信噪比最大，故選擇該濃度為魯米諾的最佳濃度。    2.4  體系的分析特性    在選定的試驗(yàn)條件下，測(cè)定氨芐西林鈉的線(xiàn)性范圍為0.0110g/ml，回歸方程為I=55.652c+5780.42(r=0.9994，n=11)，c的單位為g/

12、ml，對(duì)1.0g/ml氨芐西林鈉進(jìn)行11次平行測(cè)定，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%，檢出限(3)為3.0ng/ml。    2.5  干擾試驗(yàn)    試驗(yàn)了共存物質(zhì)對(duì)測(cè)定氨芐西林鈉的影響，當(dāng)氨芐西林鈉濃度為1.0g/ml，干擾水平為±5%時(shí)，800倍的淀粉、葡萄糖、CaCl2、NH4Cl、(NH4)2C2O4；600倍的K+、Na+、NO-3、NH+4、尿素、糊精、C2O2-4、Br-、麥芽糖；400倍的Mg2+、EDTA；200倍的CuSO4、FeCl3均不干擾測(cè)定。    3 

13、 樣品分析    精確稱(chēng)取適量的氨芐西林鈉粉針劑，用二次蒸餾水溶解至測(cè)定線(xiàn)性范圍內(nèi)后按照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。    4  機(jī)制探討    試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該發(fā)光是一個(gè)快速發(fā)光，從試劑混合到發(fā)光達(dá)到最大值只需要2s，5s以后降到基線(xiàn)。分別測(cè)定魯米諾-高碘酸鉀、氨芐西林鈉-高碘酸鉀以及魯米諾-高碘酸鉀-氨芐西林鈉混合溶液的熒光光譜。結(jié)果表明，僅在425nm波長(zhǎng)處有一個(gè)熒光峰，這是氨基鄰苯二甲酸的熒光峰6。分別測(cè)定魯米諾、氨芐西林鈉以及兩者的混合溶液的紫外吸收光譜卻沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有新的光譜產(chǎn)生，這說(shuō)

14、明魯米諾和氨芐西林鈉之間沒(méi)有相互作用而產(chǎn)生新的物質(zhì)。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)證明，該體系的化學(xué)發(fā)光是由氨基鄰苯二甲酸離子(魯米諾的氧化產(chǎn)物)產(chǎn)生的，而不是氨芐西林鈉。    分別測(cè)定魯米諾-高碘酸鉀和魯米諾-高碘酸鉀-表1    氨芐西林鈉粉針劑的測(cè)定結(jié)果氨芐西林鈉的化學(xué)發(fā)光光譜。結(jié)果表明，僅在425nm處有一個(gè)發(fā)光峰出現(xiàn)(與氨基鄰苯二甲酸的最大發(fā)光波長(zhǎng)相一致)，因此，可以推斷出，氨芐西林鈉只是增強(qiáng)該體系的化學(xué)發(fā)光。其反應(yīng)歷程可歸納如下：    (1)氨芐西林鈉+溶解氧+氫氧化鈉羥(基)氫氧基(和/或過(guò)氧化物酸根)+

15、其它反應(yīng)產(chǎn)物；    (2)魯米諾+羥(基)氫氧基(和/或過(guò)氧化物酸根)+高碘酸鉀3-氨基鄰苯二甲酸離子*；    (3)3-氨基鄰苯二甲酸離子*3-氨基鄰苯二甲酸離子+h(425nm)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典(二部)M. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：356.2 Mahgoub H, Aly F A. UV-Spectrophotometric determination of ampicillin sodium and sulbactam sodium in two-component

16、 mixtures J. J Pharm Biomed Anal,1998,17(8):1273.3 Xu L, Wang H, Xiao Y. Spectrophotometric determination of ampicillin sodium in pharmaceutical products using sodium 1,2-naphthoquinone-4-sulfonic as the chromogentic reagent J. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc,2004,60(13):30073012.4 Wang H Y, Xiao Y, Han. Simultaneous determination of carvedilol and ampicillin sodium by first-derivative fluorometry in the presence of human serum albumin J. J Anal Sci,2005,21(5):537540.5 Xiao Y, Wang H Y, Han. Simultaneous determination of carvedilol and ampicillin sodium by synchr