澤蘭提取物對乙醇致小鼠胃潰瘍保護作用

1、澤蘭提取物對乙醇致小鼠胃潰瘍保護作用                  作者：賁亮，徐鐵，周微，付寶慧，郝乘儀，李鎬 【摘要】   目的觀察澤蘭提取物對無水乙醇誘導小鼠胃潰瘍的保護作用。方法60只雄性小鼠隨機分為正常組，模型組，澤蘭提取物高劑量組、中劑量組、低劑量組和陽性對照組。澤蘭提取物高、中、低劑量組分別按1.0，0.5，0.2 g/kg灌胃澤蘭提取物;陽性對照組按0.2 g/kg灌胃西咪替丁，共5 d。第5天，

2、除正常組外，采用無水乙醇灌胃致小鼠胃黏膜損傷型急性胃潰瘍，比較各組胃潰瘍指數， 計算 潰瘍抑制率;測定胃組織超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。結果高劑量組和中劑量組澤蘭提取物能顯著降低無水乙醇引起小鼠胃潰瘍的潰瘍指數(P< 0.05)，潰瘍抑制率分別為72.0%和57.4%，并均能明顯升高胃組織SOD的活性(P< 0.05)，降低MDA含量(P< 0.05)。結論澤蘭提取物通過抗氧化活性對無水乙醇致小鼠胃潰瘍具有一定的保護作用。 【關鍵詞】   澤蘭提取物;胃潰瘍;抗氧化Abstract：ObjectiveTo observe the protec

3、tive effect of Lycopus lucidus Turcz. methanolic extract against gastric ulcer induced by anhydrous ethanol in mice. Methods60 mice were randomly divided into normal control, model control group, high dosage, middle and low dosage group and positive control group. The drug groups were pretreated int

4、ragastrically with 1.0, 0.5, 0.2 g/kg extract. Positive control group was pretreated intragastrically with 0.2 g/kg cimetidine. Control mice were given the same volume of physiological saline. On the 5th day of feeding, the mice except normal control group were orally treated with 0.1 ml/20g anhydro

5、us ethanol for gastric-ulcer induction. The gastric ulcer index and ulcer inhibition were measured, and superoxide dismutases (SOD) and malondialdehyde (MDA) levels in gastric tissue were determined. ResultsThe 1.0 and 0.5 g/kg doses of methanolic extract of L. lucidus showed antiulcer effects of 72

6、.0% and 57.4% with the increase of SOD activity and decrease of MDA content in gastric tissue, respectively, compared to the model control group.ConclusionThe methanolic extract of L. lucidus can prevent the ethanol-induced gastriculcer in mice through its antioxidation.Key words： Lycopus lucidus ex

7、tract; Gastric ulcer; Anti-oxidation澤蘭為唇形科植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz. var. hirtus Regel 和地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz. 的干燥地上部分1,2，味苦、辛，微溫，具有活血化瘀、行水消腫之功，用于治月經不調、經閉、經痛、產后瘀血腹痛、水腫1。澤蘭中的主要化學成分為三萜酸類及酚酸類。 文獻 報道三萜酸類具有抗肝炎病毒的藥理作用，酚酸類成分則具有擴張血管及 治療 心血管疾病活性3。本實驗通過體外篩選澤蘭甲醇提取物的清除二苯代苦味酰自由基的能力強(濃度50 g/ml時，清除率為48.0

8、%)，進一步研究澤蘭甲醇提取物對無水乙醇所致小鼠胃潰瘍的保護作用，并對其抗氧化作用機理進行初步探討。 1 材料 1.1 動物昆明種雄性小鼠60只，體質量(20±2)g，由延邊大學醫(yī)學部實驗動物中心提供。1.2 藥材澤蘭采自吉林省長白山東北坡一帶，經延邊大學藥學院呂惠子副教授鑒定為唇形科植物地瓜兒苗L.lucidus。材料采集后晾干、切碎，于60恒溫干燥箱中干燥至恒重，用粉碎機粉碎后過40目篩，準確稱取50 g，加約10倍量的甲醇浸提48 h，提取2次，合并2次濾液，過濾后減壓濃縮至浸膏，4冰箱中保存?zhèn)溆?。1.3 試劑與儀器 西咪替丁購自黑龍江藍天制藥有限公司，超氧化物歧化酶(SOD

9、)和丙二醛(MDA)試劑盒購自南京建成生物工程研究所，其他試劑均為國產分析純。使用的儀器有小型離心機(Sigma 1-13)，UV-2001型紫外-可見分光光度計(日本Shimadzu)和生化分析儀(SPOTCHEME 2, SP-4430)等。 2 方法 2.1 動物分組及給藥將60只小鼠隨機分為6組，每組10只：正常對照組和無水乙醇模型組灌胃等體積生理鹽水;澤蘭提取物高?p中?p低劑量給藥組分別按1.0，0.5，0.2 g/kg灌胃澤蘭提取物;陽性對照組按0.2 g/kg灌胃西咪替丁;2次/d，連續(xù)5 d，于末次給藥后1 h，除正常組外，其余均灌胃無水乙醇0.1 ml/20 g。1 h后全

10、部脫頸椎處死，剖腹，分別結扎賁門、幽門端后取出胃，向胃內注入10%甲醛6 ml，將全胃置于甲醛溶液中固定15 min，沿胃大彎剪開，生理鹽水沖洗，用濾紙吸干水分。利用游標卡尺測定胃腺區(qū)條狀損傷的長度大于1 mm者，測量長度，每毫米記1分，其寬度大于1 mm者計分加倍，長度與寬度均小于1 mm，計0.5分，將計分相加即為該動物的潰瘍指數，計算潰瘍抑制率 潰瘍抑制率 (%)= (模型組潰瘍指數 - 給藥組潰瘍指數)/模型組潰瘍指數 × 100%5,6。2.2 生化檢測按試劑盒說明測定胃組織SOD活性和MDA含量。2.3 統(tǒng)計學處理數據以±s表示，組間差別的假設性檢驗用方差分析(

11、ANOVA)，P< 0.05認為有統(tǒng)計學意義。 3 結果 3.1 潰瘍評定從胃標本看，正常組胃黏膜表面光滑;模型組潰瘍多呈現(xiàn)條索狀或點狀出血;與模型組比較，給藥組的胃黏膜點狀出血和損傷程度均有不同程度減輕。結果見表1。結果表明，澤蘭提取物高、中劑量組能明顯對抗乙醇所致的胃黏膜損傷，與模型組比較潰瘍指數明顯降低(P< 0.05)，潰瘍抑制率分別為72.0%和57.4%，對胃黏膜具有一定的保護作用。表1 澤蘭提取物對小鼠無水乙醇型胃潰瘍的影響與模型組比較，*P<0.05;n=103.2 澤蘭提取物對胃組織SOD活性和MDA含量的影響結果見表2。模型組小鼠SOD活性較正常組降低(P

12、< 0.01)，MDA含量升高(P< 0.01);與模型組比較，澤蘭提取物高劑量組、中劑量組和低劑量組SOD值均升高(P< 0.05)，高劑量組和中劑量組MDA含量降低(P< 0.05)，說明澤蘭醇提物能升高乙醇引起急性胃潰瘍小鼠胃組織的SOD活性，同時降低小鼠組織的MDA含量。表2 澤蘭提取物對小鼠乙醇型胃潰瘍模型胃組織SOD活性和MDA含量的影響(±與模型組比較，*P<0.01，*P<0.05;n=10 4 討論 近年來，隨著H2受體拮抗劑和質子泵抑制劑相繼應用于臨床，胃潰瘍的近期愈合率得到明顯提高，但這些藥物的副作用及停藥后胃潰瘍的復發(fā)仍是急

13、待解決的問題。而傳統(tǒng)中醫(yī)中藥則在增強胃黏膜防御力、提高胃潰瘍愈合質量、減少復發(fā)等方面逐步發(fā)揮出了優(yōu)勢7。小鼠灌胃無水乙醇誘發(fā)潰瘍，可導致其機體抗氧化能力下降，自由基形成增多，從而造成胃黏膜保護作用受到損傷8。超氧化物歧化酶(SOD)廣泛存在于機體各組織中，是催化清除氧自由基的酶類，是生物體內氧自由基清除系統(tǒng)的首要防線，將SOD直接輸入體內可直接清除細胞內自由基，并且具有保護細胞DNA、蛋白質與細胞膜的功能。氧自由基誘導細胞和組織損傷的機制主要是使生物膜中的不飽和脂肪酸過氧化，形成多種脂質過氧化物，破壞線粒體和溶酶體膜，形成潰瘍，造成細胞死亡9，MDA是脂質過氧化的最終產物，可嚴重破壞細胞膜結構

14、，導致細胞腫脹、壞死，目前大多通過測定SOD活性及MDA含量的變化來反映整個機體的脂質過氧化反應和抗脂質過氧化反應的能力10。本實驗結果顯示模型對照組潰瘍面積顯著高于正常對照組，表明急性胃潰瘍模型造模成功。澤蘭提取物高、中劑量組能顯著減少乙醇所致小鼠急性胃潰瘍的面積(P< 0.05)，表明藥物具有一定的胃保護作用。通過測定SOD活性和MDA含量，澤蘭甲醇提取物高、中劑量組顯著升高乙醇引起急性胃損傷小鼠胃組織SOD的活性(P<0.05)，降低小鼠胃組織的MDA含量(P<0.05)。本研究結果說明澤蘭提取物可能通過保護細胞膜，清除氧自由基抑制脂質過氧化而對胃組織起到保護作用。綜上

15、所述，澤蘭醇提取物具有很強的抗氧化活性，且對小鼠乙醇型胃潰瘍具有明顯的保護作用，通過實驗可以看出，澤蘭提取物是通過提高SOD活性，阻止胃黏膜脂質過氧化反應，增強清除氧自由基的能力，從而起到胃組織保護作用。 【 參考 文獻 】   1 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會. 中華人民共和國藥典中藥彩色圖集M. 廣州: 廣東科技出版社，1995：289.2 江蘇新醫(yī)學院. 中藥大辭典(上冊)M. 上海：上海 科學 出版社，1986：1461.3 劉 君. 澤蘭的化學成分及藥理研究進展J. 遼寧中醫(yī)藥大學學報，2008，10(1): 23.4 高 平，劉燕萍，潘為高. 紫莖澤蘭醇提物的毒 理學 研究J. 四川動物，2005，24(1): 87.5 于海玲，郭建鵬，孫連平. 老鸛草提取物對實驗性胃潰瘍小鼠胃黏膜的保護作用機制研究J. 延邊大學醫(yī)學學報，2007，30(1): 29.6 劉 瑩，崔炯謨. 白及超微粉對大鼠實驗性胃潰瘍的影響J. 中草藥，2008, 39 (3): 397.7 丁志山，蔣福升. 姜黃素對動物實驗性胃潰瘍的影響研究J. 中華中醫(yī)藥學刊，2008, 26(10): 2225.8 Mutoh H，Hiraishi H，Ota