臨床微生物學(xué)問答題大全

1、1.試述科赫（Robert Koch）原則。答：科赫(Robert koch)原則包括:1在同樣的特殊疾病中發(fā)現(xiàn)同一種病原菌;2病原體能在體外獲得純培養(yǎng);3將純培養(yǎng)接種至易感動物能引起相同的疾病;4能從感染動物體內(nèi)重新分離出這種病原菌的純培養(yǎng)。2.臨床微生物學(xué)檢驗的任務(wù)有哪些? 答：臨床微生物學(xué)檢驗的任務(wù)包括:1研究感染性疾病的病原體特征:2提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷;3指導(dǎo)合理應(yīng)用抗菌藥物;4對醫(yī)院感染進行監(jiān)控。 ?3.哪些環(huán)境因素可影晌細(xì)菌的形態(tài)?答：影響細(xì)菌形態(tài)的環(huán)境因素包括:1培養(yǎng)溫度、時間、培養(yǎng)基的成分、pH、離子濃度等;2機體內(nèi)的生態(tài)環(huán)境;3環(huán)境中不利于細(xì)菌生長的物質(zhì),如藥物、抗菌

2、藥物、抗體、過高的鹽份等。4.試述細(xì)菌的結(jié)構(gòu)及其相應(yīng)的功能。答：細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括:細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等。特殊結(jié)構(gòu)包括:鞭毛、菌毛、艦、芽胞等。細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖,肽聚糖是由多聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋三部分組成。外膜是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu),由磷脂、脂蛋白、脂多糖三部分組成。細(xì)胞壁的主要功能是維持細(xì)菌的固有外形,起保護菌體的作用。細(xì)胞膜的主要化學(xué)成分為脂類、蛋白質(zhì)及少量多糖,其結(jié)構(gòu)為平行的脂質(zhì)雙層,大多為磷脂,其中鑲嵌有多種蛋白質(zhì),這些蛋白質(zhì)可在呈液態(tài)的脂質(zhì)雙層中流動變化。細(xì)胞膜的主要功能有:1物質(zhì)轉(zhuǎn)運作用;2分泌作用;3呼吸作用;4生物合成作用。 細(xì)胞質(zhì)是細(xì)菌新陳代

3、謝的重要場所。核質(zhì)包含有細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。鞭毛是細(xì)菌的運動器官,還可增強細(xì)菌的侵襲力。菌毛存在于菌體表面,可分為普通菌毛和性菌毛,其中前者為一種粘附結(jié)構(gòu),后者具有致育性,可傳遞毒力和耐藥性。 莢膜的功能包括:1保護作用;2致病作用;3免疫原性;4鑒別與分型。芽胞是細(xì)菌的休眠體,可幫助細(xì)菌渡過不良的生存狀況。總之,不論是基本結(jié)構(gòu)還是特殊結(jié)構(gòu),均有其各自的功能,共同維持細(xì)菌的存活及其整體功能。5.細(xì)菌L型有哪些特點?答：細(xì)菌L型有以下特點:(1)細(xì)胞壁肽聚糖結(jié)構(gòu)被破壞,或合成受到抑制,造成細(xì)胞壁缺陷。(2)大小不一,形態(tài)各異,染色時不易著色,或著色不均勻。(3)在含血清的高滲低瓊脂培養(yǎng)基中能緩慢生長

4、,一般2-7d后形成油煎蛋樣小菌落(放大100倍左右才能看見)。(4)保持有親代的遺傳特性,在合適的培養(yǎng)基中生長,很少回復(fù)到母菌型,但原生質(zhì)球在去除誘導(dǎo)物培養(yǎng)時,可以返祖而恢復(fù)母菌形態(tài)。6.芽胞的生物學(xué)意義是什么?答：產(chǎn)生芽胞的細(xì)菌都是革蘭陽性菌,主要有需氧芽胞桿菌屬和厭氧芽胞梭菌屬。芽胞的意義:1可在自然界存活多年,成為某些疾病的潛在傳染源;故如懷疑病房、手術(shù)室等被能形成芽胞的細(xì)菌污染,必須封閉房間進行徹底滅菌;2對理化因素抵抗力強,故芽胞是否被殺死可作為判斷滅菌效果的指標(biāo),或評價某一種消毒滅菌方法效果的根據(jù);3細(xì)菌芽胞的形狀、大小、位主等隨菌種而異,具有重要鑒別價值;4有些芽胞能產(chǎn)生毒素或

5、其他有毒物質(zhì)。7.試述細(xì)菌的化學(xué)組成及其攝取營養(yǎng)的方式。答：細(xì)菌的化學(xué)組成除與其他細(xì)胞相似,包括水、無機鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂類與核酸等主要化合物外,也有與其他生物細(xì)胞不同的成分,如:肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡啶二羧酸等。細(xì)菌通過以下方式攝取營養(yǎng):1被動擴散;2主動吸收;3基團轉(zhuǎn)移。8.細(xì)菌有哪些主要物理性狀?答：細(xì)菌的物理性狀包括:1帶電現(xiàn)象:是區(qū)別革蘭陽性菌及革蘭陰性菌兩大類細(xì)菌染色性不同的基礎(chǔ)之一,此外,帶電現(xiàn)象對細(xì)菌的鹽凝集,以及與特異性抗體的凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、理化因素抑菌和殺菌作用等都有密切關(guān)系;2表面積大,有利于同外界進行物質(zhì)交換;3半透性與滲透壓。9.簡

6、述細(xì)菌的人工培養(yǎng)程序并列舉常用的人工培養(yǎng)方法。答：細(xì)菌的人工培養(yǎng)程序為:標(biāo)本(估計菌量少的標(biāo)本,先增菌培養(yǎng))根據(jù)培養(yǎng)目的,接種于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基適宜的培養(yǎng)環(huán)境,35-37,18-24h觀察細(xì)菌的生長情況,選擇可疑菌落進行分離、鑒定。 根據(jù)對氣體的需求,細(xì)菌的人工培養(yǎng)方法可分為:1需氧培養(yǎng)(需氧菌與兼性厭氧菌):置于空氣中即可,適于大多數(shù)細(xì)菌;2厭氧培養(yǎng)(專性厭氧菌):需在無游離氧的環(huán)境中培養(yǎng);3二氧化碳培養(yǎng)(少數(shù)細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌、布魯菌、空腸彎曲菌等):需在含5%-10%C02環(huán)境中培養(yǎng);4微需氧環(huán)境(僅在5%左右的低氧壓環(huán)境中才能生長的細(xì)菌的培養(yǎng))。 ?10.體外培養(yǎng)時,細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量為什么不能

7、保持指數(shù)增長?答：由于培養(yǎng)基中營養(yǎng)物的不斷耗盡,毒性產(chǎn)物逐漸積聚,細(xì)菌經(jīng)過一段時間生長繁殖后,繁殖速度會逐漸減慢,死菌數(shù)不斷增加,因此,體外培養(yǎng)時,細(xì)菌細(xì)胞數(shù)量不能保持指數(shù)增長。11.細(xì)菌生長曲線分為哪四期?各期有哪些特點?答：以生長時間為橫坐標(biāo),培養(yǎng)物中細(xì)菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)繪制的曲線,稱為生長曲線。生長曲線分為以下四期: (1)遲緩期:此期細(xì)菌體積增大,代謝活躍,但分裂遲緩,菌數(shù)未見增殖。遲緩期長短不一,因菌種、接種的菌量、菌齡和培養(yǎng)基而異,一般約為1-4h。 (2)對數(shù)增殖期:此期細(xì)菌生長迅速,菌數(shù)呈幾何級數(shù)增長。此時細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型,對外界環(huán)境因素的作用比較敏感。一般

8、相當(dāng)于細(xì)菌培養(yǎng)8-18h。(3)穩(wěn)定期:此期細(xì)菌增殖數(shù)與死亡數(shù)幾乎相等,活菌數(shù)保持相對不變。此時細(xì)菌可能出現(xiàn)形態(tài)、生理性狀的變化,一些細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物大多在此期內(nèi)產(chǎn)生,芽胞亦多在此期形成。(4)衰退期:此期死亡菌數(shù)逐漸上升,活菌數(shù)急劇減少;細(xì)菌形態(tài)顯著改變,甚至有的菌體自溶,難以辯認(rèn)。12.細(xì)菌主要有哪些分解代謝途徑?列舉常用的檢測分解代謝產(chǎn)物的實驗。答：細(xì)菌分解代謝主要有:糖分解、蛋白質(zhì)分解等。常用的檢測糖分解代謝產(chǎn)物的試驗有糖發(fā)酵試驗、甲基紅試驗、VP試驗等;檢測蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物的試驗有吲哚試驗、硫化氫試驗等。13.列舉醫(yī)學(xué)上有重要意義的細(xì)菌合成產(chǎn)物及其特性。答：醫(yī)學(xué)上有重要意義的細(xì)菌合成

9、產(chǎn)物主要有:熱原質(zhì)(本質(zhì)為脂多糖,具有耐高溫特性,經(jīng)高壓蒸氣滅菌(121,20min)也不能被破壞,可引起發(fā)熱反應(yīng))、毒素及侵襲性酶(構(gòu)成細(xì)菌的毒力因子)、色素(可用于細(xì)菌的鑒別)、抗生素(具有拮抗細(xì)菌的作用)、細(xì)菌素(可用于細(xì)菌分型和流行病學(xué)調(diào)查)、維生素(除供作自身的生長因子外,也能分泌至菌體外,供人體利用)等。14.何謂細(xì)菌素?其特點及意義是什么?答：某些細(xì)菌菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)與脂多糖的復(fù)合物，稱為細(xì)菌素。細(xì)菌素的抗菌譜狹窄,僅對與產(chǎn)生該種細(xì)菌素的細(xì)菌有近緣關(guān)系的細(xì)菌才有作用;由于細(xì)菌素具有種和型的特異性,可用于細(xì)菌分型和流行病學(xué)調(diào)查。15.簡述耐藥性質(zhì)粒的分類及

10、其特征。答：耐藥性質(zhì)粒分為二類:即接合性耐藥質(zhì)粒、非接合性耐藥質(zhì)粒。 接合性耐藥質(zhì)?？梢酝ㄟ^細(xì)菌間的接合進行傳遞;非接合性耐藥質(zhì)粒不能通過細(xì)菌接合而通過噬菌體傳遞。接合性耐藥質(zhì)粒又稱R質(zhì)粒,由兩部分組成即耐藥傳遞因子和耐藥決定因子(r因子)。前者編碼宿主菌產(chǎn)生接合和自主復(fù)制的蛋白,具有傳遞基因功能,后者決定對藥物的耐受性。通過耐藥質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移,耐藥菌可將耐藥基因轉(zhuǎn)移至敏感菌,使后者成為耐藥菌。16.轉(zhuǎn)位因子分哪幾類?轉(zhuǎn)座子有哪些特點?答：轉(zhuǎn)位因子主要有三類:插入順序、轉(zhuǎn)座子、轉(zhuǎn)座噬菌體。轉(zhuǎn)座子特點:1攜帶有與插入功能無關(guān)的基因;2能整合到受體DNA的多個“熱點""上。17.微

11、生物變異可表現(xiàn)在哪些方面?并給予分型。答：微生物變異現(xiàn)象可見于微生物的各種性狀,表現(xiàn)為形態(tài)、結(jié)構(gòu)、菌落、抗原性、毒力、酶活性、耐藥性、空斑、宿主范圍等的變異。可分為非遺傳型變異和遺傳型變異。 微生物在一定的環(huán)境條件下發(fā)生的變異,不能穩(wěn)定地傳給子代,當(dāng)環(huán)境條件改變,可能恢復(fù)原來性狀,稱為非遺傳型變異;微生物的基因型發(fā)生改變,變異的性狀能穩(wěn)定地傳給子代,并且不可逆轉(zhuǎn),稱為遺傳型變異。18.細(xì)菌耐藥性是怎樣產(chǎn)生的?答：細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生可以通過細(xì)菌染色體耐藥基因的突變、耐藥質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)座子的插入,使細(xì)菌產(chǎn)生一些新的酶類或多肽類物質(zhì),破壞抗菌藥物或阻擋藥物向靶細(xì)胞穿透,或發(fā)生新的代謝途徑,從而產(chǎn)生對抗

12、生素的耐藥性,造成臨床藥物治療的失敗。19.簡述細(xì)菌基因突變的類型和機制。答：細(xì)菌基因突變的類型和機制:1堿基的置換:在DNA鏈上一個或幾個堿基可以發(fā)生置換。堿基的改變影響到密碼組成,導(dǎo)致所編碼的氨基酸改變而影響蛋白質(zhì)功能;2堿基的插入和缺失:當(dāng)核苷酸序列插入或缺失一個堿基,則使此后的序列中堿基發(fā)生移碼突變,導(dǎo)致密碼子錯誤,從而造成蛋白質(zhì)的改變以致影響酶所催化的化學(xué)反應(yīng)性質(zhì),導(dǎo)致生物體遺傳性狀的改變;3能在細(xì)菌質(zhì)粒和質(zhì)粒之間,質(zhì)粒和染色體或染色體不同部分之間自行轉(zhuǎn)移的大段核苷酸構(gòu)成的轉(zhuǎn)位因子也可以發(fā)生插入、缺失或倒置,轉(zhuǎn)位因子引起的突變同時涉及許多基因的改變,不能返祖。20.簡述正常菌群概念及

13、其生物學(xué)意義。答：人體的體表及與外界相通的腔道寄居著一定種類和數(shù)量的微生物,在一定條件下,微生物與宿主、微生物與微生物之間相互制約,相互依賴,長期適應(yīng),處于微生態(tài)平衡。正常定植于人體各部位的細(xì)菌群稱為正常菌群。正常菌群對構(gòu)成生態(tài)平衡起重要作用,其生物學(xué)意義主要是:1生物拮抗;2促進機體免疫;3與衰老有關(guān);4合成維生素和細(xì)菌素。21.機體對細(xì)菌感染的免疫反應(yīng)主要有哪些?答：細(xì)菌感染?？煞譃榘饩腥竞桶麅?nèi)菌感染兩類,機體對這兩類感染的免疫反應(yīng)亦有差異。機體對細(xì)菌感染的免疫反應(yīng)包括:1抗胞外菌免疫:以中性粒細(xì)胞的調(diào)理吞噬,以及抗體和補體的溶菌作用為主,見于葡萄球菌、鏈球菌、奈瑟菌、許多革蘭陰性桿菌

14、等細(xì)菌的感染;2抗胞內(nèi)菌免疫:主要依靠細(xì)胞免疫。見于結(jié)核分校桿菌、麻風(fēng)分校桿菌、布魯菌、沙門菌等細(xì)菌感染;3抗毒素免疫:指抗細(xì)菌外毒素的免疫,是以抗體為主的免疫反應(yīng)。見于白喉、破傷風(fēng)、氣性壞疽等以外毒素致病的病原菌感染。22.內(nèi)毒素、外毒素有哪些特性?答：內(nèi)毒素的主要特性:1為革蘭陰性菌的細(xì)胞壁成分,細(xì)菌死亡裂解時釋放;2其本質(zhì)為脂多糖,耐熱,加熱100經(jīng)1h不被破壞,不能用甲醛脫毒成類毒素;3各種病原菌作用大致相同,無特異性。4毒性作用包括熱原性、低血壓休克、組織損傷、彌漫性血管內(nèi)凝血等;5促進免疫如有佐劑作用,激活免疫系統(tǒng)、抵抗微生物侵襲等。 外毒素的主要特性:1多為革蘭陽性菌及少數(shù)陰性菌

15、合成和分泌;2大多為多肽,易被熱、紫外線及化學(xué)劑變性,經(jīng)甲醛脫毒成類毒素;3具特異的組織親和性,據(jù)其所損害的靶組織不同分為神經(jīng)毒、細(xì)胞毒、腸毒素三類。23.微生物感染的免疫防治措施有哪些?答：對微生物感染的人工免疫防治措施包括:人工主動免疫、人工被動免疫。用病原微生物或其特異抗原、毒素等制成減毒活疫(菌)苗、死疫(菌)苗、類毒素等生物制品,給易感人群接種,使體內(nèi)產(chǎn)生抗該病原微生物或毒素的特異性免疫力,稱為人工主動免疫。人工被動免疫是用含抗某種病原微生物或毒素特異性抗體的免疫球蛋白或免疫血清等生物制品給已(疑)感人群注射,或注射細(xì)胞因子等細(xì)胞免疫制劑,使之獲得特異性免疫力。24.何謂微生物感染的

16、化學(xué)預(yù)防?答：微生物感染的化學(xué)預(yù)防是使用抗微生物藥物對某些微生物感染進行治療性預(yù)防,以及用于外科手術(shù)病人和高危對象等,以預(yù)防可能會發(fā)生的微生物感染。25.抗感染治療時合理選藥應(yīng)考慮哪些因素?答：“安全、有效、經(jīng)濟""可概括為合理使用抗感染治療的基本原則。合理的抗感染選藥方案取決于以下幾個方面:1病原微生物:病原學(xué)診斷及藥敏試驗,為合理選藥提供實驗依據(jù);2根據(jù)藥敏試驗結(jié)果和擬選藥物的臨床藥理學(xué)特點;3根據(jù)感染部位、病人的基礎(chǔ)疾病和免疫狀態(tài);4擬選藥物的臨床試驗和既往的應(yīng)用經(jīng)驗等。26.何謂固有耐藥、獲得耐藥?答：固有耐藥是指某一病原微生物對某種抗微生物藥物的天然耐藥性,這種耐

17、藥性代代相傳。編碼這種耐藥性的基因位于病原微生物的染色體上。獲得耐藥是指病原微生物接觸抗微生物藥物以后,通過產(chǎn)生抗微生物藥物滅活酶,或改變其細(xì)胞外膜的通透性,阻止抗微生物藥物進入菌體內(nèi)抵達靶位,或改變靶位蛋白、降低其與抗微生物藥物的親和性等方式使自身具有抵御抗微生物藥物抑殺作用的能力。獲得耐藥還可通過耐藥基因以質(zhì)粒接合和轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)移等方式傳播和擴散。27.臨床實踐中,采取哪些措施可預(yù)防和延遲細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生?答：臨床實踐中預(yù)防和延遲細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生應(yīng)做到:1針對感染病原菌選擇已知抗菌作用最強藥物,在可能情況下應(yīng)盡量選用窄譜藥物;2使用抗菌藥物時,劑量應(yīng)給夠,療程應(yīng)給足,以徹底殺滅感染病原菌,減少

18、耐藥變異菌株衍生的危險性;3針對感染病原菌使用已知能阻止其耐藥性發(fā)生的聯(lián)合用藥方案;4使用抗菌藥物進行化療預(yù)防時一定要有明顯指征,療程要盡可能短,以避免篩選出或誘導(dǎo)出耐藥菌株;5避免環(huán)境的抗菌藥物污染;6對已知耐藥菌感染的病人應(yīng)予以隔離,對其醫(yī)療護理后應(yīng)認(rèn)真進行洗手和其他隔離預(yù)防措施,以避免耐藥菌株的傳播和交叉感染的發(fā)生;7醫(yī)院應(yīng)加強耐藥菌的流行病學(xué)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)問題立即處理,制定或修訂控制措施;3醫(yī)院應(yīng)加強抗菌藥物的管理,制定和施行防止濫用抗菌藥物的措施。28.請寫出原核生物界的分類等級。答：原核生物界的分類等級和其他生物界相同,依次為界、門、綱、目、科、屬、種。有時在兩個相鄰等級之間可添加次要

19、的分類單位,如亞門、亞綱、亞屬、亞科,科和屬之間還可添加族。29.何謂菌株、種、屬、科、標(biāo)準(zhǔn)株?答：同一菌種不同來源的細(xì)菌稱為該菌的不同菌株。種是細(xì)菌分類的基本單位,形態(tài)學(xué)和生理學(xué)性狀相同的細(xì)菌群體構(gòu)成一個菌種;性狀相近、關(guān)系密切的若干菌種組成屬;相近的屬歸為一個科。同一菌種的各個細(xì)菌性狀基本相同,但在某些方面可能存在差異,差異較明顯的稱亞種和變種,差異微小的為型。具有某種細(xì)菌典型特征的菌株稱為該菌的標(biāo)準(zhǔn)株,在細(xì)菌的分類、鑒定和命名時都以標(biāo)準(zhǔn)菌株為依據(jù),標(biāo)準(zhǔn)菌株也可以作為質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)。30.細(xì)菌的分類方法有哪些?答：細(xì)菌的分類是在對細(xì)菌的大量分類標(biāo)記進行鑒定和綜合分析的基礎(chǔ)上進行的。用作細(xì)菌

20、的分類標(biāo)記有形態(tài)學(xué)、生理生化學(xué)、免疫血清學(xué)、免疫化學(xué)及遺傳學(xué)等方面的生物學(xué)性狀。主要分類方法有:1按細(xì)菌生理學(xué)與生物化學(xué)的特征,常用的分類方法有兩種,即傳統(tǒng)分類法和數(shù)值分類法;2按遺傳學(xué)特征進行分類的遺傳學(xué)分類法。31.簡述臨床微生物學(xué)實驗室進行體外抗菌藥物敏感試驗的目的和指征。答：臨床微生物學(xué)實驗室進行體外抗菌藥物敏感試驗的目的和指征是:1對其敏感性不能預(yù)測的臨床分離菌株必須常規(guī)進行藥敏試驗,以供臨床選擇治療藥物時參考;2臨床因療效差而考慮更換抗菌藥物時,應(yīng)對擬選藥物進行藥敏試驗;3了解所在醫(yī)院或地區(qū)常見病原菌耐藥性的變遷情況,定期通報臨床,有助于臨床的經(jīng)驗治療選藥;4評價新抗菌藥物的抗菌譜

21、和抗菌活性等藥效學(xué)特性;5對細(xì)菌耐藥譜進行分析和分型有助于某些菌種的鑒定,并作為醫(yī)院感染流行病學(xué)調(diào)查的手段之一。-內(nèi)酰胺類抗菌藥中,只需測試青霉素及苯唑西林的敏感性?答：因為根據(jù)青霉素及苯唑西林的敏感性,可推斷一系列-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的敏感性。如青霉素敏感的葡萄球菌對其他青霉素、頭孢菌素類及卡巴配能類也敏感,青霉素耐藥,苯唑西林敏感菌株對不耐-內(nèi)酰胺酶的青霉素耐藥,但-內(nèi)酰胺膠酶穩(wěn)定的青霉素、-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑、頭孢菌素類及卡巴配能類抗菌藥物敏感。耐苯唑西林葡萄球菌(Methicillin resistant staphylococcus,MRS)對現(xiàn)存所有-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥。因此,

22、只需測試青霉素及苯唑西林的敏感性,即可推斷一系列-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的敏感性。其他青霉素類、-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑、頭孢菌素類及卡巴配能類抗菌藥物不需常規(guī)測試。33.何謂抑菌試驗?主要包括哪些實驗方法?答：抑菌試驗用于測定抗菌藥物體外抑制細(xì)菌生長的效力。實驗方法主要有進行定性測定的紙片擴散法、定量測定的稀釋法和E試驗法。34.簡述K-B紙片瓊脂擴散法原理及影晌因素。答：K-B紙片瓊脂擴散法原理:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上。紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解后不斷地向紙片周圍區(qū)域擴散形成遞減的梯度濃度。在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)測試菌的生長被抑制,從而形成透明的抑菌圈。

23、抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度,并與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。影響紙片法藥敏試驗結(jié)果的因素有:1培養(yǎng)基的質(zhì)量,如pH、深度、硬度和表面濕度等。對每批商品化或自配MH瓊脂必須用標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株進行檢測,合格后方能使用;2藥敏紙片的質(zhì)量,含藥量和保存方式;3接種菌量正確與否是影響結(jié)果的重要因素之一,取決于麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的配制,正確使用和保存;4試驗操作質(zhì)量;5孵育條件,溫度和時間;6抑菌圈測量工具的精度;7質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株本身的藥敏特性是否合格,有無變異。35.瓊脂稀釋法有哪些優(yōu)點?答：瓊脂稀釋法的優(yōu)點是可同時做多株菌株的MIC測定,結(jié)果重復(fù)性好

24、,易于發(fā)現(xiàn)污染或耐藥突變菌,是開發(fā)新藥體外藥敏試驗時常用的經(jīng)典參照標(biāo)準(zhǔn)。36.簡述E試驗原理。答：E試驗原理:E試驗結(jié)合了稀釋法和擴散法的原理和特點,操作簡便同擴散法,但可以同稀釋法一樣直接定量出測試藥物對測試菌的最低抑菌濃度(MIC),結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好。與紙片瓊脂擴散法的主要區(qū)別在于E試驗所用的是一條寬5mn、長50mn,內(nèi)含干化、穩(wěn)定的、濃度由高至低呈指數(shù)梯度分布的一種抗菌藥物的商品化塑料試條,試條上面標(biāo)出該抗菌藥物的濃度刻度(g/ml),濃度梯度范圍一般為15個自然對數(shù)。37.簡述體外聯(lián)合藥物敏感試驗指征。答：臨床上常因以下情況聯(lián)合使用抗菌藥物:1用于病原菌尚未確定的急、重癥感染的經(jīng)驗

25、治療,以擴大病原治療的覆蓋面;2治療多種細(xì)菌所引起的混合感染;3對于某些耐藥菌可取得協(xié)同抗菌作用;4減少或推遲治療過程中細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生;5減少某些治療指數(shù)低的抗菌藥物的用量從而減輕其毒副作用。38.抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用后有哪些結(jié)果?答：抗菌藥物聯(lián)合運用后的結(jié)果有4種類型:1協(xié)同作用,即兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性顯著大于其單獨抗菌活性的總和;2相加作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性等于其單獨抗菌活性的總和;3無關(guān)作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性等于其單獨抗菌活性;4拮抗作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性顯著低于其單獨抗菌活性,即一種抗菌藥物的活性被另一種抗菌藥物削弱。39.何謂MRS株?其臨床意義是什么?答：

26、MRS是耐甲氧西林葡萄球菌(Methicillin resistant staphylococcus)的英文縮寫。MRS株意味著,不論藥敏試驗結(jié)果如何,對所有-內(nèi)酰胺類抗菌藥物臨床治療無效;對氟喹諾酮類、氨基糖甙類、大環(huán)內(nèi)酯類等抗菌藥物的耐藥性也同時升高。40.腸球菌進行氨基糖甙類高耐篩選試驗有何臨床意義?答：當(dāng)氨基糖試類高耐篩選試驗敏感時,提示氨基糖甙類與其他抗菌藥物有協(xié)同作用,臨床治療腸球菌感染時可用青霉素或氨芐西林聯(lián)合一種氨基糖苷類,或萬古霉素聯(lián)合一種氨基糖甙類。但若氨基糖甙類高耐篩選試驗?zāi)退?則氨基糖試類與以上抗菌藥物無協(xié)同作用,不可聯(lián)合使用。41.何謂產(chǎn)ESBL株,其臨床意義是什么?

27、答：ESBL是超廣譜-內(nèi)酰胺酶(extended -spectrum -lactamase,ESBL)的英文縮寫。產(chǎn)ESBL株意為克雷伯菌屬及大腸埃希菌等由于產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶,對頭孢菌素及氨曲南無論體外藥敏試驗結(jié)果如何,臨床治療都是無效的。產(chǎn)ESBL株對其他藥物也可能耐藥,如氨基糖苷類及復(fù)方新諾明。42.試述葡萄球菌的表面抗原的組成。答：葡萄球菌的表面抗原主要有: (1)蛋白抗原:葡萄球菌細(xì)胞壁的一種蛋白成分,稱為葡萄球菌A蛋白(SPA),是具有種、屬特異性而元型特異性的完全抗原。SPA具有抗吞噬細(xì)胞吞噬的作用,可與人免疫球蛋白IgG的Fc段非特異性的結(jié)合而不影響Fab段,故可用之作為檢測各

28、種抗原和抗體的實驗診斷試劑。 (2)多糖抗原:為具有型特異性的半抗原,金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁所含的多糖抗原為核糖醇磷壁酸,檢測其刺激機體所產(chǎn)生的磷壁酸抗體有助于金黃色葡萄球菌感染的診斷與預(yù)后判斷,表皮葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌的細(xì)胞壁多糖抗原為甘油磷壁酸。43.鏈球菌在血平板上有哪幾種特征性溶血觀象?答：鏈球菌在血平板上形成三種特征性溶血試驗現(xiàn)象: (1)甲型()溶血:菌落周圍出現(xiàn)較窄的草綠色溶血環(huán),習(xí)慣上稱這類菌為甲型溶血性鏈球菌,即草綠色鏈球菌。(2)乙型()溶血:菌落周圍出現(xiàn)較寬的透明溶血環(huán),這類菌被稱為乙型溶血性鏈球菌,能產(chǎn)生溶血素O等毒素,致病性強。(3)丙型(r)溶血:菌落周圍無溶

29、血環(huán),故這類菌又稱為不溶血鏈球菌。44.為什么肺炎鏈球菌肺炎患者早期應(yīng)作血液培養(yǎng)?答：肺炎鏈球菌肺炎患者早期表現(xiàn)為菌血癥,血培養(yǎng)陽性率很高。故應(yīng)在病人畏寒、發(fā)熱時,尤其是在使用抗菌藥物前積極抽送血培養(yǎng),血培養(yǎng)的敏感性和特異性均大于痰培養(yǎng),其臨床價值是后者不可比擬的。45.肺炎鏈球菌的主要鑒定依據(jù)是什么?答：肺炎鏈球菌主要鑒定依據(jù)是: (1)菌體形態(tài):呈矛頭狀成雙排列,坦面相鄰,尖端向外的革蘭陽性雙球菌。(2)血平極上的菌落特征:直徑0.5-1.5mn,灰白色,半透明,表面光滑(有些菌株可表現(xiàn)為粘液狀)的扁平菌落,周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)。培養(yǎng)或放置24h以上培養(yǎng)物,由于肺炎鏈球菌的自溶作用,其菌落

30、中央可凹陷致邊緣隆起而呈臍窩狀。(3)生化鑒定:optochin敏感試驗陽性,膽鹽溶菌試驗陽性。46.如何評價和報告鏈球菌的培養(yǎng)結(jié)果?答：(1)乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌系毒力強的致病菌,無論從任何標(biāo)本中分離出均應(yīng)報告臨床。(2)及時鑒定和報告咽部標(biāo)本中中分離出的化膿性鏈球菌,有利于臨床早期進行適當(dāng)?shù)目咕委熞詼p少嚴(yán)重后發(fā)癥,如風(fēng)濕熱和腎小球腎炎的產(chǎn)生。 (3)草綠色鏈球菌群在重癥感染,如敗血癥和心內(nèi)膜炎時應(yīng)考慮鑒定到種。(4)從膿液標(biāo)本和創(chuàng)傷感染部位等處分離出的米勒鏈球菌組多為病原菌而非污染菌。47.腸球菌與同科的鏈球菌在生理學(xué)上的顯著區(qū)別是什么?答：腸球菌與同科的鏈球菌在生理學(xué)上顯著區(qū)別

31、是:腸球菌能在高鹽(6.5%NaCl)、高堿(pH9.6)條件下,40%膽汁培養(yǎng)基上,和10-45的環(huán)境中生長,并對許多抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥。48.試述噬菌體的概念及其實際意義?答：噬菌體具有體積微小,結(jié)構(gòu)簡單和嚴(yán)格的寄生性,必須在活的宿主細(xì)胞(如細(xì)菌)內(nèi)繁殖,對寄生的宿主細(xì)胞表現(xiàn)出高度特異性,通常能將宿主細(xì)胞裂解,為一類屬于病毒的微小生物,稱之為噬菌體。其實際意義是可根據(jù)噬菌體寄生宿主菌細(xì)胞的高度特異性,并使其裂解這一特點用于細(xì)菌鑒定,亦可用于流行病學(xué)調(diào)查時的細(xì)菌分型。49.簡述送檢腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)樣本的質(zhì)量要求?答：(1)以無菌技術(shù)由腰椎穿刺采集腦脊液3-5ml盛于無菌容器中立即送檢,厭氧

32、培養(yǎng)則應(yīng)床邊接種。(2)天冷時宜將標(biāo)本置于35條件下保溫送檢,以免某些病原菌死亡。50.試述腸桿菌科的致病因素。答：(1)內(nèi)毒素:可引起發(fā)熱、白細(xì)胞變化及代謝改變等,嚴(yán)重者可致休克。(2)腸毒素:可致腹瀉。(3)其他致病因素:如穿透腸道上皮和粘附于粘膜的能力等。51.簡述淋病奈瑟菌的培養(yǎng)特點和生化反應(yīng)。答：培養(yǎng)特點:巧克力平板和專用選擇性培養(yǎng)基中生長,初次分離需提供5%左右的C0<2>和濕潤環(huán)境,培養(yǎng)溫度30-37下生長。 生化反應(yīng):氧化酶、觸酶試驗陽性,對糖類的生化活性最低,只能氧化分解葡萄糖。52.腸桿菌科在細(xì)菌形態(tài)、培養(yǎng)和生化特性上有何共同特征?答：腸桿菌科細(xì)菌具有以下共同特

33、性:革蘭陰性桿菌,無芽胞,多有鞭毛,能運動,在普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上生長良好,兼性厭氧,在有氧和無氧條件下均可生長。主要生化特性包括:發(fā)酵葡萄糖(產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣),觸酶陽性,氧化酶陰性,可將硝酸鹽還原至亞硝酸鹽。53.試述腸桿菌科細(xì)菌的抗原構(gòu)造。答：腸桿菌科細(xì)菌的主要抗原構(gòu)造復(fù)雜,主要包括菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原三種: (1)0抗原。是細(xì)菌細(xì)胞壁的成分,其化學(xué)成分是脂多糖。脂多糖分子是一個以核心多糖為中心的三層結(jié)構(gòu),腸桿菌科各屬細(xì)菌的核心多糖相同,核心多糖的內(nèi)側(cè)是類脂A,為內(nèi)毒素的毒性成分,核心多糖的外側(cè)是由重復(fù)的低聚糖組成的多糖鏈,決定0抗原的特異性。(2)H抗原。是不耐

34、熱的蛋白抗原,由鞭毛蛋白多肽鏈上的氨基酸序列和空間構(gòu)型決定H抗原的特異性。(3)表面抗原。是包繞在O抗原外側(cè)的不耐熱的多糖抗原,由粘液或莢膜多糖的結(jié)構(gòu)決定表面抗原的特異性,表面抗原在不同菌屬中有不同的名稱,如大腸埃希菌的K抗原、傷寒沙門菌的Vi抗原和志賀菌的K抗原等。0抗原和H抗原是腸桿菌科血清學(xué)分群和分型的依據(jù),表面抗原存在時可阻斷O抗原與相應(yīng)抗體之間的反應(yīng),加熱處理能消除表面抗原的阻斷作用。54.簡述大腸埃希菌的生化特性。答：本菌發(fā)酵多種糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽(IMViC)的結(jié)果為+-,在克氏雙糖鐵瓊脂(KLA)上斜面和底層均產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、H<2>S陰性,動力、

35、吲哚、尿素(MIU)培養(yǎng)基上的反應(yīng)結(jié)果為+-,一般不產(chǎn)生硫化氫(但近來發(fā)現(xiàn)產(chǎn)硫化氫菌株,應(yīng)引起注意)。55.根據(jù)其不同的血清型別、毒力和所致臨床癥狀不同,可將致瀉的大腸埃希菌分為哪五類?答：(1)腸毒素型大腸埃希菌(ETEC),引起霍亂樣腸毒素腹瀉(水瀉)。(2)腸致病型大腸埃希菌(EPEC),主要引起嬰兒腹瀉。(3)腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC),可侵入結(jié)腸粘膜上皮,引起志賀樣腹瀉(粘液膿血便)。 (4)腸出血型大腸埃希菌(EHEC),又稱產(chǎn)志賀樣毒素(VT)大腸埃希菌(SLTEC或VTEC),至少有一個血清型(0157:H7),可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征(HUS)。(5)腸凝聚型

36、大腸埃希菌(EAggEC),也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。56.試迷沙門菌的抗原構(gòu)造。答：沙門菌的抗原構(gòu)造主要有三種。即菌體抗原(0抗原)、鞭毛抗原(H抗原)和表面抗原(Vi抗原、M抗原和5抗原)。57.為什么CDC提出應(yīng)將大腸埃希菌O157：H7列為常規(guī)檢測項目?答：EHEC的血清型50種,最具代表性的是O157:H7,在北美許多地區(qū), O157:H7占腸道分離病原的第二位或第三位(多于志賀菌和耶爾森菌),是從血便中分離到的最常見的病原菌,分離率占血便的40%,6、7、8三個月O157:H7感染的發(fā)生率最高。且O157是4歲以下兒童急性腎功能衰竭的主要病原菌,所以CDC提出應(yīng)將大

37、腸埃希菌O157:H7列為常規(guī)檢測項目。58.試述沙門菌變異性。答：沙門菌屬在一定條件下發(fā)生變異,主要表現(xiàn)為:(1)S-R變異 自臨床標(biāo)本初次分離的菌株一般都是光滑型,但經(jīng)人工培養(yǎng)、傳代后可逐漸變成粗糙型菌落,此時菌體表面的特異多糖抗原喪失,在生理鹽水中可出現(xiàn)自凝。(2)H-0變異 是指有鞭毛的沙門菌失去鞭毛的變異。(3)相位變異 具有雙相H抗原的沙門菌變成只有其中某一相H抗原的單相菌,稱相位變異。(4)V-W變異 是指沙門菌失去Vi抗原的變異。59.在沙門菌鑒定過程中,如何處理血清凝集反應(yīng)中的問題?答：與多價抗血清不凝集時,可在玻璃試管內(nèi)用生理鹽水將細(xì)菌制成濃菌液,煮沸15-30min,冷卻

38、后再次做凝集試驗,因Vi抗原能阻斷0凝集反應(yīng),而煮沸處理能破壞菌體表面的Vi抗原。僅出現(xiàn)單相H抗原(第一相或第二相)時,需用位相分離的方法誘導(dǎo)出另一相抗原后再進行檢查。60.志賀菌的鑒定要點是什么?如何與類志賀鄰單胞菌進行鑒別?答：志賀菌的鑒定要點是: (1)無動力,賴氨酸陰性。(2)發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外)。(3)分解粘多糖,在醋酸鹽和枸櫞酸鹽瓊脂上產(chǎn)堿。志賀菌屬與類志賀鄰單胞菌可用動力和氧化酶試驗加以鑒別,志賀菌屬均為陰性,而類志賀鄰單胞菌為陽性。61.肺炎克雷伯菌初次分離培養(yǎng)基上菌落有何特點?答：在初次培養(yǎng)基上可形成較大、凸起、灰白色粘

39、液型的菌落。菌落大而厚實、光亮,相鄰菌落容易發(fā)生融合,用接種針沾取時可挑出長絲狀細(xì)絲。在MAC培養(yǎng)基上發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,形成較大的粘液型、紅色的菌落,紅色可擴散至菌落周圍的培養(yǎng)基中。62.試述變形桿菌的鑒定依據(jù)是什么?答：菌落在營養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平板上遷徙生長,在腸道選擇培養(yǎng)基上乳糖不發(fā)酵,呈無色菌落,在SS瓊脂上產(chǎn)硫化氫,菌落中心呈黑色。 根據(jù)氧化酶陰性,脲酶陽性,苯丙氨酸脫氨酶陽性,KIA:斜面產(chǎn)堿,底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣,H<2>S+,可初步鑒定為變形桿菌屬。63.臨床常見的需氧革蘭陽性桿菌有哪些?答：臨床常見的需氧革蘭陽性桿菌有棒狀桿菌屬中的白喉棒狀桿菌、芽胞桿菌屬中的炭疽桿菌和蠟樣芽胞桿

40、菌,李斯特菌屬中產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌、丹毒絲菌屬中紅斑丹毒絲菌和加德納菌屬中的陰道加德納菌。64.簡述炭疽芽胞桿菌生物學(xué)性狀。答：(1)取自病人或病畜的新鮮標(biāo)本直接涂片時,常單個存在或呈短鏈,經(jīng)培養(yǎng)后則形成長鏈,呈竹節(jié)狀排列。(2)芽胞多在有氧下形成,有毒菌株可有明顯的莢膜。 (3)本菌為需氧或兼性厭氧菌,生長條件不嚴(yán)格,最適溫度為30-35,在普通瓊脂培養(yǎng)基上形成灰色、粗糙型菌落,在低倍鏡下觀察菌落呈卷發(fā)狀。 (4)在血平板上不溶血,在肉湯培養(yǎng)基中由于形成長鏈而呈絮狀沉淀生長。(5)在明膠培養(yǎng)基中經(jīng)3718-24h可使表面液化成漏斗狀,這是由于細(xì)菌沿穿刺線向四周擴散成倒松樹狀。有毒菌株在NaH

41、CO<3>血瓊脂平板上置5%C0<2>37環(huán)境中24-48h可產(chǎn)生莢膜,變成粘液型(M)菌落,無毒菌株為粗糙型(R)菌落。 能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、蕈糖,有些菌株能遲緩發(fā)酵甘油和水楊素,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。能水解淀粉,不發(fā)酵鼠李糖、半乳糖等其他糖類,能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,不產(chǎn)生吲哚和硫化氫,不利用枸櫞酸鹽,不分解尿素,在牛乳中生長2-4d牛乳凝固,然后緩慢陳化,卵磷脂酶弱陽性,觸酶陽性。65.炭疽芽胞桿菌有哪些主要的鑒定試驗?答：炭疽芽胞桿菌是引起人畜共患急性傳染病一炭疽病的病原菌。本菌發(fā)病急,死亡率高,因此實驗室檢驗有重要意義,主要的鑒定試驗如下:1噬菌體裂解試驗;2串

42、珠試驗;3青霉素抑制試驗;4串珠和青霉素抑制聯(lián)合試驗;5重碳酸鹽毒力試驗;6動物試驗;7植物凝集素試驗。66.如何提高流感嗜血桿菌培養(yǎng)陽性率?答：(1)流感嗜血桿菌初次培養(yǎng)應(yīng)在5%-10%C0<2>環(huán)境。(2)生長中需要X、V因子,故可在培養(yǎng)基中添加此因子。(3)應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基,如巧克力瓊脂,并加入一定量抗生素,1ml培養(yǎng)基中含萬古霉素50g、桿菌肽300g、氯林可霉素1g,嗜血桿菌分離率可達96.7%。67.一患者食用海味發(fā)生食物中毒,取其嘔吐物培養(yǎng)得到一種動力陽性菌,血清制功試驗陰性,移種KIA、MIU培養(yǎng)基:葡萄糖(+)、乳糖（-）、H<2>S(-)、動力(+)

43、、吲哚(+)、尿素酶(-),氧化酶(+),該菌很可能為何種菌?如何進一步鑒定。 答：(1)引起食物中毒的革蘭陰性桿菌,一般有某些沙門氏菌、變形桿菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌以及副溶血性弧菌等,提示結(jié)果分析可能為耐鹽的副溶血性弧菌。(2)進一步的鑒定試驗包括嗜鹽試驗、生化反應(yīng)及血清學(xué)試驗。68.簡述厭氧菌在厭氧條件下生存的機制。答：厭氧菌慶氧機制: (1)缺乏細(xì)胞色素酶和細(xì)胞色素氧化酶。在有氧的情況下,培養(yǎng)基中的物質(zhì)被氧化,轉(zhuǎn)變成氧化型的物質(zhì)較多,需要氧化還原電勢較高的酶如細(xì)胞色素酶和細(xì)胞色素氧化酶,才能將其氧化。而厭氧菌不具備這些酶類,不能氧化電勢高的物質(zhì),最后因能量供應(yīng)不足而死亡。 (2)缺乏觸酶

44、和過氧化氫酶。有氧時,細(xì)菌生長由需氧脫氫酶催化有氧氧化,產(chǎn)生過氧化氫。它能抑制乙酰輔酶A的分解,因而阻礙細(xì)菌的脂類代謝。厭氧菌缺乏此酶,不能分解H<2>0<2>,而致代謝終止死亡。(3)缺乏超氧化物歧化酶。某些細(xì)菌氧化代謝的最終產(chǎn)物是超氧化物自由基0<2>-，具有高氧化能力,對細(xì)菌的毒害作用比H<2>0<2>大得多,而厭氧菌無此歧化酶,不能解除其毒害。綜上所述,厭氧菌由于缺乏與需氧菌類似的一些酶類,不能耐受0<2>，故而不能在有氧環(huán)境中生存。69.寫出五種臨床上常見的厭氧菌的名稱及所致疾病。答：1破傷風(fēng)梭菌:破傷風(fēng);2產(chǎn)氣

45、莢膜梭菌:氣性壞疽;3肉毒梭菌:食物中毒;4脆弱類桿菌:腸道,生殖道,顱內(nèi)等感染;5難辨梭菌:偽膜性腸炎等。70.分離培養(yǎng)厭氧菌失誤的原因有哪些?答：如果臨床懷疑有厭氧菌感染的標(biāo)本,而分離培養(yǎng)為陰性,可能有下述失誤。(1)培養(yǎng)前未作標(biāo)本的直接涂片和染色鏡檢。(2)標(biāo)本在空氣中放置太久或接種的操作時間過長。(3)未用新鮮配制的培養(yǎng)基。(4)未用選擇培養(yǎng)基,以抑制兼性厭氧菌生長。 (5)培養(yǎng)基未加必要的補充物質(zhì),如氯化血紅素、維生素K1等,它們對類桿菌特別是產(chǎn)黑素類桿菌的生長有促進作用,所以未加上述必要補充物質(zhì)的培養(yǎng)基,厭氧菌不生長。用硫乙醇酸鹽作為唯一厭氧菌培養(yǎng)基,而有些厭氧菌在該培養(yǎng)基中不能生

46、長,故初代培養(yǎng)不應(yīng)用硫乙醇酸鈉。(7)沒有合適的厭氧缸或厭氧裝置,或厭氧裝置漏氣,或其他原因?qū)е聟捬醐h(huán)境不適宜(如厭氧缸內(nèi)催化劑失活或氧化還原指示劑失效等)。 培養(yǎng)時間不足。(9)厭氧菌的鑒定材料有問題,如鑒定用的培養(yǎng)基、試劑和抗生素紙片失效,都可能導(dǎo)致鑒定錯誤。71.試述產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定依據(jù)。答：產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定依據(jù)是: (1)革蘭陽性粗大桿菌、短粗方頭,常伴其他雜菌,芽胞不易看到,可見莢膜。 (2)菌落特征和糖發(fā)酵反應(yīng),特別是“洶涌發(fā)酵""現(xiàn)象。 (3)Nagler氏試驗陽性。(4)動物試驗(血性水腫、泡沫肝等)。(5)揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的測定(主要為乙酸和丁酸,有時也

47、形成丁醇)。72.什么叫Koch現(xiàn)象?答：結(jié)核的特異性免疫是通過結(jié)核分校桿菌感染后所產(chǎn)生的。實驗證明,將有毒結(jié)核分枝桿菌純培養(yǎng)物初次接種于健康豚鼠,不產(chǎn)生速發(fā)型過敏反應(yīng),而經(jīng)10-14d,局部逐漸形成腫塊,繼而壞死、潰瘍,細(xì)菌侵入附近的淋巴結(jié),再通過淋巴-血流向全身播散。局部潰瘍經(jīng)久不愈,直至動物死亡。若在8-12周之前給動物接種減毒的或小量結(jié)核分校桿菌(即行人工感染),則局部反應(yīng)提前出現(xiàn),于2-3d內(nèi)發(fā)生紅腫硬結(jié),后有潰瘍形成但很快趨于痊愈,且附近淋巴結(jié)不受侵犯,亦無細(xì)菌周身播散。此為Koch在1891年觀察到的后為Rich所描述,故稱為Koch現(xiàn)象。73.非結(jié)核分枝桿菌Runyon分類有幾

48、群?每群各舉2例。答：非結(jié)核分校桿菌Runyon分類有四群: (1)堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌。(2)瘰疬癡分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌。(3)鳥-胞內(nèi)復(fù)合分校桿菌、蟾分枝桿菌。(4)偶發(fā)分枝桿、龜分枝桿菌。74.試述結(jié)核菌分枝桿菌培養(yǎng)特性。答：本菌為專性需氧菌,在元氧條件下迅速死亡。為兼性細(xì)胞內(nèi)寄生菌,在細(xì)胞內(nèi)外均可發(fā)育繁殖,強毒菌株可長期生存于巨噬細(xì)胞內(nèi)。生長條件37,pH6.4-7.0。具有強的疏水性,菌落不易乳化于水及生理鹽水。本菌繁殖周期較多數(shù)細(xì)菌長,在最佳培養(yǎng)基上至少14-15h繁殖一代。群體生長于以雞蛋為基礎(chǔ)的固體培養(yǎng)基上,初次分離需4-8周,次代培養(yǎng)仍需2-4周。營養(yǎng)要求尤高,需要

49、卵黃、血液、馬鈴薯淀粉等有機物質(zhì),碳、氮、磷、鉀、鎂、鐵等無機鹽類以及氨基酸、菸酸、核黃素等。75.試述麻風(fēng)分枝桿菌形態(tài)與染色特性。答：麻風(fēng)分枝桿菌亦為抗酸桿菌,但較結(jié)核分枝桿菌短而粗,大小約1-8m×m,抗酸染色著色均勻,呈束狀或團狀排列。麻風(fēng)分枝桿菌為典型的胞內(nèi)寄生菌,有該菌存在的細(xì)胞胞質(zhì)呈泡沫狀稱為麻風(fēng)細(xì)胞。用藥后細(xì)菌可斷裂為顆粒狀、鏈桿狀等,著色不均勻,叫不完整染色菌。革蘭染色陽性,無動力,無莢膜,亦無芽胞。76.BACTEC-460系統(tǒng)檢測分枝桿菌的基本原理。答：BACTEC-460自動快速檢測儀的主要原理是測定分枝桿菌的代謝產(chǎn)物。在指定專用的7H12或12B培養(yǎng)瓶中加入放

50、射性14C棕櫚酸產(chǎn)物,當(dāng)檢測標(biāo)本經(jīng)處理接種于該培養(yǎng)基內(nèi),如果有分枝桿菌存在,分枝桿菌代謝時將產(chǎn)生中間產(chǎn)物和終末產(chǎn)物,如利用培養(yǎng)瓶中標(biāo)記14C棕櫚酸產(chǎn)物而產(chǎn)生帶有放射性的14C0<2>,BACTEC儀將培養(yǎng)基中14C0<2>送入電 xFZ'l|&l) 離室,并自動顯示測定結(jié)果。以生長指數(shù)(growth index,GI)表示,連續(xù)觀察,如果GI升高達某一程度,則報告有分枝桿菌生長,即為陽性。77.簡述病毒的特點。答：病毒具有如下特點:不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu);只具有一種類型的核酸(RNA或DNA);特殊的繁殖方式復(fù)制;缺乏完整的酶系統(tǒng)和能量合成系統(tǒng);不具有核糖體;絕

51、對的細(xì)胞內(nèi)寄生。78.簡述細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件。答：細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件為:1水,主要作為溶劑。2無機鹽,如Na<+>、K<+>、Mg+、Ca+、Cl<->、HCO<3>-。其作用是:作為細(xì)胞的正常組成成分;維持滲透壓和酸堿平衡;促進細(xì)胞貼壁;作為細(xì)胞代謝過程中某些酶的激活劑。3碳水化合物,主要為葡萄糖等單糖,其作用是:為細(xì)胞提供能量;維持滲透壓。4有機氮,主要為蛋白質(zhì)及各種氨基酸,此類物質(zhì)在血清、血漿、水解酪蛋白中含量很豐富,其作用是:作為細(xì)胞的重要組成部分;幫助細(xì)胞貼壁;促進細(xì)胞生長;解除某些物質(zhì)對細(xì)胞的毒性作用。5維生素,主要作為某些酶的輔酶參

52、與細(xì)胞的新陳代謝。6其他營養(yǎng)物質(zhì),如嘧啶、核糖及脫氧核糖、激素等。79.在實驗動物中,悉生動物與普通動物相比有何優(yōu)點?答：悉生動物有如下優(yōu)點:悉生動物作為實驗動物無傳染病及寄生蟲感染;試驗結(jié)果明確;所需動物數(shù)少;利于長期的實驗觀察,實驗中死亡率低,存活率高;能利用它對實驗進行準(zhǔn)確設(shè)計,故由其得出的實驗結(jié)果具有較高的統(tǒng)計價值。80.為什么病毒必須在活的敏感細(xì)胞內(nèi)才能生長繁殖?答：因為:1病毒本身沒有合成蛋白質(zhì)的場所一核糖體,故必須借助宿主細(xì)胞的核糖體合成蛋白質(zhì);2由于病毒缺乏完整而又必須的酶,故必須借助細(xì)胞的某些酶才能復(fù)制;3只有敏感細(xì)胞上才有病毒的受體,病毒與受體結(jié)合后才能進入細(xì)胞內(nèi)生長繁殖。

53、81.什么是干擾缺損病毒?答：干擾缺損病毒(DI顆粒)是指在病毒感染時產(chǎn)生的一類亞基因缺失突變體,它們因失去了其親代病毒基因組中的復(fù)制必需片段,故不能單獨進行復(fù)制,而必須在其同型的完全病毒的輔助下,由完全病毒提供DI顆粒已喪失的但又為復(fù)制所必需的基因功能才能復(fù)制。同時,由于DI顆粒與完全病毒競爭復(fù)制所必需的基因產(chǎn)物,從而可抑制完全病毒的復(fù)制。82.簡述病毒復(fù)制的基本過程。答：病毒復(fù)制的基本過程為:1吸附,即病毒顆粒與細(xì)胞膜的受體發(fā)生相互作用后病毒顆粒特異性地吸附于宿主細(xì)胞表面;2穿入,病毒吸附于宿主細(xì)胞膜后以各種不同的方式進入細(xì)胞,此即穿入;3脫殼,病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)脫去核殼,病毒核酸隨后進入細(xì)

54、胞的一定部位;4病毒大分子的生物合成,病毒基因組進入宿主細(xì)胞后,一方面表達與合成病毒復(fù)制過程中所必需的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白,另一方面進行復(fù)制合成子代病毒核酸;5裝配與釋放,病毒核酸與殼體蛋白合成完畢后,在細(xì)胞核內(nèi)或胞漿內(nèi)裝配成熟為病毒顆粒(核衣殼),此即子代病毒體,然后子代病毒體以不同方式從感染細(xì)胞中釋放到細(xì)胞外環(huán)境。83.簡述病毒鑒定的基本原則。答：鑒定病毒的基本原則包括:根據(jù)病毒的生物學(xué)特性如病毒的形態(tài)、大小與結(jié)構(gòu)等加以鑒定;根據(jù)病毒的宿主范圍及受染宿主的癥狀加以鑒定;根據(jù)病毒的理化性質(zhì)如核酸的類型及其對理化因素的抵抗能力等加以鑒定:根據(jù)病毒的血清學(xué)反應(yīng)加以鑒定。84.簡述病毒分類的基本原

55、則。答：分類的基本原則包括:1核酸的類型、結(jié)構(gòu)和分子量等;2病毒體的形態(tài)、大小與基本結(jié)構(gòu);3病毒體對乙醚、氯仿等脂溶劑的敏感性;4血清學(xué)性質(zhì)與抗原關(guān)系;5病毒在細(xì)胞培養(yǎng)上的繁殖特征;6對除脂溶劑以外的其他理化因子的敏感性;7流行病學(xué)特征。85.什么是細(xì)胞病變效應(yīng),它在病毒鑒定中有何意義?答：細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)是指病毒在宿主細(xì)胞中復(fù)制后導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生一系列變化,如:開始時,細(xì)胞核發(fā)生變化,染色質(zhì)著邊,核濃縮,隨后細(xì)胞膜發(fā)生變化,失去黏附作用,細(xì)胞變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落,或細(xì)胞互相融合等。這些變化可通過顯微鏡檢查。各種病毒產(chǎn)生CPE各不相同,各有其特點,故可借以初步鑒定病毒種屬,并可作為病毒增殖

56、的指標(biāo)。86.鑒定病毒時常用的血清學(xué)反應(yīng)有哪幾種?答：鑒定病毒時常用的血清學(xué)反應(yīng)有:中和試驗、血凝抑制試驗、酶聯(lián)免疫試驗、放射免疫試驗、免疫熒光技術(shù)、補體結(jié)合試驗、膠乳凝集試驗、免疫電鏡技術(shù)等。87.什么是溫度敏感突變株?有何用途?答：溫度敏感突變株(ts株)為病毒的一種突變形式。其特點是病毒突變后在較低溫度下能夠繁殖,但在較高溫度下不能夠繁殖。ts突變株常為減毒株,用于病毒遺傳學(xué)研究及制備疫苗。88.純化病毒過程中應(yīng)注意哪些問題?答：純化病毒過程中應(yīng)注意:1保持病毒的感染性,如嚴(yán)格控制溫度,pH等;2選擇適宜的純化材料,如無其他病毒污染,含病毒量較多,雜質(zhì)少并易于處理;3選擇合適的提純方法;

57、4建立靈敏的病毒測定和鑒定方法。89.簡述病毒的遺傳物質(zhì)變異的主要機理。答：病毒發(fā)生變異的主要機理有:1病毒基因突變,即病毒基因組因自發(fā)的或經(jīng)誘導(dǎo)后其基因核苷酸順序發(fā)生改變,主要有點突變和缺失突變;2病毒基因重組,即來自兩個或多個病毒顆粒的遺傳物質(zhì)重配于子代重組體病毒中,病毒重組體含有來自兩個或多個不同病毒基因組的核酸序列,出現(xiàn)與親代病毒不同的基因型和表型。主要有兩種方式:分子內(nèi)重組和基因重配。90.簡述持續(xù)性感染發(fā)生的機制及分類?各舉一例說明。答：導(dǎo)致持續(xù)性感染發(fā)生的機制有:1病毒因素,如病毒基因組與細(xì)胞染色體整合、病毒無免疫原性或較弱、病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)較弱、病毒發(fā)生變異和病毒感染后產(chǎn)生干擾缺損病毒;2宿主因素,如病毒在機體受保護部位生長、機體產(chǎn)生非中和抗體和機體產(chǎn)生免疫耐受及細(xì)胞免疫缺陷等。 持續(xù)性感染分為:1潛伏性感染