動物細胞工程試題及詳解

1、動物細胞工程試題1用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是（C）A都須用液體培養(yǎng)基B都需用培養(yǎng)箱C都要在無菌條件下進行D都可體現(xiàn)細胞的全能性解析： 動物細胞離體培養(yǎng)主要是獲得細胞的代謝產物，植物體細胞離體培養(yǎng)體現(xiàn)的是全能性。植物體細胞是固體培養(yǎng)基。動物體細胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)箱。動物細胞培養(yǎng)：1、動物細胞的培養(yǎng)：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。2、動物細胞培養(yǎng)液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。3、動物細胞培養(yǎng)液的特點：液體培養(yǎng)基含動物血清。4、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件(1)充

2、足的營養(yǎng)供給微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。(2)適宜的溫度：36.5±0.5；適宜的pH：7.27.4。 (3)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。 (4)氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。 5、動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞制成細胞懸液轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細

3、胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。2下列關于細胞工程的敘述，錯誤的是（D）A. 電刺激可誘導植物原生質體融合或動物細胞融合B. 去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理C. 小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體D. 某種植物甲乙兩品種的體細胞雜交與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同解析：A正確誘導原生質體融合的方法有物理法（離心 振動 電刺激）化學法（聚乙二醇PEG）生物方法（滅活的病毒）. B正確去除植物細胞壁需要纖維素酶和果膠酶，將動物組織分散成單個細胞需要胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時間。C正確小鼠骨髓瘤細胞和經抗原免疫

4、小鼠的B淋巴細胞融合既可以無限增殖，又可產生特異性抗體。D錯誤，假設甲植物體細胞是2N,乙植物體細胞是2M，甲乙體細胞雜交染色體數(shù)目為2N+2M；而甲乙品種雜交染色體數(shù)目是N+M。3制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術包括（A）細胞培養(yǎng) 細胞融合 胚胎移植 細胞核移植A B C D解析：單克隆抗體的制備過程是 人工誘導經過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經篩選獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，經過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞獲得單克隆抗體。4利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關敘述正確的是（D）A. 用純化的核衣蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體B

5、. 體外培養(yǎng)單個漿細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C. 將等量漿細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞D. 利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者解析：A錯誤 一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產量低、純度低、特異性差； B錯誤 單克隆抗體是雜交瘤細胞合成并分泌的，雜交瘤細胞是由漿細胞與骨髓瘤細胞融合形成的；C錯誤制備單克隆抗體過程中的篩選：篩選是將未融合的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞以及BB融合、瘤瘤融合的細胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰，篩選出B瘤融合的細胞。篩選是將產生特定抗體的B瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應抗原檢測

6、的辦法篩選出來。因為從體內取免疫過的B淋巴細胞時取出很多種，形成的雜交瘤細胞有很多種，所以需篩選出產生特定抗體的雜交瘤細胞。5用動物細胞工程技術獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是()A. 將抗原注入小鼠體內，獲得能產生抗體的B淋巴細胞B. 用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C. 用聚乙二醇作誘導劑，促使能產生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D. 篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體解析：動物細胞沒有細胞壁，所以不需要纖維素酶去除細胞壁6某研究小組進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝

7、腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：(1)將數(shù)量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數(shù)量比乙細胞數(shù)量_多_。(2)在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是 血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質_。細胞培養(yǎng)應在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是_維持培養(yǎng)液pH _。(3)在兩種細胞生長過程中，當乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長_停止_。藥物試驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，甲細胞比乙細胞可以傳代的次數(shù)更_多_。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用_胰蛋白酶_消化處理。(4)為了防止細

8、胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_抗生素_。(5)已知癌細胞X過量表達與肝腫瘤的發(fā)生密切相關，要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，可將甲細胞分為A、B兩組，A組細胞培養(yǎng)液中加入_Y_，B組細胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，經培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細胞中的_mRNA_或_蛋白質_合成水平的差異，確定Y的藥效。7回答下列有關細胞培養(yǎng)的問題(1)在動物細胞培養(yǎng)過程中。當貼壁細胞分裂生長到細胞表面_相互接觸_時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的_接觸抑制_。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是_單層_。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理

9、，可用的酶是_胰蛋白酶_。(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)_衰老甚至死亡_現(xiàn)象；但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發(fā)生改變而變成_不死性_細胞，該種細胞的黏著性_降低_，細胞膜表面蛋白質(糖蛋白)的量_減少_。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是_由于死細胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色_。(4)檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用細胞分裂到_中_期的細胞用顯微鏡進行觀察。(5)在細胞培養(yǎng)過程中，通常在_超低溫_條件下保存細胞。因為在這種條件下，細胞中_酶_的活性降低

10、，細胞_新陳代謝_的速率降低。(6)給患者移植經細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機體把移植的皮膚組織當作_抗原_進行攻擊。8如圖所示為單克隆抗體制備過程示意圖。（1)淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”在一起，說明細胞膜_具有一定的流動性_。此過程，常用_聚乙二醇_作為誘導劑，雜交瘤細胞繁殖進行的是有絲分裂。該細胞的特點（遺傳性狀）是_既能大量增殖又能產生特異性抗體_。(2)篩選出雜交瘤細胞的方法是_培養(yǎng)液中加入氨基蝶呤，收集增殖的細胞_。(3)雜交瘤細胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比有何主要不同？_液體培養(yǎng)基含有葡萄糖和動物血清_。(4)單克隆

11、抗體注入體內后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導彈”，這是利用了_抗原與抗體之間結合的高度特異性_。(5)在單克隆抗體制備過程中，還應用了細胞工程中的_動物細胞融合_和_動物細胞培養(yǎng)_兩大技術。9現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學物質，實驗室研究人員欲通過動物細胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強弱。請你以一個研究人員的身份參與此項研究，完成下列有關問題：(1)實驗原理：_有毒物質能誘導細胞產生染色體變異_。根據這種變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分數(shù)(以下稱Q值)，可判斷該化學物質的毒性。(2)材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液

12、、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學物質甲溶液、適宜濃度的化學物質乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時期的高倍顯微照片。(3)實驗步驟：制備細胞懸浮液。把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸浮液。進行細胞培養(yǎng)。取A、B、C3個潔凈的培養(yǎng)瓶，_消毒 滅菌 加入等量的細胞懸浮液_；向A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻；把3個培養(yǎng)瓶放在37的恒溫箱中培養(yǎng)。制作臨時裝片。當細胞增殖到

13、大約8代左右時，同時從恒溫箱中取出3個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動物細胞固定液，迅速殺死細胞并固定細胞分裂相；靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，_用適宜濃度龍膽紫進行染色_，35min后，蓋上蓋玻片。鏡檢和統(tǒng)計。把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于_有絲分裂中_期的細胞，并與_C_進行對比，統(tǒng)計并計算變異的細胞占該期細胞總數(shù)的百分數(shù)(Q值)。(4)結果分析與結論：經研究人員實驗得知，A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實驗的結論是_甲乙都是有毒性的且乙的毒

14、性大于甲_。在實驗中，C培養(yǎng)瓶起_對照_作用，C瓶的Q值說明_動物細胞在正常培養(yǎng)狀態(tài)下染色體變異頻率非常低_。10下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖，請據圖回答下列問題：(1)圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動物細胞工程技術手段是_動物細胞培養(yǎng)_。(2)圖甲中注射病原入小鼠體內后，要經過_吞噬細胞_細胞處理后，才能被免疫細胞識別。過程常在_滅火的病毒_誘導下完成，過程與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是_不需特定的培養(yǎng)基，不需嚴格的外界環(huán)境條件_。(3)單克隆抗體能定向攻擊癌細胞，主要是利用其_特異性_。(4)圖乙過程常選擇_M中_期的卵母細胞做受體細胞，原因是_M期卵母細胞體積大，易操作，含有促使細胞核全能性表達的物質和營養(yǎng)添加_。若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎？_不是_。原因是_卵細胞細胞質的遺傳物質也能控制某些性