苯乙胺類擬腎上腺素類藥物的分析

1、.第七章第七章 苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析.基本要求基本要求一、掌握一、掌握苯乙胺苯乙胺類擬腎上腺類藥物的結(jié)構和類擬腎上腺類藥物的結(jié)構和性質(zhì)；主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物的鑒別、性質(zhì)；主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物的鑒別、檢查和含量測定的原理與特點檢查和含量測定的原理與特點 。二、熟悉二、熟悉主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物雜質(zhì)主要苯乙胺類擬腎上腺素藥物雜質(zhì)的結(jié)構、危害、檢查方法與含量限度的結(jié)構、危害、檢查方法與含量限度三、了解三、了解影響苯乙胺類擬腎上腺素藥物穩(wěn)定影響苯乙胺類擬腎上腺素藥物穩(wěn)定性的主要因素、體內(nèi)樣品與臨床監(jiān)測方法性的主要因素、體內(nèi)樣品與臨床監(jiān)測方法 .第一節(jié)

2、第一節(jié) 結(jié)構與性質(zhì)結(jié)構與性質(zhì)一、基本結(jié)構與典型藥物一、基本結(jié)構與典型藥物R R1 1CHCHCHCHNHNHR R2 2 HX HX OH ROH R3 3* *擬腎上腺素類擬腎上腺素類.HOHOCOHHCH2NHCH3腎上腺素*.HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲腎上腺素CCCOOHCOOHOHHHHO.HOCHOHCH2NHCH3 HCl鹽酸去氧腎上腺素.HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO鹽酸異丙腎上腺素.ClH2NClCHOHCH2NH C(CH3)3HCl鹽酸克侖特羅鹽酸克侖特羅無酚羥基無酚羥基.CHOHCHCH3NHCH3HCl HCl鹽酸麻黃堿鹽酸麻黃堿. 弱

3、堿性弱堿性酚羥基酚羥基特性特性芳伯氨基芳伯氨基特性特性紫外吸收紫外吸收光學活性光學活性化學性質(zhì)化學性質(zhì)烴氨基側(cè)鏈為仲烴氨基側(cè)鏈為仲胺氮，顯弱堿性胺氮，顯弱堿性鄰苯二酚鄰苯二酚/ /酚羥酚羥基，基，F(xiàn)eClFeCl3 3反應，反應，易氧化易氧化手性碳原子，具手性碳原子，具有旋光性有旋光性鹽酸克侖特羅鹽酸克侖特羅苯環(huán)苯環(huán)二、主要理化性質(zhì)二、主要理化性質(zhì).一、與鐵鹽的反應一、與鐵鹽的反應Ar-OHAr-OHFeClFeCl3 3絡合顯色絡合顯色 多為綠色多為綠色紫色紫色/ /紫紅色紫紅色 堿液堿液詳見詳見P224第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗鑒別試驗.二、與甲醛硫酸反應二、與甲醛硫酸反應 在此試劑中形成醌式

4、結(jié)構而顯色在此試劑中形成醌式結(jié)構而顯色 藥物藥物甲醛甲醛- -硫酸硫酸腎上腺素腎上腺素紅色紅色重酒石酸去甲腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素淡紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素玫瑰紅玫瑰紅橙紅橙紅深棕紅深棕紅鹽酸異丙腎上腺素鹽酸異丙腎上腺素棕色棕色暗紫色暗紫色.具有具有Ar-OHAr-OH，易被氧化劑易被氧化劑I I2 2, H, H2 2O O2 2, K, K3 3Fe(CN)Fe(CN)6 6氧化氧化而顯色而顯色三、還原性反應三、還原性反應棕棕色色腎腎上上腺腺素素紅紅（血血紅紅色色）腎腎上上腺腺素素 22OH酸性下：酸性下：異異丙丙腎腎上上腺腺素素紅紅鹽鹽酸酸異異丙丙腎腎上上腺腺素素3

5、222OSNaI重酒石酸去甲腎上腺素重酒石酸去甲腎上腺素.酒石酸酒石酸氫鉀飽氫鉀飽和溶液和溶液腎上腺素腎上腺素鹽酸異丙腎鹽酸異丙腎上腺素上腺素重酒石酸去重酒石酸去甲腎上腺素甲腎上腺素I25Na2S2O3深紅棕深紅棕紫色紫色無色無色/微紅微紅/淡紫淡紫互相區(qū)分互相區(qū)分.四、四、 雙縮脲反應雙縮脲反應是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應；可用于鹽酸麻黃是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應；可用于鹽酸麻黃堿，鹽酸去氧腎上腺素鑒別堿，鹽酸去氧腎上腺素鑒別鹽酸麻黃堿鹽酸麻黃堿藍紫色藍紫色乙醚乙醚+CuSO4 + NaOH醚層醚層(紫紅色紫紅色)鹽酸去氧腎上腺素鹽酸去氧腎上腺素紫紫色色 無色無色.五、吸收光譜特征五、吸收光譜

6、特征例如：鹽酸異丙腎上腺素例如：鹽酸異丙腎上腺素 mg/ml mg/ml maxmax詳見詳見 P226P226.一、酮體檢查一、酮體檢查 本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。 第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查.HOHOCOHHCH2NHCH3腎上腺素腎上腺素酮腎上腺素酮. 220 260 300nm腎上腺素腎上腺素及及腎上腺素酮腎上腺素酮的紫外吸收曲線的紫外吸收曲線max310nm310nm處，腎上腺素無吸收，酮體有吸收處，腎上腺素無吸收，酮體有吸收. 采用采用UV法檢查：法檢查

7、： 利用酮體在利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。有吸收，本類藥物無吸收。 例如：例如： .二、有關物質(zhì)的檢查二、有關物質(zhì)的檢查鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇TLC鹽酸苯乙雙胍鹽酸苯乙雙胍 PC其他其他HPLC .第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定非水溶劑的種類：非水溶劑的種類：酸性溶劑酸性溶劑：有機弱堿在酸性溶劑中可顯著地增強：有機弱堿在酸性溶劑中可顯著地增強 相對堿度，相對堿度，如冰醋酸如冰醋酸堿性溶劑堿性溶劑：有機弱酸在堿性溶劑中可顯著地增強：有機弱酸在堿性溶劑中可顯著地增強相對酸度，相對酸度，如二甲基甲酰胺如二甲基甲酰胺兩性溶劑：具有酸、堿性能，如兩性

8、溶劑：具有酸、堿性能，如methanol惰性溶劑：沒有酸、堿性的溶劑，丙酮、氯仿惰性溶劑：沒有酸、堿性的溶劑，丙酮、氯仿一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 弱堿性弱堿性.( (一一) ) 基本原理基本原理當當HAHA酸性較強時，反應不能定量完成，必須酸性較強時，反應不能定量完成，必須除去或降低除去或降低HAHA的酸性，使反應順利地完成。的酸性，使反應順利地完成。BHBH+ + A A- -+ +HClOHClO4 4BHBH+ + ClOClO4 4+ +HAHA游離堿類鹽游離堿類鹽被置換出的弱酸被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應測定條件因此，要根據(jù)不同情況采用相應測定條件.( (二

9、二) ) 一般方法一般方法供供試試品品+ +冰冰醋醋酸酸1010ml-30mlml-30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加若供試品為氫鹵酸鹽再加5%5%醋酸汞醋酸汞的冰醋酸液的冰醋酸液3 3ml-5mlml-5ml結(jié)結(jié)果果高氯酸滴定液高氯酸滴定液以空白試驗以空白試驗校正校正.( (三三) ) 問題討論問題討論: :pKpKb b88的有機弱堿及其鹽類的含量測定的有機弱堿及其鹽類的含量測定pKpKb b為為8 81313的弱堿性雜環(huán)類藥物，可采用本法的弱堿性雜環(huán)類藥物，可采用本法 采用合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法采用合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法藥物藥物pKpKb b為為8 81010時，時，

10、 選冰醋酸作為溶劑選冰醋酸作為溶劑 為為10101212時，選冰醋酸與醋酐的混合溶液時，選冰醋酸與醋酐的混合溶液 12 12時，應用醋酐作為溶劑時，應用醋酐作為溶劑 .比醋酸合質(zhì)子的酸性更強，比醋酸合質(zhì)子的酸性更強，可增強藥物的堿性可增強藥物的堿性2(2(CHCH3 3CO)CO)2 2O O(CH(CH3 3CO)CO)3 3O O+ + + CH + CH3 3COOCOO- -醋酐合乙酰氧離子醋酐合乙酰氧離子在冰醋酸中加入不同量的在冰醋酸中加入不同量的甲酸甲酸，也能，也能使滴定突躍使滴定突躍顯著增大顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。意

11、測定結(jié)果。 .冰醋酸中的酸性冰醋酸中的酸性:HClO:HClO4 4HBrHBrH H2 2SOSO4 4HClHClHSOHSO4 4- -HNOHNO3 3 當被置換出的酸的酸性較強，則此置換反應無當被置換出的酸的酸性較強，則此置換反應無法定量完成。法定量完成。鹽酸鹽鹽酸鹽的酸性較強，因此的酸性較強，因此滴定前預滴定前預先加入醋酸汞先加入醋酸汞與氫鹵酸生成在冰醋酸中難解離的與氫鹵酸生成在冰醋酸中難解離的鹵化汞，從而消除氫鹵酸對滴定反應的不良影響。鹵化汞，從而消除氫鹵酸對滴定反應的不良影響。.3.3.滴定劑的穩(wěn)定性滴定劑的穩(wěn)定性 溶劑冰醋酸具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，溶劑冰醋酸具有揮發(fā)性，膨脹

12、系數(shù)較大，溫度溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。和貯存條件都影響滴定劑的濃度。若滴定樣品若滴定樣品與標定與標定HClOHClO4 4溶液時的溫度不一致，溫差未超過溶液時的溫度不一致，溫差未超過1010時，應將高氯酸滴定液的濃度用公式加以時，應將高氯酸滴定液的濃度用公式加以校正校正)(0011. 010101ttNN：冰醋酸的體積膨脹系數(shù)：冰醋酸的體積膨脹系數(shù) 溫差超過溫差超過10時，應重新標定時，應重新標定.4.終點指示方法終點指示方法 常用電位法和指示劑法。常用電位法和指示劑法。電位法：玻璃電極為指示電極電位法：玻璃電極為指示電極 飽和甘汞電極為參比電極飽和甘汞電極為參比電極指示劑：結(jié)晶紫（

13、指示劑：結(jié)晶紫（crystal violet，CV） 堿性堿性 酸性酸性 紫紫、藍藍、藍綠藍綠、綠綠、黃綠黃綠、黃黃 .在滴定不同強度的堿時，終點顏色變化不同。在滴定不同強度的堿時，終點顏色變化不同。較強的堿應以藍色或天藍色為終點；較強的堿應以藍色或天藍色為終點；較弱的堿應以黃綠色或黃色為終點。較弱的堿應以黃綠色或黃色為終點。最好以電位滴定法作對照，以確定終點的顏色。最好以電位滴定法作對照，以確定終點的顏色。同時應作空白試驗以減少滴定終點誤差。同時應作空白試驗以減少滴定終點誤差。N能鍵合多個質(zhì)子，表現(xiàn)為多元堿能鍵合多個質(zhì)子，表現(xiàn)為多元堿.非水滴定法測定有機堿含量的優(yōu)點非水滴定法測定有機堿含量的

14、優(yōu)點1在水中難以溶解或易發(fā)生水解的有機堿及其鹽在水中難以溶解或易發(fā)生水解的有機堿及其鹽類，都可按非水法測定類，都可按非水法測定2由于有機溶劑的電離常數(shù)低，用于少量樣品的由于有機溶劑的電離常數(shù)低，用于少量樣品的滴定也有明顯的終點滴定也有明顯的終點3方法簡便、快速，樣品取量少，結(jié)果也較準確方法簡便、快速，樣品取量少，結(jié)果也較準確. 本類藥物的原料藥多采用此法。本類藥物的原料藥多采用此法。 1 1. .重酒石酸去甲腎上腺素的測定重酒石酸去甲腎上腺素的測定 相當于相當于B B的有機酸鹽，可直接滴定的有機酸鹽，可直接滴定 相當于相當于B B的鹽酸鹽，不能直接滴定，需加的鹽酸鹽，不能直接滴定，需加Hg(A

15、c)Hg(Ac)2 2 處理后滴定處理后滴定 相當于相當于B B的的H H2 2SOSO4 4鹽，可直接滴定至其硫酸氫鹽，鹽，可直接滴定至其硫酸氫鹽，加醋酐提高堿性加醋酐提高堿性.二、溴量法二、溴量法適用：重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素適用：重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素基本原理：具苯酚結(jié)構，酚羥基的鄰對位基本原理：具苯酚結(jié)構，酚羥基的鄰對位H H為活為活潑潑H H，能與過量的溴定量發(fā)生溴代反應，能與過量的溴定量發(fā)生溴代反應剩余剩余定、過量定、過量3結(jié)果用結(jié)果用空白試驗空白試驗進行校正進行校正.三、三、 UVUV與比色法與比色法：結(jié)構中苯環(huán)具有紫外吸收：結(jié)構中苯環(huán)具有紫外吸收2.2.比色法

16、：比色法：利用藥物分子結(jié)構中的利用藥物分子結(jié)構中的Ar-NHAr-NH2 2重氮化偶合顯色重氮化偶合顯色，如：鹽酸克侖特羅栓如：鹽酸克侖特羅栓利用藥物分子結(jié)構中的利用藥物分子結(jié)構中的Ar-OHAr-OH與與FeFe2 2絡合顯色絡合顯色，進行比色測定，如：鹽酸異丙腎上腺素注射液、進行比色測定，如：鹽酸異丙腎上腺素注射液、鹽酸多巴胺注射液鹽酸多巴胺注射液 四、四、HPLCHPLC 腎上腺素注射液、重酒石酸去甲腎上腺素注射腎上腺素注射液、重酒石酸去甲腎上腺素注射液等液等.動物組織中鹽酸克侖特羅的動物組織中鹽酸克侖特羅的GC-MS測定測定2009200920112011年，央視年，央視315315特別行動特別行動“健美豬健美豬”真相真相曝光雙曝光雙匯子公司收購匯子公司收購含含“瘦肉精瘦肉精”豬肉豬肉第五節(jié)第五節(jié) 體內(nèi)藥物分析體內(nèi)藥物分析.鹽酸克侖特羅鹽酸克侖特羅平喘藥平喘藥非獸藥非獸藥非飼料添加劑非飼料添加劑使用劑量是人用藥劑量的使用劑量是人用藥劑量的10倍以上，才能達到倍以上，才能達到提高瘦肉率的效果。提高瘦肉率的效果。中毒：肌肉顫動、心悸、心律失常、心動過速中毒：肌肉顫動、心悸、心律失常、心動過速.檢測方法檢測方法GC-MSGC-MSHPLCHPLC-MS/MS色譜高效快速色譜高效快速分離分