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文檔簡(jiǎn)介

1、人體血型鑒定與交叉配血 實(shí)驗(yàn)原理 血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原(凝集原)的類型。在血型系統(tǒng)中最重要的是ABO血型系統(tǒng),其次是Rh血型系統(tǒng)。在ABO血型系統(tǒng)中,根據(jù)紅細(xì)胞上是否含有A、B凝集原而分為A、B、AB和O型。血清中含有凝集素,且A凝集原只能與抗A凝集素結(jié)合,B凝集原只能與抗B凝集素結(jié)合,血型鑒定即是將受試者的紅細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清(抗B血清)及標(biāo)準(zhǔn)B型血清(抗A血清)中,觀察有無凝集現(xiàn)象,從而測(cè)知受試者紅細(xì)胞上凝集原的類型。Rh陽(yáng)性和陰性通常以紅細(xì)胞上是否含有D抗原來判斷,含D抗原則為Rh陽(yáng)性,大部分人為Rh陽(yáng)性,極少數(shù)人為Rh陰性。交叉配血實(shí)驗(yàn)是將供血者的紅細(xì)胞和血清分別和受

2、血者的血清(主側(cè))和紅細(xì)胞(次測(cè))混合,觀察有無凝集現(xiàn)象。交叉配血是輸血前的必需步驟,應(yīng)堅(jiān)持同型輸血、交叉配血的原則。其目的,一是鑒定所測(cè)血型是否正確;二是觀察是否還有其他不能輸血的因素存在,以確保安全輸血。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握ABO、Rh血型鑒定和交叉配血的原理和方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象 人(學(xué)生自愿者)。實(shí)驗(yàn)器材和藥品 顯微鏡、離心機(jī)、采血針、雙凹玻片片、滴管、1ml吸管、小試管、試管架、牙簽、消毒注射器及針頭;標(biāo)準(zhǔn)A、B型血清、抗D血清、生理鹽水、75%酒精、碘酒、棉球、消毒棉簽。實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目一、ABO血型鑒定:(一)玻片法1.用75%酒精棉球消毒左手無名指端,用消毒采血針刺破皮膚、用吸管吸一滴血于

3、盛有1ml生理鹽水的小試管中,混勻之城紅細(xì)胞懸液;2.取一雙凹載玻片,在左上角寫A字,右上角寫B(tài)字,將一滴標(biāo)準(zhǔn)A型(抗B)血清滴在右側(cè)凹內(nèi),一滴標(biāo)準(zhǔn)B型(抗A)血清滴在左側(cè)凹內(nèi),滴管切勿混用;3.用滴管吸取紅細(xì)胞懸液,分別滴一滴于載玻片兩側(cè)的血清上,注意不要使滴管尖端與血清接觸,用牙簽兩端分別混勻;4.1030分鐘后用肉眼觀察有無凝集現(xiàn)象。根據(jù)下表鑒定結(jié)果凝 集 現(xiàn) 象標(biāo)準(zhǔn)A型(抗B)血清 標(biāo)準(zhǔn)B型(抗A)血清 被檢者血型 - + A型 + - B型 + + AB型 - - O型玻片法鑒定ABO血型(+ 有凝聚,- 未凝聚)(二)試管法1.取試管2只,分別標(biāo)明A,B字樣,分別加入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)血清2

4、滴,各管加入受試者的紅細(xì)胞懸液12滴搖勻;2.將上述二試管用1000轉(zhuǎn)/分離心1min;3.取出小試管,輕彈底部,如沉淀物呈團(tuán)塊狀浮起為凝集,呈散在煙霧狀上浮進(jìn)而恢復(fù)原混懸狀為無凝集。二 Rh血型鑒定(鹽水介質(zhì)法)(一)試管法 1.取小試管3支,1支注明抗D,另1支注明陽(yáng)性對(duì)照,最后1支注明陰性對(duì)照;2.將室溫鹽水反應(yīng)活性的抗D血清各1滴加入上述試管內(nèi);3.抗D試管中加入1滴5待檢者紅細(xì)胞(鹽水、血清)懸液,陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照試管中分別加入相應(yīng)的陽(yáng)性紅細(xì)胞及陰性紅細(xì)胞懸液1滴;4.輕輕混勻,于3000r/min離心15s;5.取出輕輕擺動(dòng)觀察有無凝集。 (二)玻片法 1.取

5、三凹玻片1塊,在左側(cè)注明抗D,中間段注明陰性對(duì)照,右側(cè)注明陽(yáng)性對(duì)照;2.將室溫鹽水反應(yīng)的抗D血清各1滴加入上述小格內(nèi);3.抗D小凹內(nèi)加入待檢者5紅細(xì)胞懸液1滴,陽(yáng)性對(duì)照內(nèi)加入陽(yáng)性對(duì)照紅細(xì)胞懸液1滴,陰性對(duì)照加入陰性對(duì)照紅細(xì)胞懸液1滴;4.用干凈玻棒攪拌紅細(xì)胞懸液和試劑血清充分混合;5.連續(xù)輕輕傾斜轉(zhuǎn)動(dòng)平板,一般在2min內(nèi)觀察有無凝集,或按試劑說明書規(guī)定的時(shí)間觀察結(jié)果。三 交叉配血:1. 以碘酒、酒精消毒皮膚后,用消毒的干燥注射器抽取供血者靜脈血2ml,取1滴加入盛有生理鹽水1ml的小試管中,制成紅細(xì)胞懸液;其余血液裝入另一小試管中,待其凝固后離心分離血清;在試管上分別注明“供紅”和“供清”。

6、2.同法制成受血者的紅細(xì)胞懸液及血清,分別注明“受紅”和“受清”。3.取一雙凹載玻片,在左上角寫“供紅受清”,右上角寫“供清受紅”。分別用滴管吸取“供紅”、“受清”各1滴于左側(cè)凹內(nèi),再分別用滴管吸取“供清”、“受紅”各1滴于右側(cè)凹內(nèi),用牙簽兩端分別混勻。4.1030分鐘后觀察結(jié)果,如兩側(cè)均無凝集現(xiàn)象,表示血型配合,可以輸血。 注意事項(xiàng)1.操作時(shí)各滴管不能混用。2.肉眼看不清凝集現(xiàn)象時(shí),應(yīng)在顯微鏡下觀察。3.紅細(xì)胞懸液不能太濃和太淡,否則可能出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。4.必須注意區(qū)分紅細(xì)胞疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象,前者經(jīng)混勻或搖晃,串狀的紅細(xì)胞即可分開,而后者決不會(huì)因此而有所變化。5.靜脈采血必須嚴(yán)格按臨床化驗(yàn)

7、要求進(jìn)行操作,如本實(shí)驗(yàn)室不具備條件,可免做交叉配血實(shí)驗(yàn)。【思考題】1.如果有標(biāo)準(zhǔn)A型紅細(xì)胞和標(biāo)準(zhǔn)B型紅細(xì)胞,但無標(biāo)準(zhǔn)血清時(shí),能否進(jìn)行血型鑒定?2.為什么血型相同的人之間輸血仍要做交叉配血實(shí)驗(yàn)?心音聽診和血壓測(cè)量實(shí)驗(yàn)原理心音是由心臟瓣膜關(guān)閉和心肌收縮引起的振動(dòng)所產(chǎn)生的聲音。用聽診器在胸壁前聽診,在每一個(gè)心動(dòng)周期內(nèi)可以聽到兩個(gè)心音。第一心音:音調(diào)較低(音頻為2540次秒)而歷時(shí)較長(zhǎng)(0.12秒),聲音較響,是由房室瓣關(guān)閉和心室肌收縮振動(dòng)所產(chǎn)生的。由于房室瓣的關(guān)閉與心室收縮開始幾乎同時(shí)發(fā)生,因此第一心音是心室收縮的標(biāo)志,其響度和性質(zhì)變化,常可反映心室肌收縮強(qiáng)弱和房室瓣的機(jī)能狀態(tài)。第二心音:音調(diào)較高(

8、音頻為50次秒)而歷時(shí)較短(0.08秒),聲音較清脆,主要是由于半月瓣關(guān)閉產(chǎn)生振動(dòng)造成的。由于半月瓣關(guān)閉與心室舒張幾乎同時(shí)發(fā)生,因此第二心音是心室舒張的標(biāo)志。其響度??煞从硠?dòng)脈壓的高低。臨床常用的心音聽診區(qū): 二尖瓣聽診區(qū):心尖部,即位于左鎖骨中線內(nèi)側(cè)第五肋間處。三尖瓣聽診區(qū):胸骨右緣第四肋間或胸骨劍突下。主動(dòng)脈聽診區(qū):胸骨右緣第二肋間。胸骨左緣第三、四肋間為主動(dòng)脈瓣第二聽診區(qū)(又稱第五點(diǎn)),主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全時(shí)產(chǎn)生的雜音在此處最響亮。肺動(dòng)脈瓣聽診區(qū):胸骨左緣第二肋間。測(cè)定人體動(dòng)脈血壓最常用的方法是間接測(cè)壓法,它是使用血壓計(jì)的袖帶在動(dòng)脈外加壓,根據(jù)血管音的變化來測(cè)量動(dòng)脈血壓的。通常血液在血管內(nèi)流

9、動(dòng)時(shí)并沒有聲音,但如給血管施加壓力使血管變窄形成血液渦流時(shí)則可發(fā)生聲音(血管音)。用袖帶在上臂給肱動(dòng)脈加壓,當(dāng)袖帶內(nèi)壓力超過動(dòng)脈的收縮壓時(shí),動(dòng)脈血流完全被阻斷,此時(shí)用聽診器在肱動(dòng)脈處聽不到任何聲音。如袖帶內(nèi)壓力低于動(dòng)脈內(nèi)的收縮壓而高于舒張壓時(shí),當(dāng)心臟收縮,動(dòng)脈內(nèi)有血流通過,舒張時(shí)則無,血液斷續(xù)地通過受壓血管狹窄處,形成渦流而發(fā)出聲音。如袖帶內(nèi)壓力等于或小于舒張壓時(shí),則血管內(nèi)的血流連續(xù)通過,所發(fā)生的音調(diào)突變或聲音消失。故恰好可以完全阻斷血流所必須的最小袖帶內(nèi)壓力(即發(fā)生第一次聲音時(shí)),相當(dāng)于收縮壓。在心舒張時(shí)也有少許血流通過的最大袖帶內(nèi)壓力(即音調(diào)突變時(shí)),相當(dāng)于舒張壓。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)心音聽診的方

10、法,了解正常心音特點(diǎn)及其產(chǎn)生原理,識(shí)別第一心音與第二心音。了解并掌握人體動(dòng)脈血壓的測(cè)定原理和方法,觀察運(yùn)動(dòng)對(duì)動(dòng)脈血壓的影響。 實(shí)驗(yàn)對(duì)象人實(shí)驗(yàn)器材和藥品聽診器、血壓計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目一、心音聽診:受試者安靜端坐,露出胸部。主試者戴好聽診器,聽診器的耳端應(yīng)與外耳道開口方向一致(向前)。以右手的食指、拇指和中指輕持聽診器胸端緊貼于受試針胸部皮膚上,依次(二尖瓣聽診區(qū)主動(dòng)脈瓣聽診區(qū)肺動(dòng)脈瓣聽診區(qū)三尖瓣聽診區(qū))仔細(xì)聽取心音,注意區(qū)分兩心音。如難以區(qū)分兩心音,可同時(shí)用手指觸診心尖搏動(dòng)或頸動(dòng)脈脈搏。與此同時(shí)出現(xiàn)的心音即為第一心音。然后再?gòu)男囊粢粽{(diào)高低、歷時(shí)長(zhǎng)短鑒別兩心音,直至準(zhǔn)確識(shí)別為止。比較不同部位上兩

11、心音的聲音強(qiáng)弱。二、血壓測(cè)量:受試者靜坐分鐘,脫去右臂衣袖。松開打氣球上的螺絲,將袖帶內(nèi)的空氣完全放出,再將螺絲扭緊。將袖帶裹于受試者右上臂,其下緣應(yīng)在肘關(guān)節(jié)上約厘米,松緊應(yīng)適宜。受試者手掌向上平放于臺(tái)上,袖帶應(yīng)與心臟同一水平。在肘窩找到受試者的肱動(dòng)脈搏動(dòng)處,左手持聽診器的胸端放在上面(注意:不可用力下壓,但也不能接觸過松而聽不到聲音)。右手持打氣球,向袖帶打氣加壓,同時(shí)注意傾聽聲音變化,在聲音消失后再加壓30毫米汞柱。然后扭開打氣球之螺絲,緩慢放氣(切勿過快),此時(shí)可聽到血管音的一系列變化,聲音從無到有,由低而高,而后突然變低,最后完全消失。再次扭緊打氣球螺絲,繼續(xù)打氣加壓,反復(fù)聽次。重復(fù)上

12、一操作,同時(shí)注意血壓計(jì)之水銀柱和聲音變化。在緩慢放氣減壓時(shí),第一次聽到血管音時(shí)的水銀柱高度即代表收縮壓,在血管音突然由強(qiáng)變?nèi)鯐r(shí)的水銀柱高度即代表舒張壓。記下測(cè)定數(shù)值后,將袖帶內(nèi)的空氣放盡,使壓力降至零,再重測(cè)一次。打開袖帶與檢壓計(jì)的皮管接頭(注意不可將袖帶取下),令受試者在室外跑跳分鐘后,立即將接頭接好,測(cè)定血壓,觀察運(yùn)動(dòng)后的血壓變化。    注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)必須保持安靜,以利聽診。聽診器耳端應(yīng)與外耳道方向一致,橡皮管不得交叉、扭結(jié)。橡皮管切勿與它物摩擦,以免發(fā)生摩擦音,影響聽診。如呼吸音影響聽診,可令受試針暫停呼吸片刻。袖帶裹繞要松緊適宜,并與心臟同一

13、水平,切上臂不能被衣袖所壓迫。重復(fù)測(cè)壓時(shí),須將袖帶內(nèi)空氣放盡,使壓力降至零位,然后再加壓測(cè)量。如發(fā)現(xiàn)血壓超出正常范圍時(shí),應(yīng)讓受試者休息10分鐘后復(fù)測(cè)。在受試者休息期間,可將袖帶取下。血壓計(jì)使用完畢,應(yīng)將袖帶內(nèi)氣體放盡,收好。【思考題】描述所聽到的心音及不同聽診區(qū)兩心音各自的不同。根據(jù)你的操作,你認(rèn)為哪些因素可影響血壓的測(cè)定?體表心電圖實(shí)驗(yàn)原理心電圖(electrocardiogram) 心臟在每個(gè)心動(dòng)周期中,竇房結(jié)、心房、心室相繼興奮,伴隨著生物電的變化,并通過心臟周圍的導(dǎo)電組織和體液傳到體表。這種電變化經(jīng)心電描記器從體表引出多種形式的電位變化的圖形,稱心電圖(ECG)。心電圖可反映整個(gè)心臟興

14、奮的產(chǎn)生、傳導(dǎo)及恢復(fù)過程中的生物電變化。心電圖應(yīng)用最廣泛的是普通心電圖及24小時(shí)動(dòng)態(tài)心電圖。正常的心電圖包括P波、QRS波和T波,P波表示心房去極化,QRS波表示心室去極化,T波表示心室復(fù)極化。實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庑碾妶D產(chǎn)生原理、測(cè)量方法、各波和間期的形態(tài)及其意義實(shí)驗(yàn)對(duì)象人實(shí)驗(yàn)器材和藥品心電圖儀,導(dǎo)電液,酒精棉球?qū)嶒?yàn)步驟和觀察項(xiàng)目  1.接好地線后打開電源,以防交流電干擾并保障病人安全。    2.受試者摘下眼鏡、手表等金屬物品和手機(jī)等電子產(chǎn)品后平臥。 3.兩側(cè)腕關(guān)節(jié)屈側(cè)上方、內(nèi)踝上方3-5cm處先用酒精棉球脫脂,涂上導(dǎo)電液后放上電極。4.接好肢體和胸

15、導(dǎo)聯(lián)線 肢導(dǎo) 右手腕-紅色 左手腕-黃色 左腳腕-綠色 右腳腕-黑色胸導(dǎo) V1:探查電極放在胸骨右緣第4肋間。 V2:探查電極放在胸骨左緣第4肋間。V3:探查電極放在V2 與V4連線的中點(diǎn)。V4:探查電極放在鎖骨中線與第5肋間的交點(diǎn)上。 V5:探查電極放在左腋前線與第5肋間的交點(diǎn)上。 V6:探查電極放在左腋中線與第5肋間的交點(diǎn)上。 5.調(diào)節(jié)心電圖儀的基線位置、增益幅度、記錄速度。 6.再檢查基線平穩(wěn)、無肌電和市電干擾后依次記錄肢體導(dǎo)聯(lián)、aVR、aVL、aVF和胸前導(dǎo)聯(lián)V1、V2、V3、V4、V5 、V6 12個(gè)導(dǎo)聯(lián)的心電圖。    6.記錄完畢

16、后,關(guān)上電源開關(guān),在記錄紙上注明姓名,測(cè)定時(shí)間等。注意事項(xiàng)1在進(jìn)行描記心電圖前,讓被檢查者靜臥數(shù)分鐘。使全身肌肉松弛,在冬天應(yīng)在比較溫暖的環(huán)境內(nèi)進(jìn)行,這樣可以減少因肌肉震顫而引起的干擾。 2對(duì)初次檢查心電圖者,在操作前要作些解釋工作,說明這種檢查是毫不痛苦的,也沒有什么危險(xiǎn)性,以減少和消除心理上的緊張。3.被檢查者一般采取臥位,宜用木床。如在鐵床上做,應(yīng)注意絕緣,使身體不與其他任何金屬導(dǎo)電體接觸,可在床上墊上橡皮或塑料布,亦不能與墻壁和地面接觸,以免受到干擾。                         

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