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1、小組成員:石子濤小組成員:石子濤 習(xí)文習(xí)文 盛世豪盛世豪 蔣勇蔣勇知識窗知識窗u酶法分析酶法分析是指用酶作為工具定量測定某種物質(zhì)含量的分析方法。定量分析的目標(biāo)可以是酶的底物,輔酶,也可以是酶的激活劑或抑制劑。 其分類如下:單酶反應(yīng)定量法:單酶反應(yīng)定量法:指用一種酶為工具酶指用一種酶為工具酶定量定量測定某種物質(zhì)的方法。測定某種物質(zhì)的方法。偶聯(lián)酶反應(yīng)定量法:偶聯(lián)酶反應(yīng)定量法:當(dāng)單酶反應(yīng)底物或產(chǎn)物當(dāng)單酶反應(yīng)底物或產(chǎn)物反應(yīng)底物或產(chǎn)物噢物理化學(xué)手段無法區(qū)分時反應(yīng)底物或產(chǎn)物噢物理化學(xué)手段無法區(qū)分時,還可以借助另一種酶作為,還可以借助另一種酶作為指示酶指示酶,通過偶,通過偶聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行定量分析。聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行定量
2、分析。由于酶法檢測具有快速、漸變、準(zhǔn)確、無不良反應(yīng)、靈敏等優(yōu)點(diǎn),現(xiàn)已逐步取代其他方法,在臨床診斷中應(yīng)用廣泛。(詳見實(shí)驗(yàn)教程P103-104) 酶法測定血清葡萄糖是用以過氧化物酶作指示酶的偶聯(lián)酶反應(yīng)偶聯(lián)酶反應(yīng)定量法。 葡萄糖氧化酶(GOD)利用氧將葡萄糖氧化成葡萄糖酸,同時釋放出過氧化氫。過氧化物酶(POD)催化過氧化氫氧化色素原,并使色素原氧化成紅色醌類化合物(色素),即Trinder反應(yīng)。其生成量與葡萄糖含量成正比。補(bǔ)充: 葡萄糖氧化酶(GOD): 是從特異青霉(Penicillium notatum)等霉菌和蜂蜜中發(fā)現(xiàn)的酶。近白色粉末,溶于水,幾不溶于乙醇、氯仿和乙醚。最適pH 5.2最適
3、溫度 55C 過氧化物酶(POD): 是由微生物或植物所產(chǎn)生的一類氧化還原酶,它們能催化很多反應(yīng)。 過氧化物酶是以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶。主要存在于細(xì)胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。 混勻,置37水域中,保溫25min,在波長510nm比色處,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管的吸光度GODPOD血糖檢測如果不及時送檢和分離血清,全血中的血細(xì)胞會酵解血清中的G加以利用,使血糖的檢測結(jié)果偏低葡萄糖氧化酶法檢測血糖時,由于血清中還原性物質(zhì) (Vitc,谷胱甘肽、尿酸、膽紅素等)競爭與過氧化氫(H2O2)反應(yīng),使反應(yīng)生成的紅色醌類化合物減少,檢測結(jié)果偏低。受飲食
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