微生物實驗培養(yǎng)基配方

1、微生物學(xué)實驗常用培養(yǎng)基的配制1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（培養(yǎng)細(xì)菌用）牛肉膏 3g蛋白胨     5g氯化鈉          10g瓊脂1520gpH      7.07.2水              1000mL  121滅菌20min。2、高氏（Gause）1號培養(yǎng)基（培養(yǎng)放線菌用） 可溶性淀粉     &

2、#160;20g 硝酸鉀           1g氯化鈉          0.5g磷酸氫二鉀    0.5g硫酸鎂           0.5g硫酸亞鐵       0.01g瓊脂               20g水

3、              1000mLpH           7.27.4      配制時，先用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀，倒入煮沸的水中，在火上加熱，邊攪拌邊加入其他成分，溶化后，補(bǔ)足水分至1000mL。121滅菌20min。3、查氏（Czapek）培養(yǎng)基（培養(yǎng)霉菌用） 硝酸鈉2g磷酸氫二鉀1g氯化鉀0.5g硫酸鎂0.5g硫酸亞鐵0.01g蔗糖30g瓊脂1520g水1000

4、mLpH自然      121滅菌20min。 4、馬丁氏（Martin）瓊脂培養(yǎng)基（分離真菌用） 葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氫鉀1g七水合硫酸鎂0.5g1/3000孟加拉紅（rose bengal，玫瑰紅水溶液）100mL 瓊脂1520gpH自然蒸餾水800mL112滅菌30min。 臨用前加入0.03%鏈霉素稀釋液100mL，使每毫升培養(yǎng)基中含鏈霉素30g。5、馬鈴薯培養(yǎng)基（簡稱PDA）（培養(yǎng)真菌用）馬鈴薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g瓊脂1520gpH自然      培養(yǎng)基的配制：馬鈴薯去皮，切成塊煮沸30

5、min，然后用紗布過濾，再加糖及瓊脂，熔化后補(bǔ)足水至1000mL。121滅菌30min。6、麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基     培養(yǎng)基的配制：      (1)、取大麥或小麥若干，用水洗凈，浸水612小時，至15陰暗處發(fā)芽，上面蓋紗布一塊，每日早、中、晚淋水一次，麥根伸長至麥粒的兩倍時，即停止發(fā)芽，攤開曬干或烘干，貯存?zhèn)溆谩?     (2)、將干麥芽磨碎，一份麥芽加四份水，在65水浴中糖化34小時，糖化程度可用碘滴定之。加水約20mL，調(diào)勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再

6、過濾。      (3)、將糖化液用46層紗布過濾，濾液如混濁不清，可用雞蛋白澄清，方法是將一個雞蛋白加水約20mL，調(diào)勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。      (4)、將濾液稀釋到56波美度，pH約6.4，加入2%瓊脂即成。121滅菌30min。 7、無氮培養(yǎng)基（自生固氮菌、鉀細(xì)菌）甘露醇（或葡萄糖）10g磷酸二氫鉀0.2g七水合硫酸鎂0.2g氯化鈉0.2g二水合硫酸鈣0.2g碳酸鈣5g蒸餾水1000mLpH7.07.2      113滅菌30min

7、。8、半固體肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基100mL瓊脂0.350.4gpH7.6      121滅菌20min。9、合成培養(yǎng)基 偏磷酸銨1g氯化鉀0.2g七水合硫酸鎂0.2g豆芽汁10mL瓊脂20g蒸餾水1000mLpH7.0       加12 mL0.04%的溴鉀酚紫（pH5.26.8，顏色由黃變紫，作指示劑）。121滅菌20min。10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培養(yǎng)基黃豆芽100g蔗糖（或葡萄糖）50g水1000mLpH自然       培養(yǎng)基的配制：稱新鮮豆

8、芽100g，放入燒杯中，加入水1000mL，煮沸約30min，用紗布過濾。用水補(bǔ)足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。121滅菌20min 。11、油脂培養(yǎng)基 蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g香油或花生油10g1.6%中性紅水溶液1mL瓊脂1520g蒸餾水1000mLpH7.2      121滅菌20min        注：(1)、不能使用變質(zhì)油。               (2)、油和瓊脂及水先加熱

9、。               (3)、調(diào)好pH值后，再加入中性紅。               (4)、分裝時，需不斷攪拌，使油均勻分布于培養(yǎng)基中。 12、淀粉培養(yǎng)基 蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉5g可溶性淀粉2g蒸餾水1000mL瓊脂1520g      121滅菌20min 13、明膠培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨液100mL明膠1218gpH7.6 

10、     在水浴鍋中將上述成分溶化，不斷攪拌。溶化后調(diào)pH7.27.4。       121滅菌30min。14、蛋白胨水培養(yǎng)基蛋白胨10g氯化鈉5g蒸餾水1000mLpH7.6      121滅菌20min。 15、糖發(fā)酵培養(yǎng)基 蛋白胨水培養(yǎng)基1000mL1.6%溴鉀酚紫乙醇溶液12mLpH7.6      另配制20%糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10mL。       培養(yǎng)基的配制：  

11、     (1)、將上述含指示劑的蛋白胨水培養(yǎng)基（pH7.6）分裝于試管中，在每管內(nèi)放一倒置的小玻璃管（Durham tube），使之充滿培養(yǎng)液。        (2)、將已分裝好的蛋白胨水和20%的各種糖溶液分別滅菌，蛋白胨水121滅菌20min；糖溶液112滅菌30min。        (3)、滅菌后，每管以無菌操作分別加入20%無菌糖溶液0.5 mL（按每10mL培養(yǎng)基中加入20%的糖液0.5mL，則成1%的濃度）。配制用的試管必須洗干凈，避免結(jié)果混亂。16、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)

12、基 蛋白胨5g葡糖糖5g磷酸氫二鉀2g蒸餾水1000mL      將上述各成分溶于1000mL水中，調(diào)pH7.07.2，過濾。分裝試管，每管10mL，112滅菌30min。17、麥?zhǔn)希∕eclary）瓊脂（酵母菌） 葡萄糖1g氯化鉀1.8g酵母浸膏2.5g醋酸鈉8.2g瓊脂1520g蒸餾水1000mL      113滅菌20min。 18、檸檬酸鹽培養(yǎng)基 磷酸二氫銨1g磷酸氫二鉀1g氯化鈉5g硫酸鎂0.2g檸檬酸鈉2g瓊脂1520g蒸餾水1000 mL1%溴麝香草酚藍(lán)乙醇液10 mL   &

13、#160;  培養(yǎng)基的配制：將上述各成分加熱溶解后，調(diào)pH6.8，然后加入指示劑，搖勻，用脫脂棉過濾。制成后為黃綠色，分裝試管，121滅菌20min后制成斜面，注意配制時控制好pH，不要過堿，以黃綠色為準(zhǔn)。19、醋酸鉛培養(yǎng)基 pH7.4的牛肉膏蛋白胨瓊脂100 mL硫代硫酸鈉0.25g10%醋酸鉛水溶液1 mL      培養(yǎng)基的配制：將牛肉膏蛋白胨瓊脂100 mL加熱溶解，待冷卻至60時加入硫代硫酸鈉0.25g，調(diào)至pH7.2，分裝于三角瓶中，115滅菌15min。取出后待冷卻至5560，加入10%醋酸鉛水溶液（無菌的）1mL，混勻后倒入滅菌

14、試管或平板中。20、血瓊脂培養(yǎng)基 pH7.6的牛肉膏蛋白胨瓊脂100 mL脫纖維羊血（或兔血）10 mL      培養(yǎng)基的配制：將牛肉膏蛋白胨瓊脂加熱熔化，待冷卻至50時，加入無菌脫纖維羊血（或兔血）搖勻后倒平板或制成斜面。37過夜檢查無菌生長即可使用。21、玉米粉蔗糖培養(yǎng)基 玉米粉60g磷酸二氫鉀3g維生素B1100mg蔗糖10g七水合硫酸鎂1.5g水1000 mL      121滅菌30min，維生素B1單獨(dú)滅菌15min后另加。22、酵母膏麥芽汁瓊脂 麥芽粉3g酵母浸膏0.1g水1000 mL 

15、     121滅菌30min。24、棉籽殼培養(yǎng)基       培養(yǎng)基的配制：棉籽殼50%，石灰粉1%，過磷酸鈣1%，水65%70%，按比例稱好料，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝笱b瓶，較薄地平攤盤上。25、復(fù)紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基（遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基）蛋白胨10g乳糖10g磷酸氫二鉀3.5g瓊脂2030g蒸餾水1000 mL5%堿性復(fù)紅乙醇溶液20 mL      培養(yǎng)基的配制：先將瓊脂加入900 mL蒸餾水中，加熱溶解，再加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，使溶解，補(bǔ)足蒸餾水至1000 mL，調(diào)pH至7.27.4。加入乳糖

16、，混勻溶解后，115滅菌20min。稱取亞硫酸鈉置一無菌空試管中，加入無菌水少許使溶解，再在水浴中煮沸10min后。立刻滴加于20 mL 5%堿性復(fù)紅乙醇溶液中，直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性復(fù)紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持熔化狀態(tài)的培養(yǎng)基中，充分混勻，倒平板，放冰箱中備用，貯存時間不宜超過2周。26、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基） 蛋白胨水培養(yǎng)基100 mL20%乳糖溶液2 mL2%伊紅水溶液2 mL0.5%美藍(lán)水溶液1 mL      培養(yǎng)基的配制：將已滅菌的蛋白胨水培養(yǎng)基（pH7.6）加熱熔化，冷卻至60左右時，再把已滅菌的

17、乳糖溶液，伊紅水溶液及美藍(lán)水溶液按上述量以無菌操作加入。搖勻后，立即倒平板。乳糖在高溫滅菌易被破壞必須嚴(yán)格控制滅菌溫度，115滅菌20min。27、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（“水的細(xì)菌學(xué)檢查”用） 蛋白胨10g牛肉膏3g乳糖5g氯化鈉5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL蒸餾水1000 mL      培養(yǎng)基的配制：將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000 mL蒸餾水中，調(diào)pH至7.27.4。加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL，充分混勻，分裝于有小倒管的試管中。115滅菌20min。28、石蕊牛奶培養(yǎng)基 牛奶粉100g石蕊0.075g水1000 mLpH

18、6.8      121滅菌15min。29、LB（Luria-Bertani）培養(yǎng)基 蛋白胨10g酵母膏5g氯化鈉10g蒸餾水1000 mLpH7.0      121滅菌20min。30、基本培養(yǎng)基 磷酸氫二鉀10.5g磷酸二氫鉀4.5硫酸銨1g二水合檸檬酸鈉0.5g蒸餾水1000 mL       121滅菌20min。        需要時滅菌后加入：糖（20%）10 mL維生素B1（硫胺素）（1%）0.5 mL七水合硫酸鎂（2

19、0%）1 mL      鏈霉素（50mg/ mL）4 mL，終濃度200g/ mL       氨基酸（10mg/ mL）4 mL，終濃度40g/ mL       pH 自然（7.0）31、庖肉培養(yǎng)基       培養(yǎng)基的配制：       (1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方塊，置1000 mL蒸餾水中，以弱火煮1小時，用紗布過濾，擠干肉汁，將肉汁保留備用。將肉渣用絞肉機(jī)絞碎，或用刀切成細(xì)粒。       (2)、將保留的肉汁加蒸餾水，使總體積為2000 mL，加入蛋白胨20g，葡萄糖2g，氯化鈉5g，及絞碎的肉渣，置燒瓶搖勻