植物氮素測定指標以及方法

1、、測定與計算指標1、測定單株分蘗數(shù)、單株有效穗數(shù)、株高、穗長、小穗數(shù)、穗粒數(shù)、小穗粒數(shù)、千粒重、單穗穗粒重；再按莖葉、籽粒等器官分開，分別測定莖葉與籽粒的干物重與含N量；2、通過測定的指標計算：穗粒重（穗粒數(shù) 小粒重/1000）、植株吸氮量（不同部 位干物重與其含氮量（）之積的總和）、植株含氮量（% ）（植株吸氮量占整株 干物質(zhì)量的百分比）、氮素干物質(zhì)生產(chǎn)效率（單位氮素生產(chǎn)的干物質(zhì)量）、氮素籽 粒生產(chǎn)效率（成熟期植株單位氮素生產(chǎn)的籽粒產(chǎn)量）、氮素收獲指數(shù)（籽粒氮積 累總量/植株氮素積累總量）、植株N利用效率（籽粒產(chǎn)量/地上部N素積累量）；二、總的指標分類匯總（一株小麥實際上指的是由一粒種子長出

2、的一叢）（一）與產(chǎn)量相關(guān)的形狀指標（田間進行）1、 單株分蘗數(shù)：單株總莖數(shù)；地面以下或接近地面處所發(fā)生的分枝（田間 進行，每行選擇3個處理也就是3叢，分別測出再求平均）。2、單株有效穗數(shù)：單株有效成穗的個數(shù)；其中有效穗表示每穗實粒數(shù)多于5粒者為有效穗（白穗算有效穗）。（田間進行，每行選擇3個處理也就是3叢，同 上）。3、株高：（小麥根部至頂部之間的距離，不包括芒長，其中芒長是指穗上面 尖尖的芒刺），用卷尺測量。（田間進行，測選定的4株外加1株求平均）。（在材料收回來之后， 先選擇我們所需的4株另外再加1株，共5株，將穗長與小穗數(shù) 測定了，再用自來水將材料（主要是莖葉部分）沖洗三遍，再用去離子水

3、沖洗三遍；然后用 吸水紙吸取殘留水分， 然后將材料然后放 2天，等材料稍微干燥后， 將之前的5株進行人工 脫粒，測定每穗的穗粒數(shù)，根據(jù)它和小穗數(shù)計算出小穗粒數(shù)，在此步驟之后便可將我們所需的4株植株分為莖葉與籽粒部分，進行殺青烘干測定干物重與含N量了。其余的材料再放置幾天，脫粒之后測定千粒重）4、穗長：每行取5穗進行穗長的測定，平均值為該株系的穗長。5、小穗數(shù)：每穗上面長得對稱的就是小穗數(shù)；6穗粒數(shù)：平均每穗粒數(shù)，一般的小麥在 30粒左右。7、小穗粒數(shù)：每個小穗數(shù)里面所含有的籽粒的數(shù)量，一般在1-5之間；（實際上可以二穗粒數(shù)/小穗數(shù)）8、 千粒重：收獲材料晾曬干燥后（含水量約為 13%以下），隨

4、機數(shù)取1000 粒稱重的平均值計算千粒重；（一般在23-58 g）。9、單穗穗粒重：平均每穗穗粒重，（穗粒數(shù) 小粒重/1000）。（二）與氮素利用率相關(guān)的指標6干物重：收獲前從每行中選取4棵植株，貼地面部分將根部剪去，整株 放入大紗網(wǎng)袋。先用自來水將材料（主要是莖葉部分）沖洗三遍，再用去離子水 沖洗三遍；然后用吸水紙吸取殘留水分，晾曬干燥。并將植株分為莖葉與籽粒部 分，為確保脫粒過程樣品損失的減少，人工脫粒，回收穎殼、芒、莖葉和籽粒， 在105C下殺青30min后，至于75C烘箱烘至恒重，并測定莖葉、籽粒干重；7、含N量：樣品粉碎后過60目篩測定總N含量，采用半微量是凱氏定氮 法，也就是H2S

5、O4-H2O2消煮-半微量凱氏定氮法。具體操作步驟如下： 植株全氮的測定1主題內(nèi)容與適用范圍本標準規(guī)定了植株全氮測定的硫酸-過氧化氫消煮、堿化后蒸餾定氮的方法。本標準適用于禾本科植株全氮含量的測定。2引用標準GB/T 603化學試劑 試驗方法中所用制劑及制品的制備GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法NY/T 297-1995有機肥料全氮的測定3方法原理植株樣品用濃硫酸加雙氧水消煮，使有機氮轉(zhuǎn)化為銨鹽。銨鹽經(jīng)堿化后形成 氨，經(jīng)蒸餾將氨吸收到硼酸溶液中。 以甲基紅一溴甲酚綠為指示劑，用標準酸滴 定，測定植株中的全氮含量（不包括全部硝態(tài)氮）。4試劑所有試劑除注明者外，均為分析純。分析用水應(yīng)符

6、合GB/T 6682分析實驗室 用水規(guī)格和試驗方法三級水的規(guī)格。4.1硫酸（GB/T 625，也就是濃度為98%的濃硫酸）。4.2 30%過氧化氫（GB 6684）。4.3氫氧化鈉：40%,（ mN）溶液稱取40g氫氧化鈉（GB 629分析純）溶于100mL水中，溶解之后至于帶橡 膠塞或軟木塞的試劑瓶中。4.4硼酸：2%（ v/m）溶液稱取20g硼酸（GB 628）溶于1L約60C去離子水中，冷卻后再用 稀堿（0.1mol/L）調(diào)節(jié)溶液pH至4.5,顏色大概為紅紫色。使用前每升硼酸溶液中加 入甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑20mL,并用稀酸或稀堿調(diào)節(jié)至微紅色，此時該溶 液的PH值為4.5。4.5甲

7、基紅-溴甲酚綠混合指示劑稱取0.5g溴甲酚綠（HG 3-1220）和0.1g甲基紅（HG 3-958）于研缽中，加少量95%乙醇研磨至指示劑全溶為止，最后加 95%的乙醇至100mL。4.6 硫酸標準液c （1/2 H2SO4） =0.02mol/L （GB 601）。配制：準確量取分析純硫酸0.6ml，緩緩注入1000ml蒸餾水中，搖勻，冷卻。 標定：首先將硼砂配置成硼砂標準溶液。取一個潔凈且干燥的表面皿，在分析天平上準確稱取0.4000g純凈硼砂（準至0.0001g），放入潔凈且?guī)РＡО舻臒校?用少量蒸餾水沖洗表面皿，洗液一并轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入蒸餾水至約40ml，加熱溶解，冷卻至室溫。

8、將溶液定量轉(zhuǎn)移到潔凈的100ml容量瓶中，用少量蒸餾水 洗滌燒杯3次（每次約10ml水），洗液全部轉(zhuǎn)入容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度 線，搖勻。所得溶液即為硼砂標準溶液。取潔凈的20ml移液管，用少量的硼砂溶液潤洗 3次，準確移取硼砂標準溶 液20.00ml于錐形瓶中，加甲基紅指示劑2d，用滴管內(nèi)盛放未確定濃度的 H2SO4 來滴定。滴至硼砂溶液呈微紅色時即為終點，記下所用H2SO4溶液的體積，平行 滴定3次。計算出H2SO4溶液的準確濃度（保留四位有效數(shù)字）。H2SO4計算:標準溶液濃度按下式計算.C（硼砂）=m（硼砂）*1000/M（硼砂）*100C（H2SO4）=C（硼砂）*20/V（H

9、2SO4）5儀器通常實驗室儀器5.1 消煮管：50mL或 100mL。5.2消煮爐或可調(diào)電爐：1000W 5.3彎頸小漏斗：C 2cm。5.4凱氏定氮儀：全自動或半自動。5.5分析天平：感量為O.OOOIg。5.6 移液管：5，10，20mL。5.7表面皿、燒杯5.8 100ml容量瓶5.9 20ml錐形瓶6檢試樣的制備取風干的實驗室待測樣品充分混勻后，按四分法縮減至100g，粉碎，籽粒全部通過0.25mm （秸稈通過0.5mm）孔徑篩，裝入樣品瓶備用。7分析步驟7.1試樣溶液制備稱取試樣0.3,精確至0.0001g,置于250ml三角瓶（5.1）中（勿將樣品粘附 在瓶頸上）。先滴入少些水（2

10、ml）濕潤樣品，10min后加5mL H2SO4 （4.1）， 輕輕搖勻并最好放置過夜。在管口放一彎頸小漏斗（5.3），在消煮爐上先250C 消煮（溫度穩(wěn)定后計時，時間約30min）,待H2 SO4分解冒出大量白煙后再升高 溫度至400E，當溶液呈均勻的棕黑色時取下。（時間約3h）,稍冷后加10滴H2O2 （注1），搖勻，并不斷搖動凱氏瓶，以利于反應(yīng)充分進行。再加熱至微沸（注2），消煮約10-20min,取下稍冷后，重復(fù)加H2O2 5-10滴，再消煮。如此 重復(fù)2-3次，每次添加的H2O2的量應(yīng)逐次減少，消煮到溶液呈無色或清亮后（應(yīng) 該為水的顏色），再加熱約5-10min,以除盡剩余的H2O2

11、。將消煮管取下，冷卻。 并用少量水沖洗彎頸漏斗，洗液流入消煮管。將消煮液無損的洗入100mL容量瓶 中，用水定容，搖勻。過濾或放置澄清后供氮的測定，同時做空白試驗以校正實 際誤差。7.2空白試驗除不加試樣外，試劑用量和操作與測定試樣時相同。7.3測定7.31蒸餾前將配制好的氫氧化鈉（4.3）,硫酸標準液（4.6）,混合指示劑（4.5）, 對定氮儀進行充分預(yù)熱，進行空蒸餾清洗管道，直至讀數(shù)穩(wěn)定。7.32吸取上述待測液10.00mL(含NH4 N約1mg),注入凱氏定氮儀蒸餾管中,參數(shù)設(shè)置后，對待測液進行測定，其中加堿時間應(yīng)設(shè)為3S。8分析結(jié)果的表述全氮(N)含量以g/kg表示，按下式計算：全氮(N)=c(V-V 0) )0.014 :DXl000/m；c酸標準溶液的濃度，mol/L ;V滴定試樣所用的酸標準液體積 ，ml;V0滴定空白所用的酸標準液體積 ，ml;0.014N的摩爾質(zhì)量，kg/mol ;m稱樣量,g;D 分取倍數(shù)，定容體積/分取體積，100/10;所得結(jié)果應(yīng)保留小數(shù)點后三位9注意事項9.1加H2O2時，要直接滴入瓶底溶液中，如果滴在瓶頸壁上，H2O2很快分解，失去氧化能力；也不要滴在小漏斗上，以免遺留的H2O2影響氮的比色測定。9.2 H2O2不宜加入過早，每次用量不可過多，加入后的消煮溫度不要過高，只要保持消煮液微沸即可