藥物分析第七

1、藥物分析第七、八、九章輔導(dǎo)與練習(xí)農(nóng)一師電大 趙澤義2006.3第七章 藥物中的雜質(zhì)檢查第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)及其來(lái)源1雜質(zhì)的概念：藥物中的雜質(zhì)是指存在于藥物中無(wú)治療作用或者影響藥物的療效和穩(wěn)定性，甚至對(duì)人體健康有害的一種物質(zhì)。2藥物的純度是指藥物的純凈程度，它反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣。一般來(lái)說(shuō)，藥物的純凈程度是指藥物所含雜質(zhì)的多少。事實(shí)上，許多雜質(zhì)不可能完全除掉。只要將其降低到最低限度，不妨礙藥物的療效和人體的健康，不影響藥物的穩(wěn)定性以及調(diào)配處理，可允許藥物中有一定限量的雜質(zhì)存在。所以說(shuō)，純凈的藥物是相對(duì)的，不純是絕對(duì)的。3藥用規(guī)格與試劑規(guī)格的區(qū)別：藥物的純度又稱(chēng)之為藥用規(guī)格；試劑純度稱(chēng)之為試劑規(guī)格藥

2、用規(guī)格試劑規(guī)格符合標(biāo)準(zhǔn)必須符合國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)，不分等級(jí)。符合國(guó)家試劑標(biāo)準(zhǔn)。分等級(jí)（如優(yōu)級(jí)純、分析純、化學(xué)純等）。檢查項(xiàng)目所含雜質(zhì)及其限量以及檢查項(xiàng)目以不影響療效，對(duì)人體無(wú)毒副作用為原則。重點(diǎn)檢查砷鹽和重金屬等。所含雜質(zhì)及其檢查項(xiàng)目，以不影響分析結(jié)果為原則，對(duì)砷鹽和重金屬可以不檢查。藥理實(shí)驗(yàn)藥用規(guī)格必須經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)及臨床病例觀察。試劑規(guī)格未經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)。藥物的純度（藥用規(guī)格或藥用純度）主要是從保證人民用藥安全、有效考慮，而化工產(chǎn)品及試劑純度并不考慮雜質(zhì)的生理作用，僅從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化，在使用上所產(chǎn)生的影響以及它們使用的范圍和目的來(lái)加以規(guī)定。所以，二者不能相互代替使用。4藥物中的雜質(zhì)主要有兩個(gè)來(lái)源

3、：一是生產(chǎn)過(guò)程中引入，二是貯藏過(guò)程中產(chǎn)生。在合成藥物的生產(chǎn)過(guò)程中，未反應(yīng)完全的原料、中間體和副產(chǎn)物，在精制時(shí)未完全除去，就會(huì)成為產(chǎn)品中的雜質(zhì)。在藥物的生產(chǎn)過(guò)程中，還需使用一些試劑、溶劑等，如未能完全除去，也會(huì)帶入到最終的產(chǎn)品中去。如解熱鎮(zhèn)痛藥阿司匹林中游離水楊酸的檢查，生產(chǎn)過(guò)程是以水楊酸乙?；频?，如乙?；煌耆蛟谫A藏過(guò)程中水解，都有可能產(chǎn)生水楊酸，水楊酸不僅對(duì)胃有刺激性，而且分子中的酚羥基，在空氣中逐漸被氧化為有色的醌式化合物，使藥物變色。因此，中國(guó)藥典規(guī)定：阿司匹林和阿司匹林片劑等制劑都要檢查游離的水楊酸。再如，鹽酸普魯卡因原料藥不檢查對(duì)氨基苯甲酸，而鹽酸普魯卡因注射劑在高溫滅菌過(guò)程中，

4、可能水解為對(duì)氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇，因此注射劑中則要檢查對(duì)氨基苯甲酸。在藥品的貯藏過(guò)程中，尤其是貯藏保管不善，或貯藏時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，在外界條件如溫度、濕度、日光、空氣的影響下，或因微生物的作用，可能發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化，使藥物中產(chǎn)生有關(guān)的雜質(zhì)。5藥物中的雜質(zhì)按來(lái)源分類(lèi)，可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)，如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸堿、水分等。共12項(xiàng)，重點(diǎn)是前5項(xiàng)。特殊雜質(zhì)是指在藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中，根據(jù)該藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。如阿司匹林中的游離

5、水楊酸，鹽酸普魯卡因注射劑中對(duì)氨基苯甲酸，腎上腺素中的腎上腺酮等。藥物中的雜質(zhì)按其性質(zhì)還可以分為信號(hào)雜質(zhì)和有害雜質(zhì)。信號(hào)雜質(zhì)本身一般無(wú)害，但其限量的多少可以反映出藥物的純度水平，如限量過(guò)大，表明藥物的純度差，因此也稱(chēng)為指示性雜質(zhì)。氯化物、硫酸鹽等就屬于信號(hào)雜質(zhì)。重金屬、砷鹽、氰化物等，對(duì)人體有毒害，為有害雜質(zhì)，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中必須嚴(yán)格控制，以保證用藥的安全。藥物中的雜質(zhì)按其結(jié)構(gòu)又可分為無(wú)機(jī)雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)。第二節(jié) 藥物中雜質(zhì)的限量檢查1雜質(zhì)限量檢查藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。藥物中雜質(zhì)的檢查，一般不要求準(zhǔn)確測(cè)定其含量，而只檢查雜質(zhì)的量是否超過(guò)一定的限量。這種雜質(zhì)檢查的方法叫做雜質(zhì)的限量

6、檢查（Limit test）。在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)檢查多數(shù)為限量檢查。2雜質(zhì)限量檢查方法對(duì)照法（最常用的方法）、靈敏度法和比較法3雜質(zhì)限量的計(jì)算供試品中所含雜質(zhì)的量，是通過(guò)與一定量的雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較來(lái)確定，雜質(zhì)的最大允許量也就是雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（C）與體積（V）的乘積。雜質(zhì)的限量通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示。第三節(jié) 一般雜質(zhì)檢查的原理與方法一、氯化物檢查法 二、硫酸鹽檢查法 三、鐵鹽檢查法四、重金屬檢查法 五、砷鹽檢查法 六、酸堿度檢查法 七、溶液顏色檢查法 八、易炭化物檢查法 九、澄清度檢查法 十、熾灼殘?jiān)鼨z查法 十一、干燥失重測(cè)定法 十二、有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定法重點(diǎn)：氯化

7、物、硫酸鹽、 鐵鹽、重金屬、砷鹽的檢查。主要包括檢查的基本原理、操作方法、加入試劑的目的和注意事項(xiàng)等，特別是砷鹽和重金屬的檢查。其它一般雜質(zhì)檢查的概念、目的和意義。比如為什么要檢查有機(jī)溶劑殘留量？什么叫熾灼殘?jiān)鼨z查法？什么叫干燥失重測(cè)定法等？第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查原理方法特殊雜質(zhì)的檢查方法，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來(lái)進(jìn)行。 重點(diǎn)是顯色法和沉淀法、分光光度法、色譜法中的薄層色譜和高效液相色譜法。第八章 巴比妥類(lèi)藥物的分析巴比妥類(lèi)藥物均具有共同結(jié)構(gòu)的母核，不同的取代基，其分析方法多基于其分子中的基本結(jié)構(gòu)（1,3-二酰亞胺基團(tuán)）的性質(zhì)而決定。一、主要化學(xué)性質(zhì)： 1弱酸性：巴比妥類(lèi)

8、藥物可發(fā)生互變異構(gòu)形成稀醇式結(jié)構(gòu)，而顯弱酸性。2. 水解性： 巴比妥類(lèi)藥物與堿液共沸即水解而產(chǎn)生氨氣。3. 與重金屬離子的反應(yīng)：可與重金屬離子生成有色或不溶性的沉淀。巴比妥類(lèi)藥物顯紫堇色或紫色沉淀，含硫的巴比妥則顯綠色。4. 紫外吸收光譜特征：在一定的堿性溶液中可發(fā)生電離，具有紫外吸收特性。二、鑒別試驗(yàn)重點(diǎn)：一是與重金屬的反應(yīng)；二是特殊取代基（不飽和烴基取代、芳環(huán)取代）和硫元素的鑒別試驗(yàn)。三、含量測(cè)定 重點(diǎn)：銀量法、溴量法（一）銀量法1原理：巴比妥類(lèi)藥物在一定的堿性溶液中，可與銀離子定量形成鹽。因此，可采用銀量法測(cè)定本類(lèi)藥物及其制劑的含量。在滴定過(guò)程中，巴比妥類(lèi)藥物首先形成可溶性的一銀鹽，當(dāng)被

9、測(cè)定的巴比妥類(lèi)藥物完全形成一銀鹽后，稍過(guò)量的銀離子與藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁，從而指示滴定終點(diǎn)。2測(cè)定方法： 以異戊巴比妥的含量測(cè)定為例。反應(yīng)的摩爾比為1：1；即：每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于24.83mg的異戊巴比妥鈉。3含量計(jì)算： （二）溴量法1原理：5位有烯丙基取代的巴比妥類(lèi)藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可用溴量法測(cè)定其含量。反應(yīng)的摩爾比1：2；每1ml溴滴定液相當(dāng)于13.01mg的司可巴比妥鈉。2含量計(jì)算：（三）紫外分光光度法測(cè)定巴比妥類(lèi)藥物在堿性溶液中，具有特征性的紫外吸收，因而可采用紫外分光光度法測(cè)定其含量。本法廣泛用于巴比妥類(lèi)藥物原

10、料和制劑的含量測(cè)定，以及固體制劑的溶出度和含量均勻度檢查。當(dāng)供試品含有干擾物質(zhì)時(shí)，需要經(jīng)過(guò)提取分離后，再進(jìn)行測(cè)定。1. 直接紫外分光光度法測(cè)定供試品中硫噴妥鈉的量按下式計(jì)算：硫噴妥鈉（mg）As/Ar×Cr×10-3×D×1.0912.提取后紫外分光光度法測(cè)定將巴比妥類(lèi)藥物的鈉鹽轉(zhuǎn)變?yōu)槟阁w藥物，提取后再進(jìn)行測(cè)定，可消除干擾物質(zhì)的影響。如苯巴比妥鈉的含量測(cè)定，可根據(jù)苯巴比妥在氯仿中易溶解，而苯巴比妥鈉則易溶于水的特點(diǎn)，進(jìn)行測(cè)定。計(jì)算：苯巴比妥鈉（mg）As/Ar×Cr×1.095×5第九章 芳酸及其酯類(lèi)藥物的分析第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與

11、性質(zhì)一、結(jié)構(gòu)和分類(lèi)本類(lèi)藥物都具有芳酸和芳酸酯類(lèi)的結(jié)構(gòu)，主要包括芳酸及其酯類(lèi)，以及芳酸鹽等。（一）水楊酸類(lèi)： 阿司匹林、水楊酸鈉、對(duì)氨基水楊酸鈉（二）苯甲酸類(lèi)：苯甲酸、苯甲酸鈉、丙磺舒（三）其它芳酸類(lèi)：布洛芬、氯貝丁酯二、性質(zhì)1酸性：藥用芳酸的pKa一般在36之間，屬于中等強(qiáng)度的酸或弱酸。芳酸類(lèi)藥物的酸性強(qiáng)度與分子中芳環(huán)以及芳環(huán)上取代基有關(guān)。芳酸分子中苯環(huán)上如具有鹵素、硝基、羥基、羧基等電負(fù)性大的吸電子基團(tuán)，由于吸電子效應(yīng)能使苯環(huán)電子云密度降低，使氫質(zhì)子較易解離，故酸性增強(qiáng)。反之，分子中如具有甲基、氨基等斥電子基團(tuán)，則能增加苯環(huán)的電子云密度，從而降低氫-氧鍵極性，酸性減弱。2水解反應(yīng)：芳酸酯易水

12、解，在有酸或堿存在下，加熱，可加速水解反應(yīng)；利用芳酸酯類(lèi)藥物水解后，所生成的酸和醇，可鑒別相應(yīng)的芳酸酯。3紫外吸收光譜特征：第二節(jié) 鑒別反應(yīng)一、三氯化鐵反應(yīng)具有酚羥基的藥物在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物。反應(yīng)適宜的pH為46，在強(qiáng)酸性溶液中配位化合物分解。1對(duì)氨基水楊酸鈉 取供試品，加稀鹽酸呈酸性后，加三氯化鐵試液，即顯紫紅色。2阿司匹林分子中的酚羥基已成酯，可先加熱水解，使酚羥基游離后，才能與三氯化鐵反應(yīng)。例如中國(guó)藥典阿司匹林的鑒別反應(yīng)為：取本品約0.1g，加水10m1，煮沸放冷后，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。3苯甲酸及其鈉鹽不顯上述反應(yīng)，但其堿性水溶液或

13、中性溶液，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成堿式苯甲酸鐵鹽的赭色沉淀，可與水楊酸類(lèi)藥物相區(qū)別。4丙磺舒與少量NaOH試液生成鈉鹽后，在pH5.06.0的水溶液中，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀。二、水解反應(yīng)阿司匹林與碳酸鈉試液加熱水解，可得水楊酸鈉和醋酸鈉，加過(guò)量稀硫酸酸化后，則析出白色水楊酸沉淀，并產(chǎn)生醋酸的臭味。三、重氮化-偶合反應(yīng)1對(duì)氨基水楊酸鈉：對(duì)氨基水楊酸鈉具有芳伯氨基結(jié)構(gòu)，與亞硝酸鈉試液進(jìn)行重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽在堿性溶液中，與-萘酚偶合生成橙紅色沉淀。2貝諾酯：貝諾酯具有潛在的芳伯氨基，可加酸水解后，產(chǎn)生芳伯氨基結(jié)構(gòu)，再與亞硝酸鈉試液進(jìn)行重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽與堿性-萘酚偶合，產(chǎn)生

14、橙紅色沉淀。第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查一、阿司匹林中游離水楊酸的檢查生產(chǎn)過(guò)程中乙?；煌耆蛸A藏過(guò)程中水解產(chǎn)生的水楊酸，對(duì)人體有毒性，而且分子中酚羥基在空氣中被逐漸氧化成一系列醌型有色物質(zhì)，使阿司匹林成品變色。 原理：利用阿司匹林結(jié)構(gòu)中無(wú)游離酚羥基，不能與高鐵鹽作用，而水楊酸則可與高鐵鹽反應(yīng)顯紫堇色，與一定量水楊酸對(duì)照溶液所呈的色澤比較，從而控制游離水楊酸的限量。 二、對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查對(duì)氨基水楊酸鈉的合成以間氨基酚為原料。因此在成品中可能有未反應(yīng)完全的間氨基酚；對(duì)氨基水楊酸鈉又不穩(wěn)定，在日光或遇熱受潮時(shí)，也可脫羧生成間氨基酚，再被氧化成二苯醌型化合物，色漸變深，呈明顯的紅棕色。間氨基酚

15、的存在不僅導(dǎo)致藥物變色，且有毒性。中國(guó)藥典采用雙相滴定法。檢查原理：利用對(duì)氨基水楊酸鈉不溶于乙醚，而間氨基酚易溶于乙醚的特性，用乙醚提取雜質(zhì)后，在乙醚中加入適量的水，用鹽酸滴定液（0.02mol/L）滴定，以消耗一定量鹽酸滴定液來(lái)控制其限量。該法為雙相滴定法，所生成的鹽酸鹽在乙醚中不溶，而轉(zhuǎn)溶于水相中。三、氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)的檢查生產(chǎn)氯貝丁酯的原料中，可能存在合成中間體對(duì)氯苯氧異丁酸，在放置過(guò)程中，也可能分解產(chǎn)生對(duì)氯苯氧異丁酸。氯貝丁酯合成的起始原料對(duì)氯酚，在成品中常有微量存在，因其毒性大，各國(guó)藥典均采用氣相色譜法對(duì)其進(jìn)行對(duì)氯酚檢查。第四節(jié) 含量測(cè)定一、酸堿滴定法（重點(diǎn)）：本類(lèi)藥物中一部分具有

16、游離羧基，pKa值一般在36之間，因此可用酸堿滴定法進(jìn)行滴定。（一）直接滴定法阿司匹林分子中含有游離羧基，pKa為3.49，可用堿滴定液直接滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于18.02mg的阿司匹林（C9H8O4）。反應(yīng)的摩爾比為1：1。（二）水解后剩余滴定法1原理：阿司匹林分子中酯結(jié)構(gòu)，在堿性溶液中易于水解的性質(zhì)，加定量過(guò)量堿滴定液，加熱使酯水解，剩余的堿用酸滴定液回滴?？筛鶕?jù)消耗堿的量，計(jì)算含量。2方法：取本品1.5g精密稱(chēng)定加NaOH滴定液（0.5mol/L）50.0ml緩緩煮沸10min放冷加酚酞指示液用硫酸滴定液（0.25mol/L）滴定剩余NaOH并將滴定結(jié)果用

17、空白試驗(yàn)校正。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）相當(dāng)于45.04mg的阿司匹林（C9H8O4）。3計(jì)算：反應(yīng)的摩爾比為1：2。（三）兩步滴定法由于阿司匹林片劑和腸溶片中，加入少量枸櫞酸或酒石酸作為穩(wěn)定劑，并且阿司匹林片劑在制備和貯藏過(guò)程中，還可能發(fā)生水解，生成水楊酸和醋酸。因此采用上述兩種方法時(shí)，酸性的附加劑和酸性的降解產(chǎn)物可干擾測(cè)定。為了消除這些酸性物質(zhì)的干擾，可先中和供試品中共存的酸，再將阿司匹林在堿性條件下水解，采用剩余滴定法測(cè)定。稱(chēng)為兩步滴定法。1中和：精密稱(chēng)取片粉適量，加中性乙醇溶解后，以酚酞為指示劑，用NaOH滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯粉紅色。此時(shí)中和了所有存在

18、的游離酸（水楊酸、醋酸、枸櫞酸或酒石酸等），阿司匹林同時(shí)形成鈉鹽。2水解與測(cè)定：在中和后的供試品溶液中，加入定量過(guò)量的NaOH滴定液（0.1mol/L）40ml，置水浴上加熱使酯結(jié)構(gòu)水解完全，放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mo1/L）滴定剩余的堿，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。3計(jì)算：反應(yīng)的摩爾比為1：1。二、雙相滴定法（重點(diǎn)）：芳酸類(lèi)藥物的堿金屬鹽，易溶于水，其水溶液呈堿性，可用鹽酸滴定。但是由于母體藥物的酸性較強(qiáng)，因而其共軛堿的堿性較弱，使滴定終點(diǎn)的突躍不明顯，另一方面，在滴定過(guò)程中生成的酸一般不溶于水，不利于終點(diǎn)的正確判斷。苯甲酸鈉的含量測(cè)定如下。1原理：本法是利用苯甲酸溶于有機(jī)溶劑這一性質(zhì)，在水相中加入與水不相混溶的有機(jī)溶劑，在滴定