血球計(jì)數(shù)板的使用方法

1、血球計(jì)數(shù)板的使用方法血球計(jì)數(shù)板的使用方法 血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。血球計(jì)數(shù)板是一種專門用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物的一種儀器。計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特計(jì)數(shù)時(shí)，常采用樣方法。血球計(jì)數(shù)板是由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的制玻片制成的. .玻片中有四條下凹的槽玻片中有四條下凹的槽, ,構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)構(gòu)成三個(gè)平臺(tái). .中間的平臺(tái)較中間的平臺(tái)較寬寬, ,其中間又被一短橫槽隔為兩半其中間又被一短橫槽隔為兩半, ,每半邊上面每半邊上面, ,刻有一個(gè)方格網(wǎng)刻有一個(gè)方格網(wǎng). .方方格網(wǎng)上刻有格網(wǎng)上刻有9 9個(gè)大方格個(gè)大方格, ,其中只有中間的一個(gè)大

2、方格為計(jì)數(shù)室其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室, ,供微生供微生物計(jì)數(shù)用物計(jì)數(shù)用. .這一大方格的長(zhǎng)和寬各為這一大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm,1mm,深度為深度為0.1mm,0.1mm,其體積為其體積為0.1mm0.1mm3 3。 計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格計(jì)數(shù)室通常有兩種規(guī)格.一種是大方格一種是大方格內(nèi)分為內(nèi)分為16中格中格,每一中格又分為每一中格又分為25小格小格;另一另一種是大方格內(nèi)分為種是大方格內(nèi)分為25中格中格,每一中格又分為每一中格又分為16小格小格.但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造；它但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造；它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn)們都有一個(gè)共同的特點(diǎn),即每一大方格都是即每一大方格都是由由162

3、5=2516=400個(gè)小方格組成。個(gè)小方格組成。*以計(jì)數(shù)酵母菌為例以計(jì)數(shù)酵母菌為例(1)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù)。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個(gè)數(shù)。(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計(jì)數(shù),以每小以每小方格內(nèi)含有方格內(nèi)含有4-5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。個(gè)酵母細(xì)胞為宜。 (3)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計(jì)數(shù)室上加在中央的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的厚玻片蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣片的邊緣,使菌液緩緩滲入使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙

4、吸取多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi)使酵母菌全部沉降到血球計(jì)數(shù)室內(nèi).(5)計(jì)數(shù)時(shí)計(jì)數(shù)時(shí),如果使用如果使用16格格25格規(guī)格的計(jì)數(shù)室格規(guī)格的計(jì)數(shù)室,要按要按對(duì)角線位對(duì)角線位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4個(gè)中格個(gè)中格(即即100個(gè)個(gè)小格小格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為如果規(guī)格為25格格16格的計(jì)數(shù)板格的計(jì)數(shù)板,除了取其除了取其4個(gè)對(duì)角方位外個(gè)對(duì)角方位外,還需再數(shù)中央的一個(gè)中格還需再數(shù)中央的一個(gè)中格(即即80個(gè)小方格個(gè)小方格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù). (6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計(jì)數(shù)大方一般只計(jì)數(shù)大方格

5、的格的上上方和方和右右方線上的酵母細(xì)胞方線上的酵母細(xì)胞(或只計(jì)數(shù)或只計(jì)數(shù)下下方和方和左左方線上的酵母細(xì)胞方線上的酵母細(xì)胞).(7)對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)三次,取其平均值取其平均值,按下列公式計(jì)按下列公式計(jì)算每算每1ml菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù)菌液中所含的酵母菌個(gè)數(shù). 血球計(jì)數(shù)板的清潔血球計(jì)數(shù)板的清潔 血球汁數(shù)板使用后血球汁數(shù)板使用后,用自來(lái)水沖洗用自來(lái)水沖洗,切勿用硬物切勿用硬物洗刷洗刷,洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干洗后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干,或用或用95%的的乙醇乙醇,無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇,丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥丙酮等有機(jī)溶劑脫水使其干燥.通通過(guò)鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物

6、過(guò)鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物.若不干凈若不干凈,則必須則必須重復(fù)清洗直到干凈為止重復(fù)清洗直到干凈為止. 例例2:酵母菌的計(jì)數(shù)通常用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行，血球計(jì)數(shù)板每個(gè)大方格容積為0.1mm3 ，由400個(gè)小方格組成?，F(xiàn)對(duì)某一樣液進(jìn)行檢測(cè)，如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)先 后再計(jì)數(shù)。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè)。例例1 :在用血球計(jì)數(shù)板（2mm2mm方格）對(duì)某一稀釋50倍樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)在一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌 個(gè)。2x1072108稀釋稀釋例例3 檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液