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1、超聲波和微波作用對(duì)酶的影響研究進(jìn)展摘要 :超聲波對(duì)酶的影響與超聲波時(shí)間、聲強(qiáng)、溫度、功率、頻率和介質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)。適宜的超聲可提高酶促反應(yīng)速度,較低強(qiáng)度的超聲可提高酶的活性,而較高強(qiáng)度的超聲會(huì)降低酶促反應(yīng)速度甚至使酶失活。 酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。酶和蛋白質(zhì)一樣會(huì)受到某些物理、化學(xué)因素作用而發(fā)生變性,失去活力。酶的相對(duì)分子質(zhì)量很大,具有膠體性質(zhì),不能透析。酶也能被蛋白酶水解。酶催化反應(yīng)具有高效性,它可以在常溫常壓和溫和的酸堿度下高效地進(jìn)行。1個(gè)酶的分子在1min內(nèi)能引起數(shù)百萬個(gè)底物分子轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物,酶的催化能力比一般的催化劑的催化能力大1000萬倍到10萬億倍。酶催化反應(yīng)的另一個(gè)特點(diǎn),就是酶對(duì)底物的

2、高度的專一性。一種酶只能催化一種或一類物質(zhì)反應(yīng),即酶是一種僅能促進(jìn)特定的化合物、特定的化學(xué)鍵、特定的化學(xué)變化的催化劑。酶還具有:其作用受到調(diào)節(jié)控制、有的酶的作用還需要輔因子的參與等特點(diǎn)。酶的作用機(jī)制酶促反應(yīng)之所以具有高效性和專一性,是因酶與底物專一的形成了中間產(chǎn)物,使反應(yīng)的活化能降低,從而,活化分子數(shù)增加,底物結(jié)合在酶的活性中心上。誘導(dǎo)楔合說認(rèn)為:當(dāng)酶蛋白與底物結(jié)合時(shí),酶蛋白活性部位即發(fā)生一定的構(gòu)象變化,使酶蛋白中進(jìn)行反映所需要的催化基團(tuán)和結(jié)合基團(tuán)得以正確地排列和定向,以與底物楔合;同時(shí),由于酶蛋白分子中原有電子分布發(fā)生了改變,因而誘導(dǎo)底物原子間某些化學(xué)鍵發(fā)生極化現(xiàn)象而趨向不穩(wěn)定狀態(tài),故可以加

3、速反應(yīng)進(jìn)行。 酶活力:酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力。用酶催化反應(yīng)的速度來表示。酶學(xué)對(duì)食品科學(xué)的重要性酶的應(yīng)用已有幾千的歷史,盡管那時(shí)人們并沒有任何關(guān)于催化劑和化學(xué)反應(yīng)方面的知識(shí),但在是食品的加工過程中,人們已經(jīng)開始利用微生物細(xì)胞產(chǎn)生的各種酶的催化作用。酶學(xué)和食品科學(xué)的關(guān)系十分密切。早在科學(xué)家最初開始研究消化、發(fā)酵和水解反應(yīng)中的酶時(shí)就涉及了食品。食品科學(xué)家對(duì)酶在食品中的應(yīng)用,尤其是導(dǎo)致食品變質(zhì)敗壞的酶作用進(jìn)行了細(xì)致研究。近幾十年來,隨著酶學(xué)研究的不斷深入和酶生產(chǎn)的快速發(fā)展,酶在食品科學(xué)中的重要性日益凸現(xiàn)。<1997>1引言 超聲波是物質(zhì)介質(zhì)中的一種彈性機(jī)械波近年來,超聲波在高分子的降解和

4、聚合、有機(jī)合成提取和分離、霧化結(jié)晶、干燥等許多方面得到廣泛研究和應(yīng)用。本文將介紹超聲波對(duì)酶反應(yīng)影響的研究進(jìn)懇2超聲波對(duì)酶反應(yīng)的影響2 1超聲波聲功率大小不同,作用效果也不no用超聲波提取細(xì)胞內(nèi)酶的研究由來已久。1957年MarrA.G等和1969年Zetela-ki K等先后對(duì)超聲波破壁提取葡萄糖氧化酶(EC1. 1. 3 .4)進(jìn)行了研究,其中后者用聲功率100W的超聲破碎機(jī),結(jié)果導(dǎo)致了酶失活1982年Yoshio等用溫和的超聲處理?xiàng)l件,頻率20kHz聲功率15w,連續(xù)處理15小時(shí),提高了酶產(chǎn)率,而并未發(fā)現(xiàn)葡萄糖氧化酶的失活,他們把原因歸于較低的超聲波聲活力足夠高的條件下,以溫和的超聲波條件

5、應(yīng)用于胞內(nèi)酶的連續(xù)生產(chǎn)1。與此類似,用20開kHz 10W的超聲波作用于脆壁克魯弗氏酵母生產(chǎn)菊糖酶,當(dāng)聲功率小于10W時(shí),產(chǎn)酶活力隨聲功率而增大,當(dāng)功率大于10W時(shí),產(chǎn)酶活力下降,這是由于較弱的超聲波對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的破壞很少,主要起促進(jìn)可逆滲透、加強(qiáng)細(xì)胞的物質(zhì)傳輸?shù)淖饔?,而?qiáng)的超聲波的空化作用使細(xì)胞破碎,酶活降低222用超聲波處理時(shí),固定化酶的適應(yīng)性強(qiáng),酶失活少。用頻率0 88kHZ聲強(qiáng)0.05-1w/n2的超聲波,對(duì)肌酸激酶、乳酸鹽脫氫酶己糖激酶丙酮酸鹽激酶所催化的反應(yīng)進(jìn)行多次不同條件的試驗(yàn),對(duì)反應(yīng)速率均沒有明顯的直接影響。但將酶固定化以后,超聲波處理使固定化酶反應(yīng)速率明顯增加,該研究者認(rèn)為,這

6、種增加是由于超聲波的高頻振蕩作用,使底物和固定化酶的接觸次數(shù)大大增加,同時(shí)產(chǎn)物的釋放也加快,從而使反應(yīng)速率增加4。以20-40kHz,10-100W的超聲波作用于固定化糖化酶水解淀粉的反應(yīng),反應(yīng)效率提高2倍以上5.以酪阮作底物,用20kH z的超聲波處理固定于瓊脂膠上的a-胰凝乳阮酶,可使其活性提高2倍。用7MH z超聲波作用于固定在多孔聚苯乙烯上的a-淀粉酶,固定化酶活力也有提高【3】2 3許多研究表明,在有機(jī)溶劑中,一些酶的抗失活能力增強(qiáng)【6,4】。例如,枯草桿菌蛋白酶在50mM, PH 7. 8的磷酸緩沖液中,以波長(zhǎng)2 10m,聲功率150W的超聲波處理2小時(shí),酶活約下降50%,而在含該

7、緩沖液1%的t-戎醇中,超聲處理6小時(shí),酶活幾乎沒有損失在幾種不同的醇溶液中,超聲波對(duì)枯草桿菌蛋白酶催化的內(nèi)醋化反應(yīng)的反應(yīng)速率均有不同程度的提高。醇的碳鏈越長(zhǎng),反應(yīng)速率提高越多。超聲波的影響取決于超聲波長(zhǎng)(頻率沐反應(yīng)介質(zhì)中水的含量及介質(zhì)的疏水性超聲波連續(xù)處理比只用超聲波預(yù)處理酶效果更好【6】。再如,在蛋白酶催化合成多膚的反應(yīng)中,以100W, 38kH z的超聲波作用于反應(yīng),介質(zhì)是緩沖水溶液時(shí),超聲波對(duì)反應(yīng)沒有促進(jìn);當(dāng)用有機(jī)溶劑時(shí),介質(zhì)的親水性越強(qiáng),則對(duì)反應(yīng)的促進(jìn)較小,介質(zhì)的疏水性越強(qiáng),則超聲波對(duì)反應(yīng)的促進(jìn)越大同時(shí),有許多研究表明,少量的水存在于有機(jī)溶劑介質(zhì)中,對(duì)酶有保護(hù)作用【7】2 4底物濃度

8、對(duì)超聲波作用也有影響。于淑娟等8研究了在無底物和有底物時(shí),超聲波對(duì)纖維素酶的作用。分別以20kH z,40W,45W,60W,90W的超聲波作用于無底物的商品纖維素酶(用檸檬酸鈉緩沖液配制成1%溶液),在規(guī)定溫度下作用5分鐘后,酶活力分別降低7.5%、15.1%、26.5%、50.6%。如果酶與底物混合后再加超聲波作用,在一定條件下,酶活力有一定程度的提高。當(dāng)超聲功率小于45W時(shí),酶活力隨著聲功率的增加而增加,大于45W時(shí),酶活力開始下降該論文作者認(rèn)為,超聲波對(duì)有底物和無底時(shí)純酶活性改變的區(qū)別在于無底物時(shí)超聲波直接對(duì)酶作用而使其空間構(gòu)象改變而失活;加入底物時(shí),酶首先與底物形成絡(luò)合物,超聲波產(chǎn)生

9、的振蕩施加在絡(luò)合物上,在某種程度上,底物對(duì)酶起到支撐和保護(hù)的作用。超聲振蕩可以加快溶劑和產(chǎn)物的運(yùn)動(dòng)速度,改變濃度差,增強(qiáng)傳質(zhì)動(dòng)力。小結(jié) 超聲波對(duì)酶反應(yīng)的影響,在不同的條件下結(jié)果有很大的不同,甚至完全相反對(duì)這些現(xiàn)象的解釋也有不少。但目前比較統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)有如下幾點(diǎn):( 1)酶反應(yīng)時(shí)所采用的超聲波聲功率不宜過大否則,將使酶失活;( 2)有機(jī)溶中一些酶的抗失活能力強(qiáng),超聲波催化這些酶反應(yīng)的效果比在水溶液中好;(3)固定化酶的抗失活能力強(qiáng),能適應(yīng)較高的頻率和較大的聲功率而獲得較好的超聲催化效果;( 4)沒有底物的酶液受超聲作用易失活,較高的底物濃度對(duì)酶有保護(hù)作用,超聲催化效果好;(5)超聲波對(duì)某些反應(yīng)可使

10、產(chǎn)物?;?( 6)超聲波對(duì)酶反應(yīng)的催化作用主要緣于超聲振蕩加速了底物與酶的接觸和產(chǎn)物的釋放空化效應(yīng),特別是瞬態(tài)空化應(yīng)盡量避兔一般對(duì)酶反應(yīng)來說熱效應(yīng)影響不大。 參考文獻(xiàn) 1 Yoshio T shinori Isao Karube and ShuichiSuzuki Contamous production of glucose oxidasewith aspergillus spunderultrasoundwaves EnzymeM icrob T echnol; 1982(4); 85- 88 2林影,高大維,梁宏等.微超聲波對(duì)脆壁克魯弗氏酵母菊糖酶生產(chǎn)的促進(jìn)作用.李寶璋,李穩(wěn)宏,范代娣編

11、,第六屆全國(guó)生物化工學(xué)術(shù)會(huì)議論文集,北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1995, 119- 122 3馮若,趙逸云,李化茂等.超聲在生物技術(shù)中應(yīng)用的研究進(jìn)展.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,199烤21( 6): 500- 503 4 E P Chetvemkova T N Pashovka N A Rosanov et al Interaction of therapeutic ultra-sound with purified enzym es in vitro U ltrasonics,1985,(7): 183- 188 6 EvgeniN Vulfsou Douglas B Sarney andBarr

12、y A Law. Enhancanent of subtili。a to 1y sedinteresterification in organic solvents by ultrasoundirradaiation EnzymeMicrob Technol 1991;(13 ):123-126 7 J V S in isterra A pp lira tion of a ltrasound tob io technology一an overview. U ltrasonics 1992 30(3): 180- 185 8于淑娟.超聲波催化酶法提取靈芝多糖,華南理工大學(xué)學(xué)位論文,廣州,1996

13、 <2010.7> 超聲波是指頻率大于19.2 kHz的聲波,具有波動(dòng)與能量雙重屬性,是一種均勻的球面機(jī)械波,以其獨(dú)特的空化作用,在液體內(nèi)部產(chǎn)生強(qiáng)烈的沖擊波和微射流,出現(xiàn)局部高溫、高壓,導(dǎo)致諸多次級(jí)效應(yīng),如擊碎、乳化、擴(kuò)散、強(qiáng)烈的機(jī)械振蕩等,從而加速體系的傳質(zhì)、傳熱等過程。當(dāng)超聲波振動(dòng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生并傳遞強(qiáng)大的能量,使起媒質(zhì)質(zhì)點(diǎn)以極高的速度和加速度進(jìn)入振動(dòng)狀態(tài),媒質(zhì)結(jié)構(gòu)也會(huì)發(fā)生變化,促使有效成分進(jìn)入溶劑中。當(dāng)振動(dòng)處于稀疏狀態(tài)時(shí),液體會(huì)被撕裂成很多的小空穴,這些小空穴瞬問閉合會(huì)產(chǎn)生高達(dá)幾千大氣壓的瞬時(shí)壓力,即空化現(xiàn)象。這種空化現(xiàn)象在液體內(nèi)形成的空化泡,在瞬問迅速漲大并破裂,吸收的聲場(chǎng)能量在

14、極短的時(shí)問和極小的空問內(nèi)釋放出來,形成高溫和高壓的環(huán)境,同時(shí)伴隨有強(qiáng)大的沖擊波和微聲流,細(xì)胞結(jié)構(gòu)的瞬問破裂會(huì)使細(xì)胞內(nèi)的有效成分得以釋放,進(jìn)入溶劑后充分混合,有利于提高提取率1 不同的酶分子有不同的立體構(gòu)象,相同的酶分子在不同環(huán)境卜也會(huì)有不同的構(gòu)象。不同的酶分子或處于不同環(huán)境條件卜的酶分子對(duì)超聲波能量有不同的敏感性2。另外,超聲具有效率高、價(jià)格低、無污染、易獲得等優(yōu)點(diǎn),特別適用于生物研究領(lǐng)域。因此,研究超聲對(duì)酶解反應(yīng)的影響具有良好的應(yīng)用前景。1超聲場(chǎng)對(duì)酶解反應(yīng)的影響 超聲場(chǎng)對(duì)酶的作用是多方面的。酶在有超聲作用和沒超聲作用的情況曰舌力不同。在大豆蛋白酶解技術(shù)比較的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)有、無超聲波作用卜大豆蛋

15、白水解度進(jìn)行比較,考察超聲波作用的效果時(shí),分別以水解度和水解度提高率為左、右縱坐標(biāo),以正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)序號(hào)為橫坐標(biāo),以有、無超聲波作用卜的正交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果作圖。實(shí)驗(yàn)表明,與無超聲波作用時(shí)的大豆蛋白酶解相比,超聲波作用使水解度明顯提高,平均提高21.18%0可見,超聲波作用有效地促進(jìn)了大豆蛋白的酶解31.1超聲溫度對(duì)酶解反應(yīng)的影響 各種酶在最適溫度范圍內(nèi)酶活性最強(qiáng),酶促反應(yīng)速度最大。超聲波作為一種能量形式具有加熱作用和空化作用,對(duì)酶反應(yīng)可產(chǎn)生促進(jìn)和抑制雙重作用。當(dāng)溫度較低時(shí),與空化作用相比,加熱作用占主導(dǎo),超聲場(chǎng)卜的反應(yīng)體系吸收超聲波能量,從而加速了酶促水解反應(yīng),表現(xiàn)為促進(jìn)作用。隨著溫度的升高,空化作

16、用逐步顯現(xiàn),在液體介質(zhì)中微泡的形成和破裂及伴隨能量的釋放,產(chǎn)生瞬時(shí)局部高溫、高壓,可產(chǎn)生自由基,如水分子電離產(chǎn)生H·和OH·自由基,這些自由基可進(jìn)入酶活性中心,破壞酶分子的構(gòu)象。 在玉米秸稈超聲輔助酶水解實(shí)驗(yàn)中,水浴溫度分別為45、50、55,其余條件相同。通過實(shí)驗(yàn)可知,超聲波場(chǎng)下的纖維素酶水解最適作用溫度與非超聲波場(chǎng)卜纖維素酶水解最適作用溫度相一致,均為50。超聲場(chǎng)條件卜不同水浴溫度的纖維素酶解得率均高于其相應(yīng)的未加超聲波的酶解得率。超聲場(chǎng)條件下溫度為45、50、55的酶解得率分別比未加超聲波的酶解得率提高了58.17%, 77.19%和53.18%,因此酶解的最適溫度為

17、50【4】。1.2超聲時(shí)問對(duì)酶解反應(yīng)的影響 超聲時(shí)問的長(zhǎng)短會(huì)影響超聲的空化效應(yīng)。時(shí)問太短,超聲作用不完全,不能有效地利用超聲技術(shù);反之,超聲時(shí)問太長(zhǎng),會(huì)產(chǎn)生其他影響,抑制酶l舌。 在用超聲輔助酶法提取燕麥蛋白的研究實(shí)驗(yàn)中,超聲時(shí)問對(duì)燕麥蛋白提取率的影響測(cè)試是取40目的燕麥粉各20 g,按料水比1:8加水160mL,在超聲溫度 50、超聲功率60 W,酶解溫度50、酶解時(shí)問2 h,加酶量1%, pH值為7的條件h,每隔0 min , 5 min , 10 min , 15 min ,20 min , 25 min , 3 0 min進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果表明超聲提取與未超聲提取燕麥蛋白提取率有顯著差異,

18、說明短時(shí)問超聲處理可以明顯地提高燕麥蛋白的提取率。當(dāng)超聲時(shí)問超過25 min后燕麥蛋白提取率略有卜降,故確定超聲時(shí)問為25 min【5】。在10條件下,用超聲波處理菜豆種子超氧化物岐化酶不同的時(shí)問,未經(jīng)超聲波處理的酶活力以100%計(jì),測(cè)定酶活力提高的百分率。用20 W, 15 kHz的超聲波處理不同的時(shí)問,其中處理12 min .酶活力提高了15.4%【6】1.3超聲強(qiáng)度對(duì)酶解反應(yīng)的影響 在超聲輔助酶法制備大蒜素的工藝研究的實(shí)驗(yàn)中,超聲強(qiáng)度分別取0.1W/cm2 , 0.2 W/cm2 , 0.3W/cm2, 0.4 W/cm2,酶解溫度為35,酶解時(shí)問為30 min,料水比為2 : 3,超聲

19、頻率為50 kHz.然后用 95%乙醇以料液比1:4的比例在30溫度條件卜萃取1.5 h,分析不同超聲強(qiáng)度對(duì)大蒜素得率的影響。 實(shí)驗(yàn)得出,大蒜素得率隨超聲強(qiáng)度的升高而增大,當(dāng)強(qiáng)度為0.4 W/cm2時(shí),大蒜素的得率最高。說明超聲酶解強(qiáng)度大時(shí),改變酶的分子構(gòu)象有利于大蒜素的形成【7】。1.4超聲頻率對(duì)酶解反應(yīng)的影響 在超聲輔助酶法制備大蒜素的工藝研究的實(shí)驗(yàn)中,超聲頻率分別取28 kHz, 40 kHz, 50 kHz,135 kHz,酶解時(shí)問為30 min.酶解溫度35為,料水比為2 : 3,超聲強(qiáng)度為0.4 W/cm2,然后用95%乙醇以料液比1:4的比例在30下萃取1.5h,分析不同超聲頻率

20、對(duì)大蒜素得率的影響。 隨超聲酶解頻率的增加大蒜素得率呈現(xiàn)出先增后降的趨勢(shì),當(dāng)超聲頻率為50 kHz時(shí),大蒜素的得率最高。其原因可能是因?yàn)殡S著超聲頻率的增加,酶和底物分子的碰撞頻率也增大,使得反應(yīng)速度加快,大蒜素得率高,而當(dāng)超聲頻率過大時(shí),酶分子構(gòu)象進(jìn)一步改變,酶活性反而降低,影響了大蒜素的生成陰。1.5超聲功率和次數(shù)對(duì)酶解反應(yīng)的影響 超聲波的功率大小反映了超聲波破碎細(xì)胞空化作用的強(qiáng)弱。為考察超聲功率和超聲次數(shù)對(duì)菌體破碎的影響,在酶解超聲法破碎大腸桿菌提純包含體實(shí)驗(yàn)中,用超聲波處理經(jīng)酶解的菌液,進(jìn)一步把細(xì)胞碎片破碎,并把大的蛋白質(zhì)、核酸分子打斷成較小的分子,使菌液的孰度降低,提高包含體的純度。

21、從實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的400 W, 500 W, 600 W的超聲破碎研究可知,酶解后的菌液具有較高的A 650nm,值,說明其中仍含有較多的細(xì)胞碎片,經(jīng)超聲波處理后A 650nm值明顯降低;但3種破碎功率對(duì)菌體碎片的進(jìn)一步破碎沒有顯著的差別,分別超聲50次時(shí),細(xì)胞碎片破碎均較完全,A 650nm趨于穩(wěn)定。在3種不同超聲功率作用卜,使蛋白質(zhì)和核酸釋放達(dá)到最大所需超聲次數(shù)(40次一50次)均較接近,但隨著功率的增大,釋放出的大分子蛋白和核酸被打碎成較小的分子,使AA 280nm和AA 260nm增加8在菠蘿果蛋白酶與底物酪蛋白反應(yīng)的過程中,一定參數(shù)的超聲作用會(huì)在一定程度上改變菠蘿蛋白酶的分子構(gòu)象,并影響其

22、活力。當(dāng)把酶反應(yīng)系統(tǒng)置于H66025型超聲發(fā)生器(50 W-250 W, 16.5kHz, 10) mim時(shí),測(cè)得的酶活力都有一定程度的提高。在150 W范圍內(nèi),隨著功率的增加,作用效果越明顯。當(dāng)然這種增長(zhǎng)不會(huì)是無限制的,當(dāng)作用功率超過150 W后,酶活力不冉增加,并稍有卜降。方差分析結(jié)果表明,經(jīng)超聲處理的酶活性顯著高于不經(jīng)處理的對(duì)照酶活性【9】。 2超聲場(chǎng)提高酶解反應(yīng)速度的機(jī)理 超聲提高酶解反應(yīng)速度的機(jī)理目前己有不少研究,主要有以卜4個(gè)方面:改變酶分子的三級(jí)結(jié)構(gòu),提高酶活,從而加速酶解反應(yīng);超聲波對(duì)反應(yīng)底物有均質(zhì)作用,增加了酶與底物的接觸面積,從而有利于酶解反應(yīng)的進(jìn)行;超聲波的熱效應(yīng),在酶解

23、體系中施加超聲,可以提高酶解體系的溫度,從而促進(jìn)酶解反應(yīng)的進(jìn)行;當(dāng)超聲波振動(dòng)時(shí)能產(chǎn)生并傳遞強(qiáng)大的能量,引起媒質(zhì)質(zhì)點(diǎn)以極高的速度和加速度進(jìn)入振動(dòng)狀態(tài),增加了酶與底物的接觸機(jī)會(huì),因此提高了酶解反應(yīng)的速度。3小結(jié) 在一定的超聲時(shí)問、溫度、功率、頻率等條件下,超聲場(chǎng)對(duì)酶解反應(yīng)有促進(jìn)作用。超聲參數(shù)選擇不合適,反而抑制酶解反應(yīng)的進(jìn)行,因此要達(dá)到促進(jìn)酶解的目的,必須根據(jù)具體情況選擇不同的超聲條件。 參考文獻(xiàn):1王畢妮,張富新.超聲技術(shù)在皺胃酶提取中的應(yīng)用J.中國(guó)乳品工業(yè),2005, 33(11):54- 55.2呂鵬,莊重,凌建亞等.超聲對(duì)酶的影響J.生物技術(shù)通訊, 2004, 15(5):534- 536

24、.3胡愛軍,鄭捷.大豆蛋白酶解技術(shù)比較J.精細(xì)化工,2005, 22 (56):461-463.4肖瓊,姚春才,崔玲等.玉米秸稈超聲輔助酶水解J.南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2007 31(4):85- 88.5吳素萍.超聲輔助酶法提取燕麥蛋白的研究J.糧食與飼料工業(yè),2007(9):22- 25.6錢春梅,譚兆贊,李云等.超聲波對(duì)菜豆種子超氧化物歧化酶活性的影響J.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,25(3):73一77.7莫英杰,土靜,曹雁平等.超聲輔助酶法制備大蒜素的工藝研究J.食品科學(xué)·工藝技術(shù),2009 30 (10):42- 45.8劉紅,潘紅春,蔡紹哲等.酶解超聲法破碎大腸桿菌提純包含

25、體J.重慶大學(xué)學(xué)報(bào),2004, 27 (10):75一78.9朱國(guó)輝,黃卓烈,徐鳳彩等.超聲波對(duì)菠蘿果蛋白酶活性和光譜的影響J.應(yīng)用聲學(xué),2003, 2210- 15.胡愛軍,鄭捷.大豆蛋白酶解技術(shù)比較J.精細(xì)化工,2005, 22(6):461一463.由于超聲波的這些效應(yīng),使得超聲波在食品加工及食品檢測(cè)中廣泛應(yīng)用,如食品干燥、有效成分提取、乳化、結(jié)晶、殺菌和解凍。 酶作為一類特殊的具有生物催化活性的蛋白質(zhì),在食品保藏、加工和食品分析中具有重要的作用。超聲波對(duì)酶的作用很復(fù)雜,由于超聲處理的條件和強(qiáng)度不同會(huì)產(chǎn)生激活或者鈍化作用,酶性質(zhì)不同也會(huì)產(chǎn)生不同的作用。1對(duì)酶的激活作用大量的研究表明:適宜的超聲處理?xiàng)l件可提高酶促反應(yīng)速度。Ateqad3'等利用2 MHz 5.2W /an,的超聲處理木瓜蛋白酶,使酶活性有較大幅度的提高。Sakakibara等4也發(fā)現(xiàn):超聲處理可使蔗糖酶水解蔗糖的反應(yīng)速度提高30%。Vaigas L H M等5超聲處理黑曲霉中轉(zhuǎn)移酶,在兩振幅(20%,40%)下都能顯著地提高整個(gè)轉(zhuǎn)移酶活性,當(dāng)振幅為20%,作用8 m in時(shí)酶活力提高

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