牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方

1、牛肉膏蛋白胨培育基配方：牛肉膏蛋白胨培育基是一種應(yīng)用最廣泛和最一般的細(xì)菌基礎(chǔ)培育基，有時又稱為一般培育基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏為微生物供應(yīng)碳源和能源，磷酸鹽、蛋白胨主要供應(yīng)氮源，而NaCl供應(yīng)無機(jī)鹽。在配制固體培育基時還要加入肯定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96時溶化，一般實(shí)際應(yīng)用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化，以免瓊脂燒焦。瓊脂在40時凝固，通常不被微生物分解利用。固體培育基中瓊脂的含量依據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。 由于這種培育基多用于培育細(xì)菌（葷食），因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性，以利于細(xì)菌的生長繁殖。 牛肉膏蛋白胨培育基的配方如下

2、： 牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、NaCl 5g、瓊脂 1520g、水 1000ml、pH 7476（7.08.0）三、器材牛肉膏，蛋白胨， NaCl，瓊脂；1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培育基分裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（ pH 5590），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。四、操作步驟 1稱量按培育基配方比例依次精確地稱取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接放入水中，這時如略微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分別，然后馬上取出紙

3、片。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要快速。另外，稱藥品時嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。2溶化在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補(bǔ)充水分到所需的總體積。假如配制固體培育基，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯裂開。最終補(bǔ)足所失的水分。 3調(diào)pH在未調(diào)pH前，先用精密pH試紙測量培育基的原始pH值，假如pH偏酸，用滴管向培育基中逐滴加入1mol/L NaOH，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值，直至pH達(dá)7

4、6。反之，則用1mol/L HCl進(jìn)行調(diào)整。留意pH值不要調(diào)過頭，以避開回調(diào)，否則，將會影響培育基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求pH值較精確的微生物，其pH的調(diào)整可用酸度計進(jìn)行（使用方法，可參考有關(guān)說明書）。4過濾趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀看。一般無特殊要求的狀況下，這一步可以省去（本試驗(yàn)無需過濾）。5分裝按試驗(yàn)要求，可將配制的培育基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖-1。分裝過程中留意不要使培育基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。(1)液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。(2)固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，如圖-2。分裝三角燒瓶的量

5、以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。(3)半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。6加塞培育基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻擋外界微生物進(jìn)入培育基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本試驗(yàn)后面）。7包扎加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培育基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后，外包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好，使用時簡潔解開，同樣用記號筆注明培育基名稱、組別、日期。8滅菌將上述培育基以105kg/cm2（15磅/英寸2），1213， 20分鐘高壓蒸汽滅菌。如因特殊狀

6、況不能準(zhǔn)時滅菌，則應(yīng)放入冰箱內(nèi)暫存。9擱置斜面將滅菌的試管培育基冷至50左右，將試管棉塞端擱在玻棒上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。10無菌檢查將滅菌的培育基放入37的溫室中培育2448小時，以檢查滅菌是否徹底。PDA培育基配方：特點(diǎn)及用途PDA培育基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培育基的簡稱，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次對應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。 一種常用的培育基，宜培育酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌（素食）。酵母菌PH（3.86.0），霉菌（4.05.8）等。 按物理性狀劃分：固體培育基 ，按培育基成分劃分：半合成培育基配方馬鈴薯 200克 葡萄

7、糖 20克 瓊脂 1520克 自來水 1000毫升 自然PH配制步驟其做法是稱取200g馬鈴薯，洗凈去皮切成小塊，加水煮爛（煮沸2030分鐘，能被玻璃棒戳破即 可），用四層紗布過濾，再據(jù)實(shí)際試驗(yàn)需要加葡萄糖和瓊脂，連續(xù)加熱攪拌混勻，稍冷卻后再補(bǔ)足水分至1000毫升，分裝試管，加塞、包扎，（121）滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面，冷卻后貯存?zhèn)溆谩?其他事項(xiàng)1.培育基經(jīng)滅菌后，必需放在37C溫箱培育24h，無菌生長者方可使用。 2.PDA培育基一般不需要調(diào)pH。對于要調(diào)整pH的培育基，一般用pH試紙測定其pH。假如培育基偏酸或偏堿時，可用lmolLNaOH或lmolLHCL溶液進(jìn)行調(diào)整。調(diào)整時應(yīng)

8、逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過酸或過堿破壞培育基成分。 3.培育基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培育基，用于菌類的震蕩培育。 4.培育基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為0.1g/L培育基，主要是為了抑制細(xì)菌的生長，削減干擾性高氏1號培育及配方：培育放線菌用 ，改良的高氏 可溶性淀粉 2g ，KNO3 0.1g ，K2HPO4 0.05g ，MgSO4 7H2O 0.05g ，NaCl 0.05g ，F(xiàn)eSO4 7H2O 0.001g （母液），瓊脂 2g ，自來水 100mL ，pH 7.27.4 ，滅菌 1.05kg/cm2，20min 配制時，先用少量冷水，將淀粉調(diào)成糊狀，倒入少于所需水量的沸水中，在火上加熱，邊攪拌邊依次逐一溶化其他成分，溶化后，補(bǔ)足水分到100ml，調(diào)pH，121滅菌20min。 高溫滅菌后，倒平皿前加入10%酚2滴至100ml培育基中混勻，將培育基倒入平皿內(nèi)約15ml/皿。 高氏1號： 可溶性淀粉（20g），KNO3（1g），K2HPO4（0.5g），MgSO4 7H2O（