江蘇鹽城市高三生物一輪復(fù)習(xí)生物技術(shù)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)作業(yè)蘇教版

1、第2講 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、單項(xiàng)選擇題1. (2016·鹽城三模)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是( )A. 培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌B. 各種微生物培養(yǎng)基的配方中必須包含碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽及瓊脂等成分C. 純化培養(yǎng)微生物常用的接種方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法D. 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以選擇培養(yǎng)分解尿素的微生物2. 下列有關(guān)常見(jiàn)無(wú)菌操作的敘述,錯(cuò)誤的是( )A. 用酒精擦拭雙手B. 用氯氣對(duì)水源消毒C. 實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D. 玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭3. 如下圖所示,自來(lái)水經(jīng)濾膜過(guò)濾后,轉(zhuǎn)移到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上,適宜條件下培養(yǎng)4

2、8 h,染色后統(tǒng)計(jì)變色菌落數(shù)目為165個(gè)。下列說(shuō)法正確的是( ) A. 若培養(yǎng)基含伊紅美藍(lán),大腸桿菌菌落呈藍(lán)綠色B. 自來(lái)水中大腸桿菌濃度是33個(gè)·L-1,比真實(shí)值偏大C. 為了提高準(zhǔn)確度,需設(shè)重復(fù)實(shí)驗(yàn),但不用空白對(duì)照D. 若培養(yǎng)基菌落數(shù)目大于300,可適當(dāng)減少自來(lái)水量4. 下列關(guān)于微生物培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述,正確的是( )A. 凡是碳源都能提供能量B. 碳源物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源C. 無(wú)機(jī)氮源也能提供能量D. 除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽5. (2016·南通三模)下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是( )A. 應(yīng)根據(jù)微生物代謝類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)基并控制好培養(yǎng)基pHB.

3、 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已滅菌處理的材料用具與周?chē)锲方佑|C. 待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,在酒精燈火焰附近倒平板D. 使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄6. 下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的敘述,錯(cuò)誤的是( )A. 培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行滅菌B. 培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝到培養(yǎng)皿C. 溶化瓊脂時(shí)不能使培養(yǎng)基溢出或燒焦D. 高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時(shí)應(yīng)按順時(shí)針?lè)较蛞来涡o螺栓7. (2016·南京一模)下列有關(guān)用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的敘述,正確的是( ) 都需要用固體培養(yǎng)基 都需要使用接種針進(jìn)行接種 都需要在火焰旁進(jìn)行接種 都可以用菌落數(shù)來(lái)計(jì)數(shù)活菌A. B. C. D. 8

4、. (2016·南通二模)在分離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中,劃線(xiàn)接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如下圖。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A. 接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B. 連續(xù)劃線(xiàn)的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落C. 接種過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次D. 甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€(xiàn)的起始位置9. (2016·南京三模)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠(chǎng)產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A. 使用平板劃線(xiàn)法可以在上獲得單個(gè)菌落B.

5、如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用稀釋涂布平板法C. 圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源D. 微生物培養(yǎng)前,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行消毒處理10. (2016·蘇州一模)科研人員利用實(shí)驗(yàn)室保藏的酵母及市場(chǎng)上出售的面包酵母菌種,設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn),成功培育出能在-20 條件下冷凍保存56 d,存活率達(dá)到90%以上的耐凍性面包酵母菌菌種。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )A. 酵母菌能利用蛋白胨作為碳源與氮源B. 在配制培養(yǎng)基時(shí)可選擇添加適宜種類(lèi)和濃度的抗生素C. 應(yīng)將不同來(lái)源的菌株接種到培養(yǎng)液后置于-20 條件下冷凍保存56 dD. 應(yīng)采用稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法分別測(cè)定冷凍培養(yǎng)前后的

6、活菌數(shù)二、 多項(xiàng)選擇題11. (2016·泰州一模)下列操作中,能防止雜菌污染的有( )A. 早期胚胎的培養(yǎng)液中添加維生素B. 分離酵母菌的培養(yǎng)基中添加青霉素C. 腐乳裝瓶腌制時(shí)在近瓶口處加大用鹽量D. 微生物培養(yǎng)時(shí)在酒精燈火焰旁倒平板12. (2017·啟東模擬)下列有關(guān)平板劃線(xiàn)接種法的操作,正確的是( )A. 將接種環(huán)放在火焰上灼燒B. 將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C. 蘸取菌液和劃線(xiàn)要在火焰旁進(jìn)行D. 劃線(xiàn)時(shí)要將最后一區(qū)的劃線(xiàn)與第一區(qū)的劃線(xiàn)相連13. (2016·淮安模擬)某生物科技小組的同學(xué)用剛果紅染色法從土壤中分離得到了能夠分解纖維素的微生物,下

7、列有關(guān)此實(shí)驗(yàn)歷程的闡述,錯(cuò)誤的是( )A. 本實(shí)驗(yàn)既可以起到選擇培養(yǎng)的作用又可以起到鑒別培養(yǎng)的作用B. 纖維素的分解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖能與剛果紅作用形成紅色的復(fù)合物C. 涂布平板時(shí),應(yīng)用涂布器沾少量菌液并轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿以使菌液涂布均勻D. 應(yīng)只選擇平板中有較大透明圈的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)三、 非選擇題14. (2016·蘇州一模)某研究小組將一組相同圓紙片放入不同濃度的麥迪霉素(一種抗生素)溶液中浸泡后,放在接種有大腸桿菌的培養(yǎng)基上培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖1。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題: (1) 將裝有培養(yǎng)基的滅菌包裝入高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),注意不要裝得太擠,以免因 而影響滅菌的效果。加熱初期,必須將滅菌鍋

8、內(nèi)的冷空氣排盡,否則將因 而影響滅菌的效果。倒平板時(shí),待平板冷卻凝固后,應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置,并用記號(hào)筆在 上標(biāo)明培養(yǎng)基的種類(lèi)、培養(yǎng)日期、平板上樣品的稀釋度、培養(yǎng)微生物名稱(chēng)及制作者姓名等信息。 (2) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯的是濃度為 (填圖1中序號(hào))的麥迪霉素。 (3) 該實(shí)驗(yàn)中,宜使用 法接種大腸桿菌,在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時(shí)要特別注意進(jìn)行無(wú)菌操作。為了避免無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,對(duì)圓紙片的要求是 。 (4) 該研究小組運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法,還研究了相同濃度的三種不同抗生素A、B、C對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響。請(qǐng)?jiān)谏蠄D2以圖示的方法表示這一處理方案(可模仿圖1中圖示并加以必要注解的方法

9、)。15. (2016·常州一模)自生固氮菌可不與其他植物共生,能獨(dú)立完成固氮作用,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的用途。研究人員從土壤中篩選高效的自生固氮菌株,并對(duì)其固氮能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1) 在配制含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過(guò)程中,下列選項(xiàng)不需要的是 (填序號(hào))。 酒精燈 接種環(huán) 高壓蒸汽滅菌鍋 棉塞(2) 要從土壤樣品中分離出自生固氮菌,在獲得土壤浸出懸液后,可以采用稀釋涂布平板法將菌液涂布于 培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。 (3) 在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不宜過(guò)多的原因是 。 (4) 涂布培養(yǎng)4 d后,可通過(guò)觀(guān)察 的形態(tài)特征來(lái)統(tǒng)計(jì)土壤中自生固氮菌的種類(lèi)。 (5) 為了進(jìn)

10、一步篩選高效固氮菌,研究人員將上述獲得的等量的4種固氮菌分別接種到等量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)相同時(shí)間后,對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)并測(cè)定培養(yǎng)液中的含氮量,結(jié)果見(jiàn)下表:甲菌乙菌丙菌丁菌菌量/(個(gè)·mL-1)2.1×1052.5×1051.8×1052.0×105含氮量/K3.324.385.345.32 培養(yǎng)過(guò)程中需不斷振蕩的目的是 。 可以采用 方法對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù),假設(shè)計(jì)數(shù)室長(zhǎng)和寬均為1 mm,深0.1 mm,每個(gè)小方格中平均有7個(gè)固氮菌,則10 mL培養(yǎng)液中有固氮菌的數(shù)量為 個(gè);如果小方格中固氮菌的數(shù)量太多,無(wú)法數(shù)清,則應(yīng) 。 由上述結(jié)果可知,

11、菌的固氮效率最高。 第2講 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1. B 【解析】 各種微生物培養(yǎng)基的配方中必須包含碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽,但不一定有瓊脂。2. D 【解析】 用酒精擦拭雙手屬于使用化學(xué)藥劑消毒;用氯氣消毒水源也屬于使用化學(xué)藥劑消毒;實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行,因?yàn)楦邷乜煞乐闺s菌污染;玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)等應(yīng)用干熱滅菌法滅菌,利用酒精擦拭不能將所有微生物殺滅。3. D 【解析】 若培養(yǎng)基含伊紅美藍(lán),大腸桿菌菌落呈黑色或紫黑色且有金屬光澤,A錯(cuò)誤;自來(lái)水中大腸桿菌濃度是165÷5=33個(gè)·L-1,因?yàn)閮蓚€(gè)或多個(gè)大腸桿菌可能長(zhǎng)成一個(gè)菌落,因此比真實(shí)值偏小,B錯(cuò)誤;為了提高

12、準(zhǔn)確度,需設(shè)重復(fù)實(shí)驗(yàn),同時(shí)需要設(shè)置空白對(duì)照,C錯(cuò)誤;若培養(yǎng)基菌落數(shù)目大于300,可適當(dāng)減少自來(lái)水量,D正確。4. C 【解析】 無(wú)機(jī)碳源不提供能量;有些物質(zhì)可以既作碳源又作氮源,如牛肉膏;自然界中一些微生物可進(jìn)行化能合成作用,如硝化細(xì)菌,能以無(wú)機(jī)氮源合成自身物質(zhì),同時(shí)通過(guò)氧化外界無(wú)機(jī)物獲得生長(zhǎng)所需能量;無(wú)機(jī)物也可提供碳源和氮源,如碳酸鹽和硝酸鹽等。5. C 【解析】 培養(yǎng)基冷卻到50 左右即可倒平板。6. D 【解析】 制備培養(yǎng)基滅菌時(shí),培養(yǎng)基應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH后滅菌,A正確;培養(yǎng)基在分裝到培養(yǎng)皿之前要先進(jìn)行滅菌處理,以防止雜菌的污染,B正確;溶化瓊脂時(shí)要用玻璃棒攪拌,防止瓊脂燒焦,攪拌的過(guò)程不能

13、讓瓊脂溢出,C正確;高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時(shí)要以?xún)蓛蓪?duì)稱(chēng)的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓,使螺栓松緊一致,而不是依次旋緊,D錯(cuò)誤。7. B 【解析】 平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌都需要用固體培養(yǎng)基,在火焰旁進(jìn)行接種,防止雜菌污染;平板劃線(xiàn)法需要使用接種針進(jìn)行接種,只能分離微生物,不能計(jì)數(shù);稀釋涂布平板法需要用涂布器接種,可根據(jù)菌落數(shù)來(lái)計(jì)數(shù)活菌。8. D 【解析】 在分離、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中,接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌;連續(xù)劃線(xiàn)的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落;接種過(guò)程中,接種前要灼燒,每次劃線(xiàn)后均需灼燒,至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次;據(jù)甲和乙對(duì)比,甲中d區(qū)域?yàn)閯澗€(xiàn)的起始位置。9. D 【

14、解析】 微生物培養(yǎng)前,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌處理。10. D 【解析】 蛋白胨可以提供碳源與氮源;配制培養(yǎng)基時(shí)可添加適宜種類(lèi)和濃度的抗生素以防止細(xì)菌污染;將不同來(lái)源的菌株接種到培養(yǎng)液后置于-20 條件下冷凍保存56 d,可以篩選出耐凍性面包酵母菌菌種;只有稀釋涂布平板法可以測(cè)定活菌數(shù)。11. BCD 【解析】 早期胚胎的培養(yǎng)液中添加維生素是為了提供營(yíng)養(yǎng),加入抗生素能防止雜菌污染;青霉素可以抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)從而防止雜菌污染;腐乳裝瓶腌制時(shí)在近瓶口處加大用鹽量及在酒精燈火焰旁倒平板都能防止空氣中的雜菌污染。12. ABC 【解析】 平板劃線(xiàn)法接種時(shí)在每次劃線(xiàn)前都需要將接種環(huán)進(jìn)行滅菌,殺死

15、殘留的菌種以確保每次劃線(xiàn)的菌種均來(lái)自上次劃線(xiàn)的末端,以達(dá)到稀釋的目的,注意不要將最后一區(qū)的劃線(xiàn)與第一區(qū)相連。13. BCD 【解析】 培養(yǎng)基中加入纖維素起到了選擇培養(yǎng)的作用,培養(yǎng)基中加入的剛果紅染液又對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行鑒別,A正確;剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無(wú)法形成,B錯(cuò)誤;涂布平板時(shí),將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后,冷卻810 s再用,不能沾少量菌液,C錯(cuò)誤;應(yīng)只選擇平板中有較大透明圈的菌落進(jìn)行純化培養(yǎng),D錯(cuò)誤。14. (1) 影響蒸汽流通 達(dá)不到規(guī)定溫度 皿底 (2) (3) 稀釋涂布平板 大小、質(zhì)地相同 (4) 見(jiàn)下圖 【解析】

16、 (1) 高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),裝有培養(yǎng)基的滅菌包裝入時(shí)不能裝得太擠,否則會(huì)因影響蒸汽流通而影響滅菌的效果。加熱初期必須將滅菌鍋內(nèi)的冷空氣排盡,否則會(huì)因達(dá)不到規(guī)定溫度而影響滅菌效果。培養(yǎng)基的種類(lèi)、培養(yǎng)日期、平板上樣品的稀釋度、培養(yǎng)微生物名稱(chēng)及制作者姓名等信息要用記號(hào)筆在皿底上標(biāo)明。(2) 由圖1可以看出,濃度為的麥迪霉素浸泡后的圓紙片周?chē)该魅ψ畲?對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯。(3) 該實(shí)驗(yàn)用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。為了避免無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,圓紙片的大小、質(zhì)地要相同。(4) 研究相同濃度的三種不同抗生素A、B、C對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響,可以將一組相同圓紙片分別放入等量的無(wú)菌水、

17、抗生素A、B、C溶液中浸泡后,放在接種有大腸桿菌的培養(yǎng)基上。15. (1) (2) 缺氮 (3) 培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果 (4) 菌落 (5) 讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸 抽樣檢測(cè) 2.8×108 對(duì)培養(yǎng)液稀釋后計(jì)數(shù) 丙【解析】 (1) 在配制含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí)需要將培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中用棉塞塞住瓶口,再用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌。倒平板時(shí),為了防止雜菌污染需要在酒精燈旁操作。接種環(huán)在進(jìn)行平板劃線(xiàn)時(shí)會(huì)用到。(2) 因?yàn)樽陨痰軌颡?dú)立進(jìn)行固氮,所以用缺氮培養(yǎng)基可以篩選分離自生固氮菌。(3) 為了防止培養(yǎng)基表面的菌懸液出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果,在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不宜過(guò)多。(4