農(nóng)林專業(yè) 組織培訓(xùn)

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2、維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。6（愈傷組織）： 植物在受傷之后，在傷口表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞，在組織培養(yǎng)中，是指在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序的薄壁細(xì)胞團(tuán)。7（愈傷組織培養(yǎng)）:將一個細(xì)胞、一塊組織或一個器官的細(xì)胞，通過去分化形成愈傷組織，并在體外培養(yǎng)使之再分化成植株的技術(shù)。8（脫分化）：失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂，形成無分化的細(xì)胞團(tuán)即愈傷組織的現(xiàn)象9(初代培養(yǎng))：即無菌接種完成后，外植體在適宜的光、溫、氣等條件下被誘導(dǎo)成無菌短枝、不定芽、胚狀體或原球莖的過程。

3、10(繼代培養(yǎng))：中間繁殖體由于數(shù)量有限，所以需要將他們切割、分離后轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中培養(yǎng)增殖，這個過程稱為繼代培養(yǎng)。11（母液):指將所用培養(yǎng)基配方的化學(xué)成分按一定比例配成的濃縮液。12(大量元素): 指植物正常生長發(fā)育需要量或含量較大的必需營養(yǎng)元素。13(胚狀體): 離體培養(yǎng)條件下，沒有經(jīng)過受精過程，但是經(jīng)過了胚胎發(fā)育過程所形成的胚狀類似物14(植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì))：人工合成的能調(diào)節(jié)植物的生長、分化、發(fā)育的化學(xué)物質(zhì)15(微量元素）：習(xí)慣上把研究體系(礦物巖石等)中元素含量小于0.1%稱為微量元素二、填空題1、一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"

4、_脫分化3、32.在組織培養(yǎng)中,ZT和GA必須用_過濾_法滅菌，而接種室空間采用_紫外線照射_或_ 甲醛熏蒸_法滅菌6、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小,可分為_普通莖尖_培養(yǎng)和_莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型。8、不同的滅菌劑其滅菌的機(jī)理一般不一樣，次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生_Cl+（clo-）_來殺菌的；升汞是靠_汞離子_來達(dá)到滅菌目的。9、去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_組培法_兩種方法，當(dāng)把二者結(jié)合起來脫毒效果最好。11、在組織培養(yǎng)中，非洲菊是靠_從生芽_的方式進(jìn)行繁殖的，而蝴蝶蘭是以_原球莖_的方式進(jìn)行快繁的。14、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過程中是否需要光，可分為_適光_培養(yǎng)和_嗜

5、光_培養(yǎng)。17、通過莖尖培養(yǎng)脫毒苗的過程中，切取莖尖的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_反比_。18、在無毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_正比_。21、愈傷組織的形態(tài)發(fā)生有_器官_和_體細(xì)胞胚發(fā)生_兩種情況。22、用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時溫度可以設(shè)在_80_的溫度范圍內(nèi)，而若用它高溫干燥滅菌則需在_150_的溫度下13小時；烘干植物材料的溫度是_60_。23、一個已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"_脫分化24、植物的胚胎培養(yǎng)，包括_胚胎_培養(yǎng)、_幼胚_(dá)培養(yǎng)、_胚乳_培養(yǎng)、_胚珠_培養(yǎng)。25、幼胚培

6、養(yǎng)時，其發(fā)育過程有_早熟萌發(fā)_、_胚性萌發(fā)_、_形成愈傷_三種方式。26、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對象分為_組織培養(yǎng)_、_器官培養(yǎng)_、_細(xì)胞培養(yǎng)_、_原生質(zhì)體培養(yǎng)_等幾種類型。27、1902年德國植物生理學(xué)家Haberlandt第一次提出植物_細(xì)胞具有全能性_的理論概念；1943年White提出植物細(xì)胞“_全能性_”學(xué)說，并出版了植物組織培養(yǎng)手冊，從而使植物組織培養(yǎng)成為一門新興的學(xué)科。28、細(xì)胞全能性是指植物的每個細(xì)胞都具有該植物的_全部遺傳物質(zhì)_和_形成完整植株的潛在_的能力。29、6-BA / NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向，比值低時促進(jìn)_根_的生長，這時_脫分化_占主導(dǎo)地位；比值高促進(jìn)_芽

7、_的生長，這時_分化_占主導(dǎo)地位。30、在組織培養(yǎng)中，不耐熱的物質(zhì)用_過濾_法滅菌，而培養(yǎng)基常用_濕熱滅菌_法滅菌。31、組織培養(yǎng)中有三大不易解決的問題，它們分別是_黃化_、_褐化_、玻璃化_。1960年,英國學(xué)者Cocking用_真菌纖維素酶酶解_分離原生質(zhì)體成功,從而創(chuàng)新原生質(zhì)體的培養(yǎng)技術(shù)。三、簡答題1、（培養(yǎng)基一般包括哪些基本成分）?無機(jī)鹽、有機(jī)物、水天然復(fù)合物、培養(yǎng)基的支持材料。2、（莖尖脫毒的基本原理是什么）？分生組織中無微管系統(tǒng)細(xì)胞間通過胞間連絲擴(kuò)散慢分生細(xì)胞中，代謝性高，病毒無法復(fù)制莖尖中存在的高水平內(nèi)源生長素，抑制病毒增長莖尖“病毒鈍化系統(tǒng)”活性高3、（植物組織培養(yǎng)所需的無機(jī)物

8、質(zhì)有哪些元素)？ 大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S. 微量元素：Fe、Mn、Cu、Mo、Zn、Co、B.4、(植物組織培養(yǎng)所需的有機(jī)物質(zhì)有哪些)？碳源、維生素、肌醇、氨基酸、天然有機(jī)復(fù)合物。5、(瓊脂在固體培養(yǎng)中有什么作用）？在固體培養(yǎng)時瓊脂是最好的固化劑。瓊脂的用量在6 10g/L， 若濃度太高，培養(yǎng)基就會變得很硬，營養(yǎng)物質(zhì)難以擴(kuò)散到培養(yǎng)的組織中去。若濃度過低，凝固性6、（植物組織培養(yǎng)的接種室設(shè)置如何）？接種室面積應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模而定，要求干爽安靜、清潔明亮、墻面光滑平整、地面平坦無縫。 設(shè)計時注意問題:(1)根據(jù)工作量的大小決定接種間的面積，不宜過大，可多設(shè)幾個小接種間。(2)

9、 為便于無菌操作和提高接種的工作效率，以選用平流風(fēng)式單人單面超凈工作臺為宜。(3)在接種車間內(nèi)可設(shè)計一個紫外光消毒間，與培養(yǎng)間相鄰。(4) 在接種車間外設(shè)置風(fēng)淋室并配備定的防火設(shè)備。7、（怎樣對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌）？將裝好培養(yǎng)基的組培瓶放入框內(nèi)，放入高壓鍋關(guān)好鍋蓋。高壓滅菌開始時，先打開排氣口，待熱水蒸氣排出數(shù)分鐘后，關(guān)閉閥門滅菌，121度，20分鐘。待壓力降到0后放氣。在一定冷卻時間后就可以打開高壓鍋了。8、（舉出五種以上植物培養(yǎng)所需的常用設(shè)備)？純水器、電磁爐、天平、高壓滅菌鍋、超凈工作臺9、（MS培養(yǎng)基的特點(diǎn)是什么）？其無機(jī)鹽和離子濃度較高，為較穩(wěn)定的平衡溶液。其養(yǎng)分

10、的數(shù)量和比例較合適，可滿足植物的營養(yǎng)和生理需要。它的硝酸鹽含量比其他培養(yǎng)基高，廣泛地應(yīng)用于植物的器官、花藥、細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，效果良好。有些培養(yǎng)基是由它演變而來的。10、(配制母液應(yīng)注意什么問題)？ 例如將大量元素母液可配制成濃度10倍母液，用分析天平按培養(yǎng)基配方稱取藥品，分別加100mL左右蒸餾水溶解后，再用磁力攪拌器攪拌，促進(jìn)溶解。注意Ca2+和PO3-4，易發(fā)生沉淀。然后倒入1000mL定容瓶中，再加水定容至刻度，成為10倍母液。注意事項:配制時注意一些離子之間易發(fā)生沉淀配制母液時要用蒸餾水或重蒸餾水。藥品應(yīng)選取等級較高的化學(xué)純或分析純母液配好后放入冰箱內(nèi)低溫保存，用時再按比例稀釋。1

11、1、(植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用有哪些方面)？植物體的無性快速繁殖及脫毒；花粉培養(yǎng)和單倍體育種；人工種子；藥用植物的工廠化生產(chǎn)；原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交。四、論述題（共10題）表1 母液配制配方成分規(guī)定量(mg/L)擴(kuò)大倍數(shù)稱取量(g)母液體積(ml)配制1L培養(yǎng)基吸取量（ml）CaCl2.2H2O440501150020KI0.832000.03322005NAA0.01mg/ml1100某組培公司接到意向性訂單，要求在一年內(nèi)提供50萬種苗，已知該公司現(xiàn)有母苗約500株，該植物的增殖系數(shù)為5,繼代周期為8周，污染損耗率為3%，移栽生根成活率為75%，請問該訂單是否能接，如能接請指定生產(chǎn)計

12、劃，如不能，請說出合理理由。日期/d繼代次數(shù)繼代增殖苗成活苗0560500*5*（1-3%）=242511212425*5*97%=11761168211761*5*97%=57042224357042*5*97%=276654276654*（2/3）*75%*97%=134177280492218*5*97%=447257447257*(6/7)*75%*97%=278896336563893*5*97%=309881309881*75%*97%=225438合計 >50萬 二、簡答題 1、(什么是植物組織培養(yǎng)）?指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無

13、菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。 3、 （如何防止組培污染）?改善環(huán)境條件嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作嚴(yán)查接種材料在培養(yǎng)基中加入適量的抗生素利用培養(yǎng)基中高鹽或高糖的濃度，抑制微生物的生長 減少培養(yǎng)基中的某些有機(jī)成分，可抑制微生物的生長繁殖  5、(什么是植物激素?有什么作用）?植物激素是由植物自身代謝產(chǎn)生的一類有機(jī)物質(zhì)，并自產(chǎn)生部 位移動到作用部位，在極低濃度下就有明顯的生理效應(yīng)的微量物 質(zhì)，具有兩重性，即可促進(jìn)生長又可抑制生長。 6、 （簡述培養(yǎng)基的制作?簡述培養(yǎng)基的滅菌）?取出母液并按順序排好，并將有

14、機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)貯液溶化待用。再取出潔凈各種的玻璃器皿如：燒杯，玻璃棒，移液管，移液槍，量筒放在指定位置。取一個大燒杯，倒入三分之一的純水，并依母液所需量按順序加入，并不斷攪拌。再加入蔗糖，瓊脂，并加熱使其完全溶解。加入植物生長調(diào)節(jié)劑，用純水定容。調(diào)節(jié)pH，用預(yù)先配制好的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。將培養(yǎng)基分裝到各培養(yǎng)器皿，并封好瓶口。將培養(yǎng)基裝入高壓滅菌鍋中，待滅菌完成后取出備用7、（植物組織培養(yǎng)有哪些特點(diǎn)）?1、組培技術(shù)是無菌操作技術(shù)；2、組培材料處于完全的異養(yǎng)狀態(tài)；3、組培材料可以是離體狀態(tài)的器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體；4、組培培養(yǎng)物可以形成克隆也可以進(jìn)行莖芽增殖或生根；5、組培容器內(nèi)的

15、氣體和環(huán)境氣體可以通過封口材料進(jìn)行交換，相對濕度通常是幾乎100%6、組培的環(huán)境溫度，光照強(qiáng)度和時間都是人為設(shè)定的，其參數(shù)可調(diào)。8、（生長素有哪些?在植物組織培養(yǎng)中有什么作用）?生長素在植物組織培養(yǎng)中生長素一方面用于誘導(dǎo)愈傷組織的形成和生根，另一方面是與一定量的細(xì)胞分裂素配合共同誘導(dǎo)不定芽的分化、側(cè)芽的萌發(fā)與生長以及某些植物胚狀體的誘導(dǎo)。 9.（在植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分裂素和生長素各有什么作用）?生長素可刺激形成層細(xì)胞分裂；刺激枝的細(xì)胞伸長、抑制根細(xì)胞生長；促進(jìn)木質(zhì)部、韌皮部細(xì)胞分化,促進(jìn)插條發(fā)根、調(diào)節(jié)愈傷組織的形態(tài)建成.細(xì)胞分裂素的生理作用主要是引起細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)芽的形成和促進(jìn)芽的生長 12.（簡述外植體滅菌的一-般流程.）洗衣粉浸泡-流水沖洗1020min或更長時間70%75%酒精中浸泡30s0.1%0.2%氯化汞液中浸泡10min左右、在10%的次氯酸鈉、飽和漂白粉浸泡30min左右蒸餾水沖洗45次 三、問答題 1、（植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用有哪些）?1. 種苗快速繁殖 2.無病毒苗的培養(yǎng)3.倍性育種縮短育種年限雜種優(yōu)勢明顯4.克服遠(yuǎn)緣雜交的不親合性和不孕性5.保存種質(zhì) 6