蒲公英中總黃酮提取工藝的研究

1、蒲公英中總黃酮提取工藝的研究         【摘要】  目的對蒲公英中總黃酮的提取工藝進行優(yōu)選。方法采用正交實驗設計，以總黃酮的含量為指標，對提取溶劑、料液比、提取溫度、提取時間4種因素進行研究。結果蒲公英細粉用甲醇，料液比120，在70下超聲提取10 min，總黃酮的提取率較高。結論此工藝操作簡便，重現性好,穩(wěn)定可行。 【關鍵詞】  蒲公英；總黃酮；提取工藝；正交實驗蒲公英系菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand-Mazz，堿地蒲公英Taraxacum sinicu

2、m Kitag.或同屬數種植物的干燥全草。蒲公英含有多種活性成分,如蒲公英甾醇、蒲公英苦素、黃酮類、咖啡酸、綠原酸和多糖等。蒲公英總黃酮對宛式擬青霉菌和枯草桿菌具有良好的抑菌作用1，并具有重要的抗氧化作用，能有效清除超氧陰離子自由基。近些年來文獻報道中對蒲公英總黃酮的提取及含量測定等研究甚少，本文以總黃酮的含量為考察指標，采用超聲提取正交實驗設計對蒲公英中總黃酮的提取工藝進行了研究，確定最佳提取工藝，以提高對黃酮類成分的有效利用率。1 儀器與試劑2 方法與結果2.1 因素水平表對溶劑、料液比、提取溫度、提取時間4個因素，每個因素3個水平進行考察研究，見表1。表1  正交實驗因素水平（

3、略）2.2 供試品溶液制備將蒲公英藥材粉碎，過80目篩，精密稱取粉末1g共9份，按照正交實驗L9(34)設計方案實驗，見表2。用對應溶劑和料液比，在對應溫度下，提取相應時間，放冷，補足重量。過濾,置蒸發(fā)皿上蒸干，甲醇定容至20 ml，精密量取3 ml置25 ml容量瓶中，加蒸餾水至刻度，混勻，即得 。表2  L9(34)正交實驗設計及結果分析（略）2.3 對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品10.90 mg置25 ml容量瓶中，加5 ml甲醇溶解，蒸餾水定容至刻度，即得0.218 mg/ml的對照品溶液。2.4 測定波長選擇取蘆丁對照品溶液3 ml置25 ml容量瓶中，加蒸餾水6 ml

4、，加5%亞硝酸鈉溶液1 ml，放置6 min；加10%三氯化鋁溶液1 ml，放置6 min；再加氫氧化鈉試液10 ml，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，放置15 min2，用紫外可見分光光度計在200700 nm進行全波長掃描，最大吸收波長為510 nm。表3  方差分析（略）         2.5 線性關系考察精密吸取上述對照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml，分別置25 ml容量瓶中，依法在510 nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方

5、程：Y= 8.842 6 X-0.000 2，r2= 0.999 8 ,線性范圍為 0.0080.053 mg/ml。2.6  樣品測定分別取9份供試品溶液3 ml于25 ml容量瓶中，方法同“2.4”項，在510 nm波長處測定吸光度計算總黃酮含量。結果見表2。   由極差分析得知，影響因素的大小為BACD,即料液比為最主要的影響因素，溶劑次之，提取時間對結果影響較小。表3方差分析表明，提取溶劑、料液比對結果的影響具有極顯著性意義，提取溫度對實驗結果有顯著意義。正交設計實驗結果顯示提取工藝以A1B2C3D2組合為最佳，但D因素影響最小，且3個水平差別不大，為節(jié)省

6、能源，選用D1（超聲10 min）。即最佳工藝為20倍量甲醇，在70超聲提取10 min。2.7 穩(wěn)定性實驗精密稱取蒲公英粉末1 g，依法測定。每隔10 min測定1次，共測定7次。結果見表4。表4  穩(wěn)定性實驗結果（略）結果顯示,RSD=0.89%，表明樣品在70 min內穩(wěn)定。2.8 驗證實驗精密稱取蒲公英粉末1 g于具塞錐形瓶中，按最佳條件提取，依法進行測定，計算樣品中總黃酮的含量。結果見表5。表5  驗證實驗結果（略）結果顯示：RSD=0.50%,表明此條件重復性良好。3 結論與討論   蒲公英中總黃酮的最佳提取工藝，以20倍量的甲醇為溶劑，在70下超聲提取10 min。樣品中總黃酮的平均含量為53.48 mg·g-1（RSD=0.50%）。   黃酮類化合物的提取，文獻報道大多為溶劑萃取法、堿提酸沉法、碳吸附法提取、超臨界CO2流體萃取法，這些提取方法有的操作費時，有的儀器價格昂貴，不宜普及，本研究采用超聲法提取，利用超聲波產生的強烈振動，強烈的空化效應，較高的加速度和攪拌作用等，使蒲公英中黃酮類成分迅速溶出，大大縮短了提取時間，能耗低，提取效率高，且不破壞有效成分。該方法設備簡單，操作簡便，是一種較為理想的提