尿液分析和臨床顯微鏡檢查的質(zhì)量控制流程

1、尿液分析和臨床顯微鏡檢查的質(zhì)量控制流程Document number ： WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT尿液分析檢查的質(zhì)量控制流程 尿液分析（Urinalysis）是尿液（Urina）和分析（Analysis）二詞的組 合。中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)大辭典對(duì)尿液分析明確定義：.用目測(cè)、理學(xué)、化 學(xué)（應(yīng)強(qiáng)調(diào)定性，定量）、顯微鏡及其他儀器（各種尿分析儀，滲 透壓計(jì)等）對(duì)尿液標(biāo)本進(jìn)行分析”。1 .尿液分析的準(zhǔn)確程度將直接影響到臨床診斷，提高尿液分析檢查 的質(zhì)量是關(guān)系到臨床檢查的重要環(huán)節(jié)。2 .質(zhì)量控制的目的是實(shí)驗(yàn)室確保為臨床醫(yī)生提供客觀，可靠信息去 診療病人。3 .質(zhì)量控制是質(zhì)量管理的

2、一個(gè)組成部分，是致力于使質(zhì)量特征符合 質(zhì)量要求所采取的一切措施，以確保生產(chǎn)出來(lái)的產(chǎn)品滿足要求的過 程。要保證尿液分析檢查質(zhì)量，一定要建立一套完整的，適合于尿 液分析管理措施，實(shí)行分析前、分析中、分析后全程的質(zhì)量控制。 一、分析前的質(zhì)量控制 （-）標(biāo)本的采集與處理尿液標(biāo)本的采集：尿液標(biāo)本的采集要求新鮮。住院病人尿常規(guī)檢測(cè) 最好留取清晨第一次中段尿；門診或急診病人可隨時(shí)留取，但在標(biāo) 本容器上必須注明留取時(shí)間。L尿液標(biāo)本的收集：尿液標(biāo)本的收集容器要清潔。使用清潔一次性 有蓋尿標(biāo)本的容器，改變目前敞開無(wú)蓋的尿杯。容器上應(yīng)貼有病人 姓名、驗(yàn)聯(lián)號(hào)（或條碼）及注明標(biāo)本留取時(shí)間的標(biāo)簽。2.尿液標(biāo)本的送檢：尿液

3、標(biāo)本留取后應(yīng)及時(shí)送檢。一般尿液標(biāo)本留 取至少為30ml,應(yīng)在2h內(nèi)檢查完畢，以免細(xì)菌繁殖及有形成分破 壞，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)到，尿液標(biāo)本留取置25C。，2h后會(huì)出現(xiàn)如下改變： 外觀出現(xiàn)尿色變深，透明度變混或尿氣味帶有氨味； 化學(xué)成分出現(xiàn)葡萄糖,膽紅素、尿膽原、維生素C下降，亞硝 酸鹽升高，PH與蛋白質(zhì)升高或下降； 鏡檢出現(xiàn)RBC、WBC管型下降，結(jié)晶或細(xì)菌升高。3 .尿液標(biāo)本的保存：尿液標(biāo)本如不能及時(shí)送檢或分析，必須冷藏或 防腐保存。冷藏可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖，維持尿液PH恒定，使尿中 有形成分基本不變，但4C。條件下冷藏不得超過8h,有時(shí)冷藏會(huì)導(dǎo) 致鹽類析出產(chǎn)生沉淀，影響沉渣檢查?；瘜W(xué)防腐甲苯：通常用于

4、 化學(xué)成分的保存；甲醛：用于尿沉渣檢驗(yàn)標(biāo)本的保存。4 .尿液標(biāo)本接收：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立嚴(yán)格的標(biāo)本接收制度，工作人員在 接收標(biāo)本時(shí)，必須檢查：標(biāo)本內(nèi)容器是否符合要求標(biāo)記內(nèi)容與醫(yī)生所填寫化驗(yàn)單是否一致留尿到接收標(biāo)本時(shí)間是否過長(zhǎng)標(biāo)本是否被污染近期是否給服用對(duì)尿液分析有影響的藥物和其它物質(zhì)尿量不少于30ml:特殊病例不能達(dá)到此要求時(shí)（如小兒、燒 傷，腎衰無(wú)尿期等）應(yīng)在報(bào)告單上注明收到尿量及檢查方法。 尿液標(biāo)本的接收要求：凡留尿超過2h （未采取相應(yīng)的保存措施）， 未注明留尿時(shí)間或尿量不夠的標(biāo)本應(yīng)拒收。檢驗(yàn)科收到合格的標(biāo)本 后應(yīng)簽收，在送驗(yàn)單上注明留尿時(shí)間、送檢時(shí)間。須說明近期是否 給服用對(duì)尿液分析有影響的

5、藥物和其它物質(zhì)。（二）使用儀器、器材、試劑的規(guī)范要求原則：選用國(guó)家有關(guān)部門批準(zhǔn)上市的儀器和試劑；A檢驗(yàn)用儀器和計(jì)量器具均需經(jīng)校準(zhǔn)后方能使用，且可溯源；選用的試紙條、校準(zhǔn)條盡可能與儀器配套；有條件時(shí)，要對(duì)所選用的儀器和試劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。1、收集標(biāo)本的容器收集和運(yùn)送尿液的容器應(yīng)由不與尿液成份發(fā)生反應(yīng)的惰性材料制成，應(yīng)具備以下條件： 潔凈、防漏、防滲，一次性使用 容積應(yīng)50ml 園形開口的直徑4cm具有較寬的底部。盡可能使用具有安全、易于開啟的密封裝置。2、顯微鏡在尿分析實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)使用具有下列特點(diǎn)的高質(zhì)量顯微鏡： 雙目鏡筒內(nèi)置光源機(jī)械載物臺(tái)，使玻片易于平穩(wěn)移動(dòng):基本的物鏡組（10X和40X）及目鏡組（1

6、0X/）如使用多臺(tái)顯微鏡時(shí)，應(yīng)用相同的物鏡或目鏡。3、自動(dòng)化設(shè)備尿液分析使用的自動(dòng)化設(shè)備主要有自動(dòng)尿液分析儀、自動(dòng)尿沉渣分 析儀或尿沉渣工作站等，這些儀器必須經(jīng)權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可。4、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)有條件的單位，可用帶計(jì)算機(jī)成像系統(tǒng)的顯微鏡、標(biāo)準(zhǔn)化的沉渣檢 測(cè)系統(tǒng)和相關(guān)輔助軟件來(lái)自動(dòng)處理結(jié)果。但檢查方法和尿沉渣結(jié)果 報(bào)告方法必須標(biāo)準(zhǔn)化。5、干化學(xué)試紙條所用的干化學(xué)試紙條必須優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定，要具備生產(chǎn)合格證并經(jīng)主管部 門評(píng)價(jià)。試紙條一定要有失效期，必須在有效期內(nèi)使用。（三）試紙條的性能評(píng)價(jià)1、對(duì)比試驗(yàn)將新選用的試紙條與儀器配套的試紙條做對(duì)比試驗(yàn)，符合率達(dá) 到要求才能使用。將兩系統(tǒng)的測(cè)定結(jié)果以表格形式匯總，完

7、全一致的為對(duì)角線上 的例數(shù)，判斷符合的指標(biāo)為對(duì)角線上下、左右各一檔的范圍，在此 范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)與總測(cè)定數(shù)之比為符合率。例：下表為30例樣本兩臺(tái)尿液分析儀的檢測(cè)結(jié)果的比對(duì)尿液分析儀2尿液分析儀1+2+3+4+合計(jì)1010123+4152+1563+13154+11合計(jì)112573230本例的完全符合率為：本例的符合率為：2、重復(fù)性可選用+或+濃度的質(zhì)控液連續(xù)測(cè)定10條試紙帶,只允許有一條有 差異才算合格。3、穩(wěn)定性為保證尿試紙條的穩(wěn)定性，要求必須在有效期內(nèi)使用，存放也必須 按說明書要求存放。4、敏感性與特導(dǎo)性尿試紙條中每個(gè)項(xiàng)目的試驗(yàn)敏感性與特導(dǎo)性是很重要的，在應(yīng)用過程中應(yīng)注意以下特點(diǎn)：蛋白質(zhì)膜塊只

8、對(duì)白蛋白敏感，對(duì)球蛋白不敏感，對(duì)本周氏蛋白不反 應(yīng)。葡萄糖膜塊只對(duì)葡萄糖產(chǎn)生反應(yīng)，對(duì)乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反 應(yīng)。酮體膜塊對(duì)乙酰乙酸最敏感，丙酮次之對(duì)B羥丁酸不反應(yīng)。潛血膜塊不僅對(duì)完整和破損RBC均有反應(yīng)，而且對(duì)游離Hb也反應(yīng)。白細(xì)胞膜塊僅對(duì)中性粒細(xì)胞有反應(yīng)，而對(duì)淋巴細(xì)胞無(wú)反應(yīng)。膽紅素及尿膽原膜塊靈敏度比Harrison手工法低得多。比重膜塊只能反映尿中陽(yáng)離子多少與比重計(jì)結(jié)果不一；對(duì)嬰兒等低 比重尿則不敏感。根據(jù)以上特點(diǎn)，必須區(qū)分試帶結(jié)果的涵義與傳統(tǒng)手工法的不同。臨 床根據(jù)病情應(yīng)用傳統(tǒng)手工法進(jìn)行確證。二、分析中的質(zhì)量控制是指樣本在分析過程中的質(zhì)量管理。（-）統(tǒng)一尿液分析檢查方法，規(guī)范操作其

9、內(nèi)容包括：項(xiàng)目名稱、 適用儀器、檢測(cè)原理、樣本要求、種類、保存、預(yù)處理、樣本量、 試劑及配套品、校準(zhǔn)、質(zhì)量控制，操作程序、參考值范圍、方法特 性等。1 .配備儀器標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)（SOP）（隨機(jī)附帶的原文（復(fù)印件）及儀 器檢定，自檢，校驗(yàn)等相關(guān)文件，記錄，證書等）。2 .建立儀器操作卡（用于指導(dǎo)操作人員開、關(guān)機(jī)，主要操作步驟和 維護(hù)）。3 .規(guī)范檢查方法外觀/物理分析顏色正常尿液應(yīng)為黃色和琥珀色。病理尿色應(yīng)圍繞紅色、黃色、綠色、 棕色、乳白色報(bào)告。濁度（透明度）正?；靹蚰驊?yīng)透明。其濁度可用透明、霧狀、云霧狀、渾濁報(bào)告。氣味必要時(shí)應(yīng)報(bào)告。比重(SG)建議用折射儀法作為參考方法。(當(dāng)尿液含X光線反差介

10、質(zhì)、葡萄 糖、蛋白時(shí)可使結(jié)果增高，應(yīng)予校正。ProlG/dl時(shí)SG增高,GlulG/dlSG 增高)o化學(xué)分析濕化學(xué)分析至少應(yīng)包括糖和蛋白兩項(xiàng)。尿糖可用葡萄糖氧化酶法， 條件較差者也可用班氏法：尿蛋白可用磺基水楊酸法或加熱加酸 法。干化學(xué)分析是一種簡(jiǎn)單快速，對(duì)尿半定量的檢測(cè)方法。由于生產(chǎn)尿 分析儀和使用的試劑帶廠商繁多，各廠對(duì)量級(jí)標(biāo)準(zhǔn)不一致，造成醫(yī) 院間、醫(yī)院內(nèi)測(cè)定結(jié)果差異很大。為此，在使用干化學(xué)法分析時(shí)應(yīng) 注意下列問題：標(biāo)本必須新鮮，要求在采樣后2小時(shí)內(nèi)完成。使用儀器與試劑帶應(yīng)配套，若使用不同廠商生產(chǎn)的試劑帶，必 須經(jīng)嚴(yán)格對(duì)照，確定無(wú)顯著性差異時(shí)方可代用。所用試劑帶必須優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定，要具備“三證

11、”要求：試劑條貯放于原裝容器內(nèi)，短暫暴露于直射光和室內(nèi)溫度都會(huì)使試劑條產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。參照廠商規(guī)定，要避免、防潮、干燥，并在一定溫度條件下妥 善保存。使用時(shí)一次只取出所需要的試劑帶，并立即蓋緊，多余的試劑 帶不可再放回容器中。不要合并各容器內(nèi)的試劑帶。不可觸摸試劑帶上的化學(xué)檢測(cè)塊。干擾干化學(xué)法的理化、藥物因素很多，常導(dǎo)致假陽(yáng)性，假陰性 結(jié)果出現(xiàn)，造成誤診及漏診，因此，對(duì)干化學(xué)結(jié)果，要結(jié)合臨 床資料進(jìn)行分析尿十項(xiàng)試劑帶常見產(chǎn)生假陽(yáng)性、假陰性的原因項(xiàng)目假陽(yáng)性假陰性酸堿度(PH)與食物及放置時(shí)間有關(guān)同左比重(SG)隨尿量及尿液含固體物 質(zhì)濃度、食物、藥物性 質(zhì)及尿液放置時(shí)間有 關(guān)。同左，堿性尿蛋白質(zhì)

12、(PRO)尿液PH變化可影響實(shí)驗(yàn) 結(jié)果、藥物口奎寧、瞳寧 丁、喀嚏等強(qiáng)堿尿(PH 二)、季胺鹽類尿液PH值變化可致，高 鹽濃度，本一周氏蛋 白，球蛋白，粘蛋白，青 霉素葡萄糖(GLU)尿液污染了葡萄糖、 H202、漂白粉、氧化型 清潔劑維生素O500mg/L,乙酰 乙酸400mg/L, 5-羥口引喙 乙酸，尿黑酸，阿司匹 林，左旋多巴，酮體， 高比重，低PH時(shí)。酮體(KET)苯丙酮和酚儆復(fù)合物含 - SH基物質(zhì)(4克甲丙脯 酸),BSP、L - DOPA, 頭胞類抗菌素，高度著 色尿細(xì)菌污染，尿放置時(shí)間 長(zhǎng)。膽紅素(BIL)大量氯丙嗪治療，尿中 含鹽酸偶氮哦嚏，色素 尿，尿藍(lán)母，硫酸呻跺陽(yáng)光照

13、射，尿中含維生 素 CN (250mg/L),亞 硝酸鹽，陳舊尿。酚尿膽原(URO)膽色素原，口引跺,膽紅 素，吩嗥嗪，藥物色 素，非那哦嚏，對(duì)氨苯 磺酸。陽(yáng)光照射，偶氮基色素 藥物，亞硝酸鹽，福爾 馬林。亞硝酸鹽(NIT)細(xì)菌污染，標(biāo)本放置太 久，色素尿，非那哦 咤。尿在膀胱逗留時(shí)間短， 非利用硝酸鹽微生物感 染,NIT13umol/L,尿 中維生素C云250mg/L,硝 基峽喃。紅細(xì)胞(BLO)次氯酸鹽、易熱酶干 擾，細(xì)菌過氧化物酶污 染，肌紅蛋白，氧化型 清潔劑。高濃度維生素C(N 200mg/L),高蛋白尿, 高比重尿，PH<,卡普托 利,福爾馬林，樣品末 混勻，RBC沉淀，試條

14、 Hb靈敏度達(dá)不到 150mg/Lo白細(xì)胞(LEU)福爾馬林，膚喃坦嚏， 大量膽紅素，氧化型清 潔劑。尿比重高，頭施霉素 IV、慶大霉素，四環(huán) 素，硼酸，高濃度草 酸口顯微鏡檢查尿液顯微鏡檢查是尿液有形成份確證的唯一方法3. 3. 1NCCLS對(duì)尿沉渣鏡檢范圍提出三點(diǎn)要求。醫(yī)生提出要求病人的疾病.病情或其他檢查要求。尿液分析中有任何一項(xiàng)理化檢查不正常。3. 3. 2根據(jù)CCLSLireratureGP16-A要求，達(dá)到以下條件者可 認(rèn)為是標(biāo)準(zhǔn)化操作：尿樣最佳選擇是第一次晨尿，并在未冷藏情況下2 小時(shí)內(nèi)完成檢查。尿樣本量應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，建議統(tǒng)一用10ml。離心時(shí)間建議統(tǒng)一為5分鐘，以確保同等程度的沉積

15、。離心速度建議相對(duì)離心力（RCF）約400G。留置尿沉渣樣本為（200ul）。用統(tǒng)一述語(yǔ)，報(bào)告格式，參考范圍對(duì)尿有形成份以單位體積定量報(bào)告。建議用XX細(xì)胞（或管型）/ul的報(bào)告 方式。（有利于臨床醫(yī)師對(duì)患者進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察）。在報(bào)告結(jié)果前，必須重審所有結(jié)果（包括生化結(jié)果）是否與鏡 檢結(jié)果一致，不符合的結(jié)果應(yīng)再次檢測(cè)。3. 3. 3尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括：細(xì)胞：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞（包括腎小管上皮細(xì)胞、移行上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞）、異 型細(xì)胞等。管型：透明管型、細(xì)胞管型、顆粒管型、蠟樣管 型、脂肪管型、混合管型、寬形管型等。結(jié)晶：磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶等。微生物：細(xì)菌、寄生

16、蟲（或蟲卵）、真菌、精 子、粘液等。其他：臨床醫(yī)生特殊要求的其他成份。（-）室內(nèi)質(zhì)控（IQC）通過室內(nèi)的質(zhì)控,可評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果是否可靠，報(bào)告單可否發(fā)出 及排除質(zhì)量環(huán)節(jié)中所有導(dǎo)致不滿意的原因。1、質(zhì)控物(1)自行制備方法一：收集正常人新鮮尿高壓滅菌取上清液一加入各分析成份及防腐劑一預(yù)試合格后分裝于10ml棕色安瓶 一貯放4C。冰箱備用。(穩(wěn)定性一年)。上海檢驗(yàn)中心介紹質(zhì)控物配方成份量預(yù)期值氯化鈉(AR)尿素(AR)肌酊(AR)葡萄糖(AR)+小牛血清(以白蛋白計(jì))+溶血液(血紅蛋白 150g/L)+亞硝酸鹽溶液(2g/L)+內(nèi)酮(AK)+蒸鐳水加至方法二：(北京中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院介紹)濃縮尿質(zhì)控

17、液的配制成份量期望值項(xiàng)目手工法儀器法磷酸氣二鈉 (AR)GLU+300mg/dL磷酸氣二鉀 (AR)BILneg氯化鈉(AR)KET+15mg/dL尿素(AR)SG匐萄糖(AR)ERY7-12/HPF250/ul牛血清白蛋白PH丙酮PRO+75mg/dL169g/L血紅 蛋白液UBGnorm肌酊NITneg硫柳汞 飽和苦味酸溶 液LEUYLC7-U/HPF 偶見/ HPF25/ul偶見/ HPF加醛化固定的 RBC、 WBC、YLC數(shù)9001700個(gè) /ul蒸鐳水(加 至)150ml配制后分裝安瓶(5 ml/Amp)，熔封后貯放4C。冰箱保存。臨用前將濃縮質(zhì)控液按1 ： 20稀釋后啟用。有效期

18、為6個(gè)月。(2)商品質(zhì)控物BayerCHEKSTIXTM. BIO-RADLiguichekTM .JapanQCl£2,上海伊化、長(zhǎng)春迪瑞等2、質(zhì)控方法 尿液分析儀應(yīng)選用技術(shù)性能優(yōu)良符合要求的產(chǎn)品；使用時(shí)應(yīng)嚴(yán) 格遵守操作規(guī)程，使用后對(duì)儀器做好全面清理、保養(yǎng)；使用期 間定期校正，保證儀器處于最佳狀態(tài)。 做好試劑帶的質(zhì)量管理。 每天用高、低值兩種質(zhì)控尿與常規(guī)標(biāo)本進(jìn)行平行試驗(yàn)，結(jié)果做 好質(zhì)控記錄并繪制質(zhì)控管理圖記錄。 當(dāng)發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果不符時(shí)，除核查試劑帶外，還應(yīng)注意質(zhì)控尿是否過期或混濁，進(jìn)行綜合分析。在一天內(nèi)最好使用同一份質(zhì)控品，能用“正?！焙?異常，兩種質(zhì)控物進(jìn)行試驗(yàn)則更好。 質(zhì)控物某一

19、膜塊測(cè)定結(jié)果與“靶值'相差±1個(gè)膜塊內(nèi)是允許 的，否則為失控， 質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果由'正?！弊?yōu)椤爱惓！被蛳喾?，均為失控?配套質(zhì)控物要求90%的結(jié)果完全與予定結(jié)果相符,10%的結(jié)果只 允許相差一個(gè)“級(jí)差”（如尿蛋白測(cè)定，予期結(jié)果為+,則90% 的結(jié)果應(yīng)為+, 10%的結(jié)果可為+或+）。 使用其他質(zhì)控物的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)其預(yù)定結(jié)果重新確定。 對(duì)鏡檢質(zhì)控可用自制細(xì)胞、管型質(zhì)控尿或商品尿有形成份質(zhì)控 品每天隨機(jī)用雙盲法鏡下計(jì)數(shù)是一次，觀察并記錄，與靶值參 考范圍比較，脫靶失控時(shí)即查找原因。質(zhì)控記錄日期儀器廠 家試紙條 廠家試紙條 批號(hào)期果 一現(xiàn)身質(zhì)控范圍測(cè)定結(jié)果結(jié)果判斷1+ +在控2+ +在控3+ +在控4+ +在控5+ +在控6+ +在控7+ +在控8+ +在控9+ +在控10+ +在控11+ +在控12+ +在控13+ +在控14+ +在控15+ +在控16+ +在控17+ +在控18+ +在控19+ +在控20+ +在控與預(yù) 期結(jié)果 相符18 (90%)與預(yù) 期相差 一個(gè)級(jí) 差2 (10%)室內(nèi)質(zhì)量控制圖3、失控處理第一步用質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控z在控失控II開始進(jìn)