06芳酸類非甾體抗炎藥物的分析-杭太俊藥物分析第七版

1、藥物分析藥物分析第六章第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第六章第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析芳酸類非甾體抗炎藥物的分析v非甾體抗炎藥（非甾體抗炎藥（Nosteroidal Antiinflammatory Drugs，NSAIDs）是）是一類不含有甾體骨架的抗炎藥，多數(shù)具有芳酸基一類不含有甾體骨架的抗炎藥，多數(shù)具有芳酸基本結(jié)構(gòu)。本結(jié)構(gòu)。v本章主要講芳酸類本章主要講芳酸類NSAIDs，同時講一下尼美利，同時講一下尼美利舒和對乙酰氨基酚。舒和對乙酰氨基酚。第一節(jié)第一節(jié) 典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)v 一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點一

2、、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點OOHORR(水楊酸類)OHOHO(水楊酸)(Salicylic Acid)OOHOCH3O(阿司匹林)(Aspirin)OOHOOOH(雙水楊酯)(Salsalate)FFOHOHO(二氟尼柳)(Difunisal)第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)OHNOCH3CH3甲芬那酸HMefenamic AcidOHNORH鄰氨基苯甲酸類酸性酸性酸性酸性光譜特性光譜特性第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)NROORH鄰氨基苯乙酸類NNaOOClClH雙氯芬酸鈉Diclofenac Sodium酸性酸性酸性酸性光譜特性光譜特性基團(tuán)特性基團(tuán)特性第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

3、RRCH3HOO芳基丙酸類CH3HOOCH3CH3布洛芬IbuprofenCH3HOOO酮洛芬KetoprofenCH3HOOOCH3萘普生Naproxen酸性酸性第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)NOOH3CHOCH3ClO吲哚美辛 IndometacinNRRCH3OHO吲哚乙酸類酸性酸性光譜特性光譜特性第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)NSOHCH3NROOOH苯并噻嗪甲酸類NSOHCH3NOONOH吡羅昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam水解水解光譜特性光譜特性第一節(jié)第一節(jié): 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)NO2HNSCH3OOO尼美利舒 N

4、imesulideHONCH3OH對乙酰胺基酚 Paracetamol其它非甾體類抗炎藥其它非甾體類抗炎藥水解水解光譜特性光譜特性第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗v 依據(jù)藥物理化性質(zhì)，可展開一系列鑒別方法依據(jù)藥物理化性質(zhì)，可展開一系列鑒別方法OHOHOOOOFeOH+FeCl3+ H2O+ 3HCl紫堇色一、與三氯化鐵反應(yīng)顯色一、與三氯化鐵反應(yīng)顯色阿司匹林：紫堇色阿司匹林：紫堇色雙水楊酯：紫色雙水楊酯：紫色二氟尼柳：深紫色二氟尼柳：深紫色均通過產(chǎn)生水楊酸與三氯化鐵反應(yīng)顯色均通過產(chǎn)生水楊酸與三氯化鐵反應(yīng)顯色水楊酸反水楊酸反應(yīng)應(yīng)第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗v 對乙酰胺基酚與三氯化鐵對乙酰胺基酚

5、與三氯化鐵顯藍(lán)紫色顯藍(lán)紫色HONCH3OH對乙酰胺基酚 ParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HCl藍(lán)紫色NSOHCH3NOONOH吡羅昔康 PiroxicamNSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam顯玫瑰紅色顯玫瑰紅色顯淡紫色顯淡紫色酚羥基反酚羥基反應(yīng)應(yīng)第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗二、縮合反應(yīng)顯色二、縮合反應(yīng)顯色CH3HOOO酮洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOONNO2NNO2橙紅色H2SO4-H2OH二苯甲酮結(jié)構(gòu)二苯甲酮結(jié)構(gòu)第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗v 三、重氮化三、重氮化-偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)v 對乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性條件下

6、反應(yīng)可生對乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性條件下反應(yīng)可生成對氨基酚，再與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)，之后成對氨基酚，再與亞硝酸鈉進(jìn)行重氮化反應(yīng)，之后再與堿性再與堿性-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。NHCOCH3HO+HCl+H2ONH2HOHCl + CH3COOHN2ClHO+2H2ONH2HOHClHNO2+N2ClHO+OHNaOHOHNNOH紅色偶氮化合物水解反應(yīng)水解反應(yīng)產(chǎn)生芳伯產(chǎn)生芳伯胺胺芳伯胺重氮化芳伯胺重氮化偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)重氮化重氮化- -偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl貝諾酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClH

7、ON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙紅色(三三)氧化反應(yīng)氧化反應(yīng)甲芬那酸H2SO4深藍(lán)色(O)K2Cr2O7并產(chǎn)生綠色熒光隨即變?yōu)樽鼐G色(四四)水解反應(yīng)水解反應(yīng)COOHOCOCH3Na2CO3COONaOHCH3COONa+CO2+H2SO4COOHOHH2SO4CH3COOH阿司匹林阿司匹林白色水楊酸白色水楊酸第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗v六、特征元素反應(yīng)：六、特征元素反應(yīng)：v分子中含有氯、硫等元素可以轉(zhuǎn)化為氯化物或硫分子中含有氯、硫等元素可以轉(zhuǎn)化為氯化物或硫化物進(jìn)而進(jìn)行鑒別?；镞M(jìn)而進(jìn)行鑒別。七、光譜法七、光譜法1、UV2、IR(七七) IR：阿司匹林-COOH-OH-COOHPh

8、-C鄰位取代PhN-HO-HN-HPh:C=C芳胺酚第二節(jié)第二節(jié): 鑒別試驗鑒別試驗v八、色譜法八、色譜法供試品保留時間供試品保留時間對照品保留時間對照品保留時間第三節(jié)第三節(jié): 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法一、阿司匹林和雙水楊酯生產(chǎn)工藝ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。ASAOH-CO2副產(chǎn)物水楊酸COOHOOOH雙水楊酯第三節(jié)第三節(jié): 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法COOHOHCOOHOHHOOOCOOHOOHOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOOOCOOH-+HPLC

9、法法淡黃、淡黃、紅棕、紅棕、深棕色深棕色第三節(jié)第三節(jié): 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法其它有關(guān)物質(zhì)其它有關(guān)物質(zhì)OH(CH3CO)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯HPLC法法二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的檢查第三節(jié)第三節(jié): 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法甲芬那酸ClCOOHH3CCH3NH2NHCOOHH3CCH3+CuGC法法第三節(jié)第三節(jié): 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查FFNH2FFCOCH3FFOCOCH3FFOHFFOHCOOHFF+Cu偶聯(lián)乙?；?CH3CO)

10、2O,AlCl3氧化H2O2水解OH/H-+羧化CO2,CH3ONaTLCHPLC所謂物質(zhì)所謂物質(zhì)A和物質(zhì)和物質(zhì)B的檢查是的檢查是采用采用自身對照法自身對照法進(jìn)行檢查的進(jìn)行檢查的相同藥物相同藥物,不同濃度不同濃度,相互比較相互比較,主點主點限限量量第六章第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析芳酸類非甾體抗炎藥物的分析萘普生的有關(guān)物質(zhì)檢查萘普生的有關(guān)物質(zhì)檢查MeOMeOCH3O?；然疢eOOHCH3COOH催化氫化MeOCH3COOH2-萘甲醚6-甲氧基-2-萘乙酮2-羥基-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸萘普生色譜條件色譜條件雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量二、對乙酰氨基酚中氨基酚和對氯苯乙酰胺第三節(jié)第三節(jié):

11、特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法HPLCClNO2NH2HOHONO2HONHCOCH3水解還原?；疌lNHCOCH3一、酸堿滴定法(Acid-base titration method)苯甲酸苯甲酸pKa 4.20水楊酸水楊酸pKa 2.98酸性較強(qiáng)酸性較強(qiáng)COHOHO羧酸鄰位羧酸鄰位-OH-OH，吸電子基團(tuán)，使酸性增加；，吸電子基團(tuán)，使酸性增加；分子內(nèi)氫鍵，更增加了其極性分子內(nèi)氫鍵，更增加了其極性直接滴定Aspirin、丙磺舒丙磺舒(Ch.P. BP. JP等等) 苯甲酸苯甲酸(Ch.P等等)均均采用本法采用本法1.直接滴定法直接滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20以下COO

12、NaOCOCH3H2O乙醇乙醇作用：溶解作用：溶解ASAASA；防止；防止ASAASA在水溶在水溶 液中滴定過程易水解液中滴定過程易水解中性乙醇：中性乙醇：對指示劑對指示劑( (酚酞酚酞) )而言為中性，而言為中性， 可消除滴定誤差可消除滴定誤差 pKa 36 的藥物溶于中性醇的藥物溶于中性醇,可可直接用直接用NaOH滴定滴定 pKa 69 的藥物要用的藥物要用非水溶液滴定法非水溶液滴定法NSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾乎不溶，在丙酮中微溶。所以乎不溶，在丙酮中微溶。所以ChP使用使用定量過量的氫

13、氧化鈉滴定液定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，再溶解后，再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。烯醇式結(jié)烯醇式結(jié)構(gòu)構(gòu):酸性酸性為什么氫氧為什么氫氧化鈉能溶解化鈉能溶解之？之？2.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法( (Residual titration after hydrolysis) )OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品約1.5g，精密稱定，準(zhǔn)確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，緩緩煮沸10min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaO

14、H，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當(dāng)于45.04mg的C9H9O4USP32-NF27含量% = ( V0-V) FTW 100%T = 0.5 12180.16 = 45.04 (mg/ml)滴定度滴定度滴定度滴定度濃度濃度待測物反應(yīng)待測物反應(yīng)系數(shù)系數(shù)滴定液物反滴定液物反應(yīng)系數(shù)應(yīng)系數(shù)滴定液物摩滴定液物摩而質(zhì)量而質(zhì)量空白反應(yīng)體空白反應(yīng)體積積樣品測定消樣品測定消耗體積耗體積樣品稱重量樣品稱重量3.兩步滴定法兩步滴定法( (Two-step titration) )Aspirin片HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸櫞酸枸櫞酸Citric acidHO

15、CHCOOHCHCOOHHO酒石酸酒石酸Trataric acid水解產(chǎn)物水解產(chǎn)物水楊酸水楊酸SAHAc第一步：NaOH滴定所有的酸滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步：水解后剩余滴定水解后剩余滴定取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于阿司匹林0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇(對酚酞指示劑顯中性)20ml，振搖使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至顯粉紅色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱15min，并時時振搖，迅速放冷至室溫，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每每1

16、ml1ml的的NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于18.02mg18.02mg的的C C9 9H H8 8OO4 4COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O標(biāo)示量%=WW標(biāo)示量100%(V0-V)FT空白空白消耗消耗樣測樣測消耗消耗校正校正因數(shù)因數(shù)滴定滴定度度片劑片劑規(guī)格規(guī)格游離SA偏高游離SA偏高時結(jié)果偏高時結(jié)果偏高不能完全排出干擾不能完全排出干擾缺點優(yōu)點操作簡便操作簡便水楊酸干擾少水楊酸干擾少結(jié)果準(zhǔn)確，避免游結(jié)果準(zhǔn)確，避免游離SA及片劑中穩(wěn)定離SA及片劑中穩(wěn)定直接滴定法水解后剩余滴定法兩步

17、滴定法二、非水溶液滴定法吡羅昔康四、UV1.直接直接UV法法2.離子交換離子交換- -UV法法氯貝丁酯在氯貝丁酯在226nm226nm的波長處有最大吸收，但對氯酚等的波長處有最大吸收，但對氯酚等有關(guān)物質(zhì)亦有吸收，干擾有關(guān)物質(zhì)亦有吸收，干擾UVUV法的測定。根據(jù)氯貝丁酯法的測定。根據(jù)氯貝丁酯為酯結(jié)構(gòu)，不能發(fā)生電離，而有關(guān)物質(zhì)可發(fā)生酸性解為酯結(jié)構(gòu)，不能發(fā)生電離，而有關(guān)物質(zhì)可發(fā)生酸性解離的性質(zhì)差異，采用陰離子交換色譜分離后，采用離的性質(zhì)差異，采用陰離子交換色譜分離后，采用UVUV法測定。法測定。標(biāo)示量%=AsCRDWWAR標(biāo)示量100%3.CPC- -UV法法(Column Partition Ch

18、romatography)利用固定相酸堿性的不同酸堿性的不同進(jìn)行分離利用藥物和固定相起化學(xué)反應(yīng)而進(jìn)行分離利用生成離子對離子對進(jìn)行層析分離單純靠選擇流動相進(jìn)行分離200300mm60mm4mm22mm層析柱玻棉壓榨棒350mm21mm擔(dān)體：硅藻土：硅藻土(Celite 545)(Celite 545)固定相：一定：一定pHpH的緩沖水溶液的緩沖水溶液流動相：與水不相混溶的有機(jī)：與水不相混溶的有機(jī)溶劑溶劑( (洗脫前必須先用水飽和洗脫前必須先用水飽和) )b.ASA測定供試液制備洗脫洗脫 5,25mlCHCl3 相繼洗脫，棄去相繼洗脫，棄去CHCl3洗脫洗脫 10ml冰冰HAc-CHCl3(150)*；85ml冰冰HAc-CHCl3(1100)，并稀釋至，并稀釋至100ml測定：280nm 空白：CHCl3NaHCONaHCO3 3使使ASA和和SA成鹽成鹽保留于柱上保留于柱上 用用CHClCHCl3 3洗脫的目的洗脫的目的：去除中性或堿性雜質(zhì)去除中性或堿性雜質(zhì)冰冰HAcHAc酸化的目的酸化的目的：