國(guó)內(nèi)外柑桔黃龍病發(fā)生與其監(jiān)控技術(shù)應(yīng)用

1、國(guó)內(nèi)外柑桔黃龍病發(fā)生與其監(jiān)控技術(shù)應(yīng)用主要內(nèi)容主要內(nèi)容重慶大學(xué)基因工程中心1.國(guó)內(nèi)外柑桔黃龍病發(fā)生與研究重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍?。–itrus Huanglongbing Disease）重慶大學(xué)基因工程中心美國(guó)柑桔黃龍病研究現(xiàn)狀美國(guó)柑桔黃龍病研究現(xiàn)狀重慶大學(xué)基因工程中心HLB的國(guó)內(nèi)外分布的國(guó)內(nèi)外分布重慶大學(xué)基因工程中心世界柑桔黃龍病起源與擴(kuò)散途徑世界柑桔黃龍病起源與擴(kuò)散途徑重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心三種柑桔黃龍病菌的世界分布三種柑桔黃龍病菌的世界分布重慶大學(xué)基因工程中心美國(guó)佛州美國(guó)佛州HLB分布圖分布圖重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心中國(guó)中國(guó)HLB分布概況

2、分布概況重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心2. 柑桔黃龍病常規(guī)鑒定方法重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病癥狀診斷要領(lǐng)重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病典型癥狀葉片斑駁柑桔黃龍病典型癥狀葉片斑駁重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍?。℉LB）典型癥狀（1）重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病不同癥狀類型重慶大學(xué)基因工程中心柑桔葉片疑似癥狀重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病危害癥狀重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病田間不同癥狀表現(xiàn)黃龍病田間不同癥狀表現(xiàn)I重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病疑似癥狀類型黃龍病疑似癥狀類型重慶大學(xué)基因工程中心疑似柑橘黃龍病（疑似柑橘黃龍?。℉LB） 癥狀癥狀 PCR檢測(cè)檢測(cè)除草劑藥害除草劑藥害重慶大學(xué)基因工程

3、中心重慶大學(xué)基因工程中心癥狀識(shí)別與分子監(jiān)測(cè)技術(shù)癥狀識(shí)別與分子監(jiān)測(cè)技術(shù)重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病癥狀診斷要領(lǐng)黃龍病癥狀診斷要領(lǐng)重慶大學(xué)基因工程中心3. 柑桔黃龍病分子檢驗(yàn)技術(shù)柑桔黃龍病分子檢驗(yàn)技術(shù)無癥帶菌樣品重慶大學(xué)基因工程中心診斷方法與檢測(cè)技術(shù)診斷方法與檢測(cè)技術(shù)重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心中心的硬件基礎(chǔ)中心的硬件基礎(chǔ)重慶大學(xué)基因工程中心已經(jīng)建立的分子檢測(cè)技術(shù)體系已經(jīng)建立的分子檢測(cè)技術(shù)體系重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍病重慶大學(xué)基因工程中心亞洲柑桔黃龍病病原細(xì)菌顯亞洲柑桔黃龍病病原細(xì)菌顯微鏡形態(tài)圖微鏡形態(tài)圖重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病菌常規(guī)柑桔黃龍病菌常

4、規(guī)PCR檢測(cè)步驟檢測(cè)步驟重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病PCR樣品制備方法重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病樣品制備柑桔黃龍病樣品制備重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病柑桔黃龍病PCR檢測(cè)技術(shù)試劑檢測(cè)技術(shù)試劑重慶大學(xué)基因工程中心PCR擴(kuò)增程序擴(kuò)增程序重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病（柑桔黃龍?。℉LB）常規(guī)）常規(guī)PCR 早期診斷早期診斷重慶大學(xué)基因工程中心定量定量PCR的主要方法的主要方法重慶大學(xué)基因工程中心PCR引物的設(shè)計(jì)引物的設(shè)計(jì)重慶大學(xué)基因工程中心實(shí)時(shí)定量實(shí)時(shí)定量PCR方法原理和類型方法原理和類型重慶大學(xué)基因工程中心SYBR Green熒光染料法熒光染料法重慶大學(xué)基因工程中心TaqMan探針探針重慶大學(xué)

5、基因工程中心實(shí)時(shí)熒光實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)設(shè)備檢測(cè)設(shè)備重慶大學(xué)基因工程中心各種檢測(cè)技術(shù)靈敏度應(yīng)用比較各種檢測(cè)技術(shù)靈敏度應(yīng)用比較重慶大學(xué)基因工程中心實(shí)時(shí)實(shí)時(shí)PCR與常規(guī)與常規(guī)PCR相比的優(yōu)勢(shì)相比的優(yōu)勢(shì)重慶大學(xué)基因工程中心已經(jīng)建立的分子檢測(cè)技術(shù)體系已經(jīng)建立的分子檢測(cè)技術(shù)體系重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病分子檢測(cè)試劑盒柑桔黃龍病分子檢測(cè)試劑盒技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)重慶大學(xué)基因工程中心分子檢測(cè)的防治學(xué)意義分子檢測(cè)的防治學(xué)意義重慶大學(xué)基因工程中心4.柑桔木虱監(jiān)控技術(shù)柑桔木虱監(jiān)控技術(shù)重慶大學(xué)基因工程中心亞洲柑桔木虱形態(tài)特征亞洲柑桔木虱形態(tài)特征:(D.citri)重慶大學(xué)基因工程中心柑桔木虱成蟲與若蟲柑桔木虱成蟲與若

6、蟲亞洲柑桔木虱非洲二點(diǎn)木虱重慶大學(xué)基因工程中心HLB田間擴(kuò)散方式：田間擴(kuò)散方式：重慶大學(xué)基因工程中心柑桔木虱生物學(xué)特性：柑桔木虱生物學(xué)特性：重慶大學(xué)基因工程中心柑桔種子傳病柑桔種子傳病 ？重慶大學(xué)基因工程中心防治策略與方法防治策略與方法重慶大學(xué)基因工程中心黃龍病傳播介體黃龍病傳播介體柑桔木虱柑桔木虱重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病昆蟲傳播媒介柑桔黃龍病昆蟲傳播媒介柑桔木虱柑桔木虱重慶大學(xué)基因工程中心傳播媒介傳播媒介:柑桔木虱（柑桔木虱（Diaphorina citri)重慶大學(xué)基因工程中心HLB自然和人為傳播自然和人為傳播重慶大學(xué)基因工程中心柑桔木虱生物學(xué)特性柑桔木虱生物學(xué)特性重慶大學(xué)基因工程中

7、心柑桔木虱藥劑防治重慶大學(xué)基因工程中心柑桔木虱田間調(diào)查柑桔木虱田間調(diào)查重慶大學(xué)基因工程中心廣西岑溪市送檢樣品檢測(cè)結(jié)果廣西岑溪市送檢樣品檢測(cè)結(jié)果樣品編號(hào)采集地點(diǎn)品種癥狀檢測(cè)結(jié)果（Ct值）Cx01-0604-02市工農(nóng)路農(nóng)科所砂糖桔疑似癥狀N/ACx01-0604-02市工農(nóng)路農(nóng)科所砂糖桔葉片黃化N/ACx04-0604-01耀華村中間洞楊山桔疑似癥狀小葉N/ACx04-0604-02耀華村中間洞楊山桔疑似癥狀小葉N/ACx04-0604-03耀華村中間洞貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604-01同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604-02同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx08-0604

8、-03同福村沙洲組貢柑疑似癥狀N/ACx00-0605-03樟木元凡8組砂糖桔葉片黃化27.7Cx16-0605-01新廉村河旁組夏橙黃化27.1Cx00-0606-03市岑羅路農(nóng)科所砂糖桔 斑駁（典型）29.8Cx00-0606-04市岑羅路農(nóng)科所砂糖桔 斑駁29.3Cx16-0606-02波塘街大南組砂糖桔疑似癥狀N/ACx16-0606-03波塘街大南組砂糖桔疑似癥狀N/ACx16-0606-04波塘鎮(zhèn)波塘社區(qū)楊山桔斑駁30.6Cx16-0606-05波塘社區(qū)石榔楊山桔黃化N/ACx16-0606-06波塘社區(qū)石榔楊山桔黃化32.2Cx16-0606-07波塘社區(qū)廟腳組楊山桔斑駁32.2

9、重慶大學(xué)基因工程中心廣西岑溪市送檢樣品檢測(cè)結(jié)果廣西岑溪市送檢樣品檢測(cè)結(jié)果重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心重慶大學(xué)基因工程中心5.柑桔黃龍病綜合防控策略柑桔黃龍病綜合防控策略重慶大學(xué)基因工程中心綜合防除策略與措施綜合防除策略與措施重慶大學(xué)基因工程中心柑桔木虱帶菌率動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)柑桔木虱帶菌率動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病綜合防除實(shí)例柑桔黃龍病綜合防除實(shí)例重慶大學(xué)基因工程中心表表1. 柑橘黃龍病癥狀診斷和分子診斷柑橘黃龍病癥狀診斷和分子診斷 （廣西（廣西北海北海 1999年）年）第一輪 1 st round斑駁癥狀Routine Survey*分子診斷PCR Detection符合度Ag

10、reement %陽(yáng)性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Positive / No. Total 106/214109/214陽(yáng)性檢出率Positive Result %49.5350.9397.25陰性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Negative/ No. Total112/214108/214陰性檢出率Negative Result %52.3450.4796.43第二輪 2nd round 斑駁癥狀Routine Survey*分子診斷PCR Detection符合度Agreement%陽(yáng)性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Positive / No. Total 88/18293/182陽(yáng)性檢出率Positive Result %48.3551.194.62陰性樣品數(shù)/樣品總數(shù)No. Negative / No. Total 94/18289/182陰性檢出率Negative Result %51.6548.994.68重慶大學(xué)基因工程中心柑桔黃龍病田間采樣柑桔黃龍病田間采樣重慶大學(xué)基因工程中心廣西北海農(nóng)場(chǎng)柑桔黃龍病監(jiān)測(cè)與控制廣西北海農(nóng)場(chǎng)柑桔黃龍病監(jiān)測(cè)與控制重慶大學(xué)基因工程中心國(guó)內(nèi)外黃龍病防除案例國(guó)內(nèi)外黃龍病防除案例重慶大學(xué)基因工程中心重慶大