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文檔簡介
1、調脂康膠囊不同提取部位對高血脂大鼠脂質水平的影響 作者:姚紅霞,王亮,楊超燕,韋燕萍,唐春萍【摘要】 目的 探討調脂康膠囊對高血脂大鼠脂質水平影響的有效部位。方法 采用飲食性高血脂大鼠模型,用極性由小到大的3種有機溶劑和水依次萃取調脂康膠囊,
2、所得各提取部位組分別給大鼠ig給藥,測定血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)和肝臟TG、TC的變化。結果 大鼠灌高脂乳劑4周后,模型組大鼠血清TC、TG、LDLC均較正常組明顯升高,肝中TC、TG均明顯升高;給藥4周后,調脂康膠囊氯仿提取部位組、乙酸乙酯提取部位組、正丁醇提取部位組、水部位組、全方組均能顯著降低血清TC、LDLC水平(P<0.05或P<0.01);正丁醇提取部位組、全方組能顯著降低血清TG水平;正丁醇提取部位組能顯著降低TC、TG、LDLC,且與全方比較差異無顯著性 (P>0.05);正丁醇提取
3、部位組、水部位組、全方組與模型組比較,肝中TC明顯降低(P<0.05或P<0.01),乙酸乙酯提取部位組、全方組與模型組比較,肝中TG明顯降低(P<0.05)。結論 調脂康膠囊乙酸乙酯和正丁醇提取物對高血脂大鼠有降脂作用。 【關鍵詞】 調脂康膠囊;高血脂癥模型;有效部位)Abstract:Objective To study lipidlowering effects of extractions of Tiaozhikang capsules extracted with chloroform,acetic ether,nbutyl alcohol,water.
4、Methods Extractions of Tiaozhikang capsules were extracted with four organic solvents in sequence according to their polarities from higher to lower. Then the extractions were intragastrically administered to dietinduced hyperlipidemic rats,and changes in serum triacylglycerol level (TG),serum total
5、 cholesterol level (TC),serum high density lipoprotein cholesterol level (HDLC),low density lipoprotein cholesterol level (LDLC),liver triacylglycerol level,and liver total cholesterol level were measured.Results 72 Sprague Dawley (SD) rats were administered with high fat emulsion for four weeks,and
6、 serum TG level,serum TC level,serum LDLC level,liver TC level,and liver TG level were higher than those in the control group. Serum TC levels and serum LDLC level in the groups administered intragastrically with extractions of Tiaozhikang capsules respectively extracted with chloroform,acetic ether
7、,nbutyl alcohol,water,and Tiaozhikang capsules decreased significantly (P<0.05 or P<0.01); serum TG levels in the groups intragastrically administered with extractions ofTiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol and Tiaozhikang capsules decreased significantly; serum TC level,serum TG
8、 level,serum LDLC level decreased significantly in the group intrastrically administered with extractions of Tiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol,and the decline was statistically insignificantly with P>0.05 compared with that intragastrically administered with Tiaozhikang capsules;
9、 liver TC levels decreased in the groups intragastrically administered with extractions of Tiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol,water,and Tiaozhikang capsules compared with model group (P<0.05 or P<0.01); liver TG levels in the groups intragastrically administered with extraction
10、s of Tiaozhikang capsules extracted with acetic ether and Tiaozhikang capsules decreased significantly compared with that in model group (P<0.05).Conclusion Extractions of Tiaozhikang extracted with acetic ether and nbutyl alcohol had lipidlowering effects on dietinduced hyperlipidemic SD rats.Ke
11、y words:Tiaozhikang capsules;dietinduced hyperlipidemia;extraction高脂血癥是一種常見病、多發(fā)病,是心腦血管疾病的獨立危險因子。目前高脂血癥的中藥較多,但發(fā)揮藥效的具體成分尚未明確。調脂康膠囊(原名調脂靈)是我院郭姣教授在多年反復臨床實踐基礎上并經(jīng)臨床證實療效確切而無明顯毒副作用的一種純中藥復方制劑,由女貞子、白術、三七、丹參、黃連等組成,前期的研究工作表明該方有明顯的降低總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)、apoB及升高高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)、載脂蛋白A (apoA )、脂蛋白酯酶(LPL
12、)、肝脂酶(HL)的作用1,但其治療高脂血癥的物質基礎仍不清楚。本研究采用飲食性高脂血癥大鼠模型,通過研究調脂康膠囊不同提取部位對飲食性高脂血癥大鼠血清TC、TG及LDLC、HDLC和肝中TC、TG的影響,初步明確其調血脂的主要物質基礎。1 試驗材料1.1 試劑脫氧膽酸鈉(醫(yī)藥集團上?;瘜W試劑公司,批號F20080621);丙硫氧嘧啶(廣東華南藥業(yè)有限公司,批號0806012);膽固醇(天津市大茂化學試劑廠,批號080619);吐溫80(上海審宇醫(yī)藥化工有限公司,批號081001);1,2丙二醇(廣州化學試劑廠,批號200811021);TC試劑盒(中生北控科技股份有限公司,批號 081091
13、);TG試劑盒(中生北控科技股份有限公司,批號 081171);HDLC試劑盒(中生北控生物科技股份有限公司,批號 081181)。1.2 藥物調脂康膠囊,內容物為棕褐色粉末,1.848 g生藥/粒,批號:080520,廣東藥學院藥物研究所提供;非諾貝特微?;z囊(法國利博福尼制藥公司,批號79498)。1.3 主要儀器RE52AA旋轉蒸發(fā)器(上海嘉鵬科技有限公司);DKS26型電熱恒溫水浴鍋(上海精密實驗設備有限公司); 低溫高速離心機(上海安亭儀器廠,型號TGL16G);UV1800紫外可見光光度計(北京瑞利分析有限公司)。1.4 實驗動物SD大鼠,合格證號2008A020,雌性,體質量1
14、80220 g,廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供,符合SPF級標準,正常飼養(yǎng)3 d后供試。2 方法2.1 調脂康膠囊不同萃取部位制備取調脂康膠囊內容物665 g,加入10倍量95%()乙醇提取2次,合并提取液。提取液減壓濃縮成浸膏,浸膏用熱水分散,分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,減壓濃縮,即得到不同的萃取部位:石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水提取部位,各部位每毫升相當于原生藥0.6 g。2.2 動物分組與模型建立取SD大鼠72只,按體質量隨機分成9組,即正常對照組、高脂乳劑組(模型組)、高脂乳劑+非諾貝特組、高脂乳劑+石油醚部位組、高脂乳劑+氯仿部位組、高脂乳劑+乙酸乙酯部位組、高脂乳劑
15、+ 正丁醇部位組、高脂乳劑+水部位組、高脂乳劑+調脂康全方組,每組8只。除正常對照組自由攝取普通飼料外,其余組分別在此基礎上每天上午按10 mL/kg量灌胃給予高脂乳劑,4 h后給予相應的藥物,正常組、模型組給予等量生理鹽水,連續(xù)給藥4周,于末次給藥1 h后(實驗前禁食不禁水12 h)從大鼠眼眶靜脈叢取血,離心、分離血清,以酶法測定血清TC、TG,以磷鎢酸鎂沉淀法測定血清HDLC,LDLC。然后脫臼處死大鼠,立即摘取肝臟,稱取相同部位組織0.5 g,并剪碎,用提取液(氯仿甲醇=11體積比)制成勻漿后,提取液定容至5 mL,混勻。經(jīng)24 h不斷震蕩抽提,最后3 000 r/min離心5 min得
16、上清液,采用氧化酶法測定TC,采用磷酸甘油酶比色法測定TG。1 2.3 統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,實驗數(shù)據(jù)用(±s) 表示,兩組均數(shù)間比較采用t檢驗,以P<0.05為差異有顯著性。3 結 果3.1 調脂康膠囊不同提取部位對飲食性高脂血癥大鼠血脂水平的影響表1結果表明,模型組血清TC、TG、LDLC水平比正常對照組明顯升高,HDLC比正常對照組明顯降低,表明高血脂模型造模成功。給藥4周后,調脂康膠囊氯仿萃取部位組、乙酸乙酯萃取部位組、正丁醇萃取部位組、水部位組、全方組均能
17、顯著降低血清TC、LDLC水平(P<0.05或P<0.01);正丁醇提取部位組、全方組能顯著降低血清TG水平;非諾貝特組能非常顯著降低血清TC、TG、LDLC水平及升高HDLC水平。正丁醇提取部位組能顯著降低TC、TG、LDLC水平,且與全方比較差異無顯著性 (P>0.05)。3.2 調脂康膠囊不同提取部位對飲食性高脂血癥大鼠肝脂質水平的影響4 討 論中藥具有多環(huán)節(jié)、多靶點且副作用少等優(yōu)勢,但中藥尤其是復方發(fā)揮作用的具體成分尚未明確,一直困擾著中醫(yī)藥走向世界。本研究以調脂療效明確的臨床經(jīng)驗方調脂康為研究對象,采用不同極性溶劑萃取,選擇血清和肝中脂質水平變化為藥效學指標,研究石
18、油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位調脂作用。研究結果表明,正丁醇提取部位組能顯著降低血清TC、TG、LDLC,且與全方比較差異無顯著性,提示該部位作用強度等同全方,并且正丁醇提取部位組降低肝中TC的作用較強,與全方比較差異無顯著性;乙酸乙酯提取部位組降低肝臟中的TG沉積,與全方比較差異無顯著性。表明正丁醇提取部位可能是代表全方影響高脂血癥動物模型的血脂水平的主要部位。調脂康由女貞子、白術、三七、丹參、黃連組成。藥研究表明,女貞子能降低喂飼膽固醇和豬油家兔的血清膽固醇及三酰甘油,可預防和消減動脈粥樣硬化斑塊,減輕斑塊厚度,減少冠狀動脈粥樣硬化病變數(shù),降低血管的阻塞程度2;白術可使自發(fā)性高血壓腦卒中大鼠TG明顯降低,體質量增長受到抑制,脂肪沉著量減少3;三七
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