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文檔簡介

1、1原位雜交實(shí)驗(yàn)方法適用方法熒光檢測系統(tǒng)過氧化物酶檢測系統(tǒng)堿性磷酸酶檢測系統(tǒng)石蠟切片冰凍切片細(xì)胞涂片和細(xì)胞爬片2mRNA 原位雜交前實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備w1,無RNA酶水的處理w2,無RNA酶載玻片的處理w3,標(biāo)本的防RNA酶的固定w4,探針的稀釋和保存w5,DNA探針需變性3原位雜交溶液的配制w1,預(yù)雜交液和雜交液的配制w2,20Xssc, 2Xssc, 0.2Xssc緩沖液的配制w3,0.1mol PBS緩沖液的配制w4,0.1mol 枸櫞酸緩沖液的配制w5,0.1mol TBS緩沖液的配制w6,復(fù)合消化液的配制w7,組織細(xì)胞打孔液的配制w8,雜交漂洗液w9,過氧化氫封閉液4探針設(shè)計(jì)方案w1,探針名稱

2、:w2,適用種屬:w3,標(biāo)記方式:3DIG 5FAMw4,模板序列:w5,探針序列:5探針雜交原理w1,組織細(xì)胞的通透w2,探針長度w3 , 探針濃度和雜交時(shí)間w4,雜交中的Tm值和雜交溫度w5,雜交嚴(yán)格度 w6,預(yù)雜交原理w7,雜交后處理 6A-石蠟切片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統(tǒng)w二,堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)w三,熒光顯色方法7B-冰凍切片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統(tǒng)w二,堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)w三,熒光顯色方法8C-細(xì)胞爬片或涂片mRNA原位雜交步驟w一,過氧化物酶顯色系統(tǒng)w二,堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)w三,熒光顯色方法9附錄w1,DAB的配制和使用方法w2 NBT/BCIP的配制和使用方法w3,蘇木素的配制和使用方法w4,核固紅的配制和使用方

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