糖類、蛋白質(zhì)、脂肪的鑒定

1、. 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)生物組織中糖類脂生物組織中糖類脂肪和蛋白肪和蛋白質(zhì)鑒定質(zhì)鑒定.思考題：1、糖類、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)原理2、常見的還原糖有哪些？取材的要求3、斐林試劑的組成，使用時(shí)的注意事項(xiàng)4、雙縮脲試劑的組成，使用時(shí)注意事項(xiàng)5、斐林試劑和雙縮脲試劑的比較6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色？借助什么來觀察？8、如何鑒定淀粉，顏色反應(yīng)如何.1.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理：化學(xué)試劑化學(xué)試劑+有機(jī)化合物有機(jī)化合物特定的顏色特定的顏色(1) 還原糖還原糖 + 斐林試劑斐林試劑 水浴加熱水浴加熱磚紅色磚紅色 沉淀沉淀(2) 脂肪脂肪+蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色 脂肪脂肪+蘇丹蘇丹紅色紅色(3)

2、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色紫色.2、常見的還原糖有哪些？取材的要求還原糖還原糖：可被氧化充當(dāng)還原劑的糖。：可被氧化充當(dāng)還原劑的糖。(常見的有：葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、常見的有：葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖半乳糖) 注意：蔗糖不是還原糖注意：蔗糖不是還原糖3、斐林試劑的組成，使用時(shí)注意事項(xiàng)、斐林試劑的組成，使用時(shí)注意事項(xiàng)斐林試劑：甲液：斐林試劑：甲液：0.1g/mL的的NaOH溶液溶液 乙液：乙液：0.05g/mL的的CuSO4溶液溶液 使用注意事項(xiàng)：等量使用注意事項(xiàng)：等量混合，混合，現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)配現(xiàn)用（ NaOH+CuSO4）.1.點(diǎn)撥：點(diǎn)撥：還原糖還原糖 + 斐林試

3、劑斐林試劑 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 可溶性可溶性還原糖還原糖與與斐林試劑斐林試劑發(fā)生作用，可生發(fā)生作用，可生成成磚紅色磚紅色的的CuCu2 2OO沉淀沉淀。（放在放在盛有盛有50-6550-65溫水的大燒杯）溫水的大燒杯）水浴水浴加熱加熱顏色變化：淺藍(lán)色 棕色 磚紅色.1步驟：步驟：樣液制備樣液制備:（取材（取材5g，加入石英砂和，加入石英砂和 5ml水）水） (1)取樣液取樣液2ml于試管中于試管中 (2)加入新配制的斐林試劑加入新配制的斐林試劑1ml（甲液（甲液和乙液和乙液等量混合等量混合均勻后再加入）均勻后再加入）盛有盛有50-6550-65溫水的大燒杯）溫水的大燒杯） (3)水浴加熱水浴

4、加熱2min左右左右(（4）觀察顏色觀察顏色變化（變化（淺藍(lán)色淺藍(lán)色棕色棕色磚紅色）磚紅色）. 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：（1）材料的選取：還原糖含）材料的選?。哼€原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果量高，白色或近于白色，如蘋果梨梨白蘿卜。白蘿卜。 思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以嗎？為思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以嗎？為什么？什么？（2）試劑：斐林試劑）試劑：斐林試劑(等量混合、等量混合、現(xiàn)配現(xiàn)現(xiàn)配現(xiàn)用用) 甲液：甲液：0.1g/mL的的NaOH溶液溶液 乙液：乙液：0.05g/ml的的CuSO4溶液溶液 .4、雙縮脲試劑組成，使用時(shí)注意事項(xiàng).雙縮脲試劑組成：雙縮脲試劑組成：A液：液：0.1g/mL的的NaO

5、H溶液溶液B液：液：0.01g/mL的的CuSO4溶液溶液 使用注意事項(xiàng)：使用注意事項(xiàng)： 先加先加A液液1mL于樣液中，于樣液中，再加再加B液液4滴滴于樣液中于樣液中（1）蛋白質(zhì)）蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色紫色.2 2步驟：步驟：（1 1）試管中加樣液試管中加樣液2mL2mL（2 2）加雙縮脲試劑加雙縮脲試劑A A液液1mL1mL（造成堿性環(huán)造成堿性環(huán) 境境），搖勻搖勻（3 3）加雙縮脲試劑加雙縮脲試劑B B液液4 4滴滴，搖勻搖勻（4 4）觀察顏色變化（觀察顏色變化（紫色紫色） 注：樣液濃度不宜過高，以免實(shí)驗(yàn)后黏住試注：樣液濃度不宜過高，以免實(shí)驗(yàn)后黏住試管壁，洗不干凈。管壁，洗不

6、干凈。 B B液不能過量，多余的液不能過量，多余的B B液會(huì)與液會(huì)與A A液反應(yīng)液反應(yīng)成藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色成藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。.5.比較比較斐林試劑斐林試劑和和雙縮脲試劑雙縮脲試劑0.1g/mLNaOH同甲液0.01g/mLCuSO40.05g/mLCuSO4還原性糖還原性糖蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)等量混合后等量混合后再加入再加入先加先加A A液液1mL1mL，搖勻，搖勻，再加再加B B液液4 4滴滴50-6550-65水浴加熱水浴加熱磚紅色磚紅色沉淀沉淀紫色紫色絡(luò)合物絡(luò)合物不需不需加熱，搖勻加熱，搖勻.6、脂肪鑒定中酒精的用法和作用7、脂肪鑒定中能否直接觀察顏色？借助什么來觀察？.3.脂肪脂肪

7、+蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色 脂肪脂肪+蘇丹蘇丹紅色紅色.（2）步驟）步驟材料的選?。汉玖扛叩慕M織，如花生的子葉。材料的選?。汉玖扛叩慕M織，如花生的子葉。取材：取材： 取一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮取一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮切片切片制制片片：（切片越薄越好）將：（切片越薄越好）將最薄最薄的花生切片放在的花生切片放在載玻片中央載玻片中央染色：滴染色：滴23滴蘇丹滴蘇丹染液染液，染色，染色3min，用吸，用吸水紙水紙吸去染液吸去染液，再，再滴滴體積分?jǐn)?shù)體積分?jǐn)?shù)50%的的酒精洗去浮酒精洗去浮色色，再用吸水紙吸去，再用吸水紙吸去多余的酒精（多余的酒精（蘇丹蘇丹易溶于易溶于酒精中，避免影響實(shí)驗(yàn)

8、結(jié)果酒精中，避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果），滴滴12滴清水于滴清水于材料切片上材料切片上蓋上蓋玻片蓋上蓋玻片鏡檢鏡檢觀察觀察：光學(xué)：光學(xué)顯微鏡顯微鏡對(duì)光對(duì)光低倍鏡尋找著色圓低倍鏡尋找著色圓形小顆粒形小顆粒高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒.8、如何鑒定淀粉，顏色反應(yīng)如何. 用試管取用試管取2mL2mL待測(cè)組織樣液，向試管待測(cè)組織樣液，向試管內(nèi)滴加內(nèi)滴加1 12 2滴碘液，觀察顏色變化。滴碘液，觀察顏色變化。4、淀粉、淀粉 + 碘碘藍(lán)色藍(lán)色加加12滴碘液滴碘液.1.1.鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑 A A斐林試劑斐林試劑 B B雙縮脲試劑雙縮脲試

9、劑 C C蘇丹蘇丹染液染液 D D蘇丹蘇丹染液染液2.2.能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是能與斐林試劑反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀的是A A淀粉淀粉 B B果糖果糖C C蔗糖蔗糖D D纖維素纖維素3.3.下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡（下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡（ ）A A可溶性還原糖的鑒定可溶性還原糖的鑒定 B B蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定C C脂肪的鑒定脂肪的鑒定 D D淀粉的鑒定淀粉的鑒定ACB.4.4.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液顏色的變化過程為（液顏色的變化過程為（ ）A A無色一磚紅色（沉淀）無色一磚紅色（沉淀）B B淺藍(lán)色一磚紅色（沉淀）淺藍(lán)色一磚紅色（沉淀）C

10、C淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色（沉淀）淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色（沉淀）D D淺藍(lán)色一棕色一磚紅色（沉淀）淺藍(lán)色一棕色一磚紅色（沉淀）5.5.下列物質(zhì)中，能被蘇丹下列物質(zhì)中，能被蘇丹IVIV染液染成染液染成紅色的是（紅色的是（ ）A A馬鈴薯塊莖馬鈴薯塊莖 B B浸軟的蓖麻種子浸軟的蓖麻種子C C蛋清液蛋清液 D D蘋果蘋果 DB.6.6.還原糖的實(shí)驗(yàn)中，加入斐林試劑時(shí)必須要還原糖的實(shí)驗(yàn)中，加入斐林試劑時(shí)必須要 A A先加入斐林試劑甲液，后加入乙液先加入斐林試劑甲液，后加入乙液B B先加入斐林試劑乙液，后加入甲液先加入斐林試劑乙液，后加入甲液C C將斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后再加將斐林試劑的甲液和乙液混

11、合均勻后再加D D以上以上A A、B B、C C三種操作方法都正確三種操作方法都正確7.7.鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑正確做鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑正確做法是法是A A先加先加A A液，混合后再加液，混合后再加B B液搖勻觀察液搖勻觀察B B先加先加B B液，混合后再加液，混合后再加A A液搖勻觀察液搖勻觀察C CA A、B B液混合后加入，搖勻后觀察液混合后加入，搖勻后觀察D DA A、B B液同時(shí)加入樣液，搖勻后觀察液同時(shí)加入樣液，搖勻后觀察CA. 即：還原糖中的醛基（即：還原糖中的醛基（CHO）被被 Cu(OH)2氧化氧化， Cu(OH)2被還原被還原成成磚紅色磚紅色的的Cu2O沉淀沉淀 還原糖的鑒定原理：.5.比較比較斐林試劑斐林試劑和和雙縮脲試劑雙縮脲試劑0.1g/mL的NaOH溶液0.1g/mL的NaOH溶液0.01g/mLCuSO4溶液0.05g/mL的CuSO4溶液還原性糖還原性糖蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)甲液和乙液等量混甲液和乙液等量混合均勻后再加入合均勻后再加入先加雙縮脲試劑先加雙縮脲試劑A A液液1mL1mL，搖勻，再加雙縮脲試劑搖勻，再加雙縮脲試劑B B液液4 4滴滴50-6550-65水浴加熱水浴加熱磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色絡(luò)合物紫色絡(luò)合物不需加熱，搖勻即可不需加熱，搖勻即可.蛋白質(zhì)的鑒定原理：蛋白質(zhì)的鑒定原理：