課題動(dòng)物細(xì)胞工程

1、課題：動(dòng)物細(xì)胞工程編號(hào)：024 編寫(xiě)：金蕾 審核：錢立勇 （12.10）【考綱要求】1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（A）2動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體（A）【知識(shí)梳理】（一）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：1.過(guò)程 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞懸液 2、應(yīng)用：生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品，如干擾素、 ；生產(chǎn) 疫苗；培養(yǎng)皮膚細(xì)胞及檢測(cè) 等。（二）動(dòng)物細(xì)胞融合：1、概念：不同種類的動(dòng)物細(xì)胞或動(dòng)物細(xì)胞與人體細(xì)胞間進(jìn)行融合產(chǎn)生 細(xì)胞的過(guò)程。2、誘導(dǎo)方法：不同于植物細(xì)胞融合之處是常用 作為誘導(dǎo)劑。3、最重要用途： 。（三）單克隆抗體：1過(guò)程：給小鼠注射特 從_中分離 _細(xì)胞 _細(xì)胞定的抗原蛋白 B淋巴細(xì)胞 _細(xì)胞培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞 小鼠體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)_瘤細(xì)胞

2、 雜交瘤細(xì)胞 _ 抗體2雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量_，又能產(chǎn)生_。3單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：_強(qiáng)、_高、產(chǎn)量大。4.應(yīng)用：（1）在疾病診斷、治療及預(yù)防方面與常規(guī)抗體相比具 、 的特點(diǎn)。（2）為治療癌癥，可在 上連接 制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物帶到所在部位，既消滅了癌細(xì)胞，又不會(huì)損傷健康細(xì)胞。四比較植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 五填表比較植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的異同：原理方法步驟誘導(dǎo)方法結(jié)果用途或意義植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜流動(dòng)性和植物細(xì)胞全能性酶解法去壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細(xì)胞再經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)形成雜種植株物理方法化學(xué)方法誘導(dǎo)成雜種植物植株克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育優(yōu)良性狀的雜種植株動(dòng)

3、物細(xì)合細(xì)胞膜流動(dòng)性分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理、化學(xué)、生物方法形成雜種細(xì)胞培育雜種細(xì)胞或大量獲得細(xì)胞產(chǎn)品ABDC【預(yù)習(xí)檢測(cè)】根據(jù)右圖，完成下列題目：（1）、若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用 處理，除去了 ；A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中，常用的物理方法是 。融合完成的標(biāo)志是 。（2）若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)胞還要用 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（3）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自 ，然后用 使其分散開(kāi)來(lái)，A、B到C的過(guò)程中，常用的不同于植物細(xì)胞的手段是 ，所形成的D稱為 。（4）若該過(guò)程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么在獲得該細(xì)胞之前，小鼠已被注射了 。注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的 ，

4、生成了 。圖中B為 。（5）若該過(guò)程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過(guò)程中，所形成的C有 種（只考慮兩個(gè)細(xì)胞的融合）。用來(lái)培養(yǎng)的D的細(xì)胞應(yīng)該是 。獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是 和 。（6）小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞能融合在一起，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有 的特點(diǎn)?！镜湫屠}】例1.一般說(shuō)來(lái)，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（ ）無(wú)毒的環(huán)境 無(wú)菌的環(huán)境 培養(yǎng)基需要加入血清 溫度與動(dòng)物體溫相似 需要O2，不需要CO2 CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液PHA、 B、 C、 D、 例2在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是：（ ）A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的只是為了獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散C、細(xì)胞

5、的癌變發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過(guò)渡 過(guò)程中D、培養(yǎng)至50代后傳代細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變例3兩位科學(xué)家將經(jīng)過(guò)洋紅細(xì)胞免疫過(guò)的小鼠脾細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞）與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤，并能分泌單克隆抗體。洋紅細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞在該實(shí)驗(yàn)中分別屬于A.癌細(xì)胞和記憶淋巴細(xì)胞 B.癌細(xì)胞和效應(yīng)B淋巴細(xì)胞C.特定抗體物和記憶淋巴細(xì)胞 D.抗原物和效應(yīng)B淋巴細(xì)胞例4：下列各圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解，請(qǐng)根據(jù)圖回答下列問(wèn)題：請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆制備過(guò)程的順序連接起來(lái) 。在單克隆抗體制備過(guò)程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有 、 的特性。由圖中可看出，單

6、克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了 和 的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。. 【課堂檢測(cè)】右圖是制備分泌抗X抗體的過(guò)程，根據(jù)圖解回答問(wèn)題：（1）將_注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞，其中至少1個(gè)淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗該抗原的抗體。（2）單克隆抗體與普通血清抗體相比較， 具有 的特點(diǎn)（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有_。（4）在動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開(kāi)，以利于細(xì)胞融合，可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散開(kāi)。（5）圖中有兩次篩選過(guò)程，其中步驟的目的是篩選出_，步驟的目的是篩選出_。（6）_技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)【合作探究】1.

7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理,動(dòng)物細(xì)胞融合原理,制備單克隆抗體用到的原理？2.為什么選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基狀態(tài)及作用、成分及作用、條件及作用分別是什么？4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要脫分化嗎?為什么?5.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶行嗎?6.區(qū)別: 原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)， 細(xì)胞株與細(xì)胞系7.為什么不用兩個(gè)而要用多個(gè)細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞間的融合?8.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用是什么?細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是什么?9.抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？.一個(gè)淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)能分泌多種抗體嗎？ .10簡(jiǎn)述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？11在從小鼠體內(nèi)取B淋巴細(xì)胞前應(yīng)對(duì)小鼠作何種處理？為什么要這樣處理？12從小鼠何處獲取B淋巴細(xì)胞？13如只考慮兩兩融合，可能出現(xiàn)哪些融合類型細(xì)胞？14是否所有雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生某一特定抗體？15由特定的B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤